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p-STAT3在成釉细胞型颅咽管瘤中的表达及其意义

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中华神经外科杂志 2021年第12期37卷 1271-1276页

作者：祝前超汪潮湖陈燕邹石生杨浪漆松涛樊俊潘军刘忆南方医科大学南方医院神经外科广州510515

目的探讨磷酸化信号传导蛋白和转录激活物3(p-STAT3)在成釉细胞型颅咽管瘤(ACP)中的表达情况及其意义。方法ACP组织标本来源于南方医科大学南方医院神经外科行手术切除的12例颅咽管瘤患者。通过苏木素-伊红(HE)染色明确ACP标本的组织学... 详细信息

目的探讨磷酸化信号传导蛋白和转录激活物3(p-STAT3)在成釉细胞型颅咽管瘤(ACP)中的表达情况及其意义。方法ACP组织标本来源于南方医科大学南方医院神经外科行手术切除的12例颅咽管瘤患者。通过苏木素-伊红(HE)染色明确ACP标本的组织学形态特征。通过免疫荧光染色方法检测p-STAT3、pan-CK、β-catenin及E-cadherin在肿瘤组织中的表达情况。原代培养ACP细胞,设立实验组[以STAT3抑制剂隐丹参酮(5.0 mmol/L)处理]、阴性对照组(以DMSO处理)以及空白组(ACP原代细胞,未予处理),采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用Transwell实验检测细胞的侵袭能力。设立低剂量抑制剂组(以2.5 mmol/L隐丹参酮处理)、高剂量抑制剂组(以5.0 mmol/L隐丹参酮处理)以及阴性对照组(以DMSO处理),通过CCK-8实验检测各组细胞的增殖能力。通过蛋白质免疫印迹法检测应用隐丹参酮后上皮-间质转化相关指标(包括转录因子Slug、Twist、E-cadherin以及N-cadherin)的变化情况。结果HE染色结果显示,12例ACP组织中,ACP与下丘脑组织之间可形成"卯榫"样结构。免疫荧光染色结果显示,"卯榫"样结构内的涡轮状细胞中,p-STAT3呈阳性表达、pan-CK呈阴性表达、β-catenin出现核转移,而E-cadherin的表达明显下调。划痕实验结果提示,实验组细胞的迁移能力明显较其他两组降低[空白组、阴性对照组和实验组的迁移距离分别为(282±44)μm、(290±61)μm和(170±11)μm,P<0.05]。处理72 h后,Transwell实验结果提示,实验组穿过Transwell小室的细胞数较其他两组更少[空白组、阴性对照组和实验组的穿膜细胞数分别为(95±14)个、(104±11)个和(57±14)个,P<0.05]。CCK-8实验结果表明,隐丹参酮对ACP原代细胞增殖能力的抑制作用呈时间和剂量依赖性(均P<0.05)。Western blot结果显示,利用不同浓度隐丹参酮处理ACP原代细胞后,Slug、Twist和N-cadherin的表达下降(均P<0.01),而E-cadherin的表达升高(均P<0.001)。结论p-STAT3可在ACP与下丘脑之间形成的"卯榫"样结构内的涡轮状胞中表达,其介导的上皮-间质转化可能是ACP中下丘脑受累的原因,p-STAT3有可能成为治疗ACP的潜在靶点。

关键词：颅咽管瘤肿瘤侵润细胞增殖上皮-间质转化磷酸化信号传导蛋白和转录激活物3

基于QST分型的颅咽管瘤与第三脑室底脑膜层次的关系

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中华神经外科杂志 2020年第3期36卷 232-237页

作者：漆松涛刘忆汪潮湖樊俊潘军张喜安陆云涛南方医科大学南方医院神经外科广州510515

目的探索基于QST分型的、累及第三脑室底的颅咽管瘤与第三脑室底脑膜层次的关系及临床意义。方法回顾性分析2018年1月至2019年10月南方医科大学南方医院神经外科在神经内镜下行肿瘤全切除术治疗累及第三脑室底的原发性颅咽管瘤患者的临... 详细信息

目的探索基于QST分型的、累及第三脑室底的颅咽管瘤与第三脑室底脑膜层次的关系及临床意义。方法回顾性分析2018年1月至2019年10月南方医科大学南方医院神经外科在神经内镜下行肿瘤全切除术治疗累及第三脑室底的原发性颅咽管瘤患者的临床资料(共17例,其中Q型6例,S型3例,T型8例),所有患者术中均留取肿瘤组织标本。正常鞍区标本来源于同期该院行人工引产或自然流产的胎儿(8例)。对以上标本进行苏木素-伊红(HE)和免疫荧光双标染色,应用波形蛋白抗体标记硬脑膜,Ⅰ型胶原蛋白抗体标记蛛网膜,胶质纤维酸性蛋白抗体和层粘连蛋白抗体标记软脑膜,以CK18抗体标记腺垂体,以CK5/6抗体标记颅咽管瘤。观察胎儿脑组织标本的脑膜染色情况以及不同QST分型的颅咽管瘤组织与第三脑室底脑膜的层次关系。结果8例胎儿标本均成功标记硬脑膜、蛛网膜、软脑膜。颅咽管瘤标本HE染色及免疫荧光双标染色结果显示,所有Q型肿瘤(6/6)与第三脑室底之间存在硬脑膜(鞍膈);所有S型肿瘤(3/3)与第三脑室底之间存在蛛网膜和软脑膜;T型肿瘤与第三脑室底之间存在3种病理学形态关系,分别命名为卯榫样、地幔样及护城河样关系,所有T型肿瘤(8/8)与第三脑室底之间有软脑膜分隔,但在肿瘤起源点处,软脑膜可逐渐消失。当肿瘤极度挤压第三脑室空间时,第三脑室室管膜仍可保持完整。结论不同QST分型的颅咽管瘤均可累及第三脑室底,且与第三脑室底之间存在不同的脑膜层次;这些脑膜层次是手术安全切除累及第三脑室底的颅咽管瘤的天然屏障。

关键词：颅咽管瘤第三脑室蝶鞍脑膜病理学

蜂毒肽对人神经胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

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南方医科大学学报 2007年第11期27卷 1775-1777页

作者：杨志林柯以铨徐如祥彭萍南方医科大学珠江医院神经外科

目的研究蜂毒肽对体外培养的人神经胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法MTT法检测蜂毒肽对两种人神经胶质瘤细胞(U87、U251)的增殖抑制率;流式细胞仪和凝胶电泳法检测蜂毒肽对两种肿瘤细胞的凋亡诱导作用。结果蜂毒肽能够明显... 详细信息

目的研究蜂毒肽对体外培养的人神经胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法MTT法检测蜂毒肽对两种人神经胶质瘤细胞(U87、U251)的增殖抑制率;流式细胞仪和凝胶电泳法检测蜂毒肽对两种肿瘤细胞的凋亡诱导作用。结果蜂毒肽能够明显抑制两种细胞的生长(P神经胶质瘤细胞具有明显的增殖抑制和促进凋亡作用。

关键词：蜂毒肽神经胶质瘤细胞增殖凋亡

基于改良Suzuki分期的成人烟雾病侧枝循环特点及其临床意义

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南方医科大学学报 2018年第4期38卷 483-489页

作者：赵庆顺王刚肖浩江冯文峰张国忠李明洲廖永鸿温运宇漆松涛南方医科大学南方医院神经外科广东广州510515

目的探讨成人烟雾病患者侧枝循环特点及其临床意义。方法收集2006~2016年在南方医科大学南方医院神经外科接受DSA检查的成人烟雾病病人资料。根据临床影像学检查分为两组(缺血组和出血组),双盲分析影像学结果,对疾病严重程度采用改良Suz... 详细信息

目的探讨成人烟雾病患者侧枝循环特点及其临床意义。方法收集2006~2016年在南方医科大学南方医院神经外科接受DSA检查的成人烟雾病病人资料。根据临床影像学检查分为两组(缺血组和出血组),双盲分析影像学结果,对疾病严重程度采用改良Suzuki评分(m SS)进行分级。回顾性分析患者脑血管造影图像,把侧支循环血管系统的分组分为浅部脑膜组和深部脑实质组,浅部脑膜组再分为硬脑膜血管吻合系统和软脑膜血管吻合系统;深部脑实质组分为室管膜下血管吻合系统和丘脑、纹状体内血管吻合系统。每例病人,根据侧枝循环的有无进行赋值(1表示有侧枝循环,0表示无侧枝循环)。测量和记录后交通动脉(Pcom)及颈内动脉(ICA)的内径。记录脉络膜前动脉的异常改变:(0表示没显影;1表示显影但无扩张;2表示扩张并参与代偿供血)。采用spss 22.0软件对数据进行统计学分析,比较组间差异,检验水准均为α=0.05。结果出血组与缺血组间病人m SS评分的分布没有显著差异(χ~2=5.812,v=5,P=0.325);Pcom/ICA(后交通动脉颈内动脉内径比值)比较两组差异有统计学意义(t=2.119,v=108,P=0.036)出血组Pcom/ICA值较大。Pcom/ICA在不同m SS评分的各组间的分布差异有统计学意义(f=8.924,P<0.05)m SS评分在等于3、4、5分时比值较大;两组之间脉络膜前动脉扩张的发生率的差异有统计学意义(χ~2=11.79,P=0.001);侧支循环血管系统:硬脑膜血管吻合组:两组之间硬脑膜血管吻合发生率差异没有统计学意义(χ~2=0.327,P=0.567)。软脑膜血管吻合组:两组之间软脑膜血管吻合发生率差异有统计学意义(Fisher精确检验,P=0.018),出血组出现率明显高于缺血组。室管膜下血管吻合组:两组之间室管膜下血管吻合发生率差异没有统计学意义(χ~2=0.011,P=0.917)。纹状体内血管吻合组:两组之间纹状体内血管吻合发生率差异有统计学意义(χ~2=7.551,P=0.006),出血组出现率高于缺血组。结论侧支循环血管系统是烟雾病患者脑血流重要组成部分,其因病人不同而表现不同的模式;后交通动脉与颈内动脉内径的比值增大,脉络膜前动脉的异常扩张,发自沟动脉的软脑膜血管吻合和丘脑、纹状体内的血管吻合可能是烟雾病病人出现出血性卒中的独立危险因子。

关键词：烟雾病卒中类型侧支代偿

替莫唑胺诱导的小鼠胶质瘤耐药动物模型的建立

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南方医科大学学报 2021年第1期41卷 69-74页

作者：施林勇李宏辜俊伟宋憧李俊杰陈磊周强漆松涛陆云涛南方医科大学南方医院神经外科广东广州510515

目的通过颅内原位成瘤小鼠体内连续传代技术,建立更为有效的替莫唑胺(TMZ)耐药胶质瘤模型,评估其耐药性和相关生物学特性。方法取成年C57BL/6小鼠78只,按随机数字表法分为6组(13只/组):诱导组共3组(小剂量、中剂量和大剂量诱导组),对照... 详细信息

目的通过颅内原位成瘤小鼠体内连续传代技术,建立更为有效的替莫唑胺(TMZ)耐药胶质瘤模型,评估其耐药性和相关生物学特性。方法取成年C57BL/6小鼠78只,按随机数字表法分为6组(13只/组):诱导组共3组(小剂量、中剂量和大剂量诱导组),对照组共3组(不给药组、中剂量和大剂量对照组)。每组中5只磁共振评估肿瘤大小,5只观察小鼠生存,3只取肿瘤行原代培养。使用GL261鼠胶质瘤细胞系,对诱导组1和对照1、2、3组小鼠行原位成瘤。诱导组1使用小剂量TMZ(5 mg/kg)诱导5 d后停药10 d,再将诱导组1小鼠取瘤制备单细胞悬液,流式分选得到胶质瘤细胞后继续培养,用于接种诱导组2。中剂量TMZ(25 mg/kg)处理诱导组2荷瘤鼠,同法取瘤分选后培养并接种诱导组3,大剂量TMZ(50 mg/kg)处理诱导组3荷瘤鼠。以此逐代适度递增药物剂量诱导耐药,建立小鼠胶质瘤TMZ耐药模型。对照组1使用不含TMZ的溶剂对照处理,对照组2、3分别使用中、大剂量(25、50 mg/kg)TMZ处理。细胞集落法检测每代小鼠原位肿瘤细胞的TMZ耐药性;CCK8法检测TMZ作用下的细胞耐药指数。结果成功建立了小鼠胶质瘤TMZ耐药模型并确定了其耐药性。大剂量诱导组细胞相对集落率明显高于大剂量对照组(P<0.05),相比于不给药组产生了4.25倍耐药性。大剂量TMZ能明显减小对照组荷瘤鼠肿瘤体积(P<0.05),而大剂量诱导组肿瘤体积明显大于大剂量对照组(P<0.001),且荷瘤鼠生存时间较大剂量对照组明显缩短(P=0.0018)。结论逐代适度递增药物剂量刺激原位成瘤小鼠,能建立更为有效的小鼠胶质瘤TMZ耐药株模型。

关键词：胶质瘤替莫唑胺耐药动物模型

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132例松果体区肿瘤的临床研究

中华肿瘤杂志 2010年第6期32卷 441-443页

作者：邱炳辉方陆雄张喜安漆松涛南方医科大学南方医院神经外科广州510515

目的研究松果体区肿瘤的临床表现、影像学特征、肿瘤标记物、病理特征、治疗方法和临床疗效,探讨其特点和治疗策略.方法回顾性分析2000年1月至2008年5月间住院治疗的132例松果体区肿瘤患者的资料.结果 132例松果体区肿瘤患者中,男性9... 详细信息

目的研究松果体区肿瘤的临床表现、影像学特征、肿瘤标记物、病理特征、治疗方法和临床疗效,探讨其特点和治疗策略.方法回顾性分析2000年1月至2008年5月间住院治疗的132例松果体区肿瘤患者的资料.结果 132例松果体区肿瘤患者中,男性98例,女性34例,男女之比为2.9：1.临床表现以颅内压升高、眼球运动障碍为主.CT和MRI检查有一定特征,但缺乏特异性的影像表现.132例患者中,合并腩积水117例,占88.6%.甲胎蛋白（AFP）升高14例,人绒毛膜促性腺激素（HCG）升高9例.132例患者中,直接放疗18例,病理活检后放疗7例,手术切除107例.有病理诊断结果者114例,其中生殖细胞源性肿瘤56例.随访12～132个月,肿瘤复发23例,死亡12例.132例患者的5年生存率为89.3%.结论松果体区肿瘤常合并脑积水,定性诊断较困难,影像学检查有助于诊断,但特异性较差.结合肿瘤标记物可诊断生殖细胞源性肿瘤.纯生殖细胞瘤可直接选择放化疗,其他类型肿瘤均应开颅行手术治疗.应根据患者的病理诊断结果 ,施行联合放化疗,效果较好.

关键词：松果体肿瘤诊断治疗临床研究

锁孔微创入路手术治疗颅内动脉瘤的风险因素及对策分析

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中华外科杂志 2006年第14期44卷 982-984页

作者：漆松涛石小峰冯文峰许益民黄理金南方医科大学南方医院神经外科广州510515

目的探讨颅内动脉瘤在锁孔手术中破裂的风险因素、适应证选择、手术难点、预防动脉瘤破裂的方法及应急处理措施。方法回顾性分析1999年至2005年115例动脉瘤患者的临床资料。将动脉瘤破裂风险较低的43例患者通过锁孔微创人路手术治疗(锁... 详细信息

目的探讨颅内动脉瘤在锁孔手术中破裂的风险因素、适应证选择、手术难点、预防动脉瘤破裂的方法及应急处理措施。方法回顾性分析1999年至2005年115例动脉瘤患者的临床资料。将动脉瘤破裂风险较低的43例患者通过锁孔微创人路手术治疗(锁孔组),其余72例患者采用常规开颅手术治疗(常规组)。锁孔组43例患者手术中翼点锁孔人路20例,眶上锁孔入路18例,纵裂锁孔入路5例。常规组72例患者风险高而采用常规翼点开颅31例,额下开颅11例,纵裂开颅7例,翼点-额下联合10例,翼点-纵裂联合6例,额下-纵裂联合4例,翼点-额下-纵裂联合3例。结果锁孔组术中动脉瘤渗漏6例,破裂出血3例,发生率为7%,无手术死亡。2例在锁孔手术中无法夹闭动脉瘤而改为常规开颅。常规组术中发生动脉瘤渗漏18例,破裂出血9例,发生率为13%,手术后死亡2例。结论尽管锁孔手术有微创、伤口美观、术后恢复快等优点,但在风险低的患者中动脉瘤渗漏和破裂的风险仍然不能忽视。

关键词：颅内动脉瘤破裂锁孔

复合手术室内采用多枚瘤夹塑形夹闭大脑中动脉复杂动脉瘤的临床疗效

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中华神经外科杂志 2020年第1期36卷 48-51页

作者：王刚温运宇廖永鸿张国忠李明洲陈思源漆松涛冯文峰南方医科大学南方医院神经外科广州510515

目的观察在复合手术室内采用多枚动脉瘤夹塑形夹闭大脑中动脉(MCA)复杂动脉瘤患者的疗效。方法回顾性分析2015年1月至2019年2月南方医科大学南方医院神经外科收治的13例MCA复杂动脉瘤患者的临床资料。患者均于复合手术室内行单侧翼点入... 详细信息

目的观察在复合手术室内采用多枚动脉瘤夹塑形夹闭大脑中动脉(MCA)复杂动脉瘤患者的疗效。方法回顾性分析2015年1月至2019年2月南方医科大学南方医院神经外科收治的13例MCA复杂动脉瘤患者的临床资料。患者均于复合手术室内行单侧翼点入路开颅手术,术中采用多枚动脉瘤夹塑形夹闭动脉瘤。13例患者中,7例为破裂动脉瘤患者,术前Hunt-Hess分级Ⅰ级者4例,Ⅲ级者1例,Ⅳ级者2例;6例为未破裂动脉瘤患者。13例患者共19个动脉瘤,其中5例为双侧MCA单发动脉瘤,1例为单侧双发MCA动脉瘤,其余7例患者为单发MCA动脉瘤。采用Raymond分级标准评估动脉瘤即刻栓塞情况,采用改良Rankin量表评分(mRS)标准评估临床预后。结果13例患者19个动脉瘤均成功夹闭,共采用动脉瘤夹60枚,每个动脉瘤采用1~6(3.3±1.6)枚。动脉瘤夹闭后,术中造影复查显示4个动脉瘤夹闭不全(Raymond分级Ⅱ级),2例载瘤动脉狭窄,经调整动脉瘤夹后,所有动脉瘤均完全不显影(Raymond分级均为Ⅰ级),载瘤动脉瘤无狭窄。仅1例患者因动脉瘤瘤壁上发出的分支闭塞,术后发生基底核区梗死,有轻偏瘫。出院时mRS 0分10例,2分2例,5分1例。13例患者术后随访6~36个月(中位数为18个月),mRS 0分10例,1分2例,4分1例。复查造影6例,动脉瘤均无复发。结论复合手术室内采用多枚动脉瘤夹塑形夹闭MCA复杂动脉瘤疗效好,并发症少。

关键词：颅内动脉瘤大脑中动脉显微外科手术多瘤夹塑形复合手术

改良酶消化法在人脑胶质瘤细胞快速原代培养中的应用

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解放军医学杂志 2016年第6期41卷 461-465页

作者：向伟漆松涛刘亚伟雷炳喜周强易国仲陈子阳严乐南方医科大学南方医院神经外科广州510515

目的建立一种人脑胶质瘤细胞原代培养的改良酶消化法。方法基于文献并结合实际工作中经验,改良既往文献报道的酶消化法,对32例不同级别的胶质瘤进行消化后行原代细胞培养,通过倒置相差显微镜观察肿瘤细胞的形态学特点,传代时采用差速贴... 详细信息

目的建立一种人脑胶质瘤细胞原代培养的改良酶消化法。方法基于文献并结合实际工作中经验,改良既往文献报道的酶消化法,对32例不同级别的胶质瘤进行消化后行原代细胞培养,通过倒置相差显微镜观察肿瘤细胞的形态学特点,传代时采用差速贴壁法对原代细胞进行纯化。采用细胞免疫荧光法对原代细胞进行鉴定,通过细胞增殖实验(CCK-8法)绘制生长曲线,研究体外培养细胞的增殖情况。结果采用改良的酶消化法成功培养28例,失败4例,成功率为87.5%。培养成功的细胞贴壁生长,细胞状态稳定,形态各异,生长状态良好,并可传代。细胞免疫荧光检测显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性,证明培养的细胞为胶质瘤细胞;细胞增殖实验显示细胞在体外增殖活跃,肿瘤病理级别越高,细胞增殖能力越强。结论改良的酶消化法用于人脑胶质瘤细胞原代培养具有简单、高效、成功率高等优点。

关键词：神经胶质瘤原代细胞培养酶消化法