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大熊猫白血病抑制因子RNAi干扰载体的构建及应用

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西南民族大学学报（自然科学版） 2023年第6期49卷 609-615页

作者：李非平刘玉良王神飞张梦诗胡贤彪安俊辉王东辉张名岳侯蓉蔡开来成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室四川成都610081

旨在构建大熊猫白血病抑制因子(LIF)RNAi重组质粒,以期进一步研究LIF对大熊猫骨髓间充质干细胞(PDBM-MSCs)的调控作用.试验设计3组大熊猫LIF shRNA慢病毒pLKO.1 puro-LIF-down干扰载体,通过慢病毒的方式感染PDBM-MSCs,经q-PCR鉴定重组质... 详细信息

旨在构建大熊猫白血病抑制因子(LIF)RNAi重组质粒,以期进一步研究LIF对大熊猫骨髓间充质干细胞(PDBM-MSCs)的调控作用.试验设计3组大熊猫LIF shRNA慢病毒pLKO.1 puro-LIF-down干扰载体,通过慢病毒的方式感染PDBM-MSCs,经q-PCR鉴定重组质粒pLKO.1 puro-LIF-down-1抑制效果最显著.pLKO.1 puro-LIF-down-1实验组和空质粒对照组比较发现,LIF mRNA表达水平抑制后能够显著下调细胞周期调控基因CDK2、CCNB2、CCND3的mRNA表达水平(P研究成功构建出大熊猫LIF RNAi干扰载体,LIF对PDBM-MSCs的生长和干性维持具有重要的调控作用,为大熊猫干细胞的体外培养及干性机制的研究奠定基础.

关键词：大熊猫 LIF 骨髓间充质干细胞

5种培养基对大熊猫肠道微生物产短链脂肪酸的影响

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四川动物 2023年第1期42卷 85-90页

作者：谢佶芹郑丽君杨宇张文平岳碧松四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610065 成都大熊猫繁育研究基地成都610081 四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

大熊猫Ailuropoda melanoleuca的肠道微生物十分复杂,其菌群结构直接关系到大熊猫的健康。本文采用5种商业化益生菌培养基(GYP、LBS、M17、SL和TJA)培养大熊猫粪便样品菌悬液24 h,用气相色谱法测定7种短链脂肪酸(SCFA)的含量。结果表明... 详细信息

大熊猫Ailuropoda melanoleuca的肠道微生物十分复杂,其菌群结构直接关系到大熊猫的健康。本文采用5种商业化益生菌培养基(GYP、LBS、M17、SL和TJA)培养大熊猫粪便样品菌悬液24 h,用气相色谱法测定7种短链脂肪酸(SCFA)的含量。结果表明,SL和LBS中的SCFA含量最高,浓度分别达到16.410μg·mL-1和15.650μg·mL-1,其中乙酸占总含量的97%,而其他6种甚微,说明这2种培养基对产乙酸肠道菌有较强的富集作用。M17中的SCFA总含量虽然不高(2.410μg·mL-1),但可以检测到7种SCFA,正丁酸最高(1.230μg·mL-1),约占总含量的51%,丙酸和正己酸含量也占10%以上,说明M17培养基可以富集大熊猫肠道中较多种类的产酸菌。研究结果为大熊猫肠道益生菌的富集培养和分离筛选提供了基础资料。

关键词：大熊猫肠道微生物短链脂肪酸气相色谱益生菌培养基

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岷山山系南端大熊猫栖息地分布分析

四川动物 2020年第2期39卷 177-182页

作者：余翔罗秀海周延山兰官伟陈超侯蓉蒋泽银胡大明齐敦武张志和成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学省部共建实验室成都610081 四川白水河国家级自然保护区管理局四川彭州611930

基于大熊猫Ailuropoda melanoleuca野外分布数据及环境变量,利用MaxEnt模型对岷山山系南端的大熊猫适宜栖息地分布进行了预测及分析。结果显示:研究区域内有大熊猫适宜栖息地330.9 km^2,占研究区域内保护区总面积的23.2%;并且龙溪虹口-... 详细信息

基于大熊猫Ailuropoda melanoleuca野外分布数据及环境变量,利用MaxEnt模型对岷山山系南端的大熊猫适宜栖息地分布进行了预测及分析。结果显示:研究区域内有大熊猫适宜栖息地330.9 km^2,占研究区域内保护区总面积的23.2%;并且龙溪虹口-白水河-九顶山一线的大熊猫的栖息地存在一定的破碎化现象。建议继续加强对大熊猫栖息地的保护,减少人为干扰,促进大熊猫栖息地的恢复,增进各相邻保护区间的沟通交流、数据分享,更准确掌握、了解该区域大熊猫的动态。

关键词：大熊猫岷山山系南端栖息地

动物园圈养大熊猫毕氏肠微孢子虫分子流行病学调查

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浙江农业学报 2018年第7期30卷 1132-1136页

作者：曹钰莹李威钟志军肖洁弓超王承东李才武杨海迪黄祥明吴孔菊彭广能四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 中国大熊猫保护研究中心卧龙基地四川阿坝624000 成都大熊猫繁育研究基地四川成都610081

为了解各地动物园圈养大熊猫的毕氏肠微孢子虫感染情况及其人畜共患风险,采用基于ITS基因的巢氏PCR方法,对江苏、福建、浙江等10个省(市、自治区)的动物园圈养大熊猫毕氏肠微孢子虫的感染情况及基因分型进行调查和检测。在31份大熊猫粪... 详细信息

为了解各地动物园圈养大熊猫的毕氏肠微孢子虫感染情况及其人畜共患风险,采用基于ITS基因的巢氏PCR方法,对江苏、福建、浙江等10个省(市、自治区)的动物园圈养大熊猫毕氏肠微孢子虫的感染情况及基因分型进行调查和检测。在31份大熊猫粪便样品中,共检测到毕氏肠微孢子虫阳性14份,总感染率45.2%,检测出SC02(13/14)和Peru6(1/14)两种毕氏肠微孢子虫基因型。种系发育分析表明,SC02和Peru6都属于具有人畜共患潜能的group 1b。本实验首次发现SC02基因型毕氏肠微孢子虫感染大熊猫,表明大熊猫可能作为毕氏肠微孢子虫的储存宿主引起人微孢子虫病,拓宽了基因型SC02的毕氏肠微孢子虫宿主范围。

关键词：毕氏肠微孢子虫大熊猫巢氏PCR ITS基因型动物园

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小相岭山系大熊猫廊道规划

生态学报 2016年第4期36卷 1125-1133页

作者：青菁胥池杨彪杨志松齐敦武杨旭煜古晓东戴强西华师范大学大熊猫自然保护与文化研究中心南充637002 中国科学院成都生物研究所成都610041 四川雪宝顶国家级自然保护区绵阳622550 四川大学生命科学学院自然生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610064 四川省濒危野生动物保护生物学省部共建实验室成都大熊猫繁育研究基地成都610086 四川省野生动物资源调查保护管理站成都610081

廊道能有效地增加栖息地斑块间的大熊猫种群交流,降低种群灭绝的风险。小相岭山系是现存大熊猫种群数量最少的山系之一。通过MAXENT(Maximum Entropy)分析,发现小相岭山系存在7个相对隔离的栖息地斑块,栖息地破碎化严重。为了增加小相... 详细信息

廊道能有效地增加栖息地斑块间的大熊猫种群交流,降低种群灭绝的风险。小相岭山系是现存大熊猫种群数量最少的山系之一。通过MAXENT(Maximum Entropy)分析,发现小相岭山系存在7个相对隔离的栖息地斑块,栖息地破碎化严重。为了增加小相岭山系大熊猫种群交流,利用最小代价路径原理和电流理论,从保护管理角度出发,在该区域划定了9条连接大熊猫栖息地斑块的廊道。其中紫马-麻麻地廊道连接该区域面积最大、大熊猫痕迹点最多的两个栖息地斑块,生态意义重大,建议优先建设该廊道。此外,研究划定的多个廊道彼此邻近,甚至存在一定程度的重叠。将这些极其邻近或者重叠的廊道合并,并提出"廊道群"的概念。廊道群是两个或两个以上极其相邻的廊道构成的网状结构,廊道群作为景观上的网状结构,能同时连接多个栖息地斑块,更有效地增加多个栖息地斑块间的种群交流。由于农田的挤压,部分廊道难以达到大熊猫廊道的最低宽度需求(2230 m),制约了其生态效应的发挥,建议在以后的保护工作中探索农田区域的栖息地恢复方式。

关键词：大熊猫小相岭最小代价路径电流理论廊道群

西南部分地区圈养非人灵长类贾第虫感染情况调查及多位点基因序列分析

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浙江农业学报 2018年第3期30卷 366-370页

作者：田一男魏斌李平黄祥明李威涂蕊但佳明袁莉杨亭玉彭广能钟志军四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 邛崃市农业和林业局四川邛崃611530 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学省部共建实验室四川成都610081

为了解西南部分地区非人灵长类贾第虫的感染情况及其集聚体和基因亚型分布,收集了西南地区部分动物园、养殖场以及试验动物养殖基地的207份猕猴、长臂猿、金丝猴和食蟹猴新鲜粪便,采用饱和蔗糖漂浮法处理样品,提取DNA,经巢式PCR扩增β-g... 详细信息

为了解西南部分地区非人灵长类贾第虫的感染情况及其集聚体和基因亚型分布,收集了西南地区部分动物园、养殖场以及试验动物养殖基地的207份猕猴、长臂猿、金丝猴和食蟹猴新鲜粪便,采用饱和蔗糖漂浮法处理样品,提取DNA,经巢式PCR扩增β-giardin(bg)、tpi和gdh基因,扩增产物经测序后进行分子生物学分析。结果表明:西南部分地区圈养非人灵长类贾第虫感染率为7.73%(16/207),16份阳性样品均为集聚体B(assemblage B)。感染的品种包括猕猴、长臂猿及食蟹猴。长臂猿感染率最高(38.89%),不同品种非人灵长类贾第虫感染率差异极显著(P<0.01)。所有阳性样品均成功扩增出bg、tpi和gdh三个基因的特异性产物。多位点基因序列分析和种系进化树分析结果显示,bg及tpi基因位点多态性变异明显,gdh位点多态性变异较小。本次调查结果表明,西南部分地区非人灵长类所携带的贾第虫具有人兽共患风险。

关键词：非人灵长类贾第虫 bg tpi gdh 感染率

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新发林麝环状类病毒的鉴定和分析

中国动物传染病学报 2022年第1期30卷 39-43页

作者：刘齐杨世兴张文齐敦武付为国江苏大学农业工程研究院镇江212013 江苏大学医学院镇江212013 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

利用病毒宏基因组学(viral metagenomics)方法,本研究从95份林麝粪便样品中检测到1株新型圆环病毒样(Circoviruslike)病毒,经过拼接获得其全基因组序列,该毒株命名为ls-cyc。其基因组全长约3552 nt,GC含量39.00%,含有2个开放阅读框(ORF)... 详细信息

利用病毒宏基因组学(viral metagenomics)方法,本研究从95份林麝粪便样品中检测到1株新型圆环病毒样(Circoviruslike)病毒,经过拼接获得其全基因组序列,该毒株命名为ls-cyc。其基因组全长约3552 nt,GC含量39.00%,含有2个开放阅读框(ORF),即ORF1和ORF2。其中ORF1长度为1386 nt,ORF2长度为1953 nt。ORF1编码的氨基酸序列与来自猪血清圆环状病毒的(MH170058.1)序列相似度为34.31%。系统进化分析表明其与来自猪的圆环状病毒(MH170058.1)和鸭相关环状病毒(NC_030134.1)为同一进化分支。该病毒是否与林麝特定疾病相关有待于进一步流行病学研究。

关键词：林麝环状病毒病毒宏基因组学基因组结构分析系统发育分析

麻醉对小鼠的排卵数量、排极率、存活率及孤雌激活率的影响

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畜禽业 2005年第7期16卷 38-39页

作者：周杰珑侯蓉郑鸿培鲜红四川农业大学动物科技学院四川雅安625014 成都大熊猫繁育研究基地濒危野生动物繁殖与保护遗传四川省重点实验室

实验探讨了麻醉(即氯胺酮)对小鼠卵母细胞成熟和激活的影响。选择达到体成熟的昆明种小鼠实施氯胺酮的三期麻醉剂量,观察小鼠超排卵母细胞数量、排极、存活率及乙醇孤雌激活率的变化。结果发现,氯胺酮可明显减少小鼠超排卵母细胞的数目... 详细信息

实验探讨了麻醉(即氯胺酮)对小鼠卵母细胞成熟和激活的影响。选择达到体成熟的昆明种小鼠实施氯胺酮的三期麻醉剂量,观察小鼠超排卵母细胞数量、排极、存活率及乙醇孤雌激活率的变化。结果发现,氯胺酮可明显减少小鼠超排卵母细胞的数目,而且卵母细胞也出现一定数量的畸形;但氯胺酮对极体释放率影响不显著。随着培养时间的延长,对照组和麻醉组的卵母细胞在培养8h后,均有一定的死亡率,尤其是氯胺酮组的存活率表现出显著降低(与对照组相比)。另外,氯胺酮对孤雌激活的影响也是显著的。

关键词：氯胺酮排卵数量排极率存活率孤雌激活率超排卵

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牦牛肠道微生物的影响因素研究进展

中国畜牧杂志 2023年第11期59卷 60-65页

作者：潘城张婷婷李海雁王也赵旺生西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621000 西南科技大学核废物与环境安全国防重点学科实验室四川绵阳621000 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室四川省大熊猫科学研究院四川成都610081

牦牛是青藏高原代表性的反刍动物,其肠道是重要的消化吸收部位和免疫器官。肠道微生物不仅与宿主消化吸收、生理健康、疾病的发生和发展密切相关,而且对宿主适应不同的地理环境极其重要。近年来,探究各种因素对牦牛肠道微生物组成和功... 详细信息

牦牛是青藏高原代表性的反刍动物,其肠道是重要的消化吸收部位和免疫器官。肠道微生物不仅与宿主消化吸收、生理健康、疾病的发生和发展密切相关,而且对宿主适应不同的地理环境极其重要。近年来,探究各种因素对牦牛肠道微生物组成和功能的影响成为研究热点。本文主要从海拔、饲料、疾病等因素与牦牛肠道微生物结构的关系进行阐述,以期为牦牛的生产管理及肠道微生物研究提供参考。

关键词：牦牛肠道微生物影响因素

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