检索结果-南通市图书馆

作者：韩晓梅南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨黄连荷叶汤联合二甲双胍治疗肥胖型2型糖尿病（T2DM）湿热中阻证的疗效及对血管内皮功能、动脉弹性功能的影响,为临床用药提供有效的指导。方法:选取肥胖型2型糖尿病湿热中阻证患者120例,采用随机数字法进行分组,随机分为对照... 详细信息

目的:探讨黄连荷叶汤联合二甲双胍治疗肥胖型2型糖尿病（T2DM）湿热中阻证的疗效及对血管内皮功能、动脉弹性功能的影响,为临床用药提供有效的指导。方法:选取肥胖型2型糖尿病湿热中阻证患者120例,采用随机数字法进行分组,随机分为对照组（n=60）和治疗组（n=60）。对照组予以盐酸二甲双胍片0.5 g/次,每日3次,治疗组在对照组药物治疗的基础上加用黄连荷叶汤口服,每日2次,两组均连续治疗12周。对比两组临床疗效,并比较两组治疗前后中医证候积分、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、身体质量指数、腰臀比等代谢指标及反应性充血指数、臀踝脉搏波传导速度、血清脂蛋白相关磷脂酶A2等血管病变指标的变化。同时行两组患者治疗前后血尿大便常规、肝肾功能、心电图等安全性观察。结果:治疗前两组患者的性别、年龄、病程、血压、身体质量指数等一般资料均衡,差异无统计学意义（P＞0.05）,具有可比性。（1）两组患者治疗总有效率,治疗组为95.00%,显著高于对照组的80.00%（P＜0.05）。两组治疗前后相比,治疗后两组的中医证候积分较治疗前降低（P＜0.05）;治疗组与对照组治疗后比较,治疗后治疗组的中医证候积分显著低于对照组（P＜0.05）。（2）糖代谢指标比较:两组治疗前后相比,治疗后两组的空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数均较治疗前降低（P＜0.05）;治疗组与对照组治疗后比较,治疗后治疗组的空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数均显著低于对照组（P＜0.05）。（3）肥胖相关指标比较:两组治疗前后相比,治疗后两组的身体质量指数、腰围、腰臀比均较治疗前降低（P＜0.05）。治疗组与对照组治疗后比较,治疗后治疗组的身体质量指数、腰围、腰臀比均显著低于对照组（P＜0.05）。（4）血管病变指标比较:两组治疗前后相比,治疗后两组的臀踝脉搏波传导速度、血清脂蛋白相关磷脂酶A2均较治疗前降低（P＜0.05）,反应性充血指数水平升高（P＜0.05）。治疗后,相比于对照组,治疗组反应性充血指数水平较高（P＜0.05）,臀踝脉搏波传导速度和血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平较低（P＜0.05）。（5）安全性指标:两组患者治疗前后血尿大便常规、肝肾功能、心电图均无异常,且均未发现明显与药物相关的副作用。结论:黄连荷叶汤联合二甲双胍治疗能够有效控制肥胖型2型糖尿病患者血糖,改善胰岛素抵抗,减轻体重,还可改善患者血管内皮功能和动脉弹性功能,疗效较好,作用安全可靠。

关键词： 2型糖尿病肥胖黄连荷叶汤临床观察

基于半抗原抗体技术研究人参皂苷在脑组织内的分布

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基于半抗原抗体技术研究人参皂苷在脑组织内的分布

作者：欧阳柳凤南京中医药大学

学位级别：硕士

目的：目前国内外大量研究均证明人参的有效成分人参皂苷对中枢神经系统有肯定的药理作用。基于人参的这种中枢活性,人参皂苷能否透过血脑屏障(BBB)成为当前的研究热点。大多数研究学者们认为人参皂苷不能透过BBB,但也有少数学者认为人... 详细信息

目的：目前国内外大量研究均证明人参的有效成分人参皂苷对中枢神经系统有肯定的药理作用。基于人参的这种中枢活性,人参皂苷能否透过血脑屏障(BBB)成为当前的研究热点。大多数研究学者们认为人参皂苷不能透过BBB,但也有少数学者认为人参皂苷可透过BBB。基于当前的这种研究现状,本实验拟采用脑组织匀浆和脑脊液高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)检测技术和脑组织切片免疫组织化学法(IHC)检测分析技术,再次回答这个科学问题。且如果不能透过,是否能到达BBB;如果能,可具体分布于BBB的哪些细胞中。通过回答上述科学问题,将有助于探讨人参皂苷中枢活性的作用机理,并为研究其中枢作用靶点提供基础实验数据。方法：实验1：高纯度人参总皂苷的制备本实验采用大孔吸附树脂D101联用阴阳离子交换树脂制备高纯度人参总皂苷,并通过香草醛-硫酸比色法和电喷雾检测器(CAD)柱后流动相补偿一测总评法对皂苷的含量进行测定。实验2：人参皂苷半抗原抗体的制备与纯化首先用以上所得高纯度人参皂苷偶联牛血清白蛋白(BSA),得到人参皂苷半抗原,SDS-PAGE凝胶电泳检验是否偶联成功;再以偶联成功的人参皂苷-BSA免疫兔子,获得抗血清;然后通过硫酸铵沉淀、蛋白A柱纯化、抗原柱纯化,得效价较高的抗人参皂苷抗体;最后酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体效价,生物膜层干涉技术测定人参皂苷各单体与抗人参皂苷抗体之间的亲和力,免疫细胞化学法进一步检测抗体的有效性。实验3：液质联用(LC-MS)检测脑组织及脑脊液中的人参皂苷小鼠人参皂苷灌胃1周,取全脑,制备脑组织匀浆,匀浆液固相萃取预处理后,LC-MS检测人参皂苷。大鼠人参皂苷给药1周,取脑脊液,LC-MS检测人参皂苷含量。实验4：免疫组织化学法(IHC)测定人参皂苷在脑组织内的分布首先采用免疫组织化学的方法研究人参皂苷是否能在脑冰冻切片组织中被检出。然后,采用免疫荧光双染法,使用星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元神经元标志物特异性核蛋白(NEUN)、血管内皮细胞标志物血管性假血友病因子(VWF)两两联用,研究人参皂苷在这些细胞中是否有阳性显色。结果：实验1：人参皂苷样品中含单体皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rg1、Rg2、Rg3、Rc、Rd、Re、 Rf、Rh1、F2、F3,香草醛一硫酸比色法测得总皂苷含量为101.8±2.5%,一测总评法测得总皂苷含量为75%,非皂苷类成分约25%。实验2：SDS-PAGE凝胶电泳分析人参皂苷-BSA条带略高于BSA条带,说明人参皂苷与BSA偶联成功;ELISA检测纯化后的抗体效价及特异性都较好;生物膜层干涉技术测得抗人参总皂苷抗体与人参总皂苷、人参皂苷Re、Rg1、Rh1、Rh2、原人参二醇、F1、化合物K、原人参三醇的亲和力分别为3.99×10-7、4.69×10-9、2.59×10-9、2.40×10-6、1.62×10-4、2.64×10-7、1.66×10-10、1.08×10-7和1.32×10-6;免疫细胞化学法显示抗体在人参总皂苷孵育的细胞内有强阳性染色。实验3：LC-MS在脑组织匀浆液中能检测到人参皂苷Rg1, LC-MS在脑脊液中没有检测到人参皂苷。实验4：IHC在脑组织切片中能检测到人参皂苷,并能被游离的人参皂苷所阻断;免疫荧光双染法在血管内皮细胞和星形胶质细胞中检测到人参皂苷,大多数神经元中没有检测到人参皂苷,少数神经元中能检测到人参皂苷。结论：1.人参皂苷能到达BBB,可分布于构成BBB的星形胶质细胞和血管内皮细胞中。2.人参皂苷可透过BBB,作用于少数神经元,能透过BBB的人参皂苷可能是极性小的人参皂苷体内代谢产物或苷元。上述结果说明人参皂苷既可通过星形胶质细胞和血管内皮细胞间接发挥其中枢活性,也可通过神经元直接发挥中枢活性。

关键词：人参皂苷半抗原抗体 BBB 脑脊液 IHC LC-MS

针刺调控自噬流拮抗大鼠缺血性脑损伤的实验研究

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针刺调控自噬流拮抗大鼠缺血性脑损伤的实验研究

作者：刘芙蓉南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察针刺对缺血性脑损伤大鼠神经行为学评分、脑梗死体积及自噬相关指标表达的影响,明确针刺拮抗大鼠缺血性脑损伤的效应并探讨针刺调控自噬流的机制。方法:本实验主要分为实验一、实验二两大部分。实验一:针刺拮抗大鼠缺血性脑损... 详细信息

目的:观察针刺对缺血性脑损伤大鼠神经行为学评分、脑梗死体积及自噬相关指标表达的影响,明确针刺拮抗大鼠缺血性脑损伤的效应并探讨针刺调控自噬流的机制。方法:本实验主要分为实验一、实验二两大部分。实验一:针刺拮抗大鼠缺血性脑损伤的效应研究运用改良的线栓法来制备大鼠的大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。以“醒脑开窍”针刺法为介入手段。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组,每组根据缺血时间不同分为3 h、6 h、12 h和24 h不同时点的亚组,根据缺血时间不同,在造模后相应时间点观察针刺对各组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积的影响。实验二:针刺调控自噬流拮抗大鼠缺血性脑损伤的机制研究本部分实验的模型制备过程、针刺方法均同实验一。实验二与实验一的动物分组不完全相同,本实验在实验一的基础上,将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组,模型组、针刺组根据缺血时间不同分为3 h、6 h、12 h和24 h不同时点的亚组,假手术组均在造模后24 h取材,其余各组根据缺血时间不同,在造模后相应时间点进行取材。运用Western blot和Real-time PCR法分别检测各组大鼠大脑皮层缺血区自噬相关指标(Beclin1、微管相关蛋白1轻链3 LC3、SQSTM1/p62)的蛋白及mRNA的表达。结果:1.各组大鼠神经行为学评分比较根据缺血时间不同,在造模后相应时间点进行评分。与假手术组相比,其余各组大鼠的神经行为学评分升高(P0.05);与同时间点的模型组比较,针刺6h、12 h、24 h组大鼠神经行为学评分均降低(P0.05)。4.各组大鼠大脑皮层中Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及p62蛋白表达的比较与模型3 h组比较,针刺3 h组的p62表达有所下降(P0.05);与模型6 h、12 h组比较,针刺6 h、12 h组的Beclin1水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下调,p62表达则上调(P0.05)。5.各组大鼠大脑皮层Beclin1、LCB及p62的mRNA表达比较与假手术组比较,模型组4个亚组中大鼠脑组织Beclin1、LC3B的mRNA水平升高,模型6h、12h、24h组中p62mRNA表达水平降低(P<0.05);与本组3 h比较,模型6h组的Beclin1、LC3B水平都升高,p62表达有所下降(P<0.01);与模型6 h组比较,模型12 h组的Beclin1、LC3B水平降低,p62表达有所升高(P<0.05);与模型3h组比较,针刺3h组的p62的mRNA表达下降(P<0.01),Beclin1、LC3B水平降低(P<0.05);与模型6h、12h、24h组比较,针刺6h、12h、24h组的Beclin1及LC3B的mRNA下调,p62表达则上调(P<0.05)。结论:1.大鼠脑缺血后,自噬被激活,在缺血3h时呈上调趋势,缺血6h时自噬水平达到最高,12h开始逐步下调,在缺血24h时仍维持在较高水平,呈动态变化规律,表明自噬流是动态过程。2.脑缺血2h时针刺介入,能有效改善脑缺血大鼠神经功能、减小脑梗死体积,具有拮抗缺血性脑损伤的效应。3.针刺拮抗损伤的效应可能是通过调控大鼠缺血脑组织中Beclin1、LC3及p62蛋白和mRNA的表达,进而调控自噬流来实现的。脑缺血3 h时,针刺效应表现为促进自噬;从缺血6h至24h内,针刺效应表现为下调自噬,在缺血6 h时下调最为明显。

关键词：缺血性脑损伤针刺自噬流 Beclin1 微管相关蛋白1轻链3 SQSTM1/p62

益肾清利活血法治疗慢性肾小球肾炎蛋白尿的临床疗效观察

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益肾清利活血法治疗慢性肾小球肾炎蛋白尿的临床疗效观察

作者：宋钰婧南京中医药大学

学位级别：硕士

目的：通过临床病例的收集、分析,观察及评价益肾清利活血法对慢性肾小球肾炎蛋白尿的临床疗效。方法：本论文采用回顾性观察的研究方法,选择了江苏省中医院肾内科门诊61例随访资料完整、无脱落,且诊断为原发性慢性肾小球肾炎的患者。... 详细信息

目的：通过临床病例的收集、分析,观察及评价益肾清利活血法对慢性肾小球肾炎蛋白尿的临床疗效。方法：本论文采用回顾性观察的研究方法,选择了江苏省中医院肾内科门诊61例随访资料完整、无脱落,且诊断为原发性慢性肾小球肾炎的患者。其中慢性肾脏病(CKD)1期患者28例,慢性肾脏病(CKD)2期患者19例,慢性肾脏病(CKD)3期患者14例;系膜增生性肾炎(MsPGN)13例,局灶或节段性肾小球硬化(FSGS)6例,膜性肾病(MN)2例,膜增殖性肾炎(MPGN)1例,微小病变型肾炎(MCD)1例。经益肾清利活血法治疗1年,对患者治疗前后尿蛋白定性、24小时尿蛋白定量、尿隐血定性、尿红细胞计数、血肌酐、血尿素氮、血清胱抑素C、估计肾小球滤过率等疗效性指标及相关安全性指标进行统计分析。结果：经益肾清利活血法治疗的61例患者治疗3个月、9个月、12个月的总有效率分别是70.5%、77.0%、85.2%。经治疗患者尿蛋白定性、24小时尿蛋白定量、尿隐血定性、尿红细胞计数、血肌酐、血清胱抑素C、估计肾小球滤过率的疗效有统计学意义(P0.05),24小时尿蛋白定量、尿红细胞计数、血肌酐的疗效有统计学意义(P<0.05)。经治疗的MsPGN患者,治疗3个月、9个月、12个月的总有效率分别是61.5%、76.9%、92.3%。经治疗的FSGS患者,治疗3个月、9个月、12个月的总有效率分别是66.7%、83.3%、83.3%。经治疗的MsPGN和FSGS患者,24小时尿蛋白定量的疗效有统计学意义(P<0.05)。结论：益肾清利活血法能有效地控制慢性肾小球肾炎蛋白尿、尿隐血、尿红细胞、血肌酐、估计肾小球滤过率、血清胱抑素C水平,长期维持治疗,可以巩固疗效,降低蛋白尿,对轻、中度受损的肾功能有一定的保护作用,从而延缓肾功能损害的进展。益肾清利活血法治疗对CKD1-3期的蛋白尿、尿红细胞、血肌酐均有控制作用,长期维持治疗达到巩固疗效的目的。益肾清利活血法治疗对降低系膜增生性肾炎、局灶或节段性肾小球硬化的蛋白尿均有疗效。经益肾清利活血法治疗没有明显毒副作用,安全性较好。

关键词：益肾清利活血慢性肾小球肾炎蛋白尿临床疗效观察

改良八段锦功法应用于腰椎间盘突出症PELD术后早期康复的临床研究

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改良八段锦功法应用于腰椎间盘突出症PELD术后早期康复的临床研究

作者：金杰南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨改良八段锦功法对腰椎间盘突出症(LDH)患者经皮椎间孔镜椎间盘切除术(PELD)术后早期康复的临床疗效,发挥中华传统功法的优势,促进术后早期康复,为传统功法在腰椎疾病康复方面的研究提供新思路。方法:本课题将选取江苏省中医院2... 详细信息

目的:探讨改良八段锦功法对腰椎间盘突出症(LDH)患者经皮椎间孔镜椎间盘切除术(PELD)术后早期康复的临床疗效,发挥中华传统功法的优势,促进术后早期康复,为传统功法在腰椎疾病康复方面的研究提供新思路。方法:本课题将选取江苏省中医院2020年06月～2020年11月明确诊断为LDH,并接受PELD手术成功且符合标准的60名患者作为研究对象,均为主任医师主刀。根据入院日期,通过随机数表将所观察病例分为八段锦组和对照组各30例,八段锦组在常规康复治疗的基础上补充行改良八段锦功法锻炼处方(改良八段锦功法,每天演练改良八段锦功法2遍,早晚各1遍,6天/周,休息1天,连续1月为1个疗程,锻炼3个疗程)30例,对照组予常规康复治疗(单独应用常规康复方案)30例。比较两组康复前、康复后1月、康复后3月的腰腿疼痛评定(VAS)、腰椎功能JOA评分及腰骶部多裂肌表面肌电图测定,以判定临床康复疗效、多裂肌功能。使用SPSS25.0对所有统计数据进行软件处理,康复后3月评定两组患者总体疗效。结果:1.两组患者性别构成、年龄、身高、体重、病程、手术节段比较,组间的人口统计学基本特征无显著性差异(P>0.05),具有可比性。***评分比较:两组患者组内比较:两组患者在康复前与康复后1月、康复前与康复后3月、康复后1月与康复后3月(P0.05),无统计学意义;康复后3月组间比较(P0.05),无统计学意义;康复后1月、康复后3月组间比较(P0.05),无统计学意义;康复后3月组间比较(P0.05),差异无统计学意义;两组患者AEMG、MPF、MF值组间比较:康复前与康复后1月组间比较(P>0.05),无统计学意义;康复后3月组间比较(P<0.05),差异具有统计学意义。两组患者AEMG、MPF、MF值均呈不同程度的上升,康复后1月,两组AEMG、MPF、MF值上升趋势相当,康复后3月,八段锦组AEMG、MPF、MF值上升趋势较对照组更大,八段锦组提高健侧多裂肌肌力和耐疲劳度方面优于对照组。6.总体疗效比较:八段锦组优良率达90%,对照组优良率达80%(P<0.05),具有与统计学意义,说明八段锦组疗效优于对照组。结论:改良八段锦功法联合常规康复锻炼方法能够提高PELD术后患者康复疗效,长期坚持八段锦锻炼可有效提高LDH行PELD术后患者腰骶部肌肉的肌力和耐疲劳度,改善腰腿部疼痛和腰椎功能,是一项安全、有效、有益的日常体育锻炼方式,值得在腰椎间盘突出症椎间孔镜术后患者康复中推广应用。

关键词：八段锦腰椎间盘突出症 PELD 术后康复

祛风宣痹止痉法对支气管哮喘（风痰阻肺证）发作干预的临床疗效及机理研究

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祛风宣痹止痉法对支气管哮喘（风痰阻肺证）发作干预的临床疗效及...

作者：吴寒南京中医药大学

学位级别：硕士

本文从理论探讨、临床观察、实验研究三个部分对祛风宣痹止痉法治疗支气管哮喘风痰阻肺证进行了较为系统和深入的研究。理论探讨部分，着重概述了祖国医学及现代医学对支气管哮喘病因病机的认识及其研究进展，针对哮喘发病特点及其证型... 详细信息

本文从理论探讨、临床观察、实验研究三个部分对祛风宣痹止痉法治疗支气管哮喘风痰阻肺证进行了较为系统和深入的研究。理论探讨部分，着重概述了祖国医学及现代医学对支气管哮喘病因病机的认识及其研究进展，针对哮喘发病特点及其证型分布规律，提出风邪是哮证发作的始动病因，风痰阻肺证是支气管哮喘的主要病机证型之一，祛风豁痰、通阳宣痹之法是治疗哮喘的重要方法。临床研究部分，着重观察祛风宣痹止痉法的临床疗效，以50例诊断符合哮喘轻、中度急性发作期、中医辨证属风痰阻肺证的年龄在18-65岁之间的患者为对象，随机分为治疗组(祛风宣痹止痉方+基础治疗)和对照组(普米克气雾剂和喘康速气雾剂)，观察了两组的综合疗效，结果表明治疗组比对照组疗效佳。本研究证实祛风宣痹止痉法能有效干预风痰阻肺型哮喘。动物实验部分，从ET-1、ICAM-1、肺泡Ⅱ型细胞病理改变等方面来探讨祛风宣痹止痉法对哮喘干预的作用机理。采用卵蛋白致敏法建立豚鼠哮喘模型，以地塞米松片做对照药物，治疗一周后分别检测豚鼠血清中ET-1、ICAM-1中的变化，并通过组织病理学检查了解肺泡Ⅱ型细胞的凋亡情况。结果表明：祛风宣痹止痉方能使哮喘豚鼠血中ET-1、ICAM-1下降(作用与地塞米松组相当P＞0.05)，肺泡Ⅱ型细胞凋亡率减少。说明中医祛风宣痹止痉法干预哮喘发作的途径之一是通过降低ET-1、ICAM-1，减少肺泡Ⅱ型细胞的凋亡率从而改善气道炎症来实现的。

关键词：支气管哮喘祛风宣痹止痉法/中医治法临床研究实验研究 ET-1 ICAM-1 肺泡II型细胞

肾损伤时MPP5与钾离子波动及炎症因子的相关变化分析

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肾损伤时MPP5与钾离子波动及炎症因子的相关变化分析

作者：张雯南京中医药大学

学位级别：硕士

目的：观察庆大霉素(GM)、腺嘌呤(Adenine)致大鼠肾损伤时血钾的波动情况,探讨棕榈酰化膜蛋白5(MPP5)蛋白在肾损伤后对K+的调节作用;研究GM、环孢素A (CsA).顺铂(DDP)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤后,MPP5与炎症因子的变化及其相关性... 详细信息

目的：观察庆大霉素(GM)、腺嘌呤(Adenine)致大鼠肾损伤时血钾的波动情况,探讨棕榈酰化膜蛋白5(MPP5)蛋白在肾损伤后对K+的调节作用;研究GM、环孢素A (CsA).顺铂(DDP)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤后,MPP5与炎症因子的变化及其相关性。方法：1.64只大鼠随机分为正常对照组,GM 7、10、15、20d组,每组8只。GM组腹腔注射GM 100mg·kg-1,正常对照组给予同等体积的溶媒溶液,分别在腹腔注射8d、11d、16d、21d每组取8只大鼠,腹主动脉取血,分离血清,检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、钠(Na+)、钾(K+)、氯(C1-)、肿瘤坏死因子(TNF-a)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8);收集24h尿液,检测尿液中肌酐(Cr)、钠(Na+)、钾(Cl-)、氯(C1-)、肾损伤分子-1(KIM-1);肾脏组织进行组织病理学检测。Western blot.免疫组化(IHC)检测肾组织中MPP5蛋白表达情况,Western blot检测肾组织中NF-κB蛋白表达情况。2.32只大鼠随机分为正常对照组,Adenine 15.30d组,每组8只。Adenine组给予Adenine 250mg·kg-1灌胃,正常对照组给予同等体积的溶媒溶液,分别在灌胃16d、31d每组取8只大鼠取血,腹主动脉取血,分离血清,检测血清中BUN、Cr、Na+、K+、 Cl-、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8;收集24h尿液,检测尿液中Cr、Na+、K+、Cl-、KIM-1;肾脏组织进行组织病理学检测。Western blot、IHC检测肾组织中MPP5蛋白表达的变化,Western blot检测肾组织中NF-κB蛋白表达情况。3. GM (0.0625、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00mg·ml-1)、CsA (1.25、2.50、 5.00、10.00、20.00、40.00、80.00、160.00μM)、DDP (1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、 40.00、80.00、160.00μM),分别作用于HK-2细胞24h,用MTT法检测GM、CsA、DDP作用下HK-2细胞增殖情况;观察GM、CsA、DDP对细胞的形态变化的影响;检测GM (0.5、1.0、2.0 mg·ml-1)、CsA (2.5、5.0、10.0μM). DDP (2.5、5.0、10.0μM)作用于HK-2细胞24h后,细胞释放乳酸脱氢酶(LDH)的变化情况;Western blot、免疫荧光(IF)检测HK-2细胞中MPP5、转录因子NF-κB、酪氨酸蛋白IKBa、环氧酶-2(COX-2)蛋白的表达情况。结果：1.大鼠连续腹腔注射GM后体重增长幅度放缓,尿量先增加后减少,血清中Cr、BUN显著升高(P0.05),Na+变化不大,尿液中K+、Na+、Cl-明显减少(P0.05);MPP5表达有降低趋势(P>0.05);病理结果显示,大鼠肾小管上皮细胞出现水肿,部分细胞萎缩、坏死且有空泡形成。10d组血清中K+较对照组有升高趋势(P>0.05),Na+、Cl-降低(P0.05),与7d组比较有升高趋势;TNF-α、IL-6、IL-8升高明显(P0.05);TNF-α、IL-6、IL-8升高(P0.05), Na+、Cl-较对照组没有变化;TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8升高(P<0.05,P<0.01);MPP5表达减少(P<0.01);病理结果显示,肾小管出现严重萎缩且伴有空泡形成。2.大鼠用Adenine连续灌胃30d,体重增长幅度由相对减慢逐渐变为迅速减轻,尿量明显增加(P<0.001),尿液中KIM-1含量以及血清中Cr、BUN浓度明显升高(P<0.

关键词：肾损伤 K+ MPP5 NF-κB

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泻肺平喘灵颗粒的药学研究

泻肺平喘灵颗粒的药学研究

作者：丁小静南京中医药大学

学位级别：硕士

泻肺平喘灵处方来源于临床实践经验方,是针对肺炎咳喘、哮喘急性发作期痰瘀阻肺的特点,结合“肺与大肠相表里”的经典理论及“哮喘必当活血通腑”的学术观点研制的纯中药复方制剂,主要功效为宣肺平喘、通腑、活血,用以治疗小儿痰热壅肺... 详细信息

泻肺平喘灵处方来源于临床实践经验方,是针对肺炎咳喘、哮喘急性发作期痰瘀阻肺的特点,结合“肺与大肠相表里”的经典理论及“哮喘必当活血通腑”的学术观点研制的纯中药复方制剂,主要功效为宣肺平喘、通腑、活血,用以治疗小儿痰热壅肺证哮喘。经多年的临床实践验证,疗效确切。本课题根据处方中各中药的性质和文献报道的药理研究结果,结合临床用药的要求,运用现代科学技术将泻肺平喘灵制成颗粒剂并对其进行制备工艺、质量标准、初步稳定性的研究,拟定了泻肺平喘灵颗粒的质量标准草案。根据处方的功能主治和药物成分的性质确定药物的提取方法,采用正交实验法和多指标综合评分法进行最佳提取和精制工艺的筛选,最终确定泻肺平喘灵颗粒的制法为：取苦杏仁、丹参、白芥子加8倍量85%乙醇,回流提取3次,每次0.5小时,滤过,70℃真空段80～120mmHg减压浓缩回收乙醇,浓缩液备用;麻黄、瓜蒌皮、葶苈子、虎杖、大黄、甘草及上述醇提药渣首次加12倍水,浸泡35min,后两次加10倍水,共提取三次,每次加热回流提取1小时,滤过,滤液80℃真空段80～120mmHg减压浓缩至相对密度为1.07的稠膏,将稠膏醇沉至浓度50%后静置12h后,过滤,减压浓缩,回收乙醇;将上述两种浓缩稠浸膏混合均匀,再按稠膏：糊精=3：1比例混合均匀后,于75℃减压干燥,粉碎,即得药粉,取中间体药粉与淀粉：甘露醇按2：3的比例混匀,加入0.3%蛋白糖,1.0%枸橼酸,用12～14%的水制颗粒,60℃干燥,分装,每袋8克。在质量标准研究中,对方中麻黄、瓜萎皮、丹参、虎杖、大黄和甘草进行了薄层色谱鉴别并收入本品质量标准;采用高效液相色谱法对主要有效成分盐酸麻黄碱进行含量测定,对供试品的提取条件、色谱条件、线性、精密度、重现性、稳定性、加样回收率、样品进行测定,得出最佳的提取条件和色谱条件并通过了方法学考察,因此将含量测定方法列入质量标准正文,根据多批样品测定结果,制定了盐酸麻黄碱的含量限度,暂定本品每袋含盐酸麻黄碱不得少于3.60mg。初步稳定性研究中采用常温留样和加速试验进行稳定性考察,取样品三批,考察时间为0、1、2、3月,结果三批样品性状、鉴别、检查、含量测定等均符合质量标准规定。结论：该制剂工艺合理、可行,成品质量稳定可控。

关键词：泻肺平喘灵颗粒制备工艺质量标准初步稳定性考察

犬胆囊结石模型的构建与加味茵陈蒿汤胆囊灌洗干预作用的实验研究

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犬胆囊结石模型的构建与加味茵陈蒿汤胆囊灌洗干预作用的实验研究

作者：顾瑞南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:胆囊结石是临床常见病、多发病,结石形成的原因很多,包括全身和局部因素,胆囊局部感染和炎症是其中之一。炎症与结石相互影响。本研究拟构建犬胆囊结石模型,并探讨模型的构建方法,总结经验教训,以供类似实验研究参考;在此基础上,... 详细信息

目的:胆囊结石是临床常见病、多发病,结石形成的原因很多,包括全身和局部因素,胆囊局部感染和炎症是其中之一。炎症与结石相互影响。本研究拟构建犬胆囊结石模型,并探讨模型的构建方法,总结经验教训,以供类似实验研究参考;在此基础上,予加味茵陈蒿汤灌洗胆囊结石炎症模型,考察胆囊结石与胆囊炎症相互影响的初步机制。方法:19只比格犬适应性饲养1周后,通过手术在胆囊里植入结石并注射适宜浓度的稀盐酸,造成急性炎症反应,并在胆囊内植入一根导管至犬体外,人工构建通道,建立犬胆囊结石伴急性胆囊炎模型,5天后复查生化、B超,检测造模是否成功。造模成功犬采用随机数字法分为3组,每组4只。于第3周开始给药,空白模型组予生理盐水灌胆、口服对照组予加味茵陈蒿汤灌胃,胆囊灌洗治疗组予加味茵陈蒿汤灌胆,连续给药10天后,各组犬股静脉抽血及摘取胆囊组织,检测其白细胞水平和肝功能,采用ELISA法检测犬血清、胆汁、胆囊黏膜中IL-1β的水平。结果:造模结果:12只犬造模成功。其他7只犬或死亡,或感染,或导管脱落因此无法进行药物灌胆试验,建模成功率为63%。加味茵陈蒿汤灌胆实验结果:①一般情况方面:犬体重减轻,精神差,叫声低微,摇尾无力,活动、进食量少、大便稀溏等情况,给药后陆续好转,模型组无干预缓解较慢,部分犬症状加重;②白细胞:组间比较,模型组白细胞数量最高,治疗组数量最低,治疗组与模型组具有可比性(P0.05)。④安全性:实验研究过程中,各组犬一般情况、饮食、二便除实验干预因素未见明显异常,灌洗胆囊和经口给药无明显不良反应,安全性可确定。结论:犬胆囊结石模型造模成功;实验证实,加味茵陈蒿汤治疗犬胆囊结石,能降低血清白细胞数量,减少血清、胆汁、胆囊黏膜中1L-1β含量,改善犬一般情况,具有一定的疗效。此方法可为临床治疗胆囊结石伴发急性胆囊炎行穿刺引流的患者提供参考依据。

关键词：胆囊结石实验动物犬模型灌洗胆囊

黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖及分泌神经营养因子的影响

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黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖及分泌神经营养因子的影响

作者：张农山南京中医药大学

学位级别：硕士

背景：黄芪(astragalus)是豆科黄芪属植物,为中医传统的益气药。祖国医学还认为黄芪有强化机体的作用,临床重用黄芪治疗半身不遂每有良效,沈跃建应用黄芪和川芎注射液治疗神经功能缺损患者,症状均有明显好转;现代药理研究认为黄芪有多... 详细信息

背景：黄芪(astragalus)是豆科黄芪属植物,为中医传统的益气药。祖国医学还认为黄芪有强化机体的作用,临床重用黄芪治疗半身不遂每有良效,沈跃建应用黄芪和川芎注射液治疗神经功能缺损患者,症状均有明显好转;现代药理研究认为黄芪有多方面的药理作用,如具有免疫调节、抗菌利尿、强心等作用,刘世清等研究中药黄芪对实验性脊髓损伤的神经保护作用,认为黄芪可以提高机体对创伤的修复能力,增加受损部位的供血,有利于神经的再生。嗅鞘细胞作为一种特殊类型的胶质细胞,不仅具有促进成年哺乳动物嗅感觉神经元不断更新的特点,还能促进中枢神经系统多种神经元存活和轴突生长。目前研究认为嗅鞘细胞这些功能部分源于培养时其分泌的多种营养物质,如神经生长因子、脑源性神经营养因子等,嗅鞘细胞的特殊生物学特性使其被广泛应用于临床,在促进神经功能恢复和改善患者生活质量方面起到了积极的作用,成为神经损伤患者的新希望。本试验运用中西医结合的思维,强调综合治疗的原则,通过对祖国医学治疗方法机理的研究,以期用中西医结合的临床治疗思路给神经功能缺损患者带来更大福音,也进一步推广中药提供理论依据。目的：探讨嗅鞘细胞的生物学特性,探寻中药黄芪养嗅鞘细胞的作用。方法：体外培养嗅鞘细胞,并拍照记录观察对比;采用MTT法和流式细胞仪检测黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖的影响;用酶联免疫法测定培养上清的神经营养因子的含量。结果：MTT结果显示20ug/ml和2ug/ml浓度黄芪注射液能明显促进嗅鞘细胞增殖;流式细胞仪检测结果表明黄芪注射液能显著减少嗅鞘细胞凋亡数量;ELISA结果表明2ug/ml浓度黄芪能对嗅鞘细胞分泌神经营养因子有显著的促进作用。结论：用差速贴壁法成功地体外培养出嗅鞘细胞;黄芪注射液能促进嗅鞘细胞增殖及分泌神经营养因子。

关键词：黄芪嗅鞘细胞增殖神经营养因子