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雌激素受体α激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进成骨细胞的增殖与分化

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中国组织工程研究 2025年

作者：杨锋龙欢杨冯春张桂鑫姜涛陈庆真邵敏广州中医药大学第三附属医院广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学广东省第二中医院

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白... 详细信息

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白激酶的分子机制及对成骨细胞增殖、分化的影响。方法：(1)将传代的MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞分3组：空白对照组、mock组(转染pCDNA3.1对照质粒)、雌激素受体α组(转染pCDNA3.1-雌激素受体α过表达质粒)，RT-qPCR和Western blot法检测肝激酶B1、CaMKKβ和腺苷酸活化蛋白激酶α1 mRNA、蛋白及磷酸化水平。(2)ChIP-qPCR证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子互作；双荧光素酶实验证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子区域互作激活其转录表达。(3)细胞分3组：mock+shNC组、雌激素受体α+shNC组、雌激素受体α+shLKB1组，采用Western blot检测细胞中肝激酶B1、磷酸化肝激酶B1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α1蛋白的表达水平变化。(4)细胞分4组：mock组、雌激素受体α组、雌激素受体α+5μmol/L Compound C(腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂)组、雌激素受体α+10μmol/L Compound C组，Western blot法检测腺苷酸活化蛋白激酶信号通路相关蛋白和成骨分化相关蛋白的表达。细胞转染24 h后给予成骨诱导14 d，检测各组细胞碱性磷酸酶染色及活性情况。成骨诱导21d采用茜素红染色检测矿化结节形成情况。(5)按分组转染及不同浓度腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂预处理，通过CCK8检测细胞活力。结果与结论：(1)雌激素受体α能激活MC3T3-E1细胞中腺苷酸活化蛋白激酶信号通路；(2)雌激素受体α可促进肝激酶B1转录介导腺苷酸活化蛋白激酶信号通路激活；(3)雌激素受体α通过激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖分化，腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂干预下腺苷酸活化蛋白激酶α1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α、骨保护素、骨桥蛋白、Runx2蛋白表达下调，成骨细胞活力下降；(4)结果说明，雌激素受体α可通过肝激酶B1启动子激活腺苷酸活化蛋白激酶通路，促进成骨细胞增殖和成骨分化，起到防治骨质疏松症的作用。

关键词：绝经后骨质疏松症雌激素受体α过表达 AMPK 信号通路肝激酶B1 工程化组织构建

“白花蛇舌草-半枝莲”治疗原发性肝癌的机制研究:基于网络药理学、分子对接及体外实验验证

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南方医科大学学报 2025年

作者：徐朦陈丽娜吴金玉刘丽丽施美周灏张国梁广西中医药大学研究生院广西中医药大学金沙洲医院肾病科广西中医药大学第一附属医院风湿科安徽中医药大学附属医院感染科

目的通过网络药理学及分子对接探究“白花蛇舌草-半枝莲”的有效成分及其作用于原发性肝癌的主要生物过程及信号通路。方法通过TCMSP、Uniport、Genecards、String等数据库以及Cytoscape软件得出最终核心基因；通过ClueGo对药物-疾病... 详细信息

目的通过网络药理学及分子对接探究“白花蛇舌草-半枝莲”的有效成分及其作用于原发性肝癌的主要生物过程及信号通路。方法通过TCMSP、Uniport、Genecards、String等数据库以及Cytoscape软件得出最终核心基因；通过ClueGo对药物-疾病共有基因做GO、KEGG富集分析；通过Pubcham、RCSB、Autoduck把药物有效成分与最终核心基因进行分子对接，得出结合能最高药物有效成分；再通过CCK-8、细胞凋亡、Western blotting实验研究此药物有效成分对HepG2的作用。结果筛选得出最终核心基因为TP53、ESR1。GO分析显示主要生物过程为BP-regulation of apoptotic signaling pathway,negative regulation of cell population proliferation;CC-membrane raft; MF-protein kinase activity等。KEGG分析显示主要信号通路为Apoptosis,Proteoglycans in cancer,PI3K-Akt signaling pathway,Hepatitis B等。分子对接结果显示，药物有效成分与最终核心基因均可以在自然条件下进行对接，其中ESR1与ursolic acid结合能最高（-4.98 kcal/mol）。CCK-8、细胞凋亡、Western blotting实验显示ursolic acid对HepG2有明显抑制作用。结论 “白花蛇舌草-半枝莲”通过多种有效成分与原发性肝癌紧密结合，继而对原发性肝癌起到治疗作用。

关键词：白花蛇舌草半枝莲原发性肝癌网络药理学分子对接

外泌体miRNA差异表达可作为诊断慢性心力衰竭合并高尿酸血症患者新型分子标志物及靶基因功能分析

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南方医科大学学报 2025年

作者：陈志亮杨永刚黄霞成彦瞿媛衡琪琪符羽佳李可薇顾宁南京中医药大学附属南京中医院心血管病科南京中医药大学附属南京中医院检验科南京中医药大学附属南京中医院药学部南京中医药大学附属南京中医院急诊科南京中医药大学

目的分析慢性心力衰竭（CHF）合并高尿酸血症（HUA）患者血清外泌体miRNA的差异表达，探讨其作为CHF合并HUA新型诊断分子标志物的可能性，并对差异miRNA进行靶基因功能分析，分析作用靶点。方法以2020年9月～2023年9月南京中医药大学... 详细信息

目的分析慢性心力衰竭（CHF）合并高尿酸血症（HUA）患者血清外泌体miRNA的差异表达，探讨其作为CHF合并HUA新型诊断分子标志物的可能性，并对差异miRNA进行靶基因功能分析，分析作用靶点。方法以2020年9月～2023年9月南京中医药大学附属南京中医院心血管病科收治的CHF合并HUA患者为观察组（n=30），选择同期健康志愿者为对照组（n=30）。两组各选取6例样本，采用高通量测序分析血清外泌体中的差异表达miRNA，采用RT-PCR检测对未作高通量测序的观察组和对照组样本（n=24）进行验证，使用R软件进行GO、KEGG富集分析，预测差异表达miRNA的作用靶点，并通过动物实验验证临床筛查的差异miRNA。结果高通量测序分析显示，观察组患者共检测到42个差异表达的miRNA(18个上调，24个下调)，其中miR-27a-5p上调（P<0.001）,miR-139-3p下调（P<0.001）。RT-PCR检测显示，观察组患者血清外泌体中miR-27a-5p表达量上调（P=0.004）、miR-139-3p表达量下调（P=0.005）;ROC曲线下面积（AUC）分析发现，miR-27a-5p、miR-139-3p预测CHF合并HUA发病的AUC分别是0.708(95%CI:0.562-0.855)和0.734(95%CI:0.593-0.876)，两者联合预测CHF与HUA发病的AUC为0.899(95%CI:0.812-0.987)。对差异基因进行GO富集分析发现，细胞自噬是富集程度最高的靶点；KEGG功能注释显示，激活AMPK-mTOR信号通路可能是差异表达的miR-27a-5p和miR-139-3p作用靶点之一。进一步动物实验得到了相同的验证。结论血清外泌体中miR-27a-5p上调和miR-139-3p下调可作为精准诊断CHF合并HUA的新型分子标志物，激活AMPK-mTOR信号通路后促进心肌细胞的自噬反应可能是差异表达的miR-27a-5p、miR-139-3p的作用靶点之一。

关键词：慢性心力衰竭高尿酸血症外泌体微小RNA AMPK mTOR 自噬

左、右归丸干预PGC-1α/PPARγ对BMSCs线粒体生物发生的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：杨莹冯秀芝陈怡然王智民郭晛任艳玲辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

目的：基于“阳化气，阴成形”理论，探讨左、右归丸通过过氧化物酶体增殖激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)影响大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化过程中线粒体生物发生的分子机制，为左、右归丸防... 详细信息

目的：基于“阳化气，阴成形”理论，探讨左、右归丸通过过氧化物酶体增殖激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)影响大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化过程中线粒体生物发生的分子机制，为左、右归丸防治绝经后骨质疏松症（PMOP）奠定更多理论依据。方法：将骨髓间充质干细胞（BMSCs）分为成脂诱导组（MX组）、左归丸组（ZGW组）、右归丸组（YGW组）、补佳乐组（BJL组），采用流式细胞仪进行细胞鉴定；噻唑蓝（MTT）法绘制BMSCs的生长曲线，并检测左、右归丸对BMSCs增殖的影响；油红O染色法检测脂滴的形成；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测成脂相关因子PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、脂蛋白脂肪酶（LPL）蛋白，棕色脂肪相关蛋白PGC-1α、UCP1、PRDM16蛋白，线粒体生物发生相关PGC-1α、核呼吸因子1（NRF1）、核转录因子红系2相关因子2（NRF2）、TFAM蛋白的表达；RT-qPCR法检测成脂相关因子PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、LPL基因以及CytoB mtDNA拷贝数的表达；透射电镜观察线粒体超微结构。结果：与MX组比较，各给药组BMSCs增殖能力随干预时间增强而增强，药物干预后脂滴明显减少，成脂相关PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、LPL mRNA及蛋白表达水平显著下调（P<0.01）；棕色脂肪相关PGC-1α、UCP1、PRDM16蛋白表达水平显著上调（P<0.01）；线粒体数量增多，肿胀减少，双层膜和嵴结构清晰，同时内嵴断裂减少；线粒体CytoB基因拷贝数显著上调（P<0.01）；线粒体生物发生相关PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM蛋白表达水平显著上调（P<0.01）。结论：左、右归丸均能通过PGC-1α/PPARγ影响BMSCs线粒体生物发生以防治PMOP。

关键词：左归丸右归丸绝经后骨质疏松症 PGC-1α 线粒体生物发生

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基于“阳化气，阴成形”论治多系统萎缩

现代中医临床 2025年

作者：李秀芳王垚张含徐萱张凯歌陈志刚北京中医药大学北京中医药大学东方医院

多系统萎缩（multiple system atrophy，MSA）是一种罕见且致命的神经系统变性病，以自主神经功能障碍、多巴低反应的帕金森综合征和小脑综合征多种组合为特征。阳化气匮乏和阴成形不足是多系统萎缩发生的关键病机，阴阳俱虚是其迁延和... 详细信息

多系统萎缩（multiple system atrophy，MSA）是一种罕见且致命的神经系统变性病，以自主神经功能障碍、多巴低反应的帕金森综合征和小脑综合征多种组合为特征。阳化气匮乏和阴成形不足是多系统萎缩发生的关键病机，阴阳俱虚是其迁延和发展的重要因素。治疗应以阴阳双补为法，自拟温肾健脑方温补肾阳、益精填髓，兼顾护正气，使阴阳调和、脑髓得养。结合临床病案对基于“阳化气，阴成形”论治多系统萎缩的诊疗思路及用药经验进行介绍。

关键词：多系统萎缩阳化气阴成形温肾健脑

基于数据挖掘的非酒精性脂肪性肝炎动物模型应用分析

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世界中医药 2025年

作者：田蓉李开楊吴小梅杨梅黄敬赵琦贵州中医药大学贵州中医药大学第二附属医院

目的:探索非酒精性脂肪性肝炎(NASH)动物模型的动物种类、造模方法、阳性对照药、评价指标,以期为NASH基础研究提供参考。方法:以“非酒精性脂肪性肝炎”“动物模型”“NASH”“Nonalcoholic Steatohepatitis”“Animal Model”为主题... 详细信息

目的:探索非酒精性脂肪性肝炎(NASH)动物模型的动物种类、造模方法、阳性对照药、评价指标,以期为NASH基础研究提供参考。方法:以“非酒精性脂肪性肝炎”“动物模型”“NASH”“Nonalcoholic Steatohepatitis”“Animal Model”为主题词在国家知识基础设施数据库(CNKI)、中文科技期刊数据库(CCD)、中国学术期刊数据库(CSPD)及PubMed数据库进行检索。归纳总结实验动物的种类、性别、周龄、造模方式、阳性对照药、检测指标等,并进行分析。结果:共纳入423篇文献,NASH模型中应用最多的是雄性C57BL/6小鼠和斯泼累格·多雷(SD)大鼠,高脂饮食和蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食为最常见的造模方式;造模周期多选择56 d或84 d;检测频次较高的指标为组织病理学、血清生化指标;组织病理学使用最多的是苏木精-伊红染色法。多烯磷脂酰胆碱为频次最高的阳性干预药。结论:目前有多种NASH动物模型制备方法,但仍存在局限性,故通过对NASH动物模型的数据挖掘,为模型选择和模型改善提供参考和思路。

关键词：数据挖掘非酒精性脂肪性肝炎肝癖动物模型基础研究检测指标应用分析阳性药

基于“异病同治”理论探讨蒿芩清胆汤治疗病毒性肺炎的辨治思路及效应机制

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：彭鑫徐浩田梁磊栾哲宇王晗笑张益豪杨坤封继宏天津中医药大学天津中医药大学第二附属医院

异病同治是中医辨证论治的精髓，是指不同的疾病在发展过程中出现相同的病机变化或相同的证候表现时，可采用相同的原则和方法进行治疗。由于病毒致病类型的复杂性和高度变异性，不同类型VP的精准有效治疗一直是现代医学的研究重点和难... 详细信息

异病同治是中医辨证论治的精髓，是指不同的疾病在发展过程中出现相同的病机变化或相同的证候表现时，可采用相同的原则和方法进行治疗。由于病毒致病类型的复杂性和高度变异性，不同类型VP的精准有效治疗一直是现代医学的研究重点和难题。VP属于中医学外感热病、温病、疫病等范畴，蒿芩清胆汤是温病学清热祛湿代表方，多种呼吸道病毒感染所致的VP使用本方干预疗效显著。本研究在异病同治理论指导下，将蒿芩清胆汤治疗不同类型VP的相关研究进行有机串联，发现流感病毒性肺炎（IVP）、严重急性呼吸综合征（SARS）及新型冠状病毒肺炎（COVID-2019）在各自疾病发展的不同阶段均存在“湿热”共性病机，当上述疾病由湿热因素主导时，使用蒿芩清胆汤疗效斐然。现代药理研究证实蒿芩清胆汤可抑制病毒增殖、减轻发热反应、抑制炎症介质表达、调节免疫平衡，且本方君药具有极佳的抗病毒活性，组方蕴含着丰富的抗VP科学内涵。该文从异病同治视角出发，基于蒿芩清胆汤对不同类型VP的有效治疗实践及现代药理研究，挖掘其共治的中医理论基础，并在此基础上进一步探讨本方治疗不同类型VP的辨治思路及效应机制，分析其作用机制和特点，以期为蒿芩清胆汤治疗VP的临床应用及现代化研究提供依据与参考。

关键词：异病同治蒿芩清胆汤病毒性肺炎辨治思路效应机制

基于“因加而发”理论探讨中医药调控免疫炎症微血管损伤在肺炎恢复期“瘥后防复”中的作用

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：彭鑫徐浩田梁磊栾哲宇王晗笑杨坤封继宏天津中医药大学天津中医药大学第二附属医院

肺炎是全球范围内发病率和病死率较高的感染性疾病，其对机体的损害不局限于急性期。“因加而发”理论强调体内故邪停聚、新邪引动，新故合邪致病生，是对肺炎恢复期疾病的发病内涵的高度概括。肺炎恢复期机体存在免疫稳态破坏、持续低... 详细信息

肺炎是全球范围内发病率和病死率较高的感染性疾病，其对机体的损害不局限于急性期。“因加而发”理论强调体内故邪停聚、新邪引动，新故合邪致病生，是对肺炎恢复期疾病的发病内涵的高度概括。肺炎恢复期机体存在免疫稳态破坏、持续低度炎症和微血管损伤等病理改变，将持续影响身体机能，影响患者身体健康及生活质量，增加二次感染的风险。中医学认为肺炎乃因虚致病，恢复期以“气虚血瘀”为核心病机特点，此时机体正气未充、余邪未尽，易感外邪，使肺炎瘥后复发。“瘥后防复”作为中医学“治未病”理念的重要一环，强调在疾病恢复期仍需进行善后调摄，从而预防疾病复发。该文从“因加而发”发病观出发，针对疾病“气虚血瘀”的病机特点，探讨中医药调控免疫炎症微血管损伤在肺炎恢复期“瘥后防复”中的作用与内涵，以期为肺炎恢复期的有效防治拓展新思路。

关键词：因加而发免疫炎症微血管损伤肺炎恢复期瘥后防复理论探讨

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护场理论在原发性肝癌治疗中的应用浅探

现代中医临床 2025年

作者：张恺悦魏莱黄源鹏北京中医药大学东直门医院北京中医药大学厦门医院

原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）是临床常见的难治恶性肿瘤。护场理论源于中医外科学的疮疡治疗。中医学认为肿瘤是全身疾病的局部表现，现代医家将护场理论应用至包括PLC的肿瘤疾病中并取得良好效果。在微观层面，“护场”的... 详细信息

原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）是临床常见的难治恶性肿瘤。护场理论源于中医外科学的疮疡治疗。中医学认为肿瘤是全身疾病的局部表现，现代医家将护场理论应用至包括PLC的肿瘤疾病中并取得良好效果。在微观层面，“护场”的概念与肿瘤微环境相联系。基于护场理论的PLC治疗策略包括：依据疮疡半阴半阳证“阳变阴者多死，阴变阳者多生”的原则，进行平调阴阳和动态攻补；通过调补宗气来促进整体护场的形成以及先安未受邪之地，重视从肺论治；重视疏肝利胆、通利二便使邪有出路。通过调节机体正气与癌邪之间的关系，促进整体与局部护场的形成，为PLC的防治提供新的思路和方法。

关键词：原发性肝癌护场理论中医药治疗策略