检索结果-南通市图书馆

M1型乙酰胆碱受体在微波辐射致小鼠认知行为改变中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医杂志 2024年第4期60卷 43-49页

作者：何钢华潘婷冯志华崔智琳杨镁楹李杨左红艳邓桦佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528231 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京海淀100850

为了研究微波辐射对海马乙酰胆碱受体(AChRs)表达的影响,探讨微波辐射敏感的AChRs亚型及其在微波辐射致认知行为改变中的作用。本试验以C57BL/6N小鼠为试验对象,建立微波辐射动物模型,通过脑组织石蜡切片和苏木精-伊红(H.E.)染色,观察... 详细信息

为了研究微波辐射对海马乙酰胆碱受体(AChRs)表达的影响,探讨微波辐射敏感的AChRs亚型及其在微波辐射致认知行为改变中的作用。本试验以C57BL/6N小鼠为试验对象,建立微波辐射动物模型,通过脑组织石蜡切片和苏木精-伊红(H.E.)染色,观察海马阿蒙氏角1(CA1)、阿蒙氏角2(CA2)、阿蒙氏角3(CA3)和齿状回(DG)各亚区组织病理学变化;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测海马组织AChRs的表达;微波辐射后,采用M1型AChR激动剂VU0357017 hydrochloride以10 mg/(kg·bw)腹腔注射小鼠,利用新物体识别和Y迷宫试验评价小鼠认知行为改变。结果显示,微波辐射后7 d,小鼠海马CA3区病理改变较为明显,主要表现为神经元核固缩深染、血管周围间隙增宽;RT-qPCR结果显示,与空白对照组相比较,微波辐射后海马组织M1和M3型AChR mRNA相对表达量均显著下调(M1-AChR,P0.05);Y迷宫试验结果显示,辐射前后小鼠的自由交替率均未见统计学差异(P>0.05)。结果表明,微波辐射可引起海马AChRs亚基构成比发生变化,海马CA3区组织病理学改变,M1型AChR对于微波辐射所致认知行为功能下降具有重要的调控作用。

关键词：乙酰胆碱受体海马微波辐射

宿主ARF4和ARF5基因敲除小鼠的构建及其在寨卡病毒感染中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 2024年

作者：邓考李明圆张惠莹邓永强秦成峰秦源福建农林大学生命科学学院中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室香港中文大学化学病理系李嘉诚健康科学研究所

本研究旨在构建宿主ADP-ribosylation factor 4（ARF4）和ARF5基因敲除小鼠，明确ARF4和ARF5基因对寨卡病毒感染的作用。本研究首先利用CRISPR-Cas9技术，获得ARF4和ARF5单基因敲除小鼠（ARF4KO和ARF5KO），并通过杂交繁育获得双基因敲... 详细信息

本研究旨在构建宿主ADP-ribosylation factor 4（ARF4）和ARF5基因敲除小鼠，明确ARF4和ARF5基因对寨卡病毒感染的作用。本研究首先利用CRISPR-Cas9技术，获得ARF4和ARF5单基因敲除小鼠（ARF4KO和ARF5KO），并通过杂交繁育获得双基因敲除小鼠（ARF4KO/ARF5KO），通过PCR法鉴定小鼠基因型，定量RT-PCR法检测目标基因的敲除效果。之后，用寨卡病毒感染基因敲除小鼠，采集第2、4、6天小鼠血液和各组织样本，提取核酸后用RT-qPCR法检测病毒载量，用HE染色观察组织病理变化。结果显示，用ARF4和ARF5特异引物，分别在ARF4KO-/+、ARF5KO-/-以及ARF4KO-/+/ARF5KO-/-小鼠扩增到与目标基因大小一致的条带。RT-qPCR检测结果显示，ARF4KO-/+小鼠各组织中ARF4 mRNA水平显著降低，其敲除效率在37.8%-50%之间，ARF5无变化。ARF5KO-/-小鼠组织中ARF5 mRNA完全敲除，ARF4无变化。ARF4KO-/+/ARF5KO-/-小鼠在肺、肾和睾丸中ARF4 mRNA水平显著降低，ARF5完全敲除。最后，用寨卡病毒分别感染基因敲除小鼠和野生型小鼠。结果显示，与野生型小鼠相比，ARF4KO-/+小鼠在各时间点血清中病毒载量均显著下降，但ARF5KO-/-小鼠与ARF4KO-/+/ARF5KO-/-小鼠无明显变化。同时，与野生型小鼠相比，ARF4KO-/+小鼠各组织病毒载量没有显著降低，但其大脑和睾丸的病理性改变减轻。本研究利用CRISPR-Cas9技术成功构建了ARF4和ARF5基因敲除小鼠，并证实ARF4是寨卡病毒感染必需的宿主蛋白，为后续深入研究ARF4和ARF5在寨卡病毒感染致病中的作用机制以及抗病毒药物研发奠定了基础。

关键词： CRISPR-Cas9技术基因敲除小鼠 ADP-核糖基化因子4 ADP-核糖基化因子5

多房棘球蚴感染小鼠肝转录组分析及肝纤维化关键基因的筛选与验证

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年

作者：孙慧李立闫鸿斌李秀荣吴耀东何兴殷宏付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃省动物寄生虫病重点实验室国家动物包虫病专业实验室中国人民解放军海军军医大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

为探究多房棘球蚴感染引起宿主肝纤维化的关键基因变化，通过建立多房棘球蚴感染小鼠模型，利用高通量测序技术获得感染小鼠肝不同时间点差异mRNA表达谱，结合DisGeNET、GeneGard等数据库中已收录的肝纤维化相关基因集，挖掘感染进程中... 详细信息

为探究多房棘球蚴感染引起宿主肝纤维化的关键基因变化，通过建立多房棘球蚴感染小鼠模型，利用高通量测序技术获得感染小鼠肝不同时间点差异mRNA表达谱，结合DisGeNET、GeneGard等数据库中已收录的肝纤维化相关基因集，挖掘感染进程中影响肝纤维化的重要基因。结果显示，多房棘球蚴感染小鼠肝出现胶原纤维沉积；通过转录组测序数据结合vlookup函数检索，发现2943个肝纤维化相关基因在感染不同时间出现差异表达，其中显著上调的基因主要富集在PI3K-Akt等通路上，实时荧光定量PCR验证结果与高通量测序结果一致，通路中神经生长因子（Ngf）、肌腱蛋白C（Tnc）基因在肝星状细胞中表达量显著高于肝实质细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞，在小鼠原代肝星状细胞中敲低Ngf基因影响胶原基因Col1α1及Timp1的表达，推测这些通路和基因可能参与多房棘球蚴感染后致小鼠肝组织纤维化的过程。

关键词：多房棘球蚴转录组测序生物信息学纤维化神经生长因子

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

乌司他丁对脓毒症急性骨丢失的保护作用

中国组织工程研究 2024年第35期28卷 5649-5655页

作者：杨鹏唐玉彬杨京刘健姚润杰陈林苏楠陆军军医大学大坪医院骨质疏松与骨发育中心/战伤组织修复与康复医学研究室/全军军事训练伤防治与康复实验室/创伤与化学中毒国家重点实验室重庆市400042 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院急诊科甘肃省兰州市730050 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北省武汉市430030

背景:在脓毒症引发的全身炎症情况下机体会出现骨量快速丢失的现象,目前尚缺乏有效的治疗办法。乌司他丁作为一种抑炎类药物在全身炎症情况下对骨骼的具体保护作用和机制尚不明确。目的:探讨乌司他丁对脂多糖导致的急性骨丢失是否有缓... 详细信息

背景:在脓毒症引发的全身炎症情况下机体会出现骨量快速丢失的现象,目前尚缺乏有效的治疗办法。乌司他丁作为一种抑炎类药物在全身炎症情况下对骨骼的具体保护作用和机制尚不明确。目的:探讨乌司他丁对脂多糖导致的急性骨丢失是否有缓解作用。方法:(1)动物实验:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,对照组腹腔注射生理盐水,模型组腹腔注射脂多糖,实验组腹腔注射脂多糖与乌司他丁,其中乌司他丁连续注射3 d,每组10只。乌司他丁注射14 d后,进行股骨CT扫描与病理切片观察。(2)细胞实验:分离培养C57BL/6小鼠颅骨原代成骨细胞,分3组处理,对照组常规培养,模型组加入脂多糖,实验组加入脂多糖与乌司他丁,检测细胞增殖与成骨分化情况。分离培养C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,分3组处理,对照组常规培养,模型组加入脂多糖,实验组加入脂多糖与乌司他丁,检测破骨分化情况。结果与结论:(1)动物实验:CT扫描与苏木精-伊红染色显示,脂多糖处理后小鼠骨量减少,乌司他丁可提升脂多糖处理后小鼠的骨量。抗酒石酸酸性磷酸染色显示,模型组骨组织破骨细胞数量增加,实验组骨组织破骨细胞数量较模型组显著减少。(2)细胞实验:CCK-8检测显示脂多糖处理抑制了成骨细胞的增殖,乌司他丁可提升脂多糖处理后成骨细胞的增殖。碱性磷酸酶染色、茜素红染色及成骨相关基因(碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素、骨桥素、RANKL、OPG)检测显示,脂多糖处理可抑制成骨细胞的成骨分化,提升RANKL/OPG比值;乌司他丁对脂多糖诱导的成骨细胞功能降低无明显作用,但可降低RANKL/OPG比值。抗酒石酸酸性磷酸酶与破骨相关基因(抗酒石酸酸性磷酸酶、基质金属蛋白酶9)检测显示,脂多糖处理可促进骨髓单核细胞的破骨分化,而乌司他丁可抑制脂多糖诱导的骨髓单核细胞破骨分化。(3)乌司他丁可明显抑制脂多糖引起的骨丢失,主要通过促进成骨细胞增殖、直接或间接抑制破骨细胞分化来缓解骨丢失,达到骨保护的作用。

关键词：脂多糖乌司他丁脓毒症成骨细胞破骨细胞骨丢失

同方期刊数据库

基于深度神经网络的年龄预测模型的构建和评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

标记免疫分析与临床 2024年第3期31卷 519-526,533页

作者：吴佳慧崔雨萌魏子岚徐婕王友亮陈水平解放军医学院北京100853 中国人民解放军总医院第五医学中心检验科北京100039 军事医学研究院生物工程研究所北京100071 安徽医科大学解放军307临床学院合肥230032

目的利用GEO数据库筛选年龄相关的差异基因,构建和评价基于深度神经网络(DNN)的年龄预测模型。方法收集GEO数据库583例正常人的转录组数据,利用R语言的“limma”软件进行差异表达分析,进一步通过Lasso回归筛选年龄相关特征基因。构建深... 详细信息

目的利用GEO数据库筛选年龄相关的差异基因,构建和评价基于深度神经网络(DNN)的年龄预测模型。方法收集GEO数据库583例正常人的转录组数据,利用R语言的“limma”软件进行差异表达分析,进一步通过Lasso回归筛选年龄相关特征基因。构建深度神经网络模型,训练集数据优化模型后,采用测试集数据对模型进行评价。结果共筛选出156个年龄相关特征基因,采用15个年龄相关特征基因构建的DNN年龄预测模型效果最佳,其最大误差、中位数误差和均方根误差分别为11岁、4岁和6岁。与弹性网络回归算法(ENR)、随机森林算法(RF)、随机梯度下降算法(SGD)和支持向量回归算法(SVR)相比,基于DNN的年龄预测模型误差最小,精度最高。15个年龄相关特征基因在HUVEC衰老细胞中的表达量也发生显著变化。结论本研究构建的基于DNN的年龄预测模型可准确和特异地预测年龄,在衰老相关疾病的发生机制、治疗和预后方面发挥重要作用。

关键词：深度神经网络年龄预测模型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

噪声性听力损失的遗传学研究进展

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第4期38卷 343-347,353页

作者：李丹阳王洪阳王秋菊中国人民解放军总医院第六医学中心耳鼻咽喉头颈外科医学部北京100853 南开大学医学院国家耳鼻咽喉疾病临床医学研究中心

噪声性听力损失(noise-induced hearing loss,NIHL)是由长期噪声暴露导致的获得性进行性感音神经性听力损失。尽管在相同的噪声环境下,暴露人群也具有个体易感差异。随着测序技术的发展,NIHL中涉及氧化应激、免疫炎症、离子稳态、能量... 详细信息

噪声性听力损失(noise-induced hearing loss,NIHL)是由长期噪声暴露导致的获得性进行性感音神经性听力损失。尽管在相同的噪声环境下,暴露人群也具有个体易感差异。随着测序技术的发展,NIHL中涉及氧化应激、免疫炎症、离子稳态、能量平衡、DNA损伤修复等机制的相关基因不断见诸报道,部分基因与噪声暴露指标存在交互作用。本文对近20年的NIHL相关基因多态性及基因-环境交互作用的人群研究进行综述,以期为NIHL风险预测模型构建及个性化干预制定提供依据。

关键词：噪声性听力损失遗传因素单核苷酸多态性基因-环境交互作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立

高技术通讯 2005年第5期15卷 77-81页

作者：马鸣潇金宁一王振国费东亮郑敏金扩世夏志平葛淑敏金明兰中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室长春130062 锦州医学院畜牧兽医学院锦州121001 不详

参照国内外已发表的禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法,根据AIV高保守、高特异的M蛋白基因设计了一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法.根据AIV HA基因... 详细信息

参照国内外已发表的禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法,根据AIV高保守、高特异的M蛋白基因设计了一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法.根据AIV HA基因设计了H5、H7、H9亚型的联合RT-PCR引物,其上下游引物分别位于裂解位点两侧,在确定各亚型单项RT-PCR检测方法的反应条件和反应体系的基础上,建立、优化了三联RT-PCR检测方法的反应体系和反应条件,并通过相关病毒、质粒、棉拭子检测,建立了AIV三联RT-PCR检测方法.最终建立了AIV系列RT-PCR检测方法,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为AIV检测、流行病学调查、致病性分析及疫苗使用等奠定了基础.

关键词： PCR检测方法禽流感病毒流行病学调查基因设计反应体系反应条件 AIV Virus PCR引物基因序列 H9亚型裂解位点疫苗使用通用型国内外相关 M蛋白 V系列致病性基础三联棉

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

O型口蹄疫病毒O／LZ株拯救

畜牧兽医学报 2008年第3期39卷 333-336页

作者：马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军金扩世中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室

以构建的口蹄疫病毒O/LZ株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜... 详细信息

以构建的口蹄疫病毒O/LZ株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定,结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒。同时用空斑试验法观察了拯救病毒及其母本毒株的生长特性,结果表明二者没有明显差异,这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础。

关键词：口蹄疫病毒 cDNA 转录产物 RNA

载基因壳聚糖纳米粒的制备及免疫增强作用的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2008年第2期28卷 37-41页

作者：计越金宁一鲁会军马鸣潇金明兰霍晓伟郑敏李旭刘慧娟中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室

目的:制备壳聚糖载基因纳米粒,并对其体外转染效率及其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。方法:以构建的口蹄疫DNA疫苗为模型药物,采用复凝聚法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和zeta电位;凝胶... 详细信息

目的:制备壳聚糖载基因纳米粒,并对其体外转染效率及其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。方法:以构建的口蹄疫DNA疫苗为模型药物,采用复凝聚法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和zeta电位;凝胶阻滞分析测定基因在纳米粒中的位置;用体外基因转染实验评价纳米粒的转染活性。用载基因壳聚糖纳米粒免疫雌性Balb/c小鼠,检测免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫水平。结果:所制备的载基因纳米粒形态规则、大多成球形,平均粒径约为150nm,多分散度基因几乎全部被包裹在纳米粒内部;体外基因转染实验表明壳聚糖作为一种新型的非病毒基因递送载体能够高效传递DNA进入BHK-21细胞,基因能够在该细胞中高效表达;小鼠免疫实验表明纳米粒不仅能诱导机体产生较高的细胞免疫水平,而且体液免疫水平也显著提高。结论:壳聚糖纳米粒能将基因递送到细胞内并且能够表达,小鼠免疫实验显示其具有良好的免疫增强效果。

关键词：壳聚糖纳米粒转染免疫原性