禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立

作     者：马鸣潇 金宁一 王振国 费东亮 郑敏 金扩世 夏志平 葛淑敏 金明兰 MA Mingxiao;JIN Ningyi;Wang Zhenguo;Fei Dongliang;Zheng Min;Jin Kuoshi;Xia Zhiping;Ge Shumin;Jin Minglan

作者机构：中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室长春130062 锦州医学院畜牧兽医学院锦州121001 不详 

出 版 物：《高技术通讯》 (Chinese High Technology Letters)

年 卷 期：2005年第15卷第5期

页      面：77-81页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 0810[工学-信息与通信工程] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 0812[工学-计算机科学与技术（可授工学、理学学位）] 

基　　金：国家科技攻关项目 

主　　题：PCR检测方法 禽流感病毒 流行病学调查 基因设计 反应体系 反应条件 AIV Virus PCR引物 基因序列 H9亚型 裂解位点 疫苗使用 通用型 国内外 相关 M蛋白 V系列 致病性 基础 三联 棉 

摘      要：参照国内外已发表的禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法,根据AIV高保守、高特异的M蛋白基因设计了一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法.根据AIV HA基因设计了H5、H7、H9亚型的联合RT-PCR引物,其上下游引物分别位于裂解位点两侧,在确定各亚型单项RT-PCR检测方法的反应条件和反应体系的基础上,建立、优化了三联RT-PCR检测方法的反应体系和反应条件,并通过相关病毒、质粒、棉拭子检测,建立了AIV三联RT-PCR检测方法.最终建立了AIV系列RT-PCR检测方法,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为AIV检测、流行病学调查、致病性分析及疫苗使用等奠定了基础.