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重组鼠IFN-γ腺病毒诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立和观察

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第2期31卷 128-134页

作者：杨箐张玮光黎陈铖刘细细胡中晓王风楠陈碧清田芳张晓丽热爱拉·加那提朱学军南京中医药大学附属医院、南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210029 南京中医药大学附属医院中心实验室江苏南京210029 南京中医药大学附属医院血液科江苏南京210029

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。... 详细信息

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。将40只雌性C57Bl/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、载体对照组、病毒低、中、高剂量组(每组8只),分别向各组小鼠腹腔注射PBS(200μL)、Ad-lacZ(2×10^(7)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(5×10^(6)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(1.5×10^(7)PFU/只)和Ad-mIFN-γ(2×10^(7)PFU/只)。每日观测小鼠的体质量及生存情况;第3天时采用流式细胞术检测小鼠外周血和脾内单核细胞(CD11b^(+))、巨噬细胞(CD11b^(+)/CD86^(+))比例,免疫荧光染色法检测脾内CD11b^(+)的单核细胞比例;第9天时采用流式细胞术检测小鼠血清中细胞因子的分泌水平;第14天,采用颈椎脱臼法处死小鼠,H-E染色法观察小鼠肝、脾、肺和肾的病理和组织学变化。结果:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,在第3天检测到巨噬细胞分泌mIFN-γ达到峰值(118.34±2.90)pg/mL,并在一周内持续高分泌mIFN-γ,Ad-lacZ对照组IFN-γ分泌水平较低后,第3天时为(0.17±0.08)pg/mL。小鼠腹腔注射Ad-mIFN-γ后,在14 d内病毒低、中剂量组无小鼠死亡,病毒高剂量组小鼠体质量持续减轻(P<0.001);第3天,病毒高剂量组小鼠外周血和脾组织内单核细胞、巨噬细胞比例较对照组和中剂量组均显著增加(P<0.05或P<0.01);第9天,病毒低、中、高剂量组小鼠血清中mIFN-γ、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1、TNF-α等细胞因子的水平均显著升高(P<0.001);10 d内病毒高剂量组小鼠死亡率达100%。组织病理检测可见病毒高剂量组小鼠的肝、脾、肺、肾组织有明显损伤。结论:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠原代腹腔巨噬细胞后,可以快速分泌mIFN-γ;腹腔注射高剂量(2×10^(7)PFU/只)Ad-mIFN-γ导致小鼠出现CRS典型表现,可作为CAR-T细胞治疗诱发CRS的动物模型。

关键词： γ-干扰素腺病毒巨噬细胞细胞因子释放综合征动物模型 C57Bl/6J小鼠

冰菖散通过Nrf2/HO-1信号通路改善APP/PS1阿尔茨海默病小鼠铁死亡及认知功能障碍的研究

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南京中医药大学学报 2024年 490-499页

作者：郭少博朱文慧白宇张彪 1.南京中医药大学附属医院 2.南京中医药大学第一临床医学院中医代谢病重点实验室 3.南京中医药大学中西医结合学院南京中医药大学附属医院南京中医药大学第一临床医学院中医代谢病重点实验室南京中医药大学中西医结合学院

目的探讨吸嗅冰菖散通过调节Nrf2/HO-1信号通路来改善阿尔茨海默病（AD）小鼠的铁死亡和认知功能障碍。方法30只APP/PS1小鼠随机分为模型组（APP/PS1组）、冰菖散低剂量组（BCS-L组）和冰菖散高剂量组（BCS-H组），10只同窝阴性小鼠作... 详细信息

目的探讨吸嗅冰菖散通过调节Nrf2/HO-1信号通路来改善阿尔茨海默病（AD）小鼠的铁死亡和认知功能障碍。方法30只APP/PS1小鼠随机分为模型组（APP/PS1组）、冰菖散低剂量组（BCS-L组）和冰菖散高剂量组（BCS-H组），10只同窝阴性小鼠作为空白组（WT组）。WT组和APP/PS1组进行纯水雾化给药处理；BCS-L组和BCS-H组每日雾化给药0.5、1μL冰菖散吸嗅剂，每日10 min，持续2周。给药2周后进行水迷宫实验来判断各组小鼠空间认知能力，水迷宫实验后处死小鼠，取大脑组织进行Aβ1-42免疫荧光和磷酸化Tau蛋白（P-tau）免疫组化及尼氏染色；提取海马组织进行Western blot、qPCR检测Keap1、Nrf2、HO-1、GPX4、SCL7A11、TFRC、DMT1、FTL、FTH1的蛋白和mRNA表达水平；提取大脑组织进行GSH试剂盒检测。结果 BCS各组逃避潜伏期缩短，平台所在象限活动时间和穿越平台次数增加。相对于APP/PS1组，BCS各组小鼠的海马CA1区和皮层中的Aβ1-42和P-tau表达水平显著降低（P<0.05,P<0.01）。尼氏染色显示，BCS各组神经元排列较为紧密，有较多尼氏体。在海马组织中，相比于未处理的APP/PS1小鼠，BCS各组在Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4、FTL的蛋白和mRNA表达水平上均有显著提升（P<0.05,P<0.01）,BCS-L组FTH1的蛋白和mRNA水平有提升，但无显著意义，同时TFRC、DMT1、Keap1的表达水平显著下调（P<0.05,P<0.01）。此外，BCS各组能有效恢复其大脑中GSH的含量（P<0.05,P<0.01）。结论吸嗅BCS可以改善APP/PS1小鼠认知功能障碍。BCS可以激活Nrf2/HO-1通路，增加GPX4的表达，并通过抑制Keap1来增强Nrf2的转录活性，从而提高SLC7A11的表达并恢复GSH的含量，有效对抗铁死亡。同时，冰菖散还能有效抑制TFRC和DMT1，上调FTL和FTH1的表达，进而维持细胞内铁的稳态平衡，有助于减轻铁死亡对APP/PS1小鼠的影响，可改善AD小鼠的认知功能。

关键词：阿尔茨海默病铁死亡 Nrf2/HO-1信号通路冰菖散吸嗅

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术的中药荆芥穗化学成分表征与鉴定

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 420-430页

作者：赵毅萌张礼欣杨舒昀王泽琨李长印束雅春南京中医药大学附属医院药学部江苏南京210029 南京中医药大学附属医院江苏省中医院临床药理实验室江苏南京210029 江苏省中医院全国中药炮制技术传承基地江苏南京210029

应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对荆芥穗中的化学成分进行定性分析。采用Agilent poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.... 详细信息

应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对荆芥穗中的化学成分进行定性分析。采用Agilent poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,电喷雾离子源,在正、负离子模式下扫描采集数据,通过对照品比对及PeakView软件分析鉴定化合物。从荆芥穗中共鉴定出97个化合物,其中黄酮类化合物28个,酚酸类化合物23个,脂肪酸类化合物23个,萜类化合物15个以及其他类化合物8个。该研究建立的UHPLC-Q-TOF-MS/MS能快速、准确、较全面地鉴定荆芥穗药材的化学成分,为荆芥穗药效物质基础研究提供参考依据。

关键词：荆芥穗超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术化学成分结构鉴定

MSCT在胰腺实性假乳头状瘤和囊实性胰腺癌中的鉴别诊断价值

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临床放射学杂志 2024年第4期43卷 591-596页

作者：吕晓静曹营营钱丽超魏昪孙亚琳王中秋任帅南京中医药大学附属医院(江苏省中医院)放射科 210029 南京中医药大学附属南京中医院 210022

目的探索多层螺旋CT(MSCT)在胰腺实性假乳头状瘤(SPN)与囊实性胰腺癌(PC)鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析经病理诊断证实的32例SPN和14例囊实性PC患者的临床及影像学资料,分析比较两组患者年龄、性别、病灶长径、位置、形状、边界... 详细信息

目的探索多层螺旋CT(MSCT)在胰腺实性假乳头状瘤(SPN)与囊实性胰腺癌(PC)鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析经病理诊断证实的32例SPN和14例囊实性PC患者的临床及影像学资料,分析比较两组患者年龄、性别、病灶长径、位置、形状、边界、质地、强化方式、“浮云征”、钙化、胰管扩张、胰腺萎缩、侵犯或转移情况的发生率,测量计算病灶CT平扫及增强扫描各期CT值和比值比采用多因素逻辑回归分析建立诊断模型。应用受试者工作特征曲线(ROC)评估诊断模型在SPN和囊实性PC鉴别诊断中的效能。结果 SPN组患者平均年龄为32岁,囊实性PC组患者平均年龄为64岁,两组患者年龄差异具有统计学意义(P0.05)。多因素逻辑回归分析提示“浮云征”、“侵犯或转移”是鉴别SPN和囊实性PC有统计学价值的预测因素。联合上述指标建模后行ROC曲线分析,曲线下面积(AUC)为0.853(95%CI:0.714~0.991),诊断的敏感度、特异度和准确率分别为78.6%、90.6%和86.9%。结论 SPN多见于年轻患者,且病灶多边界清晰,很少出现转移或侵犯,“浮云征”为其增强后的特异性征象;而囊实性PC多边界模糊,“浮云征”少见,发生转移或侵犯的概率较高;相较于SPN,囊实性PC的病灶往往更小。

关键词：胰腺实性假乳头状瘤囊实性胰腺癌鉴别诊断多层螺旋CT

Notch信号和线粒体在脓毒症心肌损伤中的交互作用

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中华急诊医学杂志 2024年第4期33卷 579-583页

作者：沈琪李泽林晋金兰广州中医药大学深圳医院(福田)重症医学科深圳518034

脓毒症(sepsis)是机体对感染反应失调导致的危及生命的器官功能障碍。脓毒症及其引发的后续器官功能障碍是急危重症医学领域的难点[2]。脓毒症患者最为常见的并发症是心肌损伤导致的心功能障碍,发生率高达40%~50%,它的出现提示疾病严重... 详细信息

脓毒症(sepsis)是机体对感染反应失调导致的危及生命的器官功能障碍。脓毒症及其引发的后续器官功能障碍是急危重症医学领域的难点[2]。脓毒症患者最为常见的并发症是心肌损伤导致的心功能障碍,发生率高达40%~50%,它的出现提示疾病严重程度和预后都较差,对患者生命造成严重威胁[3]。

关键词：器官功能障碍疾病严重程度心功能障碍急危重症心肌损伤脓毒症患者医学领域 Notch信号

当归多糖调节Caspase-1/Gasdermin D通路促进脑缺血-再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞血管新生

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中药材 2024年 977-983页

作者：高加巍崔梦迪南京中医药大学南京中医药大学附属南京中医院

目的:考察当归多糖调节Caspase-1/Gasdermin D通路促进脑缺血-再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞血管新生的作用。方法:将脑缺血-再灌注损伤大鼠随机分为模型组、依达拉奉(10 mg/kg)阳性对照组及当归多糖低(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量... 详细信息

目的:考察当归多糖调节Caspase-1/Gasdermin D通路促进脑缺血-再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞血管新生的作用。方法:将脑缺血-再灌注损伤大鼠随机分为模型组、依达拉奉(10 mg/kg)阳性对照组及当归多糖低(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,另设假手术组,每组12只大鼠。灌胃给药,模型组和假手术组灌胃相应体积生理盐水,所有组别均连续给药14 d。记录各组大鼠给药前和末次给药后的生存状况、体质量、功能缺损评分,比较各组大鼠给药后的脑组织含水量、MVD,ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-18水平及脑组织Caspase-1、Gasdermin D、VEGF、VEGFR2、IL-1β、IL-18水平,qPCR及Western Blot检测大鼠脑组织pro-Caspase-1、Caspase-1、Gasdermin D、VEGF、VEGR2、IL-1β、IL-18 m RNA及蛋白表达。结果:给药前,假手术组大鼠的精神、活动量和摄食量均正常,模型组及各给药组大鼠精神不振,活动量和摄食量减少,5组大鼠的体质量差异无统计学意义(P>0.05)。给药后,与假手术组比较,模型组大鼠功能缺损评分及血清IL-1β、IL-18和脑含水量显著升高,MVD显著降低,脑组织Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18水平显著升高,VEGF、VEGFR2水平显著降低,脑组织pro-Caspase-1、Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18、VEGF、VEGR2 m RNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,当归多糖高剂量组和依达拉奉组大鼠功能缺损评分及血清IL-1β、IL-18和脑含水量显著降低,MVD显著升高,脑组织Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18水平显著降低,VEGF、VEGFR2水平显著升高,脑组织pro-Caspase-1、Caspase-1、Gasdermin D、IL-1β、IL-18 m RNA及蛋白表达显著降低,VEGF、VEGR2 m RNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:当归多糖可促进脑缺血-再灌注损伤大鼠微血管内皮细胞血管新生,其机制可能与抑制细胞焦亡Caspase-1/Gasdermin D通路,上调VEGF、VEGFR2表达有关。

关键词：当归多糖胱天蛋白酶1/Gasdermin D通路再灌注损伤大鼠内皮细胞

重症患者新发心房颤动的影响因素分析及其风险预测列线图模型构建

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实用心脑肺血管病杂志 2024年第6期32卷 33-38页

作者：庄燕张海东陈秋华戴林峰南京中医药大学附属医院重症医学科江苏省南京市210029

目的分析重症患者新发心房颤动(NOAF)的影响因素,并构建其风险预测列线图模型。方法回顾性选取2018—2020年南京中医药大学附属医院重症医学科收治的重症患者287例为研究对象。收集患者临床资料,采用单因素、多因素Logistic回归分析探... 详细信息

目的分析重症患者新发心房颤动(NOAF)的影响因素,并构建其风险预测列线图模型。方法回顾性选取2018—2020年南京中医药大学附属医院重症医学科收治的重症患者287例为研究对象。收集患者临床资料,采用单因素、多因素Logistic回归分析探讨重症患者NOAF的影响因素;基于赤池信息量准则(AIC)最小原则,采用向后逐步回归分析筛选变量,然后构建重症患者NOAF的风险预测列线图模型;采用Bootstrap法重复抽样500次对该列线图模型进行内部验证;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价该列线图模型的区分度,并运用Bootstrap法重复抽样500次对ROC曲线进行内部验证;采用Hosmer-Lemeshow拟合优度检验评价该列线图模型的校准度并绘制校准曲线;采用决策曲线及临床影响曲线评价该列线图模型的临床适用性。结果多因素Logistic回归分析结果显示,年龄及入院时心率(HR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)是重症患者NOAF的独立影响因素(P重症患者NOAF的风险预测列线图模型。采用Bootstrap法重复抽样500次对该列线图模型进行内部验证,结果显示,κ值为0.121,准确率为0.736。ROC曲线分析结果显示,该列线图模型预测重症患者NOAF的AUC为0.730〔95%CI(0.666~0.793)〕。采用Bootstrap法重复抽样500次对ROC曲线进行内部验证,结果显示,该列线图模型预测重症患者NOAF的AUC为0.707,ROC标准差=0.100,敏感度标准差=0.056,特异度标准差=0.135。Hosmer-Lemeshow拟合优度检验结果显示,该列线图模型的拟合程度较好(χ^(2)=0.467,P=0.792)。决策曲线分析结果显示,当阈值概率为4%~60%时,该列线图模型的临床净获益>0。临床影响曲线分析结果显示,当阈值概率>60%时,该列线图模型的预测结果和实际发生情况高度匹配。结论年龄及入院时HR、APTT、CK-MB是重症患者NOAF的独立影响因素。本研究基于年龄及入院时APACHEⅡ评分、HR、APTT、CK-MB、BNP构建的重症患者NOAF的风险预测列线图模型具有较好的稳定性、校准度、临床适用性及一定区分度。

关键词：心房颤动新发心房颤动影响因素分析列线图

中药抑制缺氧诱导因子-1α相关信号通路的抗肿瘤作用研究进展

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世界中医药 2024年第4期19卷 600-605页

作者：毛梦婷许尤琪董孟佳李伟良唐杰南京中医药大学南京210029 南京中医药大学第二附属医院南京210017

缺氧是实体肿瘤的常见特征,缺氧微环境可引起缺氧诱导因子-1(HIF-1)过表达。HIF-1α是缺氧应答中至关重要的转录调控因子,在各类肿瘤组织中均过表达,其在肿瘤细胞的增殖、侵袭转移、血管生成、糖酵解和免疫中发挥重要作用并参与多种转... 详细信息

缺氧是实体肿瘤的常见特征,缺氧微环境可引起缺氧诱导因子-1(HIF-1)过表达。HIF-1α是缺氧应答中至关重要的转录调控因子,在各类肿瘤组织中均过表达,其在肿瘤细胞的增殖、侵袭转移、血管生成、糖酵解和免疫中发挥重要作用并参与多种转导通路。因此,HIF-1α作为治疗实体肿瘤的潜在靶点,颇有应用前景。相较于HIF-1α抑制剂存在高毒性、低效性的问题,中药具有多靶点、低毒性、高耐受性等优势,在肿瘤治疗中有广泛的应用前景。

关键词：缺氧诱导因子-1α 中药肿瘤信号通路缺氧机制

老年股骨颈骨折全髋或半髋关节置换的中远期状态:倾向性评分匹配法评价

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中国组织工程研究 2024年第24期28卷 3839-3844页

作者：李志鹏环大维袁兆丰丁凯邱越夏天卫沈计荣南京中医药大学附属医院(江苏省中医院) 江苏省南京市210004

背景:关节置换是治疗老年移位性股骨颈骨折的主要手段,全髋关节置换与半髋关节置换的选择是目前具有较大争论的焦点。目的:基于倾向性评分匹配法对比直接前入路下全髋与半髋关节置换治疗老年移位性股骨颈骨折的中远期生存状态。方法:选... 详细信息

背景:关节置换是治疗老年移位性股骨颈骨折的主要手段,全髋关节置换与半髋关节置换的选择是目前具有较大争论的焦点。目的:基于倾向性评分匹配法对比直接前入路下全髋与半髋关节置换治疗老年移位性股骨颈骨折的中远期生存状态。方法:选择2016年1月至2021年1月收治的147例老年移位性股骨颈骨折患者(≥65岁),其中88例行全髋关节置换,59例行人工股骨头置换(半髋关节置换)。对于患者术前合并症采用年龄校正Charlson合并症评分表,计算患者虚弱度,并采用倾向性评分匹配法对两组患者进行1∶1匹配,比较匹配后两组患者的手术时间、出血量、术后住院时间、住院费用、营养指标、术后并发症、死亡率和术后生存时间,其中术后生存时间采用Kaplan-Meier生存分析。结果与结论:①倾向性评分匹配后,两组共有42对匹配成功,匹配后两组患者术前资料均衡可比(P>0.05);②与半髋关节置换组相比,全髋关节置换组手术时间(79.71 min vs.59.07 min,P0.05);但在术后疼痛方面,半髋关节置换组疼痛发生率明显高于全髋关节置换组(24%vs.7%,P=0.035);④整体来看,全髋关节置换具有更好的长期预后生存效果,但对于身体素质差的患者则更适合行半髋关节置换;同时,术后的疼痛可能很大程度上会对患者髋关节置换后的生活质量及存活时间产生影响。

关键词：直接前入路移位性股骨颈骨折老年全髋关节置换半髋关节置换年龄校正Charlson合并症评分倾向性评分匹配生存状态