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紫外交联免疫沉淀技术原理及其应用

生物化学与生物物理进展 2024年第1期51卷 136-144页

作者：杜亚琼王琬瑶高帆徐旸时文涛天津医科大学基础医学院遗传学系天津300070 南开大学医学院天津300071

紫外交联免疫沉淀(UV cross-linking immunoprecipitation,CLIP)技术最初建立于2003年。通过紫外交联、免疫沉淀、逆转录及后续的高通量测序等步骤,可在全转录组范围鉴定特定RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)的靶标RNA序列和结合... 详细信息

紫外交联免疫沉淀(UV cross-linking immunoprecipitation,CLIP)技术最初建立于2003年。通过紫外交联、免疫沉淀、逆转录及后续的高通量测序等步骤,可在全转录组范围鉴定特定RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)的靶标RNA序列和结合位点。在近20年的应用过程中,该技术被不断改进和完善,可操作性、实验结果的准确性都有所提升,技术的应用范围也有所拓展。本文对CLIP技术的基本原理、实验方法、实际应用进行介绍,着重比较几种主流CLIP技术的异同,并对如何选择具体的技术路线提出建议。

关键词：紫外交联免疫沉淀高通量测序 RNA结合蛋白

氢氧化钠碱蚀法改善3D打印PCL/β-TCP网状支架表面亲水性及其性能研究

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西安交通大学学报（医学版） 2024年第3期45卷 508-513页

作者：郭芳曾辉黄硕刘宁郭亚媛张予淇刘昌奎西安医学院口腔医学院牙颌面组织再生与修复研究中心陕西西安710021 兰州大学口腔医学院甘肃兰州730000

目的为解决聚己内酯(polycaprolactone,PCL)/β-TCP骨组织工程支架表面亲水性不足的问题,通过NaOH蚀刻法改善3D打印PCL/β-TCP支架表面微形貌,进一步影响其亲水性和细胞反应。方法采用3D打印熔融沉积成型(fused deposition modeling,FDM... 详细信息

目的为解决聚己内酯(polycaprolactone,PCL)/β-TCP骨组织工程支架表面亲水性不足的问题,通过NaOH蚀刻法改善3D打印PCL/β-TCP支架表面微形貌,进一步影响其亲水性和细胞反应。方法采用3D打印熔融沉积成型(fused deposition modeling,FDM)技术制备PCL/β-TCP网状支架,通过NaOH蚀刻法进行支架表面粗糙化改性,观察NaOH浓度、时间2项反应参数对支架改性前、后在微观形貌、能谱元素、接触角、压缩强度、细胞黏附等性能方面的影响。结果经NaOH蚀刻后成功制备PCL/β-TCP网状支架表面微孔结构。随着NaOH浓度、时间任一种参数的增加均会导致支架表面微孔增大、材料表面接触角减小,但NaOH处理参数为1 mol/L(24 h)或10 mol/L(6 h)的蚀刻支架,其压缩强度与未处理组对比,差异没有统计学意义(P=0.071);蚀刻支架上细胞数目增多,单个细胞铺展面积大,在骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附增殖上更具优势。结论采用NaOH蚀刻法改善3D打印PCL/β-TCP骨组织工程支架亲水性的方法是一种低成本的有效策略,可有效改善支架湿润性和细胞黏附。

关键词：聚己内酯(PCL)/β-TCP 3D打印骨组织工程支架 NaOH 亲水性

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金属镁催化高张力三元环系的不对称开环反应

科学通报 2024年第23期69卷 3367-3382页

作者：吕佳明王林清王锐杨东旭兰州大学基础医学院甘肃省新药临床前研究重点实验室多肽研究创新单元(2019RU066)兰州730000 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

利用储量丰富、廉价易得、低污染元素作为催化资源构筑重要立体化学结构具有重要研究意义.含杂原子的手性化合物,例如手性氨基醇类、手性酰胺类、取代四唑类,吲哚衍生物、吡咯烷衍生物等结构单元广泛存在于天然产物中,并且在药物研发过... 详细信息

利用储量丰富、廉价易得、低污染元素作为催化资源构筑重要立体化学结构具有重要研究意义.含杂原子的手性化合物,例如手性氨基醇类、手性酰胺类、取代四唑类,吲哚衍生物、吡咯烷衍生物等结构单元广泛存在于天然产物中,并且在药物研发过程中具有重要的价值.高效构建以上结构单元一直以来都是化学、生命科学、药学科研工作者重点关注的问题.三元环系结构具有较大的环张力,导致其稳定性低,因此具有较高的反应活性.重要三元环系化合物主要包括:环氧乙烷(oxirane)、氮杂环丙烷(aziridine)以及供体-受体环丙烷(donor-acceptor,D-A cyclopropane),这些结构的不对称开环反应成为构建上述重要结构骨架的合成砌块.值得注意的是,近些年在金属催化剂催化策略下,经三元环类化合物的不对称开环反应高效构建高对映选择性的含杂原子结构片段及杂环骨架受到了广泛的研究关注.同时,伴随了多种催化策略的发展.本文主要综述了近年基于金属镁催化策略的三元环类化合物不对称开环反应研究进展,讨论了基于不同类型亲核试剂及催化条件下的开环反应途径和方法,阐述了反应的相关应用,探讨了部分机理过程.最后,对三元环类化合物不对称开环反应当前的发展状况进行了总结,并在此基础上进行了相关展望.

关键词：镁催化氮杂环丙烷氧杂环丙烷 D-A环丙烷不对称开环反应

缺氧对胃癌细胞生长和5-氟尿嘧啶化学治疗效果的影响

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中南大学学报（医学版） 2024年第3期49卷 392-399页

作者：周雅丽沈翌飞汪凯李一凡张静妍兰州大学第二医院/第二临床医学院萃英生物医学研究中心兰州730030 兰州大学第二医院/第二临床医学院兰州730030 兰州大学第二医院/第二临床医学院皮肤科兰州730030

目的:缺氧是造成胃癌化学治疗(以下简称“化疗”)耐药的重要原因,但目前对单纯缺氧环境下胃癌的生长情况了解甚少,本研究通过观察缺氧对胃癌细胞生长的影响,探讨缺氧环境中胃癌细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的反应。方... 详细信息

目的:缺氧是造成胃癌化学治疗(以下简称“化疗”)耐药的重要原因,但目前对单纯缺氧环境下胃癌的生长情况了解甚少,本研究通过观察缺氧对胃癌细胞生长的影响,探讨缺氧环境中胃癌细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的反应。方法:设置缺氧(1%氧气)及常规空气环境,将胃癌细胞MKN45分别置于上述环境中培养,同时设立化疗药物5-FU干预组。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法、JC-1线粒体膜电位法及Annexin-V/PI双染法检测不同氧含量环境中、不同干预组胃癌细胞的增殖及凋亡情况,流式细胞术检测细胞周期的改变,在电镜下观察细胞线粒体变化情况。结果:不加5-FU干预的情况下,缺氧组与常氧组相比,JC-1线粒体膜电位法、Annexin-V/PI双染法及CCK-8检测结果显示胃癌细胞早期凋亡、晚期凋亡率更高,细胞死亡率更高;流式细胞术检测结果显示细胞周期被阻止在G0/G1期,不进展;电镜结果显示线粒体破坏更严重。而在加入5-FU干预的情况下,缺氧组与常氧组相比,凋亡率低,细胞周期更易进展,线粒体破坏更少。结论:缺氧环境促进胃癌细胞凋亡甚至死亡,但是缺氧环境对化疗药物5-FU的起效产生反作用,可能是造成5-FU化疗耐药的因素。

关键词：缺氧胃癌 5-氟尿嘧啶

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MFG-E8调节小胶质细胞功能的研究进展

中国免疫学杂志 2024年第10期40卷 2214-2218页

作者：董颖苏刚高娟柴苗王禾张振昶兰州大学第二医院神经内科兰州730030 兰州大学基础医学院遗传研究所兰州730000

小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)中的常驻免疫细胞,在CNS生理和病理下均扮演着重要角色,可被多种理化因素激活产生促炎表型(M1型)和抗炎表型(M2型)。乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)与小胶质细胞生物学功能密切联系,可调节小胶质细胞在CNS... 详细信息

小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)中的常驻免疫细胞,在CNS生理和病理下均扮演着重要角色,可被多种理化因素激活产生促炎表型(M1型)和抗炎表型(M2型)。乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)与小胶质细胞生物学功能密切联系,可调节小胶质细胞在CNS相关疾病中发挥促进吞噬、抗炎、抑制氧化应激等神经保护作用,但同时调节细胞发挥促肿瘤效应,进而影响疾病的转归。本文就靶向MFG-E8调节小胶质细胞功能的作用展开综述,为今后寻找CNS相关治疗靶点提供依据。

关键词：小胶质细胞 MFG-E8 神经保护作用促肿瘤

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病理学领域指南与共识的制订方法与思考

中华病理学杂志 2024年第6期53卷 521-527页

作者：周奇陈耀龙梁智勇兰州大学基础医学院循证医学中心兰州730000 中国医学科学院循证评价与指南研究创新单元、兰州大学基础医学院兰州730000 中国医学科学院、北京协和医学院北京协和医院病理科、国家病理质控中心北京100730

病理诊断在医学中扮演着至关重要的角色,制订和实施高质量的病理学指南和共识,可以促进提升疾病诊断的准确率,降低不必要的误诊和漏诊。因此,本文将围绕国内外病理学指南和共识的研究现状、高质量指南和共识的制订方法以及指南与共识的... 详细信息

病理诊断在医学中扮演着至关重要的角色,制订和实施高质量的病理学指南和共识,可以促进提升疾病诊断的准确率,降低不必要的误诊和漏诊。因此,本文将围绕国内外病理学指南和共识的研究现状、高质量指南和共识的制订方法以及指南与共识的区别等主题展开论述,并在此基础上提出推动我国病理学指南和共识发展的思考与建议。

关键词：指南质量控制病理学共识制订方法

中国2021年医学博士学位论文的伦理报告情况分析

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中国循证医学杂志 2024年第3期24卷 348-354页

作者：周甜赵佳宁张娇燕郑卿勇申希平田金徽兰州大学第一医院兰州730000 兰州大学基础医学院循证医学中心兰州730000 甘肃省循证医学与临床转化重点实验室兰州730000 兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学公共卫生学院兰州730000 兰州大学基础医学教学研究中心兰州730000

目的调查以人体为研究对象的医学博士学位论文对伦理学原则的遵守情况,为提高医学类博士的伦理学意识提供依据。方法以中国博士学位论文全文数据库为数据来源,收集在2021年间发表的、以人体为研究对象的博士论文1733篇,比较双一流与其... 详细信息

目的调查以人体为研究对象的医学博士学位论文对伦理学原则的遵守情况,为提高医学类博士的伦理学意识提供依据。方法以中国博士学位论文全文数据库为数据来源,收集在2021年间发表的、以人体为研究对象的博士论文1733篇,比较双一流与其他高校、不同高校类型、不同专业、不同培养方向与招生类型、不同地区医学系列博士毕业论文的伦理学差异。结果2021年,我国医学博士关于涉及以人为研究对象的论文,提及伦理内容占比为73.34%,提及知情同意占比为86.27%。报告了伦理批准描述、伦理批准号、伦理批件、知情同意的论文仅占2.19%,12.52%的医学类博士对于伦理学与获研究对象知情同意内容未体现于学位论文中。结论我国医学类博士的伦理学意识及其学位论文的伦理信息报告情况均亟需提高与改善。

关键词：医学博士学位论文知情同意伦理报告情况

医学期刊发表中国指南和共识类文献科学性、透明性和适用性评级方法学———样本确定及专科分配

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协和医学杂志 2024年第2期15卷 429-434页

作者：刘辉杨楠史乾灵罗旭飞张海荣田金徽靳英辉陈耀龙 STAR工作组方法与技术专业委员会中国医学科学院循证评价与指南研究创新单元兰州大学基础医学院兰州730000 甘肃省循证医学重点实验室兰州730000 兰州大学健康数据科学研究院兰州730000 兰州大学基础医学院循证医学中心兰州730000 STAR工作组兰州730000 兰州大学第一临床医学院兰州730000 武汉大学中南医院循证与转化医学中心武汉430071 中华医学会杂志社指南与标准研究中心兰州730000 世界卫生组织指南实施与知识转化合作中心兰州730000 不详

随着指南科学性、透明性和适用性评级工具(Scientific,Transparent and Applicable Rankings tool for clinical practice guidelines,STAR)的研发,2021年和2022年医学期刊发表中国指南和共识STAR评级结果以及部分专科指南和共识STAR评级结果的发布,STAR评级受到医学界广泛关注。为进一步提升STAR评级的科学性和透明性,STAR工作组方法与技术专业委员会特撰写本文,对评级过程中的样本确定及专科分配进行详细介绍。

关键词：指南共识评价评级 STAR

转录因子HNF1α基因c.493T>C位点突变对其蛋白质水平的影响

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遗传 2024年第3期46卷 256-262页

作者：梁淑杰彭乙华雷佳红贾艾敏蒋红蔡燕川北医学院附属医院遗传与产前诊断中心南充637000 川北医学院附属医院内分泌科南充637000 川北医学院附属医院风湿免疫研究所南充637000 川北医学院检验医学院南充637000 川北医学院转化医学研究中心南充637000

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)... 详细信息

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)3型的致病原因,目前已报道的该基因的突变位点众多,如P291fsinsC、P112L等常见的突变位点,但其具体的分子机制尚不清楚。本研究对前期工作中发现的1例携带有HNF1α基因c.493T>C位点突变的MODY3患者,通过应用Mutation Surveyor软件分析突变位点的致病性,构建HNF1α野生型和突变型真核表达质粒,采用Western blot检测两种质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性变化,结果发现Mutation Surveyor软件分析提示c.493T>C位点突变可能为致病性变异基因,Western blot显示突变型真核质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性均明显降低,差异均具有统计学意义(PC(***165Arg)变异显著影响HNF1α的表达量及稳定性,可能为其导致疾病发生的原因,为后续深入探究MODY3的分子致病机制提供了新的方向。

关键词： MODY HNF1α 基因突变