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IFI35介导细胞凋亡抑制新城疫病毒增殖的分子机制研究

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西北农业学报 2022年第10期31卷 1250-1257页

作者：贾燕青仇薪鑫张蓉杨增岐杨凌职业技术学院动物工程分院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

细胞凋亡是由多种基因调控的一种程序性细胞死亡方式,也是宿主抵抗病毒感染的一种防御策略。新城疫病毒(NDV)感染鸡胚组织后,通过RNA-Seq测序分析发现,F48E9和LaSota分别引起2035和1604个差异表达基因,对部分差异表达基因抗病毒研究表明... 详细信息

细胞凋亡是由多种基因调控的一种程序性细胞死亡方式,也是宿主抵抗病毒感染的一种防御策略。新城疫病毒(NDV)感染鸡胚组织后,通过RNA-Seq测序分析发现,F48E9和LaSota分别引起2035和1604个差异表达基因,对部分差异表达基因抗病毒研究表明,差异表达基因IFI35抗病毒效果良好。过表达IFI35后可显著抑制F48E9和LaSota-GFP的增殖,机制研究发现,IFI35可介导细胞凋亡,也可以促进NDV感染时诱导的凋亡,并可以促进凋亡相关基因p53、Caspase3和FasL的表达量增加。本研究结果初步表明,IFI35可以通过介导细胞凋亡来抑制NDV的增殖,这些研究不仅丰富了宿主抗NDV的分子机制,也为新城疫防治提供新的思路。

关键词：新城疫病毒 IFI35 细胞凋亡分子机制

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新城疫病毒感染鸡胚组织miRNAs表达谱的测序及分析

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动物医学进展 2022年第8期43卷 19-24页

作者：贾燕青仇薪鑫王相伟谢晓刚白军王兴龙杨增岐杨凌职业技术学院动物工程分院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为了阐明新城疫病毒(NDV)感染鸡胚后miRNAs表达谱的变化及NDV感染与宿主基因之间的相互作用,帮助寻找NDV防控的新靶点和方法。通过small RNA测序技术获得NDV强毒株(F48E9)和弱毒株(La Sota)感染的鸡胚内脏组织miRNAs表达谱。对差异表达... 详细信息

为了阐明新城疫病毒(NDV)感染鸡胚后miRNAs表达谱的变化及NDV感染与宿主基因之间的相互作用,帮助寻找NDV防控的新靶点和方法。通过small RNA测序技术获得NDV强毒株(F48E9)和弱毒株(La Sota)感染的鸡胚内脏组织miRNAs表达谱。对差异表达的miRNAs进行分析发现,F48E9感染引起了33个miRNAs上调,31个miRNAs下调;La Sota感染引起36个miRNAs上调,25个miRNAs下调;La Sota与F48E9感染组比较,有27个miRNAs上调,22个miRNAs下调。选取10个差异表达miRNAs进行RT-qPCR验证,gga-miR-34a-5p、gga-miR-375、gga-miR-122-3p、gga-miR-187-3p、gga-miR-124a-3p、gga-miR-203a、gga-miR-205a、gga-miR-183、gga-miR-9-3p和gga-miR-451表达量与small RNA测序结果相似。对差异表达miRNAs进行靶基因预测和生物信息学富集分析发现,在NDV感染鸡胚时,差异表达的miRNAs主要参与调控细胞生长代谢、细胞周期及免疫和炎症反应等通路。研究结果分析了NDV感染后miRNAs表达变化及预测功能,为NDV防控研究提供参考。

关键词：新城疫病毒 small RNA测序 miRNA 实时荧光定量PCR

硫酸化朱砂七多糖对免疫应激鸡下丘脑与肾上腺c-fos表达及血清皮质醇含量的影响

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动物医学进展 2022年第10期43卷 67-72页

作者：张芮琪卿素珠杨凌职业技术学院动物工程分院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

目前中药多糖在动物养殖生产中的应用日益广泛,对于其作用机理的探讨十分必要。以雏鸡为试验用动物,以制备的朱砂七多糖(Polygonum cillinerve polysaccharide,PCP)和硫酸化朱砂七多糖(sulfated Polygonum ciliinerve polysaccharides,s... 详细信息

目前中药多糖在动物养殖生产中的应用日益广泛,对于其作用机理的探讨十分必要。以雏鸡为试验用动物,以制备的朱砂七多糖(Polygonum cillinerve polysaccharide,PCP)和硫酸化朱砂七多糖(sulfated Polygonum ciliinerve polysaccharides,sPCP)为材料,将雏鸡随机分为对照组,新城疫(ND)疫苗组,高、低PCP组和高、低sPCP组,在疫苗首免后7 d(21日龄)和二免后7 d(35日龄)分别进行各组鸡的血样采集,制备血清;并取各组鸡的下丘脑和肾上腺制备石蜡切片,进行HE染色和c-fos免疫组化染色;ELISA法测定各组雏鸡血清中皮质醇的含量,观察朱砂七多糖和硫酸化朱砂七多糖对ND疫苗免疫应激鸡的保护作用。结果显示,sPCP组及PCP组雏鸡下丘脑室旁核和肾上腺皮质的c-fos阳性反应均较疫苗组的弱,以低剂量sPCP组的阳性反应最弱;在D21,sPCP低剂量组血清皮质醇含量较疫苗组明显降低,在D35,sPCP低剂量组及PCP组的血清皮质醇含量均低于疫苗组的,但差异不显著(P>0.05)。以上结果说明PCP和sPCP具有一定的抗免疫应激作用,且以低剂量sPCP效果较好。

关键词：硫酸化朱砂七多糖免疫应激鸡 c-fos 皮质醇

4种致牛腹泻病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2023年第10期51卷 20-28页

作者：高睿徐伟罗艳谢晓刚李梦磊张琪杨凌职业技术学院动物工程分院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 陕西省彬州市动物疫控中心陕西彬州713500 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

【目的】建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛轮状病毒(BRV)、牛恶性卡他热病毒(MCFV)4种致牛腹泻病毒多重荧光定量PCR检测方法,为BVDV、BCoV、BRV和MCFV的鉴别诊断提供技术支持。【方法】根据BVDV的5′UTR基因、BCoV的N... 详细信息

【目的】建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛轮状病毒(BRV)、牛恶性卡他热病毒(MCFV)4种致牛腹泻病毒多重荧光定量PCR检测方法,为BVDV、BCoV、BRV和MCFV的鉴别诊断提供技术支持。【方法】根据BVDV的5′UTR基因、BCoV的N基因、BRV的VP6基因和MCFV的ORF9基因的保守区域设计引物,克隆目的基因构建标准阳性重组质粒,建立可同时检测4种致牛腹泻病毒的多重荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评价。用建立的多重荧光定量PCR检测方法对76份临床样品进行检测,并与常规PCR检测方法的结果进行比较。【结果】建立了BVDV、BCoV、BRV和MCFV多重荧光定量PCR检测方法,该方法建立的标准曲线线性关系良好,仅可特异性扩增出4种目标基因片段;对BVDV、MCFV、BRV和BCoV的最低检出限分别为9.4×10^(1),1.4×10^(3),9.1×10^(1)和1.2×10^(2)拷贝/μL,与普通PCR相比,灵敏性高出10~1000倍;批内、批间差异均小于5%。76份临床样品检测结果显示,多重荧光定量PCR检测结果与普通PCR检测结果的符合率分别为98.7%(BCoV)、97.4%(BRV)、100.0%(BVDV)和100.0%(MCFV)。【结论】建立了BVDV、BCoV、BRV和MCFV多重荧光定量PCR检测方法,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于牛腹泻病毒病原的实验室检测。

关键词：牛腹泻病牛病毒性腹泻病毒牛冠状病毒牛恶性卡他热病毒牛轮状病毒多重荧光定量PCR检测

转录组测序在新城疫病毒感染中的应用与研究进展

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动物医学进展 2022年第10期43卷 85-89页

作者：贾燕青仇薪鑫佛香霖杨增岐杨凌职业技术学院动物工程分院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

转录组测序技术因其具有通量高、精确度高、灵敏性高及成本低等特点,已被广泛应用于病毒与宿主互作研究中。新城疫病毒是制约养禽业发展的重要病原之一,运用转录组测序技术可促进对新城疫病毒感染与宿主免疫之间的研究,也能加速对新城... 详细信息

转录组测序技术因其具有通量高、精确度高、灵敏性高及成本低等特点,已被广泛应用于病毒与宿主互作研究中。新城疫病毒是制约养禽业发展的重要病原之一,运用转录组测序技术可促进对新城疫病毒感染与宿主免疫之间的研究,也能加速对新城疫病毒的快速分析能力,为从转录水平研究新城疫病毒与宿主互作机制研究提供快速有效的方法。论文对转录组测序技术的发展及特点进行概述,对该技术在新城疫病毒感染引起基因表达变化、非编码基因调控等研究及应用进行详细的综述,并对其未来应用进一步展望,以期为新城疫相关研究提供参考。

关键词：新城疫病毒转录组 RNA测序

致牛腹泻4种细菌多重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2023年第6期44卷 21-27页

作者：高睿徐伟罗艳谢晓刚李梦磊张琪许信刚杨凌职业技术学院动物工程学院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 陕西省彬州市动物疫控中心陕西彬州713500 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

随着规模化和集约化养牛业的不断发展,多种致病菌混合感染造成牛腹泻严重制约了养牛业的快速发展,对腹泻病原进行快速准确鉴别诊断对疫病防控至关重要。根据沙门氏菌的ivnA基因、大肠埃希氏菌的23S rRNA基因、产气荚膜梭菌的plc基因以... 详细信息

随着规模化和集约化养牛业的不断发展,多种致病菌混合感染造成牛腹泻严重制约了养牛业的快速发展,对腹泻病原进行快速准确鉴别诊断对疫病防控至关重要。根据沙门氏菌的ivnA基因、大肠埃希氏菌的23S rRNA基因、产气荚膜梭菌的plc基因以及志贺氏菌的ipaH基因的保守区域建立了可同时检测这4种细菌的多重荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性和重复性进行了研究。结果显示,建立的标准曲线线性关系良好;优化后的检测方法仅可特异性扩增出4种目标细菌;对大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌和产气荚膜梭菌的最低检出限分别为9.4×10~1copies/μL、1.2×10~2copies/μL、9.1×10~1copies/μL和1.4×10~3copies/μL,该方法的灵敏性高于普通单项PCR检测方法10倍;批内、批间差异均小于5%。用此方法检测人工感染病料,每份病料均检测出对应攻毒细菌的荧光信号。以上结果表明,所建立的多重荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于致牛腹泻细菌的实验室检测。

关键词：大肠埃希氏菌沙门氏菌志贺氏菌产气荚膜梭菌多重荧光定量PCR

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冷应激复温对ICR小鼠神经行为学的影响

中国畜牧兽医 2023年第3期50卷 932-941页

作者：史宏昭刘洋姚睿智刘鹏李士泽杨凌职业技术学院动物工程学院动物疫病防控陕西省高校工程研究中心杨凌712100 黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 内蒙古民族大学动物科技学院通辽028011

【目的】研究不同冷应激复温后对ICR小鼠的自发运动、探索行为、焦虑情绪和血液激素指标的影响。【方法】通过与28℃常温对照组相比,检测ICR小鼠4、10、16、22℃冷应激复温组于复温2、4、6、8、10、12 h后在旷场试验和高架十字迷宫试验... 详细信息

【目的】研究不同冷应激复温后对ICR小鼠的自发运动、探索行为、焦虑情绪和血液激素指标的影响。【方法】通过与28℃常温对照组相比,检测ICR小鼠4、10、16、22℃冷应激复温组于复温2、4、6、8、10、12 h后在旷场试验和高架十字迷宫试验中的运动变化,并通过ELISA检测各组在复温2及4 h后的血液激素指标变化。【结果】旷场试验结果显示,与28℃常温对照组相比,22℃冷刺激复温10 h时中央区域停留时间和运动时间显著减少(P0.05)。与28℃常温对照组相比,皮质酮(CORT)在22℃冷刺激复温4 h时极显著升高(P<0.01),16℃冷刺激复温2和4 h时极显著升高(P<0.01);肾上腺素(EPI)在22℃冷刺激复温4 h时极显著升高(P<0.01),10℃冷刺激复温2和4 h时极显著升高(P<0.01)。【结论】冷应激结束后对ICR小鼠的自发运动、探索行为、焦虑情绪和血液激素指标存在持续影响,应减少以ICR小鼠为模型的试验环境温度变化,提高试验结果准确性。

关键词： ICR小鼠冷应激复温行为学皮质酮(CORT) 肾上腺素(EPI)

职业教育中的《兽医流行病学》课程思政教学设计研究与实践

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畜牧兽医科技信息 2022年第12期 7-9页

作者：仇薪鑫张振仓贾燕青杨凌职业技术学院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100

本文结合学院课程思政建设工作,通过创新教学方法,坚持以学生为中心,加强教师引导辅助作用,重视引入故事案例,深挖课程思政元素,将思政元素与专业知识技能有机融合,开展小组探讨式教学。实践表明,改革前后学生对本课程的学习兴趣、对课... 详细信息

本文结合学院课程思政建设工作,通过创新教学方法,坚持以学生为中心,加强教师引导辅助作用,重视引入故事案例,深挖课程思政元素,将思政元素与专业知识技能有机融合,开展小组探讨式教学。实践表明,改革前后学生对本课程的学习兴趣、对课程内容的满意度、对教学模式的满意度、对培养学习能力等方面均有极大提升,改革成果将有效提升教学效果和学生的职业素养,有助于锻炼学生的科学素质,增强学生的职业责任感和使命感。真正实现在育人过程中培养知识与技能。为培养出具备实事求是、探索未知的科学精神,严谨细致、精益求精的工匠精神,肩负畜产品安全、人类公共卫生安全的责任感和使命感的高素质兽医技术技能专业人才提供借鉴。

关键词：兽医流行病学课程思政高素质人才使命感责任感

RT-PCR鉴别鸡新城疫病毒强弱毒株检测方法的建立

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动物医学进展 2022年第3期43卷 16-19页

作者：仇薪鑫贾燕青张振仓杨增岐杨凌职业技术学院动物工程学院/动物疫病防控陕西省高校工程研究中心陕西杨凌712100 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

通过比对分析NCBI数据库中新城疫病毒(NDV)不同毒株V蛋白基因序列,设计2对引物,并优化试验条件,建立一种快速鉴别NDV强弱毒株的RT-PCR诊断方法。结果显示,用2对引物对NDV强毒可扩增出703 bp和456 bp的特异性片段,而对NDV弱毒只能扩增出7... 详细信息

通过比对分析NCBI数据库中新城疫病毒(NDV)不同毒株V蛋白基因序列,设计2对引物,并优化试验条件,建立一种快速鉴别NDV强弱毒株的RT-PCR诊断方法。结果显示,用2对引物对NDV强毒可扩增出703 bp和456 bp的特异性片段,而对NDV弱毒只能扩增出703 bp的特异性片段;特异性试验结果表明该方法对IBDV、IBV和ILTV的检测均为阴性;灵敏性试验结果显示,该方法对NDV强弱毒株最小RNA检出量为均为0.01 ng/μL,敏感性高于当前通用检测引物。所建方法具有高灵敏性、强特异性、准确快速等优点,可用于临床新城疫强弱毒的快速检测及新城疫的监测。

关键词：新城疫病毒检测方法 V蛋白鉴别诊断