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基于BACTEC MGIT 960培养的结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染检测方法的研究

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中国防痨杂志 2024年

作者：陈振华郭婧玮王珏胡培磊易松林刘怡谭云洪湖南省胸科医院检验科

目的：探讨结核分枝杆菌复合群（Mycobacterium tuberculosis complex， MTBC）和非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacteria， NTM）混合感染的检测方法，为临床诊治混合感染提供参考依据。方法：使用脓肿分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞... 详细信息

目的：探讨结核分枝杆菌复合群（Mycobacterium tuberculosis complex， MTBC）和非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacteria， NTM）混合感染的检测方法，为临床诊治混合感染提供参考依据。方法：使用脓肿分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌3种NTM和MTBC标准菌株（H37Rv）各制备3种不同初始浓度(10-2mg/mL、10-4mg/mL和10-6mg/mL)的菌液，将每个浓度的NTM与MTBC采用9种不同比例（NTM标准菌株与H37Rv按照1∶99、5∶95、10∶90、20∶80、50∶50、80∶20、90∶10、95∶5和99∶1共9种比例）混合制成81种混合感染标本。3种感染模型分别为，脓肿分枝杆菌和H37Rv、鸟分枝杆菌和H37Rv、胞内分枝杆菌和H37Rv。经BACTEC MGIT 960培养，采用MPB64抗原检测、对硝基苯甲酸（PNB）生长试验、荧光PCR熔解曲线法和恒温扩增实时荧光法4种方法对培养液进行检测。结果：3种混合感染模型的81份标本均在34 d内报告阳性。其中，MPB64抗原检测阳性3份（3.7%，3/81）；PNB生长试验阳性78份（96.3%，78/81）；荧光PCR熔解曲线法仅检出相应的NTM 64份（79.0%，64/81），仅检出MTBC 3份（3.7%，3/81），同时检出相应的NTM和MTBC 14份（17.3%，14/81）；恒温扩增实时荧光法检出MTBC 67份（82.7%，67/81）。结论：临床标本经BACTEC MGIT 960培养，仪器报告阳性后，用MPB64抗原检测和PNB生长试验初判，若有NTM生长，建议采用分子生物学方法鉴定NTM，同时，用单一检测MTBC核酸的方法对培养液进行检测，以免MTBC 漏检。

关键词：分枝杆菌,结核非典型性细菌重叠感染培养技术研究技术

阿尔茨海默病中BACE1相互作用蛋白筛选及功能分析

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生物化学与生物物理进展 2024年第8期51卷 1904-1919页

作者：刘聪聪王亚琦王培昌首都医科大学宣武医院检验科北京100053

目的β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1(β-site APP cleaving enzyme 1,BACE1)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)中淀粉样斑块形成的限速酶,其表达水平与活性在AD发生发展中起到关键作用。BACE1的相互作用蛋白可以通过直接结合、间... 详细信息

目的β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1(β-site APP cleaving enzyme 1,BACE1)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)中淀粉样斑块形成的限速酶,其表达水平与活性在AD发生发展中起到关键作用。BACE1的相互作用蛋白可以通过直接结合、间接结合、参与各种细胞信号转导通路等方式,直接或间接在BACE1的转录、翻译、修饰、胞内运输等各个环节对BACE1进行调节,从而参与AD的发生与疾病的进程。本研究拟筛选并验证BACE1的相互作用蛋白,为进一步深入阐明淀粉样斑块形成的机制提供新的依据。方法采用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)与质谱联合应用的技术富集并鉴定AD模型小鼠海马组织中BACE1的相互作用蛋白,通过生物信息学分析筛选与BACE1有潜在相互作用的蛋白质,采用Co-IP实验及免疫荧光共聚焦技术进行初步验证,并探究BACE1相互作用蛋白在AD细胞模型中蛋白质表达水平变化。结果本研究在AD组中共鉴定到与BACE1相互作用的差异表达蛋白614个。基因本体(GO)富集分析显示,AD组BACE1相互作用蛋白主要参与细胞内信号转导、靶向高尔基体囊泡的转运、浦肯野细胞层发育等生物学过程;京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示,AD中BACE1相互作用蛋白主要参与了PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路等神经退行性疾病相关通路。通过构建BACE1相互作用蛋白网络,筛选了12个可信度较高的相互作用蛋白,其中NSF、NUMB、HSP90aa1、SNAP91为首次发现的BACE1相互作用蛋白。经进一步验证,发现NSF与BACE1存在相互作用,并且在AD细胞模型中NSF表达水平上调。结论BACE1相互作用蛋白参与多种AD相关生物途径及信号通路,NSF为新鉴定到的BACE1相互作用蛋白,与BACE1存在相互作用。NSF在AD细胞模型中表达水平上调,预测NSF与BACE1蛋白间相互作用参与调节AD疾病的进程,为疾病的机制研究提供新的靶点和方向。

关键词： β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1 免疫共沉淀质谱法神经退行性疾病阿尔茨海默病

应用低温等离子技术灭活体外结核分枝杆菌效果的初步研究

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中国防痨杂志 2024年第5期46卷 557-561页

作者：薛莲剧猛黄毅赵国连张语豪王思翰雷颖党丽云左蕾西安市胸科医院超声科西安710100 西安市胸科医院检验科西安710100 西安市胸科医院耐药结核科西安710100

目的:初步探讨低温等离子技术在体外实验中对不同类型结核分枝杆菌的杀灭效果,旨在为结核分枝杆菌的杀灭提供新的技术和方法。方法:将结核分枝杆菌标准株(H37Rv)、广泛耐药结核分枝杆菌(extensive drug-resistant Mycobacterium tubercu... 详细信息

目的:初步探讨低温等离子技术在体外实验中对不同类型结核分枝杆菌的杀灭效果,旨在为结核分枝杆菌的杀灭提供新的技术和方法。方法:将结核分枝杆菌标准株(H37Rv)、广泛耐药结核分枝杆菌(extensive drug-resistant Mycobacterium tuberculosis,XDR-MTB)、耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-MTB)菌液接种在培养基上,于培养3周内配置成0.5麦氏浓度的菌悬液,再倍比稀释为试验用菌悬液,分别取2.0 ml菌悬液样品置于无菌试管中;分别采用低温等离子系统PLACOAG(止血、凝固)模式对菌悬液行0、3、6、9、12、15 s处理,随后放入培养箱,21 d后分别计算各组不同作用时间存活的菌落数、杀菌对数值及杀菌率。结果:(1)H37Rv菌株(F=20.313,P=0.003)、XDR-MTB菌株(F=13.956,P=0.006)及MDR-MTB菌株(F=20.355,P=0.006)不同作用时间杀菌对数值差异均有统计学意义;3种菌株在作用9 s时杀菌对数值比较差异有统计学意义(F=61.603,P=0.004),XDR-MTB菌株最低(0.50±0.00),H37Rv菌株居中(1.14±0.12),MDR-MTB菌株最高(1.23±0.00);3种菌株均于作用15 s时杀菌对数值达到最大值,MDR-MTB菌株为1.71±0.00,H37Rv菌株为1.83±0.00,XDR-MTB菌株为1.35±0.21。(2)H37Rv菌株(F=10.458,P=0.012)、XDR-MTB菌株(F=10.945,P=0.011)及MDR-MTB菌株(F=9.424,P=0.015)不同作用时间杀菌率差异均有统计学意义;3种菌株在作用9 s时杀菌率比较差异有统计学意义(F=287.890,P<0.001),XDR-MTB菌株最低[(68.25±0.00)%],H37Rv菌株居中[(92.59±2.10)%],MDR-MTB菌株最高[(94.12±0.00)%];3种菌株均于作用15 s时杀菌率达到最大值,MDR-MTB菌株为(100.00±0.00)%,H37Rv菌株为(99.26±1.05)%,XDR-MTB菌株为(96.35±5.16)%。结论:本研究通过体外实验证实了低温等离子技术对3种结核分枝杆菌均具有快速且明显的杀灭效果,但灭菌效果有所不同,需要制定个体化策略。

关键词：分枝杆菌,结核灭菌体外研究研究技术

肺癌患者合并肺部真菌感染的危险因素及其耐药性的Meta分析

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中华医院感染学杂志 2024年第4期34卷 531-537页

作者：郑迈克郭艳玲马尚王潮虹龙嗣博晏君王桂荣赵艳首都医科大学附属北京胸科医院检验科北京101149

目的系统评价肺癌患者合并肺部真菌感染危险因素及其耐药性.方法利用计算机检索维普(VIP)、万方数据库、中国知网(CNKI)、Web of Science及PubMed数据库,收集有关肺癌合并肺部真菌感染的危险因素及耐药相关的横断面研究,检索2012年1月—... 详细信息

目的系统评价肺癌患者合并肺部真菌感染危险因素及其耐药性.方法利用计算机检索维普(VIP)、万方数据库、中国知网(CNKI)、Web of Science及PubMed数据库,收集有关肺癌合并肺部真菌感染的危险因素及耐药相关的横断面研究,检索2012年1月—2022年12月刊登的文献.对文献进行质量评价与资料提取,使用R Studio软件进行Meta分析.结果纳入13篇文献,包括4157名患者,其中肺部真菌感染者837名,真菌感染率为20.13%;促进患者发生真菌感染的危险因素及OR值分别为年龄>65岁(OR=3.28,95%CI:1.04~10.28,P医院在真菌用药方面优先考虑氟胞嘧啶和两性霉素B.

关键词：肺癌真菌感染危险因素耐药性 Meta分析

多参数流式细胞术筛选急性早幼粒细胞白血病免疫表型特征

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 747-754页

作者：李婷伍平陈曼王爱先傅旻婧吴雪英甄军毅宫美维王卉北京陆道培医院病理与医学检验科北京100176 河北燕达陆道培医院检验科廊坊065201

目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒... 详细信息

目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒变异型APL(APLv)组24例,非APL[包括NPM1突变AML(NPM1 mut AML)、AML伴KMT2A重排等]组62例。采用MFC免疫分型法分析和比较各组侧向散射光(SSC)中位表达强度(MEI)及其白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MEI比值(T/L MEIR),CD34、髓过氧化物酶(MPO)、CD64和CD9的中位荧光强度(MDFI)及其上述参数白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MDFI比值(T/L MDFIR)差异;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价流式多参数模型对cAPL和非APL、APLv和非APL的鉴别诊断效能。结果:cAPL组SSC的MEI、T/L MEIR高于APLv组和非APL组(P均<0.05),且APLv组高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组CD34的MDFI均高于非APL组(P均<0.05),APLv组的CD34 T/L MDFIR高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组MPO、CD9的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05);cAPL组CD64的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05)。ROC曲线结果显示,SSC的MEI、CD64的MDFI、CD9的MDFI、SSC的T/L MEIR和CD9的T/L MDFIR诊断cAPL的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.932、0.816、0.893、0.960和0.894,诊断APLv的AUC分别为0.725、0.737、0.791、0.729和0.736,其对鉴别cAPL和非APL、APLv和非APL均有较好的诊断价值(P均<0.05)。结论:通过MFC方法可分析筛选APL的免疫表型特征,对cAPL、APLv和非APL患者进行鉴别诊断。

关键词：白血病,早幼粒细胞,急性流式细胞术免疫表型分型中位荧光强度鉴别诊断

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原发性肝癌实验室检查策略及进展

中华预防医学杂志 2024年第1期58卷 128-135页

作者：陈媛梁静李昀晖王雅杰北京大学地坛医院教学医院检验科北京100015 首都医科大学附属北京地坛医院检验科北京100015

原发性肝癌(简称肝癌)是全球癌症相关主要死亡原因之一,其早期诊断、早期治疗具有重要临床意义。肝癌检测手段主要包括血清学指标、影像学检查及风险评估模型等。随着科技发展与研究深入,肝癌实验室检查的灵敏度和特异性有了大幅度提升... 详细信息

原发性肝癌(简称肝癌)是全球癌症相关主要死亡原因之一,其早期诊断、早期治疗具有重要临床意义。肝癌检测手段主要包括血清学指标、影像学检查及风险评估模型等。随着科技发展与研究深入,肝癌实验室检查的灵敏度和特异性有了大幅度提升,但仍存在假阴性、早期诊断率低等现象。针对不同病因和不同流行率地区,各国均制定了适合自身国情的临床实践指南,指导风险人群进行有效预防并进行早期诊断和规范治疗。如何参照指南警惕和预防肝癌,建立适合中国国情的肝癌实验室检查策略对于我国肝癌防控防治具有重要意义。本文从实验室检查策略的角度,阐述肝癌相关检测手段的特点和优劣势,以及未来发展趋势对实验室技术的影响,为肝癌实验室诊断策略实际应用提供理论支撑。

关键词：原发性肝癌实验室检查诊断策略

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检验前智慧化流程再造与效果评估

中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 520-525页

作者：薛灏夏勇罗厚龙李明洋晏耀明纪玲北京大学深圳医院检验科深圳518036

目的:通过检验前智慧化流程再造,以提高工作效率并减少差错。方法:收集北京大学深圳医院2021年12月至2023年2月门诊的肿瘤和感染标志物检验样本,通过集成样本传输、样本分拣与二次转运及实验室自动化系统,并实现全流程信息化监控。比较... 详细信息

目的:通过检验前智慧化流程再造,以提高工作效率并减少差错。方法:收集北京大学深圳医院2021年12月至2023年2月门诊的肿瘤和感染标志物检验样本,通过集成样本传输、样本分拣与二次转运及实验室自动化系统,并实现全流程信息化监控。比较检验前智慧化流程自动识别的再造前后的样本人工介入节点、样本采集-检测、采集-报告的周转时间(TAT)、智能预稀释比例、自动识别出检验前差错数量,评估流程再造的效果。采用卡方检验、Fisher精确概率法、Mann-Whitney U检验进行统计学分析。结果:在实施智能化流程再造后,人工介入节点从原先的13个减少至2个;门诊患者肿瘤标志物一阶段改造后,采集-报告TAT中位数从185(141,242)min降至137(102,183)min( Z=-54.932, P检验前智慧化流程再造能够优化工作流程、提升效率、减少差错。

关键词：人工智能检验前智慧化流程再造周转时间预稀释

肺癌化疗患者血清TBNK淋巴细胞亚群水平变化与预后的相关性研究

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中国肿瘤临床 2024年第6期51卷 302-307页

作者：吕丽媛杨冬明倪超钱方王鹏飞北京京煤集团总医院检验科北京市102300

目的:探究肺癌化疗患者血清TBNK淋巴细胞亚群水平变化,并分析其与预后的相关性。方法:分析2020年1月至2023年6月就诊于北京京煤集团总医院的92例肺癌化疗患者,行标准方案化疗,检测首次化疗前、化疗1、3个周期后TBNK淋巴细胞亚群水平,化... 详细信息

目的:探究肺癌化疗患者血清TBNK淋巴细胞亚群水平变化,并分析其与预后的相关性。方法:分析2020年1月至2023年6月就诊于北京京煤集团总医院的92例肺癌化疗患者,行标准方案化疗,检测首次化疗前、化疗1、3个周期后TBNK淋巴细胞亚群水平,化疗结束后3个月评价预后,分为缓解组(63例)、未缓解组(29例),分析TBNK淋巴细胞亚群水平与预后的相关性。结果:Ⅲ期组化疗1、3个周期后CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(-)CD19^(+)低于Ⅳ期组,CD3^(+)CD8^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)高于Ⅳ期组(P<0.05);缓解组化疗1、3个周期后CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(-)CD19^(+)低于未缓解组,CD3^(+)CD8^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)高于未缓解组(P<0.05);肺癌化疗患者分期、预后与CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(-)CD19^(+)呈正相关,与CD3^(+)CD8^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)呈负相关(P<0.05);化疗3个周期后TBNK淋巴细胞亚群联合预测肺癌化疗患者预后的AUC最大,为0.907(P<0.05)。结论:肺癌化疗患者外周血TBNK淋巴细胞亚群变化与免疫功能状态及预后有关,监测相关指标水平可预测肺癌化疗患者预后。

关键词：肺癌 TBNK淋巴细胞亚群化疗 ROC曲线相关性危险度

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中国百日咳实验室检测及质量管理专家共识

中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 498-505页

作者：中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会柯江维冉飞钟龙青不详江西省儿童医院检验科贵州省人民医院检验科

百日咳是一种由百日咳杆菌通过飞沫传播,感染人类引起的急性呼吸道传染病。百日咳的规范化治疗的前提是早期、及时、准确识别感染者,实验室检测及质量管理对诊断和监测百日咳感染具有重要的临床价值。为提高百日咳实验室检测效率及质量... 详细信息

百日咳是一种由百日咳杆菌通过飞沫传播,感染人类引起的急性呼吸道传染病。百日咳的规范化治疗的前提是早期、及时、准确识别感染者,实验室检测及质量管理对诊断和监测百日咳感染具有重要的临床价值。为提高百日咳实验室检测效率及质量,为临床百日咳的诊断和治疗提供规范化数据支持和应用,中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会组织专家参考国内外相关文献指南,总结梳理百日咳实验室检测及质量管理研究进展,形成本共识。重点阐述实验室检测方法及质量管理在百日咳诊疗方面的临床应用,使百日咳的实验室检测更有效地服务于百日咳患者诊疗和预后评估。

关键词：百日咳传染病实验室质量管理