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白细胞介素-22通过调节菌群和E-钙黏蛋白表达保护牙龈上皮屏障的研究

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中华口腔医学杂志 2024年第7期59卷 653-662页

作者：张驰张璐任俊贤李金雨谭灵屏高雳赵川江中山大学附属口腔医院牙周病科·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州510055 中山大学附属第三医院口腔科广州510630

目的研究白细胞介素-22(IL-22)在牙周炎症环境下对牙龈上皮屏障的调控作用及其可能机制。方法构建IL-22敲除小鼠,采用混合菌液口腔灌洗法构建牙周炎模型。收集同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠(每组7只)口腔菌斑并提取DNA,... 详细信息

目的研究白细胞介素-22(IL-22)在牙周炎症环境下对牙龈上皮屏障的调控作用及其可能机制。方法构建IL-22敲除小鼠,采用混合菌液口腔灌洗法构建牙周炎模型。收集同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠(每组7只)口腔菌斑并提取DNA,建立牙周炎相关风险微生物数据库"PD-RiskMicroDB"并结合16S rRNA测序结果,测定两组小鼠口腔菌群变化和微生物功能的关系。通过改良胰酶消化法培养牙龈上皮细胞(GEC),以100μg/L IL-22、感染复数为的100牙龈卟啉单胞菌(Pg)分别或联合刺激GEC,实验分组为:对照组(细胞未加刺激)、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组,处理时间为3和12 h;采用细胞免疫荧光、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法检测各组细胞3 h后上皮屏障蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;通过异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)介导的上皮细胞通透性实验明确各组GEC 3和12 h细胞通透性的变化。RT-qPCR检测同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin表达水平。将15只C57BL/6野生型小鼠按随机数字表法随机分为对照组、牙周炎组和牙周炎+IL-22处理组,每组5只。RT-qPCR及免疫组织化学(IHC)染色法检测各组小鼠牙龈上皮E-cadherin的表达水平。结果16S rRNA测序结果显示,与同窝生野生型牙周炎组小鼠相比,IL-22敲除牙周炎组小鼠口腔菌群组成发生改变,其中与牙周组织侵袭相关的菌属丰度显著增高(线性判别分析得分为2.22,P=0.009)。体外细胞实验显示,Pg感染GEC 3 h后,Pg组GEC的细胞连接中断,Pg组E-cadherin荧光强度较对照组减弱,E-cadherin的mRNA(0.69±0.12)和蛋白(0.60±0.12)表达水平均显著低于对照组(分别为1.00±0.00、1.04±0.08)(P=0.043,P=0.003);而Pg+IL-22组的E-cadherin荧光强度较Pg组稍增强,Pg+IL-22组E-cadherin的mRNA(1.16±0.10)和蛋白(0.98±0.07)表达水平均显著高于Pg组(分别为0.69±0.12、0.60±0.12)(P=0.005,P=0.007);上皮通透性实验结果显示,Pg处理GEC 3 h后,对照组、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组各组间总体比较上皮屏障通透性差异无统计学意义(F=0.20,P=0.893);处理12 h后,相较于对照组(1.00±0.00),Pg组GEC上皮屏障通透性(1.39±0.15)显著增加(P=0.027),而Pg+IL-22组上皮屏障通透性(1.02±0.18)显著低于Pg组(P=0.034);体内RT-qPCR结果显示,IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin的mRNA表达水平(0.32±0.21)显著低于同窝生野生型牙周炎组(1.01±0.01)(t=5.70,P=0.005)。RT-qPCR及IHC染色结果显示,牙周炎组小鼠牙龈上皮组织E-cadherin的mRNA表达水平(0.40±0.07)和E-cadherin阳性表达吸光度值(0.02±0.00)均显著低于对照组(分别为1.00±0.00、0.04±0.01)(P=0.005,P=0.006);牙周炎+IL-22处理组E-cadherin的mRNA表达水平(1.06±0.24)和E-cadherin阳性表达吸光度值(0.03±0.01)均显著高于牙周炎组(P=0.003,P=0.039)。结论IL-22可能通过调节口腔菌群的侵袭性以及宿主屏障蛋白表达,发挥其对炎症环境下牙龈上皮屏障的保护作用。

关键词：牙周炎白细胞介素22 菌群调控牙龈上皮屏障 E-钙黏蛋白

酒精性肝炎自噬关键基因的筛选及生物信息学分析

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器官移植 2024年第1期15卷 90-101页

作者：袁超练庆海尼贝贝许燕张彤张剑中山大学附属第三医院肝脏外科暨肝移植中心广州510630 中山大学附属第三医院疫苗研究所广州510630 中山大学附属第三医院生物治疗中心广州510630

目的筛选酒精性肝炎(AH)的自噬关键基因,探讨AH潜在的生物标志物和治疗靶点。方法采用基因表达综合数据库(GEO)中的2个AH基因芯片和从MSigDB、GeneCards数据库中获得的自噬相关数据集,通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)获取关键基因。... 详细信息

目的筛选酒精性肝炎(AH)的自噬关键基因,探讨AH潜在的生物标志物和治疗靶点。方法采用基因表达综合数据库(GEO)中的2个AH基因芯片和从MSigDB、GeneCards数据库中获得的自噬相关数据集,通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)获取关键基因。对筛选的关键基因进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能富集分析,蛋白质相互作用(PPI)分析,免疫浸润分析,构建信使RNA(mRNA)-微小RNA(miRNA)网络,进行酒精性肝病不同分期的自噬相关关键基因的表达差异分析,并进一步通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)在AH患者和小鼠肝脏组织中验证。结果本研究筛选得到了11个与AH自噬相关的基因(EEF1A2、CFTR、SOX4、TREM2、CTHRC1、HSPB8、TUBB3、PRKAA2、RNASE1、MTCL1、HGF),均为上调基因。在AH患者和小鼠肝脏组织中,SOX4、TREM2、HSPB8、PRKAA2在AH组中的相对表达量均高于对照组。结论SOX4、TREM2、HSPB8、PRKAA2可能是AH潜在的生物标志物和治疗靶点。

关键词：酒精性肝炎自噬关键基因生物信息学加权基因共表达网络分析(WGCNA) 基因本体(GO) 京都基因和基因组百科全书(KEGG) 蛋白质相互作用(PPI)

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中国炎症性肠病肠道超声检查及报告规范专家指导意见

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中华超声影像学杂志 2024年第3期33卷 185-192页

作者：中国炎症性肠病诊疗质控评估中心中华医学会消化病学分会炎症性肠病学组中华医学会超声分会腹部超声学组陈旻湖谢晓燕陈瑜君毛仁不详中山大学附属第一医院消化内科广州510080 中山大学附属第一医院超声医学科广州510080

炎症性肠病(IBD)是一种慢性迁延性消化道炎症性疾病,需长期随访观察。肠道超声(IUS)无创、方便、价廉,是IBD长期随访的理想检查手段。本文旨在为我国IBD肠道超声规范化检查、超声征象解读以及影像报告书写提供指导意见。

关键词：炎症性肠病肠道超声指导意见

解剖型锁定钛板与髓内钉治疗胫骨远端骨折的疗效比较

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中山大学学报（医学科学版） 2024年第1期45卷 108-113页

作者：马梦君陈彦博曾钢陈宸宋卫东刘文宙中山大学附属第八医院骨外科广东深圳518033 中山大学孙逸仙纪念医院骨外科广东广州510000

【目的】对比应用解剖型锁定钛板与髓内钉治疗胫骨远端骨折的临床疗效与并发症情况。【方法】自2019年9月至2021年9月,于中山大学孙逸仙纪念医院诊断为胫骨远端AO-A型骨折的手术患者纳入本研究,共32例。其中15例采用钛板螺钉治疗,17例... 详细信息

【目的】对比应用解剖型锁定钛板与髓内钉治疗胫骨远端骨折的临床疗效与并发症情况。【方法】自2019年9月至2021年9月,于中山大学孙逸仙纪念医院诊断为胫骨远端AO-A型骨折的手术患者纳入本研究,共32例。其中15例采用钛板螺钉治疗,17例采用髓内钉治疗。比较两组一般手术指标、骨折愈合时间、术后并发症发生情况、手术前后VAS评分及术后踝关节功能。【结果】患者均获得随访,随访时间10~20个月,平均12个月。髓内钉组手术时间、术中透视次数均长于钛板螺钉组,但术前等待时间、住院天数少于钛板螺钉组,统计学差异显著(P0.05);术后6周,两组VAS评分均低于术前,统计学差异显著(P0.05);术后6月AOFAS评分、术后1年踝关节活动度、并发症发生率髓内钉组优于钛板螺钉组,统计学差异显著(P0.05)。【结论】钛板螺钉与髓内钉均是治疗胫骨远端AO-A型骨折的有效术式,远期临床疗效无明显差异。髓内钉的软组织并发症较少,对踝关节活动度影响更小,康复更快,安全性更高,而钛板螺钉发生术后软组织感染的概率较大。我们建议在临床工作中,应该做好患者的术前评估,在把握适应症的前提下,髓内钉并发症更少,有一定优势。

关键词：胫骨远端骨折解剖型锁定钛板髓内钉治疗疗效

吗啡诱导大鼠镇痛耐受和脊髓GIRK1-2表达减少

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中山大学学报（医学科学版） 2024年第5期45卷 701-708页

作者：杨翘睿王晓娥崔宇肖力中山大学医学院广东深圳518107 中山大学附属第一医院麻醉科广东广州510080

【目的】观察G蛋白门控内向整流钾离子通道(GIRK)亚单位GIRK1和GIRK2在吗啡耐受大鼠脊髓背角的表达变化并探讨其调控机制。【方法】成年雄性SD大鼠连续7 d鞘内注射吗啡(15μg/d)建立吗啡耐受模型。在每天吗啡注射前30 min,鞘内注射蛋白... 详细信息

【目的】观察G蛋白门控内向整流钾离子通道(GIRK)亚单位GIRK1和GIRK2在吗啡耐受大鼠脊髓背角的表达变化并探讨其调控机制。【方法】成年雄性SD大鼠连续7 d鞘内注射吗啡(15μg/d)建立吗啡耐受模型。在每天吗啡注射前30 min,鞘内注射蛋白激酶C-ε(PKCε)选择性抑制剂εV1-2(10μg),观察对吗啡耐受以及脊髓背角GIRK1和GIRK2表达的影响。24只大鼠随机平均分成四组:生理盐水组(saline)、吗啡组(morphine)、吗啡+生理盐水组(morphine+saline)和吗啡+εV1-2组(morphine+εV1-2)。所有大鼠在1 d、3 d、5 d和7 d,药物注射前和吗啡注射后30 min后检测热痛阈值,在第7天行为学测试结束后,免疫荧光检测脊髓背角GIRK1和GIRK2的表达。【结果】荧光双染显示,GIRK1和GIRK2主要分布于大鼠脊髓背角I-Ⅱ板层,且与μ阿片受体(MOR)共染。与生理盐水组相比,连续7 d鞘内注射吗啡导致吗啡镇痛效应显著下降(P<0.001),同时导致脊髓背角GIRK1(22.45±10.58vs.62.83±20.80,P<0.001)和GIRK2(23.67±8.78 vs.50.17±11.05,P=0.001)表达显著降低。荧光双染显示,PKCε与GIRK1和GIRK2在脊髓背角共染。鞘内注射εV1-2可以有效抑制吗啡耐受的形成(P<0.001),且抑制吗啡诱导的GIRK1(54.50±10.37 vs.19.33±9.48,P<0.001)和GIRK2(39.83±6.24 vs.15.83±9.58,P=0.001)表达降低。【结论】脊髓背角GIRK1和GIRK2下调与吗啡耐受密切相关,PKCε是吗啡诱导GIRK1和GIRK2下调的重要原因。

关键词：吗啡耐受 G蛋白门控内向整流钾离子通道亚单位1 G蛋白门控内向整流钾离子通道亚单位2 蛋白激酶C-ε

双样本双向孟德尔随机化法分析人免疫细胞与增生性瘢痕之间的因果关系

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第6期40卷 572-578页

作者：吴虹林陈咏菲李舒婷杨浩李晓卉唐冰朱家源胡志成中山大学附属第一医院烧伤与创面修复科广州510080 中山大学附属第一医院整形外科广州1510080

目的运用双样本双向孟德尔随机化法,探讨人免疫细胞与增生性瘢痕(HS)之间的因果关系。方法该研究基于双样本双向孟德尔随机化(MR)法,分别从全基因组关联分析catalog数据库和FinnGen数据库获取731种人免疫细胞与HS的数据集。设置显著阈值... 详细信息

目的运用双样本双向孟德尔随机化法,探讨人免疫细胞与增生性瘢痕(HS)之间的因果关系。方法该研究基于双样本双向孟德尔随机化(MR)法,分别从全基因组关联分析catalog数据库和FinnGen数据库获取731种人免疫细胞与HS的数据集。设置显著阈值,筛选与免疫细胞及HS显著相关的单核苷酸多态性(SNP)并排除弱工具变量偏倚的影响。采用逆方差加权(IVW)法[同时采用错误发现率(FDR)中的Benjamini-Hochberg法校正其P值]初步检测免疫细胞与HS的因果关系并筛选与HS有显著因果关系的免疫细胞。进一步地,采用双样本MR分析的5种方法:IVW法、加权中位数法、简单模式法、加权模式法和MR-Egger法绘制散布图检测筛选出的免疫细胞与HS的因果关系。针对符合假设的免疫细胞SNP,进行Cochran Q检验评估异质性,进行MR-Egger回归和MR-PRESSO法排除水平多效性,进行留一法分析来评估显著结果是否由单个SNP决定。采用双样本MR分析中IVW法反向检测HS与免疫细胞之间的因果关系。结果731种免疫细胞达到显著阈值的SNP数量从7个到1786个不等,HS中达到显著阈值的SNP数量有119个,这些SNP的F值均>10,提示具有弱工具变量偏倚的可能性较小。IVW法分析显示,60种免疫细胞与HS具有潜在因果关系(P值均0.05)。Cochran Q检验显示,CD45RA和CD39双阳性Treg与HS的因果关系不存在异质性(P>0.05)。MR-Egger回归、MR-PRESSO法分析显示,CD45RA和CD39双阳性Treg与HS的显著因果关系不存在水平多效性(P>0.05)。留一法分析显示,CD45RA和CD39双阳性Treg与HS的显著因果关系在逐个剔除SNP后结果稳定。双样本反向MR分析显示,HS与731种免疫细胞均无潜在因果关系(P>0.05)。结论从遗传学的角度揭示,免疫细胞CD45RA和CD39双阳性Treg可能会增加HS患病风险。

关键词：免疫,细胞孟德尔随机化分析因果律增生性瘢痕

TCD的特征频谱振荡波和钉子波在去骨瓣减压后患者脑死亡判定中的价值分析

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中华神经医学杂志 2024年第6期23卷 571-577页

作者：廖苑刘华徐玲玲徐桂兴中山大学附属第一医院器官移植中心广州510080 中山大学附属第一医院儿科广州510080 中山大学附属第一医院神经外科广州510080

目的探讨经颅多普勒超声(TCD)的特征频谱(振荡波、钉子波)在行去骨瓣减压(DC)患者脑死亡判定中的价值。方法选择中山大学附属第一医院重症医学科自2021年1月1日至2023年12月31日收治的189例因神经重症致脑死亡患者,其中曾行DC患者51例(... 详细信息

目的探讨经颅多普勒超声(TCD)的特征频谱(振荡波、钉子波)在行去骨瓣减压(DC)患者脑死亡判定中的价值。方法选择中山大学附属第一医院重症医学科自2021年1月1日至2023年12月31日收治的189例因神经重症致脑死亡患者,其中曾行DC患者51例(颅骨不完整组),未行DC患者138例(颅骨完整组)。颅骨不完整组中所有患者均行床旁TCD、脑电图(EEG)和诱发电位(EP)三项确认检查,颅骨完整组中47例患者行TCD、EEG和EP三项确认检查。比较2组患者临床资料和TCD特征频谱检出率的差异。分析当临床脑死亡至TCD检查的时间间隔0.05)。与颅骨完整组比较,颅骨不完整组患者TCD特征频谱的检出率较高,差异有统计学意义(P<0.05)。当临床脑死亡至TCD检查的时间间隔≥48 h时,颅骨不完整组、颅骨完整组患者TCD与EEG、EP检查结果的一致率均为100%。多因素Logistic回归分析结果显示,临床脑死亡至TCD检查的时间间隔≥48 h是颅骨不完整组患者TCD与EEG、EP检查结果一致的独立影响因素(OR=7.313,95%CI:1.612~15.973,P=0.004)。结论临床脑死亡至TCD检查的时间间隔≥48 h时,TCD的"振荡波"和"钉子波"可作为行DC后患者脑死亡判定时的特征性表现。

关键词：去骨瓣减压脑死亡经颅多普勒超声振荡波钉子波

穿支动脉病变的影像学评估在内囊预警综合征中的临床应用1例

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中华神经科杂志 2024年第6期57卷 634-638页

作者：蓝琳芳陈红兵黄鑫范玉华李竹浩中山大学附属第一医院神经科广州510080 中山大学附属第一医院影像科广州510080

内囊预警综合征是脑缺血发作的一种特殊亚型,目前关于其发病机制仍然知之甚少。本文报道了1例内囊预警综合征患者,展现了穿支动脉的影像学评估在其诊疗过程中的临床应用,充分阐明了内囊预警综合征的可能机制为穿支血管的动脉粥样硬化性... 详细信息

内囊预警综合征是脑缺血发作的一种特殊亚型,目前关于其发病机制仍然知之甚少。本文报道了1例内囊预警综合征患者,展现了穿支动脉的影像学评估在其诊疗过程中的临床应用,充分阐明了内囊预警综合征的可能机制为穿支血管的动脉粥样硬化性病变,其反复发作的特点可能与血管狭窄处原位血栓形成-溶解有关。这一病例为了解内囊预警综合征的发病机制及指导治疗提供了更多的依据。

关键词：脑缺血发作短暂性磁共振成像穿支动脉内囊预警综合征

腹腔镜与经肛腔镜辅助双镜联合代直肠切除吻合口重建术的疗效与安全性:单中心51例报告

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中国普通外科杂志 2024年第4期33卷 569-577页

作者：周佐霖黄斌杰何炎炯刘铎李嘉敏周文彬朱苗苗黄小艳秦启元蔡建马腾辉深圳市第二人民医院(深圳大学第一附属医院)肛肠外科中山大学附属第六医院普通外科(结直肠外科、放射性肠损伤中心)/广东省结直肠盆底疾病研究重点实验室广州市黄埔区中六生物医学创新研究院广东广州510655 中山大学附属第六医院临床营养与微生态科广东广州510655 中国医学科学院肿瘤医院深圳医院胃肠外科广东深圳518116 中山大学附属第六医院药学部广东广州510655

背景与目的:代直肠切除吻合口重建手术可成功恢复多数直肠吻合失败及肿瘤局部复发患者的肠道连续性,避免患者永久性肠造口。然而该手术难度大、手术相关并发症发生率高。手术方式及入路的选择在降低手术难度、确保手术安全性及降低术后... 详细信息

背景与目的:代直肠切除吻合口重建手术可成功恢复多数直肠吻合失败及肿瘤局部复发患者的肠道连续性,避免患者永久性肠造口。然而该手术难度大、手术相关并发症发生率高。手术方式及入路的选择在降低手术难度、确保手术安全性及降低术后并发症方面具有重要意义。因此,本研究总结单中心8年间行腹腔镜与经肛腔镜辅助双镜联合代直肠切除吻合重建的手术经验,以期为临床提供循证参考。方法:回顾性收集中山大学附属第六医院结直肠外科2015年10月—2023年8月51例行代直肠切除吻合重建患者的病历资料。其中,24例行经肛腔镜辅助双镜联合代直肠切除吻合口重建术(双镜联合组),27例行腹腔镜代直肠切除吻合重建术(腹腔镜组)。分析全组患者的术中、术后情况,并比较双镜联合组与腹腔镜组相关临床指标的差异。结果:51例患者均顺利完成代直肠切除吻合口重建手术。消化道重建吻合方式包括Bacon手术30例、Dixon手术5例、Parks手术15例、括约肌间切除术1例。51例患者中,拖出切除二期结肠肛管吻合30例、拖出切除单吻合5例、拖出切除双吻合3例、一期手工吻合13例。其中,术前已有肠造口患者42例、术后行新增预防性肠造口6例、术后未行预防性肠造口3例。全组中位手术时间为296(251~349)min,术中出血量为100(50~200)mL;双镜联合组与腹腔镜组的手术时间、术中出血量差异均无统计学意义(均P>0.05)。术中经肛门取标本共24例,其中腹腔镜组5例,双镜联合组19例,差异有统计学意义(P0.05),但双镜联合组的术后排气时间、术后进食时间短于腹腔镜组(均P<0.05)。全组无术后转入ICU治疗和住院期间死亡,9例肿瘤局部复发患者术后组织病理学检查结果均显示标本切缘未见肿瘤。51例患者中,16例发生并发症(Clavien-Dindo并发症分级Ⅱ级9例、Ⅲ级及以上7例),其中双镜联合组4例(16.67%),腹腔镜组12例(44.44%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.554,P=0.033)。结论:代直肠切除吻合重建手术方式及入路的选择应根据患者初次手术吻合失败类型、病变距肛门距离、患者全身情况以及单位医疗水平制定个体化方案。相比单纯的腹腔镜代直肠切除,经肛腔镜辅助双镜联合代直肠切除吻合重建手术具有术后恢复快和术后并发症发生率低的优势。此外,两种术式进行代直肠切除吻合口重建术后的肠造口回纳率、远期肛门功能以及生活质量方面的差异仍需要进一步随访。

关键词：直肠肿瘤再手术器官保留治疗腹腔镜手术后并发症