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不同灰质结构亚型强迫症患者的动态功能连接异常分析

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中华精神科杂志 2024年第3期57卷 138-146页

作者：丁志鹏尚婷惠子李平李成冲杨旭齐佳乐韩佳奇秦晓青秦玮琪李善聪陈云辉吕丹王娜肖健刘万强齐齐哈尔医学院医学技术学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院精神卫生学院临床心理教研室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院精神卫生学院精神卫生研究所齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院精神卫生学院精神医学教研室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第四医院精神科齐齐哈尔161006

目的探讨不同灰质结构亚型强迫症患者静息状态下的动态功能连接(dynamic functional connectivity,dFC)模式,并探究不同亚型强迫症患者的异常灰质体积和dFC模式与临床症状的关系。方法前瞻性收集2013年9月至2020年3月就诊于齐齐哈尔医... 详细信息

目的探讨不同灰质结构亚型强迫症患者静息状态下的动态功能连接(dynamic functional connectivity,dFC)模式,并探究不同亚型强迫症患者的异常灰质体积和dFC模式与临床症状的关系。方法前瞻性收集2013年9月至2020年3月就诊于齐齐哈尔医学院附属第四医院(20例)和齐齐哈尔市精神卫生中心住院和门诊(28例)的共48例强迫症患者的临床资料,其中男33例,女15例,年龄18~45(27.1±6.7)岁。同期招募年龄匹配的健康对照者39名,其中男31名,女8名,年龄18~45(28.5±8.6)岁。对符合ICD-10诊断标准的48例强迫症患者(强迫症组)和39名健康对照(对照组)进行磁共振成像扫描。采用基于体素的形态学分析(voxel-based morphometry,VBM),使用半监督机器学习方法,以灰质体积为特征对强迫症组进行亚型分析,选取灰质体积异常的脑区为感兴趣脑区,进行基于全脑体素的dFC分析,探究异常灰质体积和dFC模式与强迫症临床症状之间的相关性。结果基于灰质体积,强迫症可分为2个亚型,其中亚型1为右中央后回灰质体积增加[809个体素;t=4.31;高斯随机场(Gaussian random field,GRF)校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾],亚型2为左颞上回灰质体积降低(1118个体素;t=-4.37;GRF校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾)。在亚型1中,右侧中央后回与左内侧额上回之间的dFC显著降低(187个体素;t=-4.42;GRF校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾);在亚型2中,左侧颞上回与左侧海马、左侧中央旁小叶之间的dFC显著降低(分别为272、99个体素;t=-4.69、-5.01;GRF校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾)。亚型1右侧中央后回与左内侧额上回之间的dFC值与病程呈负相关(r=-0.579;P=0.002,未校正);亚型2左侧颞上回与左侧海马之间dFC值与病程呈正相关(r=0.578;P=0.003,未校正)。结论静息状态下,基于灰质体积的不同亚型强迫症患者具有不同的dFC异常模式。

关键词：强迫性障碍亚型动态功能连接灰质体积机器学习异质性

中国弯颈霉多糖抗氧化和抑制氧化应激活性研究

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食品工业科技 2024年第2期45卷 333-341页

作者：白明健周颖程昊边聪李名正李林张春晶齐齐哈尔医学院医学技术学院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:探究中国弯颈霉菌丝体多糖(Tolypocladium sinense polysaccharide,TSP)的体外抗氧化活性和抑制过氧化氢诱导小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激导致的细胞凋亡。方法:采用热水浸提法提取中国弯颈霉菌丝体多糖,随后测定其超氧阴离子自由基(s... 详细信息

目的:探究中国弯颈霉菌丝体多糖(Tolypocladium sinense polysaccharide,TSP)的体外抗氧化活性和抑制过氧化氢诱导小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激导致的细胞凋亡。方法:采用热水浸提法提取中国弯颈霉菌丝体多糖,随后测定其超氧阴离子自由基(superoxide anion,O^(-)_(2)·)、羟自由基(hydroxy radical,·OH)、对1,1-二苯基苦基苯肼自由基(P-1,1-diphenylpicryl phenylhydrazine radical,DPPH·)清除能力;采用200μmol/L过氧化氢(hydrogenperoxide,H_(2)O_(2))诱导小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激,给予高剂量和低剂量TSP(0.625、0.156 mg/mL)进行保护,MTT法测定MIN6细胞生存率;倒置显微镜观察细胞形态;采用试剂盒测定培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf-2)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun N-terminal kinase,pJNK)相对表达量。结果:TSP对于三种自由基具有显著的清除效果;细胞实验结果显示,与过氧化氢模型组相比TSP高低剂量给药组细胞生存率显著上升(P<0.01,P<0.05);悬浮细胞数量极显著下降(P<0.01);培养基中LDH极显著含量下降(P<0.01);细胞凋亡率显著降低(P<0.01,P<0.05);细胞内SOD水平显著增高(P<0.01,P<0.05),丙二醛含量极显著下降(P<0.01);Western Blot结果显示相较于模型组,高剂量给药组Nrf-2表达量显著增高(P<0.05),高剂量和低剂量给药组pJNK表达量显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论:TSP具有显著的抗氧化活性,能够通过调节Nrf-2和pJNK的表达来减少氧化应激导致的细胞凋亡。

关键词：中国弯颈霉多糖抗氧化活性氧化应激细胞凋亡

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齐齐哈尔地区淡水螺体内4种吸虫幼虫的分子鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 360-366页

作者：李健科张静刘柳刘谦豪张浩齐齐哈尔医学院黑龙江齐齐哈尔161000

目的对分离自齐齐哈尔市嫩江流域淡水螺体内的4种吸虫幼虫进行分子生物学鉴定。方法2023年3-7月在齐齐哈尔市嫩江浏园段水域内采集淡水螺,分类鉴定后压碎螺壳,显微镜下观察内脏团,分离螺体内的吸虫幼虫。分别提取不同吸虫幼虫总DNA,PC... 详细信息

目的对分离自齐齐哈尔市嫩江流域淡水螺体内的4种吸虫幼虫进行分子生物学鉴定。方法2023年3-7月在齐齐哈尔市嫩江浏园段水域内采集淡水螺,分类鉴定后压碎螺壳,显微镜下观察内脏团,分离螺体内的吸虫幼虫。分别提取不同吸虫幼虫总DNA,PCR扩增吸虫幼虫内转录间隔区2 (ITS2),对扩增产物进行测序,利用Contig Express软件拼接后在NCBI网站进行序列比对。用MEGA 11.0软件以邻接法构建系统进化树并计算遗传距离。结果共采集到7种淡水螺(2 771只),其中阳性螺3种,分别为黑龙江短沟蜷(282只)、中国圆田螺(709只)和绘环棱螺(142只)。共检出4种吸虫幼虫,每只淡水螺只寄生1种吸虫幼虫,分别为寄生于黑龙江短沟蜷和绘环棱螺体内的幼虫a (阳性率25.23%,107/424),寄生于中国圆田螺体内的幼虫b (阳性率2.82%,20/709),寄生于黑龙江短沟蜷体内的幼虫c (阳性率0.70%,2/282)和寄生于中国圆田螺体内的幼虫d(阳性率0.56%,4/709)。幼虫a~d的ITS2目的序列扩增长度分别约为523、701、960和554 bp。基因测序及序列比对结果显示,幼虫a ITS2序列与Notocotylus ephemera (GenBank:OP720890.1)序列一致性最高,为98.49%;与N. ephemera和Notocotylidae sp.的遗传距离最近,均为0.014,推测幼虫a为背孔科吸虫。幼虫b ITS2序列与卷棘口吸虫(GenBank:GQ463130.1)序列一致性最高,为94.56%;与卷棘口吸虫的遗传距离最近,为0.085,推测幼虫b为棘口科棘口属吸虫。幼虫c ITS2序列与Echinochasmus suifunensis (GenBank:MT447049.1)序列一致性最高,为99.82%;与E. milvi的遗传距离最近,低于0.001,推测幼虫c为棘口科棘隙属吸虫。幼虫d ITS2序列与马尔科维奇侧殖吸虫(GenBank:OP106430.1)序列一致性最高,为92.36%;与Asymphylodora parasquamosa的遗传距离最近,为0.090,推测幼虫d为单睾科侧殖属吸虫。结论齐齐哈尔嫩江流域内淡水螺体内可能寄生有背孔科吸虫、棘口科棘口属和棘隙属吸虫、单睾科侧殖属吸虫,提示可能危害鱼类、家禽及哺乳动物健康。

关键词：淡水螺吸虫幼虫 ITS2序列种类鉴定

过氧麦角甾醇通过调控线粒体凋亡途径诱导人肝癌细胞凋亡

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3365-3372页

作者：王璐罗然赵音旭邹宇卜明林宇齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

探讨过氧麦角甾醇(ergosterol peroxide, EP)对人肝癌细胞凋亡的影响及其作用机制。利用cell counting kit-8(CCK-8)法检测0(空白对照)、2.5、5、10、20、40、80μmol·L^(-1)的EP作用于HepG2、SK-Hep-1细胞24、48、72 h后的细胞活力,并计算24、48、72 h的半数抑制浓度(IC_(50))。正式实验以0(空白对照)、10、20、40μmol·L^(-1)的EP与HepG2细胞共培养48 h后,使用活性氧(reactive oxygen species, ROS)荧光探针法检测EP对细胞内ROS的影响,使用线粒体膜电位荧光探针染色检测EP对细胞内线粒体膜电位的影响,使用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡数,使用AO/EB染色法检测不同浓度的EP对细胞凋亡形态的影响。使用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同浓度的EP对线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、胱天蛋白酶9(caspase-9)、活化的胱天蛋白酶9(cleaved caspase-9)蛋白表达的影响。结果表明,不同浓度的EP均可抑制肝癌细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性。与空白对照组相比,EP药物处理组ROS水平显著升高(P<0.05),线粒体膜电位显著下降(P<0.05),细胞总凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下调,Cyt-C、Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3表达均显著上调(P<0.05)。综上所述,EP可能通过调控线粒体介导的凋亡途径抑制肝癌细胞增殖,并诱导其凋亡。

关键词：过氧麦角甾醇肝癌线粒体膜电位线粒体凋亡活性氧

基于网络药理学及体外实验探讨过氧麦角甾醇对乳腺癌MCF-7细胞的作用机制

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3627-3635页

作者：罗然邓思琦赵音旭王璐任文康邹宇林宇卜明齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制,并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选,构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络,对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP... 详细信息

基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制,并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选,构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络,对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制活性,克隆形成实验检测EP对MCF-7细胞增殖影响;采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞的凋亡情况、线粒体膜电位及活性氧水平的变化情况;通过Western blot法检测EP对B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶蛋白(caspase)-7、活化的caspase-7(cleaved caspase-7)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸激酶B(AKT)蛋白表达水平的影响情况。结果显示,经网络药理学预测,得出EP与乳腺癌有173个共同靶点;KEGG富集分析结果显示EP治疗乳腺癌结果主要在癌症通路、PI3K-AKT信号通路、细胞衰老信号通路、病毒致癌作用等信号通路;MTT结果显示,与对照组相比,EP组MCF-7细胞的活性明显降低,呈时间-浓度依赖趋势;EP能够抑制乳腺癌细胞MCF-7集落形成;采用10、20、40μmol·L^(-1)的EP作用MCF-7细胞24 h后,MCF-7细胞总凋亡率均显著升高,线粒体膜电位均显著降低,活性氧水平均显著升高;此外,MCF-7细胞经过EP处理后,细胞内Cyt C、Bax、cleaved caspase-7蛋白的表达水平上升,p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平下降。研究表明,EP可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,减少集落形成,其机制可能与PI3K-AKT通路介导线粒体凋亡途径有关。

关键词：过氧麦角甾醇乳腺癌 MCF-7细胞网络药理学细胞凋亡线粒体膜电位活性氧

基于网络药理学与代谢组学和分子对接的整合药理学策略研究温胆汤治疗慢性阻塞性肺疾病的作用机制

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中国药学杂志 2024年第11期59卷 998-1010页

作者：牛旭东何溢琨何梓龙陈爱灵高文浩任腾飞朱珍珍汪芳任睿楠林松王天阳齐齐哈尔医学院基础医学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院基础医学院基础医学科研中心黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省药食同源资源与代谢性疾病防治重点实验室黑龙江齐齐哈尔161006

目的探讨温胆汤治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的作用机制。方法首先,基于网络药理学方法,利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、Swiss Target Prediction和Metascape等数据库,揭示温胆汤治... 详细信息

目的探讨温胆汤治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的作用机制。方法首先,基于网络药理学方法,利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、Swiss Target Prediction和Metascape等数据库,揭示温胆汤治疗COPD的潜在机制;其次,采用代谢组学方法,研究温胆汤对COPD诱发内源性代谢物紊乱的干预作用;最后,借助MetScape算法,整合网络药理学与代谢组学研究结果,并采用分子模拟对接和分子生物学方法,深入研究温胆汤治疗COPD的作用机制。结果网络药理学结果揭示温胆汤的102个潜在活性成分及其治疗COPD的98个潜在靶点。进一步分析显示温胆汤的11个潜在药效物质,包括3-叔丁基己二酸、6-甲基姜辣二醇双乙酸酯和甘草异黄烷酮等可能通过调节脂质与动脉粥样硬化、环磷腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)信号通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase-protein kinase B,PI3K-Akt)信号通路和白介素17(interleukin-17,IL-17)信号通路等发挥疗效。另一方面代谢组学研究显示,丙二醇、N-乙酰神经氨酸、苏氨酸、原胆酸、2-氧异戊酸酯、乙酰磷酸、柠檬酸盐和异丁酸等9种内源性物质,可能是温胆汤治疗COPD的关键代谢物。最后整合分析显示,脂质代谢与氨基酸代谢可能是温胆汤治疗COPD的关键过程,黄嘌呤脱氢酶(xanthine dehydrogenase,XDH)、激酶插入区受体(kinase insert domain receptor,KDR)、磷酸二酯酶5A(phosphodiesterase 5A,PDE5A)、细胞色素P450家族2亚家族C成员9(cytochrome P450 family 2 subfamily C member 9,CYP2C9)和成员19(cytochrome P450 family 2 subfamily C member 19,CYP2C19)等同氧化和炎症相关的基因可能是温胆汤发挥治疗作用的关键靶点;并且结果显示温胆汤可有效改善COPD大鼠肺部充血、水肿和炎性细胞浸润等多种病理状态,显著降低COPD大鼠肺组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量和丙二醛(malonaldehyde,MDA)活性,提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;而且分子对接结果也揭示了潜在药效物质与核心靶点基因之间的关联性。结论基于代谢组学、网络药理学和分子对接的整合药理学研究表明温胆汤可能通过调控炎症反应、氧化应激、脂质代谢和氨基酸代谢等途径实现治疗COPD的作用。

关键词：温胆汤慢性阻塞性肺疾病网络药理学代谢组学分子对接炎症因子

黄连解毒汤调节HIF-1α/VEGF信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 59-65页

作者：张英华吕翰林周建文樊丽李洋齐齐哈尔医学院精神卫生学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第一医院黑龙江齐齐哈尔161041 齐齐哈尔医学院医药科学研究院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨黄连解毒汤(HLJDT)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响。方法:40只5月龄APP/PS1小鼠,分为模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg^(-1)·d^... 详细信息

目的:基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨黄连解毒汤(HLJDT)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响。方法:40只5月龄APP/PS1小鼠,分为模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄连解毒汤低、中、高剂量(1.5、3、6 g·kg^(-1)·d^(-1)),C57BL/6小鼠8只为正常组。连续给药45 d,进行Morris水迷宫实验,测定脏器指数,透射电镜观察小鼠脑血管内皮细胞形态结构,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA及脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测APP、HIF-1α、VEGF mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠潜伏期明显延长(P<0.05),目标平台周围路程及时间明显缩短(P<0.05),脑和脾脏的脏器指数明显降低(P<0.05),血管内皮细胞核固缩,胞质不丰富,海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA蛋白表达增加(P<0.05),BDNF蛋白表达降低(P<0.05),APP、HIF-1α、VEGF mRNA表达增加(P<0.05)。与模型组比较,HLJDT高剂量组潜伏期明显缩短(P<0.05),目标平台周围路程及时间延长(P<0.05),脑和脾脏的脏器指数明显升高(P<0.05),血管内皮细胞细胞器结构较清晰,海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA蛋白表达降低(P<0.05),BDNF蛋白表达增加(P<0.05),APP、HIF-1α、VEGF mRNA表达降低(P<0.05)。结论:HLJDT可通过降低HIF-1α和VEGF表达来提高小鼠学习记忆能力,从而发挥对神经的保护作用。

关键词：黄连解毒汤淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) 血管内皮生长因子(VEGF)

基于UHPLC-ESI-QTOF-MS/MS成分分析、网络药理学与实验验证桑菊饮治疗急性肺损伤作用机制

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药物评价研究 2024年第10期 2227-2240页

作者：何梓龙任睿楠汪芳赵国安朱珍珍陈爱灵牛旭东姚怡草毛安迪张鸿飞李宇孟娜娜王天阳林松齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔医学院基础医学院

目的研究桑菊饮治疗急性肺损伤（ALI）的作用机制。方法采用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆飞行时间质谱法（UHPLC-ESI-QTOF-MS/MS）快速鉴别桑菊饮的入血成分，使用Swiss Target Prediction和GeneCards等数据库筛选桑菊饮入血成分... 详细信息

目的研究桑菊饮治疗急性肺损伤（ALI）的作用机制。方法采用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆飞行时间质谱法（UHPLC-ESI-QTOF-MS/MS）快速鉴别桑菊饮的入血成分，使用Swiss Target Prediction和GeneCards等数据库筛选桑菊饮入血成分关联靶点与ALI相关靶点，并通过Venny确认桑菊饮抗ALI潜在靶点。使用Metascape对交集靶点进行基因本体（GO）注释及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，通过String数据库与Cytoscape软件构建并分析蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络。基于分子对接对重要成分和靶点间相互作用进行验证，并进一步采用脂多糖（LPS）致ALI大鼠模型，借助实时荧光半定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）明确桑菊饮对ALI大鼠重要靶点（TNF、EGFR、STAT3、PTGS2）的调控作用。结果共检测出38个桑菊饮入血成分，获得220个药物潜在靶点、3 758个ALI治疗潜在靶点和145个交集靶点，筛选出10个核心成分（芦丁、苦杏仁苷、甘草苷等）。KEGG通路富集分析揭示桑菊饮可能通过影响花生四烯酸代谢、PI3K-Akt信号通路等多种生命过程，发挥抗ALI作用。分子对接结果表明，芦丁、苦杏仁苷、甘草苷等核心成分与TNF、EGFR、STAT3等关键靶点具有良好亲和力。qRT-PCR结果进一步显示桑菊饮可显著回调ALI导致的EGFR、TNF、STAT3、PTGS2等mRNA表达量的改变（P<0.01）。结论桑菊饮可能通过甘草苷、芦丁、苦杏仁苷等多成分干预TNF、EGFR、STAT3、PTGS2等多靶点，进而调节花生四烯酸代谢和PI3K-Akt等信号通路发挥治疗ALI作用。

关键词：桑菊饮急性肺损伤成分分析网络药理学芦丁苦杏仁苷甘草苷

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华支睾吸虫体内神经递质5-羟色胺的分布

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第1期42卷 78-82,90页

作者：刘柳张静李健科张浩张凤玉齐齐哈尔医学院医学技术学院黑龙江齐齐哈尔161000

目的了解华支睾吸虫体内神经递质5--羟色胺(5--HT)的分布规律。方法从感染麦穗鱼中消化分离华支睾吸虫囊蚴,以灌胃方式感染90只昆明小鼠(40~50个囊蚴/鼠),分别于感染后第10、20、30天安乐死处死小鼠,从肝门静脉收集虫体。醋酸洋红染色... 详细信息

目的了解华支睾吸虫体内神经递质5--羟色胺(5--HT)的分布规律。方法从感染麦穗鱼中消化分离华支睾吸虫囊蚴,以灌胃方式感染90只昆明小鼠(40~50个囊蚴/鼠),分别于感染后第10、20、30天安乐死处死小鼠,从肝门静脉收集虫体。醋酸洋红染色后光学显微镜下观察不同发育阶段虫体内各器官发育情况;同时进行5--HT免疫荧光染色,在激光扫描共聚焦荧光显微镜下观察虫体内5--HT的分布情况。结果醋酸洋红染色后光学显微镜下观察可见,感染后华支睾吸虫d10幼虫中,消化、排泄器官基本发育成熟,生殖器官未完全发育成熟,子宫内可见散在分布的虫卵;d20幼虫中,生殖器官发育成熟,子宫中虫卵数量增多,睾丸分支增多;d30成虫中,消化、排泄、生殖系统均发育成熟,子宫内虫卵较d20幼虫排列更紧密,睾丸增大且分支明显。5--HT免疫荧光染色后激光扫描共聚焦荧光显微镜下可见,d10幼虫的中枢经系统节、神经联合、口吸盘处荧光染色较强,在虫体内部器官中呈点状分布;d20幼虫的口吸盘附近神经联合处观察到少量神经细胞,除中枢神经系统外,虫体的排泄囊及排泄孔、生殖器官中出现5--HT荧光染色;d30虫体的消化、排泄、生殖器官中均出现5--HT荧光染色,睾丸的荧光染色较肠支、口腹吸盘等部位更强,虫体中存在较多神经细胞。结论5--HT广泛存在于华支睾吸虫虫体内,主要分布于肌肉组织丰富的器官及内脏。5--HT在同一发育阶段虫体内不同器官中的分布存在差异,在相同器官的不同发育阶段也存在差异。

关键词：华支睾吸虫发育 5-羟色胺

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