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人参皂苷Rg_(3)和大黄酸纳米乳的制备及其联合aPD-L1治疗三阴性乳腺癌的药效学研究

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中草药 2022年第16期53卷 4973-4981页

作者：张翡峰钱柯马莉莎赵悦施经斌许淑君熊阳浙江中医药大学药学院杭州浙江311402 浙江中医药大学中医药科学院杭州浙江310053

目的根据中医治疗肿瘤时提倡的“扶正祛邪”治则,选用中药人参和大黄的主要成分人参皂苷Rg_(3)(ginsenoside Rg_(3),G-Rg_(3))和大黄酸(rhein,Rhe)进行组合,制备G-Rg_(3)/Rhe纳米乳(G-Rg_(3)/Rhe NE),同时提高G-Rg_(3)和Rhe溶解度以利于注射给药,并利用该纳米乳联合程序性死亡受体配体1单抗(anti-programmed cell death ligand 1,aPD-L1)治疗三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)。方法采用紫外分光光度法分别测定G-Rg_(3)和Rhe在不同辅料中的溶解能力,筛选出合适的乳化剂、助乳化剂和油相。利用伪三元相图考察乳化剂与助乳化剂质量比(Km值)对纳米乳体系的影响,根据形成纳米乳区域面积大小选择适宜的Km值,优选G-Rg_(3)/Rhe NE的处方,并对其进行表征和稳定性评价。选用4T1Fluc原位乳腺肿瘤小鼠模型,评价G-Rg_(3)/Rhe NE联合aPD-L1抗TNBC的效果。结果G-Rg_(3)/Rhe NE的优化组分比为聚氧乙烯氢化蓖麻油EL35-聚乙二醇400-辛癸酸甘油酯-水,其质量比为1.33∶2.67∶2.80∶12.50,Km值为1∶2,G-Rg_(3)/Rhe NE的平均粒径为(84.8±1.1)nm,多分散性系数(polydispersity index,PDI)为0.21±0.02,ζ电位为(−11.30±0.43)mV。载药纳米乳中G-Rg_(3)、Rhe的包封率分别为96.51%、97.47%,两药共载的载药量为0.75%。G-Rg_(3)/Rhe NE联合aPD-L1,能显著抑制荷4T1Fluc小鼠的肿瘤生长。结论G-Rg_(3)/Rhe NE粒径均一、稳定性好,可联合aPD-L1增强其抗TNBC的效果。

关键词：人参皂苷Rg_(3) 大黄酸纳米乳三阴性乳腺癌 aPD-L1

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松弛素治疗肝纤维化的研究进展

中国现代应用药学 2022年第23期39卷 3171-3175页

作者：郦瑜洁熊阳浙江中医药大学药学院杭州311403 浙江中医药大学中医药科学院杭州310053

肝纤维化是肝内细胞外基质异常增生而降解减少的一种失衡性沉积的病理结果,是多种慢性肝病向肝硬化进展的共同反应,现在还没有药物被批准用于肝纤维化临床治疗。目前,纤维化可逆性已被确定为抗纤维化药物的重要原则和靶点之一。松弛素... 详细信息

肝纤维化是肝内细胞外基质异常增生而降解减少的一种失衡性沉积的病理结果,是多种慢性肝病向肝硬化进展的共同反应,现在还没有药物被批准用于肝纤维化临床治疗。目前,纤维化可逆性已被确定为抗纤维化药物的重要原则和靶点之一。松弛素治疗因其能减弱活化的肝星状细胞的纤维化特性并逆转已形成的纤维化而受到重视。本文从肝纤维化发病机制、治疗现状、松弛素的概述及其治疗机制进行综述,为拓展松弛素疗法提供依据和指导。

关键词：松弛素肝纤维化应用前景研究进展

基于线粒体形态特征与UPLC-Triple-TOF-MS整合分析的人参/三七心肌保护物质辨析研究

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2766-2775页

作者：史雪敬陈彦羽蔡思怡邵青赵筱萍浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 浙江大学药学院浙江杭州310058 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌... 详细信息

人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌细胞缺氧复氧损伤模型。采用荧光探针MitoTracker Deep Red标记心肌细胞线粒体,Hoechst 33342标记细胞核,使用高内涵荧光成像系统采集心肌细胞荧光图像,运用ImagePro Plus软件对图像自动批量处理并提取线粒体形态特征的量化参数,选取代表性参数用于评价线粒体形态功能改变进而筛选人参、三七有效组分;进一步整合UPLC-Triple-TOF-MS技术,筛选人参、三七有效成分。结果显示组分RS-2、RS-4、SQ-1、SQ-4可以同时显著提高线粒体3个形态参数值,增加线粒体长度、分支程度和面积,有效改善缺氧复氧损伤引起的心肌细胞线粒体形态改变。对有效组分的主要成分筛选发现20(R)-人参皂苷Rg_(3)、人参皂苷Re、七叶胆苷ⅩⅦ对心肌细胞线粒体保护作用最佳,进一步研究表明20(R)-人参皂苷Rg_(3)可能通过上调视神经萎缩蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)和线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,MFN2)表达,人参皂苷Re和七叶胆苷ⅩⅦ通过上调OPA1蛋白表达,促进线粒体膜融合,减轻线粒体损伤,从而发挥心肌细胞的保护作用。该研究为从人参、三七中发现创新药物提供了实验依据,也为中药心肌保护有效组分与有效成分的规模化筛选提供了新方法。

关键词：人参三七线粒体形态缺氧复氧活性成分心肌保护荧光成像

二硫化钼基纳米复合材料在癌症治疗中的研究进展

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化工新型材料 2022年第1期50卷 252-256,261页

作者：应佳妮万浩芳浙江中医药大学中医药科学院杭州310053

近年来,以二硫化钼(MoS_(2))为代表的二维过渡金属硫化物在生物医学领域得到了广泛的应用,MoS_(2)有望作为基础材料用于发展癌症的多模式治疗。通过表面改性后的MoS_(2)基纳米复合材料使多功能医疗系统成为可能。首先对二维过渡金属硫... 详细信息

近年来,以二硫化钼(MoS_(2))为代表的二维过渡金属硫化物在生物医学领域得到了广泛的应用,MoS_(2)有望作为基础材料用于发展癌症的多模式治疗。通过表面改性后的MoS_(2)基纳米复合材料使多功能医疗系统成为可能。首先对二维过渡金属硫化物的表面改性方法包括物理吸附和化学键合进行简单介绍。而后对基于MoS_(2)的纳米复合材料在癌症光热疗法、化学疗法、基因疗法等单一治疗策略及多种方法联合治疗中的研究现状进行系统性总结,并对其进行生物安全性评价。最后对未来的发展方向进行展望。

关键词：二硫化钼纳米复合材料癌症光热疗法化学疗法

连续切片三维重构技术在细胞超微结构研究中的应用

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电子显微学报 2022年第1期41卷 92-97页

作者：王博戴灵豪王林燕关旸徐纯依浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

目的:探究三维重构技术在细胞超微结构研究中的重要性。方法:收集Hela细胞,样品经OTO制样方法处理后进行连续切片,并通过扫描电镜收集序列切片背散射电子信号。通过Amira软件对图片集进行对中、分割处理及三维展示。结果:获得细胞三维... 详细信息

目的:探究三维重构技术在细胞超微结构研究中的重要性。方法:收集Hela细胞,样品经OTO制样方法处理后进行连续切片,并通过扫描电镜收集序列切片背散射电子信号。通过Amira软件对图片集进行对中、分割处理及三维展示。结果:获得细胞三维重构图,对线粒体长度、宽度和厚度进行了测定和统计,着重对线粒体内质网偶联三维结构进行了观察。结论:细胞三维可视化较二维图像能全面客观的展示超微结构,而连续切片三维重构技术在三维可视化研究中具有重要意义。

关键词：连续切片三维重构细胞超微结构

荷叶碱对小鼠肝AML-12细胞内脂质代谢的影响

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现代食品科技 2023年第11期39卷 18-24页

作者：徐豪王雪竹俞卓利高靖汝郭瑞李娇妹李松涛韩强浙江中医药大学公共卫生学院浙江杭州310053 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

该研究通过高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定荷叶中荷叶碱含量,对比分析25种荷叶中荷叶碱含量差异,并利用油酸诱导建立AML-12细胞脂质蓄积模型,研究荷叶碱对脂质代谢的影响。通过测定甘油三酯(Triglyce... 详细信息

该研究通过高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定荷叶中荷叶碱含量,对比分析25种荷叶中荷叶碱含量差异,并利用油酸诱导建立AML-12细胞脂质蓄积模型,研究荷叶碱对脂质代谢的影响。通过测定甘油三酯(Triglyceride,TG)含量和油红O染色情况,评估细胞脂滴蓄积情况;检测细胞内AMP依赖的蛋白激酶(Adenosine 5‘-Monophosphate-Activated Protein Kinase,AMPK)通路相关蛋白表达水平,探究荷叶碱影响脂质代谢的作用机制。经HPLC检测,发现荷叶品种间荷叶碱含量差异显著,其中佛座莲的荷叶碱质量分数最高,达0.68 mg/g,而金凤的荷叶碱质量分数最低,仅为0.22 mg/g。在脂质代谢研究中,与对照组相比,模型组在建模后脂滴数量显著增加,TG含量提升(P<0.01),P-AMPK和脂肪甘油三酯脂肪酶(Adipose Triglyceride Lipase,ATGL)在蛋白水平上表达显著降低(P<0.05);在荷叶碱的干预下,AML-12细胞的脂滴蓄积程度明显降低,TG含量显著减少(P<0.05),P-AMPK和ATGL的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。由此表明:不同荷叶品种间荷叶碱含量存在明显差异,荷叶碱可能是通过调控AMPK/ATGL途径调节AML-12细胞内脂质代谢。该结果可为荷叶的开发利用提供理论支持。

关键词：荷叶碱 AML-12细胞脂代谢高脂血症

高脂诱导下雄激素缺乏小型猪肾脏脂质沉积的关键基因表达分析

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中国病理生理杂志 2023年第2期39卷 305-313页

作者：范莹盈任裕杰凌云吕东颖蔡兆伟浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 浙江中医药大学中医药科学院动物实验研究中心浙江杭州310053

目的:探讨高脂诱导条件下雄激素缺乏小型猪肾脏脂质沉积及关键基因表达的变化。方法:将雄性五指山小型猪随机分为3组,即不去势(IM)组、去势(CM)组和去势+睾酮(CMT)组,每组6只动物,均饲喂高脂饮食。12周后检测血清肾功能指标,测定肾脏甘... 详细信息

目的:探讨高脂诱导条件下雄激素缺乏小型猪肾脏脂质沉积及关键基因表达的变化。方法:将雄性五指山小型猪随机分为3组,即不去势(IM)组、去势(CM)组和去势+睾酮(CMT)组,每组6只动物,均饲喂高脂饮食。12周后检测血清肾功能指标,测定肾脏甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量;进行肾脏苏木精-伊红(H&E)和油红O染色,观察其脂质沉积和组织病理学变化。利用转录组测序分析肾脏组织表达谱差异,并用RT-qPCR和Western blot方法验证参与TG合成、胆汁酸代谢和雌激素合成相关差异表达基因。结果:CM小型猪肾脏重量明显低于IM和CMT小型猪(P<0.05);与IM组和CMT组小型猪相比,CM小型猪血尿素氮含量显著升高(P<0.05),但血清肌酐和总蛋白水平没有显著变化;CM组小型猪肾脏内出现大量脂滴,且TG含量显著高于IM和CMT小型猪(P<0.05);与IM组和CMT组小型猪相比,CM组小型猪肾脏TG合成基因包括固醇调节元件结合转录因子1(SREBF1)、糖类应答元件结合蛋白(ChREBP/MLXIPL)和硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)等表达升高,而胆汁酸代谢和雌激素合成基因包括法尼酯X受体(FXR/NR1H4)和雌激素受体1(ESR1)表达下调;睾酮处理能够逆转去势小型猪肾脏内脂质沉积及相关基因表达变化。结论:ESR1和NR1H4可能通过影响SREBF1脂质合成途径参与高脂诱导的雄激素缺乏小型猪肾脏脂质沉积过程。这为老年男性慢性肾脏疾病防治提供了新思路。

关键词：肾脏脂质沉积雄激素缺乏小型猪高脂饮食

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高校科研公共平台数字化改革的探索与实践

实验室研究与探索 2023年第12期42卷 263-266,271页

作者：张世杰盛振华王博李昌煜浙江中医药大学中医药科学院杭州310053

高校科研公共平台立足数字赋能,不断推进数字化改革,但普遍存在系统性不强、集成度不高、“智慧”不足等问题。聚焦高校科研公共平台数字化改革三大需求,综合运用系统分析V字模型,借助物联网技术,构建多跨协同数字化改革场景,并以中医... 详细信息

高校科研公共平台立足数字赋能,不断推进数字化改革,但普遍存在系统性不强、集成度不高、“智慧”不足等问题。聚焦高校科研公共平台数字化改革三大需求,综合运用系统分析V字模型,借助物联网技术,构建多跨协同数字化改革场景,并以中医药科学院“数智科研”综合信息管理系统为例,对数字化改革探索与实践所取得的成效进行了总结,提出思考与建议,以期为同类科研公共平台数字化改革提供思路和参考。

关键词：公共平台数字化改革系统分析物联网技术管理系统

基于转录组学的冠心宁抗小鼠脑缺血再灌注损伤作用机制研究

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中国中药杂志 2022年第11期47卷 3015-3022页

作者：惠贤瑞金强何江敏刘雳赵筱萍浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 正大青春宝药业有限公司浙江杭州310023 浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

冠心宁是由丹参和川芎组成的现代中药制剂,具有活血化瘀、通脉养心的功效。临床研究表明其对于缺血性脑卒中具有一定的治疗作用,但具体机制尚未阐明。该研究采用转录组学探讨冠心宁抗小鼠脑缺血再灌注损伤的潜在作用机制并进行体外验证... 详细信息

冠心宁是由丹参和川芎组成的现代中药制剂,具有活血化瘀、通脉养心的功效。临床研究表明其对于缺血性脑卒中具有一定的治疗作用,但具体机制尚未阐明。该研究采用转录组学探讨冠心宁抗小鼠脑缺血再灌注损伤的潜在作用机制并进行体外验证。采用大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery embolization, MCAO)法构建小鼠脑缺血再灌注损伤模型,以小鼠神经功能评分、脑梗死面积、病理学形态、神经元损伤、细胞凋亡为指标,考察冠心宁对小鼠脑缺血再灌注损伤的药效作用。结果显示,冠心宁可以降低脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能评分,减轻脑梗死面积,改善脑组织病理学形态、神经元损伤及细胞凋亡。通过RNA-seq技术对小鼠脑组织RNA样本进行测序,以|log_(2)FC|>1、P<0.05为条件筛选差异表达基因,对297个共同差异表达基因进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,提示炎症反应、氧化应激、能量代谢、细胞凋亡是冠心宁抗小鼠脑缺血再灌注损伤的潜在作用机制。体外实验结果表明,冠心宁可下调p-NF-κB p65和p-p38 MAPK蛋白表达、上调PPARγ和PGC-1α蛋白表达,从而抑制TNF信号通路、激活PPAR信号通路,进而抑制炎症反应和改善氧化应激对缺氧复氧损伤SH-SY5Y细胞起到保护作用。该研究初步揭示了冠心宁抗小鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制,为冠心宁的临床应用提供参考依据。

关键词：冠心宁脑缺血再灌注损伤转录组学炎症反应氧化应激