载基因壳聚糖纳米粒的制备及免疫增强作用的初步研究

作     者：计越 金宁一 鲁会军 马鸣潇 金明兰 霍晓伟 郑敏 李旭 刘慧娟 JI Yue;JIN Ning-yi;LU Hui-jun;MA Ming-xiao;JIN Ming-lan;HUO Xiao-wei;ZHENG Min;LI Xu;LIU Hui-juan

作者机构：中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2008年第28卷第2期

页      面：37-41页

核心收录：

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：吉林省科技发展计划资助项目(20040202-1) 

主　　题：壳聚糖 纳米粒 转染 免疫原性 

摘      要：目的:制备壳聚糖载基因纳米粒,并对其体外转染效率及其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。方法:以构建的口蹄疫DNA疫苗为模型药物,采用复凝聚法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和zeta电位;凝胶阻滞分析测定基因在纳米粒中的位置;用体外基因转染实验评价纳米粒的转染活性。用载基因壳聚糖纳米粒免疫雌性Balb/c小鼠,检测免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫水平。结果:所制备的载基因纳米粒形态规则、大多成球形,平均粒径约为150nm,多分散度0.26,zeta电位约为21mV;凝胶分析结果表明质粒DNA与壳聚糖分子间可以通过电性结合作用而完全结合,基因几乎全部被包裹在纳米粒内部;体外基因转染实验表明壳聚糖作为一种新型的非病毒基因递送载体能够高效传递DNA进入BHK-21细胞,基因能够在该细胞中高效表达;小鼠免疫实验表明纳米粒不仅能诱导机体产生较高的细胞免疫水平,而且体液免疫水平也显著提高。结论:壳聚糖纳米粒能将基因递送到细胞内并且能够表达,小鼠免疫实验显示其具有良好的免疫增强效果。