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基于蛋白质组学探讨马鞭草苷对人冠状病毒229E感染小鼠肺损伤的治疗作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：孙绮悦郭姗姗高双荣包蕾耿子涵李舒冉赵荣华张敬升刘宪谢锐崔晓兰孙静中国中医科学院中药研究所

目的：评价马鞭草苷对人冠状病毒229E（HCoV-229E）体内、外感染模型的药理作用，并通过蛋白质组学分析，初步探究马鞭草苷的抗病毒作用机制。方法：体外采用细胞活力检测试剂盒-8（CCK-8）建立HCoV-229E感染人肺腺癌细胞系（A549）细... 详细信息

目的：评价马鞭草苷对人冠状病毒229E（HCoV-229E）体内、外感染模型的药理作用，并通过蛋白质组学分析，初步探究马鞭草苷的抗病毒作用机制。方法：体外采用细胞活力检测试剂盒-8（CCK-8）建立HCoV-229E感染人肺腺癌细胞系（A549）细胞损伤的模型，将A549细胞作为5组，正常组、模型组和3个马鞭草苷处理浓度组(125 μmol·L-1、62.5 μmol·L-1、31.25 μmol·L-1)，通过细胞存活率检测、免疫荧光染色方法评价马鞭草苷的细胞保护活性；体内将30只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、磷酸氯喹组、马鞭草苷高、低剂量组(40、20 mg·kg-1)，每组6只。建立HCoV-229E感染小鼠肺损伤模型评价马鞭草苷的治疗作用。分别通过检测肺指数、肺抑制率评价肺部损伤情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）评价肺部炎症因子的严重程度、微型计算机断层扫描（micro-CT）检测肺部的形态和结构、苏木素-伊红（HE）染色评价肺组织病理学改变；进一步采用四维数据独立组识别（4D-DIA）蛋白质组学方法，通过差异表达蛋白筛选、功能注释、富集分析及蛋白互作网络分析方法，初步分析马鞭草苷治疗HCoV-229E感染小鼠肺损伤模型的可能机制。结果：A549细胞选用HCoV-229E原倍浓度感染36 h建立体外感染模型，马鞭草苷的最大无毒浓度为125 μmol·L-1，半数细胞毒性浓度(CC50)值为288.8 μmol·L-1。与正常组比较，模型组细胞存活率显著下降（P<0.01），死亡细胞比例明显增加（P<0.01），线粒体损伤，膜电位明显降低（P<0.01）；而不同浓度马鞭草苷(125、62.5、31.25 μmol·L-1)处理后，均能显著提高细胞存活率（P<0.01），降低细胞死亡比例（P<0.01），并调节线粒体膜电位（P<0.01）。体内实验进一步验证了马鞭草苷对HCoV-229E感染小鼠的治疗作用。与正常组相比，模型组小鼠肺指数显著升高（P<0.01），肺组织损伤明显加重，肺部体积肿大，炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达显著升高（P<0.01）。而在马鞭草苷处理组中，这些病理改变显著改善，肺指数降低（P<0.01），肺组织损伤减轻，肺部体积肿大缓解，炎症因子表达也显著降低（P<0.01）。蛋白质组学分析结果显示，与正常组相比，模型组富集到多种与抗病毒免疫反应相关信号通路，包括核因子-κB（NF-κB）信号通路（P<0.05）。而与模型组相比，马鞭草苷组富集到多种与炎症反应和自噬相关的信号通路（P<0.05），提示马鞭草苷可能通过调节这些信号通路发挥其抗病毒和抗炎作用。结论：马鞭草苷在HCoV-229E感染体内、外模型中均表现出较好的治疗作用，其机制可能与NLRP3炎症小体通路和线粒体自噬有关。

关键词：马鞭草苷 HCoV-229E 蛋白质组学 A549 小鼠肺损伤肺部炎症

基于GPR37介导的炎症消散研究瘀血痹片对炎症性疼痛小鼠的干预作用

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中国中药杂志 2025年第1期 178-186页

作者：刘莹张国鑫姚雪敏王文丽黄奥晴王海平朱春燕林娜中国中医科学院中药研究所

为了调查瘀血痹片对炎症性疼痛小鼠外周及中枢炎症消散的干预作用是否与其对G蛋白偶联受体37（GPR37）的调控有关，该研究通过足底注射完全弗氏佐剂（CFA）构建炎症性疼痛小鼠模型，假手术组注射等体积生理盐水。小鼠随机分为假手术组... 详细信息

为了调查瘀血痹片对炎症性疼痛小鼠外周及中枢炎症消散的干预作用是否与其对G蛋白偶联受体37（GPR37）的调控有关，该研究通过足底注射完全弗氏佐剂（CFA）构建炎症性疼痛小鼠模型，假手术组注射等体积生理盐水。小鼠随机分为假手术组，模型组，布洛芬(91 mg·kg-1)组，瘀血痹片低、中、高剂量(60、120、240 mg·kg-1)组。造模第1～19天灌胃给药。以Von Frey法检测小鼠机械痛阈值，热板法检测热痛敏，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测脊髓中白细胞介素-10（IL-10）、转化生长因子-β（TGF-β）的含量，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及蛋白免疫印迹法检测脊髓中GPR37 mRNA及蛋白表达，免疫荧光法检测背根神经节中巨噬细胞抗原（macrosialin,又名CD68）、甘露糖受体（MRC1,又名CD206）、GPR37的表达及脊髓背角中离子钙结合衔接分子1（IBA1）、CD206、GPR37的表达。结果显示，与假手术组比较，模型组小鼠机械痛阈值显著下降，热缩足潜伏时间显著缩短，背根神经节中CD68、脊髓背角中IBA1表达明显增加，背根神经节及脊髓背角中CD206、GPR37表达明显降低，脊髓中IL-10、TGF-β含量明显减少。与模型组比较，瘀血痹片高剂量组小鼠机械痛阈值显著提高，热缩足潜伏时间显著延长，背根神经节中CD68、脊髓背角中IBA1表达明显减少，背根神经节及脊髓背角中CD206、GPR37表达明显上调，脊髓中IL-10、TGF-β含量明显增加。结果表明，瘀血痹片可通过上调CFA小鼠背根神经节及脊髓背角中GPR37的表达抑制巨噬细胞（小胶质细胞）浸润，促进巨噬细胞M2极化，提高IL-10、TGF-β的含量，促进外周及中枢炎症消散，进而发挥镇痛作用。

关键词：瘀血痹片炎症性疼痛炎症消散 G蛋白偶联受体37(GPR37)

疏风解毒胶囊调控TLR4/TRIF/TBK1信号通路改善人冠状病毒229E感染小鼠肺部炎症

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：包蕾耿子涵崔晓兰中国中医科学院中药研究所

目的：研究疏风解毒胶囊在人冠状病毒229E（HCoV-229E）感染小鼠模型中的抗炎和免疫调节作用。方法：将48只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、氯喹阳性组及疏风解毒胶囊高、中、低剂量组，每组8只。采用滴鼻感染HCoV-229E病毒液建立... 详细信息

目的：研究疏风解毒胶囊在人冠状病毒229E（HCoV-229E）感染小鼠模型中的抗炎和免疫调节作用。方法：将48只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、氯喹阳性组及疏风解毒胶囊高、中、低剂量组，每组8只。采用滴鼻感染HCoV-229E病毒液建立冠状病毒感染模型。感染后第4天脱颈椎处死小鼠，通过称量肺湿重和计算肺指数评估肺部病理变化，同时使用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timePCR）和蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测肺组织中 toll样受体4（TLR4）、Toll/白细胞介素-1受体（TIR）结构域包含的适配器诱导干扰素-β（TRIF）、肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）、TANK结合激酶1（TBK1）、磷酸化TANK结合激酶1（p-TBK1）、干扰素调节因子3（IRF3）及磷酸化干扰素调节因子3（p-IRF3）等关键基因mRNA和蛋白的表达水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠的肺指数显著升高，肺间质有大量炎症渗出，并显著升高TLR4、TRIF、TRAF6、TBK1、p-TBK1、IRF3和p-IRF3蛋白的表达（P<0.01），说明人冠状病毒229E引起了严重的肺部炎症。与模型组比较，疏风解毒胶囊各剂量组显著降低了小鼠的肺指数，其中高、中剂量组的肺指数抑制率分别为78.18%和79.27%（P<0.01）。同时，RT-PCR和Western Blot结果显示，疏风解毒胶囊中剂量组显著降低了TLR4、TRIF、TRAF6、TBK1、p-TBK1及p-IRF3的基因和蛋白表达水平（P<0.05）。结论：疏风解毒胶囊能够通过抑制Toll样受体4/含Toll/白细胞介素-1受体结构域的衔接蛋白诱导干扰素-β/TANK结合激酶1信号通路（TLR4/TRIF/TBK1）信号通路的过度激活，减轻冠状病毒感染引发的肺部炎症反应和组织损伤。

关键词：疏风解毒胶囊冠状病毒 TLR4/TRIF/TBK1信号通路免疫调节 HCoV-229E

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被泛化的阿是法

中国针灸 2025年第1期 105-109+122页

作者：牟东晓武晓冬赵楠琦丁楠袁静云中国中医科学院针灸研究所北京中医药大学针灸推拿学院

通过对阿是法源流考证文献进行逐条分析，提出当前阿是法存在泛化情况。经过系统研究和理论辨析后可知，阿是法就是源自于民间、广泛应用于民间的用于寻找缓解病痛部位的简易定位取穴方法，这是相较于官方正统经络腧穴学教育和治疗而言... 详细信息

通过对阿是法源流考证文献进行逐条分析，提出当前阿是法存在泛化情况。经过系统研究和理论辨析后可知，阿是法就是源自于民间、广泛应用于民间的用于寻找缓解病痛部位的简易定位取穴方法，这是相较于官方正统经络腧穴学教育和治疗而言的。阿是法是当时穷苦百姓在缺医少药情况下的无奈之选，是有一定局限性的。现代针灸医生在临床上须将阿是穴与十四经穴及经外奇穴等结合使用，并且结合现代医学知识和技术开展更为细致深入的研究。

关键词：阿是法阿是穴定位取穴揣穴

基于代谢组学和转录组学探究安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制

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中国中药杂志 2025年

作者：朱晓瞳田良良张晶晶杨洪军广东药科大学中医药研究院中国中医科学院中药研究所中国中医科学院中医药健康产业研究所中药药理江西省重点实验室北京脑科学与类脑研究中心中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室

该研究结合代谢组学和转录组学探讨安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制。利用经过优化处理的Feeney自由落体撞击技术成功构建了大鼠创伤性颅脑损伤（TBI）模型，依据随机数字表法将实验大鼠分为假手术（sham）组，模型（Mo... 详细信息

该研究结合代谢组学和转录组学探讨安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制。利用经过优化处理的Feeney自由落体撞击技术成功构建了大鼠创伤性颅脑损伤（TBI）模型，依据随机数字表法将实验大鼠分为假手术（sham）组，模型（Mod）组，阳性药物（吡拉西坦，piracetam）组，安宫牛黄丸低、高剂量（ANP-L、ANP-H）组。通过尼氏染色、免疫荧光检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、半胱天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）和肿瘤蛋白53（TP53）在脑组织的表达，酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠脑组织中炎症因子前列腺素内过氧化物合成酶2（PTGS2）表达水平。对sham组、Mod组和AGP-H组大鼠脑组织进行代谢组学与转录组学的分析，通过基因本体（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）进行富集分析，表示安宫牛黄丸干预TBI的作用机制。同时，整合代谢组学和转录组学分析发现了安宫牛黄丸干预TBI的代谢途径。结果表明，安宫牛黄丸显著增高TBI大鼠脑组织尼氏小体的数量，明显增高Bcl-2的表达量，明显减低caspase-3、TP53、PTGS2等蛋白的表达水平。与Mod组对比，AGP-H组明显上调12个差异代谢产物（DMs），下调了25个DMs，筛选出了5条关键的代谢路径，包括甘油磷脂代谢、嘧啶代谢，以及甘氨酸、苏氨酸和丝氨酸代谢，还有精氨酸与脯氨酸代谢、D-氨基酸代谢。转录组学发现了730个表达上调的差异基因（DEGs），以及612个表达下调的差异基因。富集分析显示，与炎症反应（inflammatory responses）及凋亡过程（apoptotic processes）紧密相关的生物学功能和包括磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）及MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）等关键信号通路得到了显著富集。结合转录组和代谢组的数据分析，识别出甘油磷脂、嘧啶和甘氨酸、苏氨酸及丝氨酸代谢等3个关键代谢路径。

关键词：安宫牛黄丸代谢组学转录组学创伤性颅脑损伤甘油磷脂代谢

整合医学背景下古代经典名方研发的关键问题探讨

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中国中医基础医学杂志 2025年

作者：郭敬陈琳李慧珍佟琳刘斌龚照元梁宁张海力刘思鸿车前子史楠楠中国中医科学院中医临床基础医学研究所中国中医科学院中医药信息研究所

古代经典名方是传承传统中医药文化的经典载体，具有较高的临床应用价值。古代经典名方以传统中医药理论为指导，积累了丰富的历史人用经验，是中药复方现代化研究的基础。然而，中医药理论研究共性技术体系尚不完善，且缺乏符合中药特... 详细信息

古代经典名方是传承传统中医药文化的经典载体，具有较高的临床应用价值。古代经典名方以传统中医药理论为指导，积累了丰富的历史人用经验，是中药复方现代化研究的基础。然而，中医药理论研究共性技术体系尚不完善，且缺乏符合中药特性的临床疗效评价模式，这导致了古代经典名方的研发仍存在诸多挑战。古代经典名方研发的顶层设计应以三结合审评证据体系为指导，基于整合医学开展处方临床价值评估；病证结合模式的临床疗效评价指标筛选；并结合人用经验情况进行临床试验的设计，最终形成临床价值评估-疗效指标筛选-临床试验确证的古代经典名方研发顶层设计模式，旨在为古代经典名方的研发提供参考。

关键词：古代经典名方中医药理论人用经验整合医学三结合审评证据体系

湖北地区苍术根腐病菌多基因分子鉴定及其致病力分析

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中国中药杂志 2025年

作者：王铁霖徐扬万修福吕朝耕闫滨滨杜用玺康传志郭兰萍中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室中国中医科学院中药研究所

为明确湖北地区苍术根腐病菌种类、致病力及分布特点，采用组织分离法对湖北主要苍术种植区根腐病样本样进行病原菌分离，在ITS序列初步鉴定为镰刀菌属的基础上，对EF1/EF2、Btu-F-FO1/Btu-F-RO1及FF1/FR1共3个管家基因进行了扩增、序... 详细信息

为明确湖北地区苍术根腐病菌种类、致病力及分布特点，采用组织分离法对湖北主要苍术种植区根腐病样本样进行病原菌分离，在ITS序列初步鉴定为镰刀菌属的基础上，对EF1/EF2、Btu-F-FO1/Btu-F-RO1及FF1/FR1共3个管家基因进行了扩增、序列测定；在此基础上，基于TEF基因序列构建系统发育树对病菌进行分类，同时采用灌根法测定了不同菌株的致病力。通过组织分离法共分离苍术根腐病菌株194株；采用3个管家基因进行分子鉴定，将病菌分别鉴定为茄病镰刀菌Fusarium solani、尖孢镰刀菌F. oxysporum、共享镰刀菌F. commune、木贼镰刀菌F. equiseti、三线镰刀菌F. tricinctum、芬芳镰刀菌F. redolens、藤仓镰刀菌F. fujikuroi、燕麦镰刀菌F. avenaceum、锐顶镰刀菌F. acuminatum和变红镰刀菌F. incarnatum共10个种，其中F. solani和F. oxysporum为苍术根腐病主要致病菌，广泛分布在多个地区，F. solani占分离菌株总数约为54%，F. oxysporum占分离菌株总数约为34%；其他菌株占比较少，总占比约为12%。致病力测定结果表明，菌株间致病力存在一定的差异，对湖北苍术根腐病优势菌种F. solani和F. oxysporum菌株致病力分化进行分析，发现二者均以强致病菌为主。该研究确定了湖北苍术根腐病菌种类、致病力及其在产区的分布情况，相关研究结果为进一步揭示苍术根腐病及其发生流行规律，以及苍术根腐病害科学防控提供了科学依据。

关键词：苍术根腐病遗传多样性致病力

“三结合”审评证据体系下中药新药中医药理论研究技术体系框架

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中国中医基础医学杂志 2025年

作者：车前子佟琳张华敏郑丹平梁宁李慧珍张海力陈琳程翠翠郭敬史楠楠中国中医科学院中医临床基础医学研究所中国中医科学院中医药信息研究所中国中医科学院中医基础理论研究所

本研究旨在为中药新药复方制剂组方的合理性、科学性、安全性、适用性提供科学依据，提出了中医药理论研究技术体系框架。该框架适用于具有中医药理论和人用经验的中药新药复方制剂，包括中药创新药、中药改良型新药和古代经典名方中药... 详细信息

本研究旨在为中药新药复方制剂组方的合理性、科学性、安全性、适用性提供科学依据，提出了中医药理论研究技术体系框架。该框架适用于具有中医药理论和人用经验的中药新药复方制剂，包括中药创新药、中药改良型新药和古代经典名方中药复方制剂。框架的主要研究步骤包括信息检索、信息收集、信息整合，并在每个步骤下列举了相关研究方法，辅助使用者形成标准化的处方来源、功能主治、组方原理、用量、基原、炮制、制法服法、禁忌等内容。该框架为中药新药研发奠定扎实的中医药理论基础，并为“三结合”审评体系下的中药新药审批提供支持。

关键词：中药新药中医药理论研究框架 “三结合”审评体系

面向中医药高维小样本的多组学数据融合方法初探

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中国中药杂志 2025年第1期 278-284页

作者：王念俞成诚杨虎王忠刘骏中国中医科学院中医临床基础医学研究所中央财经大学信息学院

随着大数据和人工智能技术的发展，组学技术在中医药研究中的广泛应用生成了大型实验数据集，跨尺度寻找海量数据之间的关联成为可能，由此也逐步进入数据密集型研究范式。重视技术及算力工具的多组学数据融合分析模式作为新兴方法之一... 详细信息

随着大数据和人工智能技术的发展，组学技术在中医药研究中的广泛应用生成了大型实验数据集，跨尺度寻找海量数据之间的关联成为可能，由此也逐步进入数据密集型研究范式。重视技术及算力工具的多组学数据融合分析模式作为新兴方法之一，或许是该领域的突破点。中医学的整体观念与多组学数据融合的理念呈现相似之处，但其数据类型呈现高维小样本特征，因此需要通过降维等的方式对数据进行处理。目前的挑战是如何选择适合数据的分析方法，增加对生理功能和疾病诊疗过程的系统理解。因此该文通过对多组学数据融合的理论和框架进行探索，分析中医药高维小样本多组学数据融合的方法，拟为中医药的发展提供思路。

关键词：多组学中医药数据融合高维小样本