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基于指纹图谱及非挥发性成分定量结合化学模式识别法评价不同产地艾叶质量

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中草药 2023年第18期54卷 6084-6091页

作者：曾维艳陈肖王洋孙丰慧代敏蒲忠慧成都医学院检验医学院四川成都610500 四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室四川成都610500

目的以非挥发性化学成分为指标,评价不同产地艾叶Artemisia argyi质量,为其进一步开发利用提供科学依据。方法采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC),以指纹图谱定性,绿原酸和黄酮等多指标成分定量,结合聚... 详细信息

目的以非挥发性化学成分为指标,评价不同产地艾叶Artemisia argyi质量,为其进一步开发利用提供科学依据。方法采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC),以指纹图谱定性,绿原酸和黄酮等多指标成分定量,结合聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对艾叶进行化学模式识别研究。结果建立了20批艾叶的指纹图谱,相似度为0.739~0.983,标定了28个共有峰,指认了绿原酸、木犀草苷、圣草酚、棕矢车菊素、异泽兰黄素5个成分,含量测定表明不同产地艾叶绿原酸和黄酮成分存在显著差异;HCA分析20批艾叶为3类;PCA得到7个主成分的累积方差贡献率为86.676%;OPLS-DA分析表明绿原酸、木犀草苷、圣草酚、棕矢车菊素、异泽兰黄素可能是影响艾叶药材质量的差异标志物。结论指纹图谱定性及多非挥发性成分定量结合化学模式识别可用于艾叶药材鉴别和质量控制。

关键词：艾叶指纹图谱绿原酸木犀草苷圣草酚棕矢车菊素异泽兰黄素化学模式识别质量控制

家蚕浓核病病毒和血液型脓病病毒PCR诊断方法的建立及应用

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四川畜牧兽医 2024年第2期51卷 31-34页

作者：叶斌蔡冬冬李建岗范毅罗毅刘伽均胡晓亮田志革成都市动物疫病预防控制中心四川成都610041 四川省动物疫病预防控制中心四川成都610041 宜宾学院农林与食品工程学部动物多样性与生态保育宜宾市重点实验室四川宜宾644000

蚕在密集群体饲养条件下极易受病原微生物和其他外界因素的影响而引起各种疾病,其中家蚕血液型脓病病毒、浓核病病毒是导致蚕患病的主要病原。本研究以上述2种病毒为研究对象,建立双重PCR检测方法,结果证实该方法具有检测效率高、特异... 详细信息

蚕在密集群体饲养条件下极易受病原微生物和其他外界因素的影响而引起各种疾病,其中家蚕血液型脓病病毒、浓核病病毒是导致蚕患病的主要病原。本研究以上述2种病毒为研究对象,建立双重PCR检测方法,结果证实该方法具有检测效率高、特异性强、敏感性高的特点,能够为这两种病毒病的快速诊断提供技术支持。

关键词：家蚕血液型脓病病毒浓核病病毒单重PCR 双重PCR

基于指纹图谱和多指标成分定量结合化学模式识别法评价不同产地草果质量

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中草药 2022年第11期53卷 3472-3479页

作者：陈肖管红梅陈梦林王保山代敏蒲忠慧成都医学院检验医学院四川成都610500 四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室四川成都610500 成都医学院发育与再生四川省重点实验室四川成都610500 北京生泰尔科技股份有限公司北京102600

目的采用指纹图谱、多指标成分定量与化学模式识别相结合的方法,评价不同产地草果Amomum tsaoko质量,为其进一步开发利用提供依据。方法采用HPLC法,流动相为甲醇-0.2 mol/L磷酸水溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,体积流量1 mL/min,检测波长27... 详细信息

目的采用指纹图谱、多指标成分定量与化学模式识别相结合的方法,评价不同产地草果Amomum tsaoko质量,为其进一步开发利用提供依据。方法采用HPLC法,流动相为甲醇-0.2 mol/L磷酸水溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,体积流量1 mL/min,检测波长270 nm,对15批不同产地草果药材建立指纹图谱及6种有效成分含量测定,运用聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对草果进行化学模式识别研究。结果建立了15批草果药材的指纹图谱,相似度为0.737~0.991,共标定21个共有峰,指认了6个成分,含量测定结果表明不同产地草果中化学成分含量存在明显差异;HCA分析15批草果明显分为3类;PCA得到4个主成分的累计方差贡献率为85.941%;OPLS-DA表明原儿茶酸、原儿茶醛、对羟基苯甲酸可能是影响草果药材质量的差异标志物。结论建立的草果HPLC指纹图谱及6个成分含量测定方法的专属性强,且准确、可靠,结合化学模式识别可用于草果的药材鉴别和质量控制。

关键词：草果指纹图谱多指标成分化学模式识别质量评价原儿茶酸原儿茶醛对羟基苯甲酸

基于转录组探究Enterococcus faecium 15A降解二乙基亚硝胺的作用机制

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食品研究与开发 2022年第22期43卷 28-35页

作者：钟雨婷张倩姚姝婷罗娅明悦李晓玲刘璇岳鑫魏香奕刘刚李学理成都医学院检验医学院四川成都610500 四川师范大学生命科学学院四川成都610000 成都医学院四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室四川成都610500

二乙基亚硝胺(N-nitrosodiethylamine,NDEA)是食品加工中易产生的强致癌物,研究显示,部分乳酸菌具有降解NDEA的功能,但其降解机制未明确。因此,该研究基于一株能有效降解NDEA、来源于健康人肠道的粪肠球菌(Enterococcus faecium)15A,系... 详细信息

二乙基亚硝胺(N-nitrosodiethylamine,NDEA)是食品加工中易产生的强致癌物,研究显示,部分乳酸菌具有降解NDEA的功能,但其降解机制未明确。因此,该研究基于一株能有效降解NDEA、来源于健康人肠道的粪肠球菌(Enterococcus faecium)15A,系统考察培养温度、时间、pH值、需/厌氧的环境因素对*** 15A降解作用的影响,发现菌株的降解能力与其生长情况呈正相关,环境的pH值能转变菌株的降解特性,pH2~7条件下有降解NDEA作用,而pH8环境中则表现为促进NDEA形成。经转录组学分析发现,*** 15A对NDEA的作用过程是一个多基因靶点、涉及多代谢通路的过程,其中嘌呤合成/代谢途径可能为主要靶点通路。随后,采用实时反转录聚合酶链式反应技术验证了相关的关键上调基因xpt、hpt、Pyk、Ndk和下调基因guaA,揭示了*** 15A降解NDEA的作用规律,探究其降解作用的分子机制。研究结果可为微生物法高效降解NDEA奠定基础,为乳酸菌类发酵剂、益生菌剂的应用提供新思路。

关键词：亚硝胺肠球菌乳酸菌降解转录组

柠檬醛体外抗MRSA活性及其对β-内酰胺类抗生素的增效作用

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应用与环境生物学报 2018年第1期24卷 7-12页

作者：孙丰慧龙娜娜王雪梅郭莉娟林琳李建龙代敏成都医学院检验医学院成都610500 成都医学院四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室成都610500

通过体外抑菌实验评价柠檬醛单独使用以及与3种β-内酰胺类抗生素（阿莫西林、头孢氨苄及头孢吡肟）联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）的抑制效果.采用微量稀释法测定柠檬醛与3... 详细信息

通过体外抑菌实验评价柠檬醛单独使用以及与3种β-内酰胺类抗生素（阿莫西林、头孢氨苄及头孢吡肟）联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）的抑制效果.采用微量稀释法测定柠檬醛与3种β-内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration,MIC）及最低杀菌浓度（Minimum bactericidal concentration,MBC）;用微量棋盘法测定柠檬醛与3种β-内酰胺类抗生素的分级抑菌浓度（Fractional inhibitory concentration,FIC）指数;用分光光度法测定柠檬醛和阿莫西林联合使用后对MRSA生长的抑制效果.结果显示：柠檬醛MIC和MBC分别为695-2 780μg/mL和1 390-2 780μg/mL.联合药敏试验发现柠檬醛与3种β-内酰胺类抗生素联合使用FIC指数集中分布在≤0.5和0.5-1;与单独用药相比,阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟的MIC_（50）分别降低为原来的1/9、1/15和1/9;1/4 MIC阿莫西林与1/4 MIC柠檬醛联合用药后,显著抑制了MRSA的生长.因此,柠檬醛具有一定的体外抗MRSA活性,与阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟等β-内酰胺类抗生素联合使用时可增强β-内酰胺类抗生素的活性,降低其用量.

关键词：柠檬醛耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抗菌活性联合用药 β-内酰胺类抗生素增效作用

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草果中不同多酚类体外抗氧化活性研究

食品与发酵科技 2023年第3期59卷 43-46,75页

作者：陈肖曾维艳王翔孙丰慧代敏蒲忠慧成都医学院检验医学院四川成都610500 四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室四川成都610500

比较草果中两种不同多酚类体外抗氧化活性。以Vc为阳性对照,采用体外抗氧化活性方法,测定草果中不同多酚类黄酮和酚酸对DPPH·、ABTS^(+)·、·OH、O_(2)·^(-)清除能力和Fe^(3+)还原力。结果表明,草果中不同多酚类在0.625 mg/mL时对DPP... 详细信息

比较草果中两种不同多酚类体外抗氧化活性。以Vc为阳性对照,采用体外抗氧化活性方法,测定草果中不同多酚类黄酮和酚酸对DPPH·、ABTS^(+)·、·OH、O_(2)·^(-)清除能力和Fe^(3+)还原力。结果表明,草果中不同多酚类在0.625 mg/mL时对DPPH·清除率均达到80%以上,还具有一定的ABTS^(+)·、·OH、O_(2)·^(-)清除作用和Fe^(3+)还原作用。其清除效果与草果多酚浓度具有剂量依赖性。草果酚酸对DPPH·清除能力优于草果黄酮;草果黄酮对ABTS^(+)·、·OH、O_(2)·^(-)清除能力和Fe^(3+)还原能力均强于酚酸。

关键词：草果黄酮酚酸抗氧化体外

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香叶醇联合柠檬醛体外抗MRSA的优化配比

应用与环境生物学报 2019年第4期25卷 897-901页

作者：廖泽东王雪梅卢志宇周洋莹代敏孙丰慧成都医学院四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室成都610500 成都医学院检验医学院成都610500

通过体外抑菌实验研究香叶醇与柠檬醛联合使用抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的体外抑菌活性,并采用单纯形格子混料设计优化二者比例.采用微量稀释法测定香叶醇和柠檬醛对43株MRSA的最... 详细信息

通过体外抑菌实验研究香叶醇与柠檬醛联合使用抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的体外抑菌活性,并采用单纯形格子混料设计优化二者比例.采用微量稀释法测定香叶醇和柠檬醛对43株MRSA的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC),采用棋盘法测定香叶醇和柠檬醛联合用药时的分级抑菌浓度(Fractional inhibitory concentration,FIC),采用单纯形格子设计优化香叶醇和柠檬醛联合用药时的比例,并采用微量稀释法对最佳配比混合液的抗MRSA活性进行测定.结果显示:香叶醇的MIC值为0.34-0.67 mg/mL,柠檬醛的MIC值为0.66-42.23 mg/mL.二者联合使用时,以协同作用为主,占46.51%;其次为相加作用,占41.86%.单纯形格子设计优化的香叶醇和柠檬醛联合使用的最佳比例为香叶醇84.50%、柠檬醛15.50%.采用此配比测定香叶醇和柠檬醛混合液对43株MRSA的MIC值,发现混合液MIC50、MIC90分别为0.25 mg/mL和0.44 mg/mL;与香叶醇单独使用相比,MIC50和MIC90分别约为单独使用时的1/2和 2/3;与柠檬醛单独使用相比,MIC50和MIC90分别约为单独使用时的1/3和1/4.上述结果表明香叶醇与柠檬醛联合使用时可起到增敏的效果,且降低彼此的用量.

关键词：香叶醇柠檬醛耐甲氧西林金黄色葡萄球菌联合用药体外抑菌活性

丁香油联用β-内酰胺类抗生素体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌作用研究

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中草药 2019年第7期50卷 1629-1635页

作者：邱敏龙娜娜高鸣乡周洋莹孙丰慧林琳代敏成都医学院检验医学院四川成都610500 成都医学院四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室四川成都610500 成都医学院基础医学院四川成都610500

目的探讨丁香油体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性,以及与3种β-内酰胺类抗生素(阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟)联合使用抗MRSA的体外活性。方法采用96孔板微量稀释法分别测定丁香油、丁香油与3种β-内酰胺类抗生素联合使用对2... 详细信息

目的探讨丁香油体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性,以及与3种β-内酰胺类抗生素(阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟)联合使用抗MRSA的体外活性。方法采用96孔板微量稀释法分别测定丁香油、丁香油与3种β-内酰胺类抗生素联合使用对2株MRSA标准株和32株MRSA临床分离株的最低抑菌浓度(MIC);微量棋盘法分别测定丁香油与3种β-内酰胺类抗生素的分级抑菌浓度(FIC)指数;生长曲线法分析丁香油以及丁香油和头孢氨苄联合使用对MRSA生长的影响。结果丁香油具有明显的体外抗MRSA活性,MIC为0.25、0.51 mg/m L。丁香油分别与3种β-内酰胺类抗生素(阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟)联合使用时,FIC指数集中分布在≤0.5和0.5~1,主要表现为协同和相加作用,其中与阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟的协同率分别为58.8%、97.0%、64.7%;丁香油能明显增强β-内酰胺类抗生素抗MRSA活性,降低β-内酰胺类抗生素的用量,使其MIC50和MIC90降低为单独用药的1/4~1/2和1/2~1。生长曲线结果表明,丁香油能明显延长MRSA延滞期,抑制其生长速度,生长量明显降低,且抑制MRSA生长呈明显量效关系;当丁香油(1/4 MIC)与头孢氨苄(1/4 MIC)联合使用后,MRSA生长几乎被抑制。结论丁香油不仅自身具有较强的抗MRSA活性,还具有协同增效β-内酰胺类抗生素抗MRSA作用,具备治疗MRSA感染新药的开发与应用前景。

关键词：丁香油耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抗菌活性 β-内酰胺类抗生素协同增效

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草果总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺优化研究

中国药房 2020年第7期31卷 831-836页

作者：赵雨鸿沈华代双亿蒲忠慧谢子锐肖灵况敏代敏成都医学院检验医学院成都610500 成都医学院四川省动物源性食品兽药残留防控技术工程实验室成都610500

目的:建立草果总黄酮的含量测定方法,并对其大孔吸附树脂纯化工艺进行优化。方法:采用高效液相色谱法测定草果中总黄酮的含量。色谱柱为Eclipse Plus C18,流动相为乙腈-1%醋酸水溶液(15∶85,V/V),柱温为40℃,流速为0.8 mL/min,检测波长... 详细信息

目的:建立草果总黄酮的含量测定方法,并对其大孔吸附树脂纯化工艺进行优化。方法:采用高效液相色谱法测定草果中总黄酮的含量。色谱柱为Eclipse Plus C18,流动相为乙腈-1%醋酸水溶液(15∶85,V/V),柱温为40℃,流速为0.8 mL/min,检测波长为256 nm,进样量为10μL。以吸附、解吸性能为考察指标,采用静态吸附和解吸试验对6种大孔吸附树脂进行筛选,采用静态吸附和解吸动力学试验考察吸附和解吸时间。在单因素试验的基础上,以总黄酮含量(以芦丁计)为评价指标,以上样液质量浓度、上样液p H、乙醇体积分数及洗脱用量为考察因素,采用正交设计优化草果总黄酮的纯化工艺并进行验证试验。结果:芦丁检测质量浓度的线性范围为0.028~0.281 mg/mL(r=0.999 9);定量限为437.5 ng/mL,检测限为109.4 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%,加样回收率为96.24%~99.75%(RSD性好,优化的纯化工艺稳定、可行,可用于草果总黄酮的纯化。

关键词：草果总黄酮含量测定大孔吸附树脂纯化工艺