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Hsa_circ_0000128通过miR-623/EIF4A1轴促进人胃腺癌细胞增殖和迁移的机制研究

医学研究生学报 2022年第10期35卷 1022-1029页

作者：王亚东曹碧月高生宝王雪君步雪峰江苏大学附属人民医院普外科镇江212000 江苏大学附属人民医院呼吸内科

目的目前对于hsa_circ_0000128是否通过miR-623/EIF4A1轴通路参与胃腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在研究环状RNA hsa_circ_0000128(Circ_01607)在胃腺癌组织、细胞株的表达以及对胃癌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响。方法收集2019年9月... 详细信息

目的目前对于hsa_circ_0000128是否通过miR-623/EIF4A1轴通路参与胃腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在研究环状RNA hsa_circ_0000128(Circ_01607)在胃腺癌组织、细胞株的表达以及对胃癌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响。方法收集2019年9月至2020年8月江苏大学附属人民医院病理科的40份胃腺癌及癌旁组织标本。进行高通量测序筛选出表达明显提高的环状RNA hsa_circ_0000128;通过circBank、TargetScan等数据库预测下游miR-623。采用RT-PCR对40例临床胃腺癌组织、癌旁组织、胃癌细胞株(MGC-803,HGC-27,BGC-823)以及正常人胃粘膜上皮细胞株GES-1中hsa_circ_0000128的表达进行测定及验证结果。挑选出表达量差异最大的两组进行后续实验。将HGC-27、MGC-803细胞株分别接种于两块细胞培养板中,培养板中设置相应的circRNA组别:Si-NC组(Si-NC转染胃腺癌细胞)、Si-circ组(si-hsa_circ_0000128转染胃腺癌细胞)、Si-EIF4A1组(Si-EIF4A1转染胃腺癌细胞)、miR-NC组(miR-623-NC转染胃腺癌细胞)、miR-mimics组(miR-623-mimics转染胃腺癌细胞)、miR-inh组(miR-623-inhibitors转染胃腺癌细胞)、Si-circ+miR-NC组(Si-circ、miR-NC转染胃腺癌细胞)、Si-circ+miR-inh组(Si-circ、miR-inh转染胃腺癌细胞)。采用克隆形成实验测定各组细胞增殖能力;使用Transwell实验测定各组胃癌细胞的迁移能力;蛋白免疫印迹实验测定凋亡相关蛋白Cleaved-caspase-3、bcl-2和Bax的表达水平验证细胞凋亡情况。验证miR-623在组织及细胞中的表达情况,通过荧光素酶实验验证结合靶点信息,加入miRNA对应干扰并将其分组,通过细胞功能学实验,蛋白印迹实验比较胃癌细胞株各组细胞功能的变化。通过PCR及蛋白免疫印迹实验验证各组真核翻译起始因子4A1(EIF4A1)的相关表达水平与miR-623含量的关系。结果hsa_circ_0000128在胃癌组织及细胞株中较癌旁组织及正常胃黏膜上皮细胞中呈高表达状态。SI-circ组hsa_circ_0000128的相对表达量明显低于SI-NC组(P<0.05)。SI-circ+miR-inh组miR-623含量较SI-circ+miR-NC组下降(P<0.05)。SI-circ组Cleaved-caspase-3、Bax相对表达量较SI-NC组增加(P<0.05),Bcl-2相对表达量下降(P<0.05)。HGC-27和MGC-803细胞中Si-circ组的克隆形成率[(11.57±1.724)%、(12.47±2.401)%]明显低于Si-NC组[(32.53±3.250)%、(25.07±1.557)%],差异有统计学意义(P<0.05)。加入miR-623 inhibitor后可逆转抑制现象,SI-circ+miR-NC组克隆形成率[(10.43±1.305)%、(12.50±1.400)%]明显低于Si-circ+miR-inh组[(25.03±1.665)%、(19.63±1.955)%],差异具有统计学意义(P<0.01)。Transwell实验表明,SI-circ组较SI-NC组迁移明显降低(P<0.05)。EIF4A1在40对胃癌组织及胃癌细胞株HGC-27、MGC-803表达较癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞GES-1中呈高表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。蛋白免疫印迹实验显示当敲减hsa_circ_0000128时,EIF4A1的含量下降;当加入miR-623 inhibitor逆转敲减circRNA情况时,EIF4A1的表达含量上升(P<0.01)。结论hsa_circ_0000128在胃癌细胞株、组织中呈高表达,hsa_circ_0000128作为miR-623的海绵上调EIF4A1促进胃癌细胞的生物学功能;含量下调后可显著抑制胃癌细胞增殖、迁移并诱导其凋亡。

关键词： hsa_circ_0000128 胃腺癌 miR-623 真核翻译起始因子4A1 细胞凋亡

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超早期肺康复介入对矽肺合并呼吸衰竭有创机械通气患者治疗的影响

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中国中西医结合急救杂志 2022年第6期29卷 695-698页

作者：徐俊马杭文璐徐州医科大学第二附属医院呼吸与危重症医学科江苏徐州221000 江苏大学附属金坛人民医院呼吸内科

目的观察超早期肺康复介入对矽肺合并呼吸衰竭机械通气患者临床疗效的影响。方法采用前瞻性研究方法,选择2016年7月至2019年12月徐州医科大学第二附属医院呼吸与危重症医学科呼吸重症监护病房(RICU)收治的85例矽肺合并急性呼吸衰竭进行... 详细信息

目的观察超早期肺康复介入对矽肺合并呼吸衰竭机械通气患者临床疗效的影响。方法采用前瞻性研究方法,选择2016年7月至2019年12月徐州医科大学第二附属医院呼吸与危重症医学科呼吸重症监护病房(RICU)收治的85例矽肺合并急性呼吸衰竭进行有创机械通气的患者作为研究对象。按随机数字表法将患者分为试验组(44例)和对照组(41例)。所有患者均给予积极的抗感染等常规治疗,对照组于自主生命体征稳定后给予早期肺康复介入;而试验组于生命体征稳定(包含血管活性药物支持下)时即开始实施超早期肺康复介入干预。比较两组康复干预前基线资料及住RICU期间呼吸机相关性肺炎(VAP)发生率、撤机成功率、有创机械通气时间、住院时间、管路脱落不良事件发生率、病死率的差异。结果两组患者实施肺康复介入前性别、年龄、矽肺分期、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))、动脉血pH值、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、降钙素原(PCT)、肌酐等比较差异均无统计学意义。与对照组比较,试验组治疗期间VAP发生率明显下降〔13.64%(6/44)比31.71%(13/41),P0.05〕。结论在矽肺合并呼吸衰竭机械通气患者中,超早期实施肺康复介入可明显缩短机械通气时间和住院时间,降低VAP发生率,提高撤机成功率;而且不会增加相关不良事件和并发症的发生率,值得临床应用并进一步探讨。

关键词：超早期肺康复矽肺呼吸衰竭机械通气

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降阶梯方案用于治疗重症获得性下呼吸道感染临床疗效分析

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中华医院感染学杂志 2016年第17期26卷 3924-3926页

作者：丁浩朱莉王剑江苏大学附属人民医院呼吸内科江苏镇江212002 江苏大学附属人民医院肾内科江苏镇江212002

目的探讨降阶梯方案用于重症获得性下呼吸道感染患者治疗中的临床效果,为临床治疗提供依据。方法选取2013年10月-2015年6月医院收治的88例重症获得性下呼吸道感染患者,随机分为观察组和对照组,各44例,对照组患者给予传统治疗,观察组患... 详细信息

目的探讨降阶梯方案用于重症获得性下呼吸道感染患者治疗中的临床效果,为临床治疗提供依据。方法选取2013年10月-2015年6月医院收治的88例重症获得性下呼吸道感染患者,随机分为观察组和对照组,各44例,对照组患者给予传统治疗,观察组患者采用降阶梯方案进行治疗,统计两组患者治疗后的感染控制情况和临床疗效。结果观察组44例患者治疗有效37例,有效率为84.09%,对照组44例患者治疗有效28例,有效率为63.64%,两组比较差异有统计学意义(P呼吸道感染患者采用降阶梯方案临床疗效显著,可在短时间内有效控制病情发展,治疗方案针对性强,值得临床推广。

关键词：降阶梯方案重症获得性下呼吸道感染临床疗效

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Nur77通过NF-κB/IL-6信号途径促进胃癌细胞的侵袭与迁移

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南方医科大学学报 2022年第9期42卷 1410-1417页

作者：李蔚石永康郭玉华田声望常州市金坛第一人民医院肿瘤内科江苏常州213200

目的探讨孤儿核因子受体(Nur77)在胃癌组织中表达及其与患者预后状况之间联系,研究Nur77在胃癌细胞侵袭与迁移进程中的作用机制。方法利用Oncomine数据库在线分析Nur77在胃癌及胃黏膜组织中mRNA表达情况;基于Human Protein Atlas网站数... 详细信息

目的探讨孤儿核因子受体(Nur77)在胃癌组织中表达及其与患者预后状况之间联系,研究Nur77在胃癌细胞侵袭与迁移进程中的作用机制。方法利用Oncomine数据库在线分析Nur77在胃癌及胃黏膜组织中mRNA表达情况;基于Human Protein Atlas网站数据对比胃癌及正常胃组织中Nur77蛋白表达分布特征;GEPIA2在线分析工具评估Nur77与患者总生存期之间联系;蛋白免疫印迹法(Westernblot)比较正常胃黏膜上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS、MKN-45中Nur77蛋白表达差异;分别通过siRNA靶向干扰以及质粒转染上调Nur77表达和靶向下调IL-6验证Nur-77与IL-6之间表达调控关系;运用划痕实验检测干扰Nur77表达前后胃癌细胞的迁移能力改变;将胃癌细胞分空载体组和过表达Nur77组以及空载体转染后干扰IL-6处理组,过表达Nur77结合干扰IL-6处理组(质粒转染24 h后siRNA继续处理24 h)经Transwell小室实验检测Nur-77及IL-6在胃癌细胞迁移和侵袭过程中作用;利用Westernblot检测Nur77表达对NF-κB/IL-6信号通路活化的影响。结果Oncomine数据库在线分析显示,与正常胃黏膜组织相比胃癌组织中Nur77的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中Nur77多表达于胃癌细胞细胞核内;Nur77的高表达与胃癌患者不良预后相关(P<0.05);胃癌细胞中高表达的Nur77参与IL-6的表达调控;划痕实验和Transwell小室结果显示,Nur77可能通过IL-6参与胃癌细胞的迁移和侵袭进程(P<0.05);Westernblot结果显示,Nur77通过调控p-p65、p65、p-Stat3、Stat3的表达参与NF-κB/IL-6信号通路活化。结论胃癌中高表达Nur77与患者不良预后密切相关;Nur77可能通过调控NF-κB/IL-6信号途径活化参与胃癌细胞侵袭与迁移进程。

关键词：胃癌 Nur77 NF-κB/IL-6 侵袭迁移

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血管生成素-1在急性呼吸窘迫综合征患者外周血中的变化及与预后的关系

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华中科技大学学报（医学版） 2015年第6期44卷 705-709页

作者：丁浩朱莉王剑江苏大学附属人民医院呼吸内科镇江212002 江苏大学附属人民医院肾内科镇江212002

目的探讨血管生成素-1（Ang-1）在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者外周血中的变化及与预后的关系。方法选取住院治疗的85例ARDS患者,根据患者氧化状态分为轻度组（n=25）、中度组（n=36）和重度组（n=24）,选取同期住院治疗的40例非ARD... 详细信息

目的探讨血管生成素-1（Ang-1）在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者外周血中的变化及与预后的关系。方法选取住院治疗的85例ARDS患者,根据患者氧化状态分为轻度组（n=25）、中度组（n=36）和重度组（n=24）,选取同期住院治疗的40例非ARDS患者作为对照组。收集所有研究对象临床基本资料,采用RT-PCR技术检测研究对象外周血中Ang-1和酪氨酸激酶受体Tie2表达,采用Pearson相关分析对变量间相关关系进行分析。根据患者28d死亡情况,分为生存组（n=47）和死亡组（n=38）,采用多因素Logistic回归分析对影响ARDS患者预后的相关因素进行分析,采用ROC曲线对Ang-1在预测ARDS发生中的效能进行分析。结果与对照组相比,ARDS患者PaO2/FiO2降低,而APACHEⅡ评分、LIS评分、SOFA评分、C-反应蛋白、IL-6和死亡率均升高,外周血中Ang-1mRNA和Tie2mRNA相对表达量均降低,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;重度组患者外周血中Ang-1mRNA和Tie2mRNA相对表达量均低于中度组和轻度组,且中度组均低于轻度组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;Pearson相关分析显示,ARDS患者外周血中Ang-1和Tie2表达均与PaO2/FiO2呈正相关（均P〈0.05）,而与APACHEⅡ、LIS、SOFA、C-反应蛋白和IL-6呈负相关（均P〈0.05）;多因素Logistic回归分析显示,PaO2/FiO2和APACHEⅡ是ARDS患者死亡的独立危险因素（均P〈0.05）,而Ang-1mRNA和Tie2mRNA相对表达量则是ARDS患者死亡的保护性因素（均P〈0.05）;ROC曲线分析显示,Ang-1mRNA相对表达量在诊断ARDS患者时的曲线下面积0.874（95%CI：0.809~0.938）,灵敏度72.5%,特异度85.9%。结论 Ang-1在ARDS患者外周血中呈低表达,与患者病情严重程度密切相关,可能通过减少与Tie2的结合,而加速ARDS患者内皮细胞损伤及增加血管通透性,可作为预测患者预后的参考指标。

关键词：急性呼吸窘迫综合征血管生成素-1 酪氨酸激酶受体预后

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结直肠癌TRDMT-1、CEACAM-1的表达及与肿瘤生物学特性的相关性

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分子诊断与治疗杂志 2020年第11期12卷 1556-1560页

作者：冯婧赵凯周鑫江苏大学附属金坛人民医院消化内科江苏金坛213200

目的分析tRNA天冬氨酸甲基转移酶1(TRDMT-1)、癌胚抗原相关细胞黏附分子-1(CEACAM-1)在结直肠癌中的表达及与肿瘤生物学特性的相关性。方法收集62例结直肠癌患者的临床资料,同选取本组患者距离肿瘤组织<5 cm的正常组织肠黏膜组织作为参... 详细信息

目的分析tRNA天冬氨酸甲基转移酶1(TRDMT-1)、癌胚抗原相关细胞黏附分子-1(CEACAM-1)在结直肠癌中的表达及与肿瘤生物学特性的相关性。方法收集62例结直肠癌患者的临床资料,同选取本组患者距离肿瘤组织<5 cm的正常组织肠黏膜组织作为参照,对比TRDMT-1、CEACAM-1不同表达微淋巴管密度(LMVD)的差异,分析影响结直肠癌患者预后死亡的危险因素。结果结直肠癌的TRDMT-1、CEACAM-1阳性表达率分别为61.29%、64.52%;癌旁正常组织分别为27.42%、30.65%,明显低于结直肠癌组织,且结直肠癌组织中的LMVD值亦显著高于癌症正常组织(t=22.976,P<0.05)。结直肠癌组织中TRDMT-1、CEACAM-1表达均与肿瘤浆膜浸润、TNM分期、肝转移、淋巴结转移、脉管浸润有关(P<0.05),而TRDMT-1表达与肿瘤直径、组织学分化程度关系密切(P<0.05)。结直肠癌组织中TRDMT-1、CEACAM-1阳性表达者LMVD值均显著高于TRDMT-1、CEACAM-1阴性表达者(P<0.05)。非条件多因素Logistic回归分析结果示,TRDMT-1、CEACAM-1阳性表达是影响结直肠癌患者预后死亡的危险因素(P<0.05)。结论 TRDMT-1、CEACAM-1的高表达及LMVD的升高与结直肠癌的生物学行为和进展关系密切,临床上可根据TRDMT-1、CEACAM-1表达情况对患者进行病情评估、预后监测。

关键词： tRNA天冬氨酸甲基转移酶1 癌胚抗原相关细胞黏附分子-1 结直肠癌肿瘤生物学特性

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CircRNA_23113抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移

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基础医学与临床 2022年第1期42卷 82-88页

作者：王灵霞严玉兰袁海涛蔡烨伟刘德慧谷文露曹碧月江苏大学附属人民医院呼吸内科江苏镇江212002 江苏大学附属人民医院普外科江苏镇江212002 上海市松江区中心医院呼吸内科上海201600

目的探究circRNA_23113在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法通过高通量测序技术测序5例临床肺腺癌、癌旁组织标本,筛选出差异性表达的circRNA_23113。实时荧光定量PCR检测肺腺癌组织、血清和细胞中circRNA_23113的表... 详细信息

目的探究circRNA_23113在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法通过高通量测序技术测序5例临床肺腺癌、癌旁组织标本,筛选出差异性表达的circRNA_23113。实时荧光定量PCR检测肺腺癌组织、血清和细胞中circRNA_23113的表达;构建circRNA_23113的过表达质粒,用CCK-8法、克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室法分析其对细胞增殖和迁移的影响;用Western blot检测β-catenin、cyclin D1以及c-myc蛋白水平的表达。结果CircRNA_23113在肺腺癌患者组织、血清和细胞中显著低表达(P<0.05);过表达circRNA_23113后抑制A549和H1299细胞增殖和迁移(P<0.05);CircRNA_23113抑制β-catenin、cyclin D1以及c-myc表达(P<0.05)。结论CircRNA_23113在肺腺癌中低表达,且过表达能抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移。

关键词： circRNA_23113 肺腺癌增殖迁移

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环状RNA表达与肺腺癌生物学功能的关联性研究

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淮海医药 2023年第1期41卷 19-23,27页

作者：张日婷赵弘卿王洵严玉兰南京医科大学附属无锡第二医院呼吸内科江苏无锡214000 江苏大学附属人民医院呼吸内科江苏镇江212001

目的:探索环状RNA(circRNA)表达水平与肺腺癌发病的关联性。方法:选取江苏大学附属人民医院胸外科接受部分或根治性手术治疗的肺腺癌患者25例,术中提取患者的肺腺癌组织和癌旁正常组织。采用高通量测序技术(RNA-seq)在5对肺组织中筛选... 详细信息

目的:探索环状RNA(circRNA)表达水平与肺腺癌发病的关联性。方法:选取江苏大学附属人民医院胸外科接受部分或根治性手术治疗的肺腺癌患者25例,术中提取患者的肺腺癌组织和癌旁正常组织。采用高通量测序技术(RNA-seq)在5对肺组织中筛选肺腺癌组织异常表达的circRNA,qRT-PCR实验检测20对肺组织标本中测序差异表达倍数前10位的10个circRNA表达水平,circRNA/miRNA/mRNA(ceRNA)网络互作图分析部分差异表达的circRNA与miRNA、mRNA的互作关系,克隆实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测circRNA对肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果:测序结果显示,肺腺癌组织中共285个circRNA表达异常,其中102个circRNA表达上调,183个circRNA表达下调。qRT-PCR实验结果显示,测序结果中表达上调差异倍数前五位的circRNA和表达下调差异倍数前五位的circRNA异常表达方向与测序结果一致,且hsa_circ_0002360为表达差异倍数最高的circRNA。生物信息学分析显示,hsa_circ_0002360可海绵吸附多个miRNA。体外细胞功能实验提示,hsa_circ_0002360促进了肺腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭。结论:circRNA在肺腺癌组织表达异常,其中hsa_circ_0002360表达差异倍数最高,hsa_circ_0002360参与肺腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移过程,可能为肺腺癌患者的潜在预后标志物和治疗靶点。

关键词：肺腺癌环状RNA 高通量测序

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ST2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的意义

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中国免疫学杂志 2019年第6期35卷 726-728,734页

作者：凌夏君许姣李献文周燕娟庄志方常州市武进人民医院江苏大学附属武进医院呼吸内科常州213017

目的:探讨ST2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义。方法:2014年1月～2015年10月期间在本院就诊经病理组织学、细胞学检查确诊为非小细胞肺癌的45例患者,选择癌旁正常肺组织标本(距离癌组织至少10 cm)作为对照(正常肺组织组)。HE染色... 详细信息

目的:探讨ST2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义。方法:2014年1月～2015年10月期间在本院就诊经病理组织学、细胞学检查确诊为非小细胞肺癌的45例患者,选择癌旁正常肺组织标本(距离癌组织至少10 cm)作为对照(正常肺组织组)。HE染色检测组织中免疫细胞,RT-PCR检测NSCLC及癌旁正常肺组织标本中ST2、IL-4、IFN-γ的表达。结果:(1)NSCLC患者肺癌组织中ST2表达量明显高于癌旁正常肺组织(P<0. 05);(2)与癌旁正常肺组织相比,NSCLC患者肺癌组织标本中IL-4/IFN-γ比值增大,有统计学意义。结论:非小细胞肺癌患者肺癌组织高表达ST2,ST2介导的Th1/Th2细胞因子漂移可能参与了肺癌过程。

关键词：非小细胞肺癌肺癌组织 ST2

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EGFR-TKI联合放疗治疗肺腺癌伴有中枢神经系统转移的meta分析

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中国医师杂志 2021年第7期23卷 1017-1021页

作者：赵越徐心怡陆沁源张希龙黄汉鹏江苏大学附属医院呼吸内科镇江212003 江苏大学附属人民医院麻醉科镇江212003 南京医科大学第一附属医院呼吸内科 210000

目的系统评价表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFK-TKI)联合放疗对比单一EGFR-TKI或单一放疗在治疗肺腺癌合并中枢神经系统转移的有效性。方法计算机检索PubMed、EMBASE、Medline、Cochrane Library、Clinical trials等数据库,收集2... 详细信息

目的系统评价表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFK-TKI)联合放疗对比单一EGFR-TKI或单一放疗在治疗肺腺癌合并中枢神经系统转移的有效性。方法计算机检索PubMed、EMBASE、Medline、Cochrane Library、Clinical trials等数据库,收集2012年1月至2019年4月在国内外公开发表的EGFR-TKI合并放疗对比单一EGFK-TKI或单一放疗治疗肺腺癌合并中枢神经系统转移的临床对照研究,在浏览并筛选文献、评价纳人研究的质量、提取资料并交叉核对、评估数据后,采用REVMAN 5.3软件进行meta分析。结果一共10个临床对照试验包括1379例患者纳入了本研究。研究结果显示,与单一EGFR-TKI或放疗相比,EGFR-TKI联合放疗能明显提高患者的客观缓解率(0RR)[OR:3.81,95%CI(1.73,8.39);P<0.001]、总生存期(OS)[HR:0.60,95%CI(0.41,0.89);P=0.01]、颅内无进展生存期(nPFS)[HR:0.65,95%CI(0.46,0.91);P=0.01].结论EGFR-TKI联合放疗对比单一EGFR-TKI或单一放疗在提高患者客观缓解率、总生存期、颅内无进展生存期上效果显著。

关键词：腺癌,肺中枢神经系统肿瘤肿瘤转移表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤联合化疗方案

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