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延长盐单胞菌生产依克多因高密度发酵工艺优化

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华东理工大学学报(自然科学版) 2024年

作者：张悦刘昊刘玮余君雄肖扬郇晶伟颜诚旭庄英萍王泽建华东理工大学生物工程学院

建立了延长盐单胞菌（Halomonas elongata DSM 2581T）高效合成依克多因的高密度发酵工艺。通过单因素实验、Plackett-Burman实验与Central Composite Design系统考察了合成培养基营养组分对H. elongata DSM 2581T发酵代谢的影响。优化... 详细信息

建立了延长盐单胞菌（Halomonas elongata DSM 2581T）高效合成依克多因的高密度发酵工艺。通过单因素实验、Plackett-Burman实验与Central Composite Design系统考察了合成培养基营养组分对H. elongata DSM 2581T发酵代谢的影响。优化结果显示，柠檬酸钠：3.00 g/L，氯化铵：3.00 g/L，氯化钠：80.00 g/L时能够显著促进H. elongata DSM 2581T菌体的生长和产物合成。进一步，根据H. elongata在5 L发酵罐中优化后的培养基条件下的生长代谢情况，建立了葡萄糖连续流加和pH反馈控制（氨水）的补料方式进行H. elongataDSM2581T高密度发酵工艺，进一步实施了将对数生长期发酵液中NaCl浓度从8%提升到13%的快速盐梯度冲击策略，发酵13 h后OD600最高达到169.3，依克多因产量和合成速率分别达到20.0 g/L和1.54 g/（L·h）。这项研究为实现依克多因的低成本、高效率工业化生产提供了理论指导。

关键词：延长盐单胞菌合成培养基高细胞密度培养依克多因盐冲击

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含卟啉聚肽的合成及其自组装行为研究

高分子学报 2024年第2期55卷 172-181页

作者：王寅超郑家豪张伟安蔡春华林嘉平华东理工大学材料科学与工程学院上海200237

以带有炔丙基端基的聚(γ-苄基-L-谷氨酸酯)(PBLG)和含单叠氮基团的卟啉衍生物(TFPP-N3)为反应物,利用点击反应,合成了含卟啉聚肽(TFPP-PBLG).运用核磁共振氢谱(1H-NMR)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、紫外-可见光光度计(UV-Vis)和凝胶渗... 详细信息

以带有炔丙基端基的聚(γ-苄基-L-谷氨酸酯)(PBLG)和含单叠氮基团的卟啉衍生物(TFPP-N3)为反应物,利用点击反应,合成了含卟啉聚肽(TFPP-PBLG).运用核磁共振氢谱(1H-NMR)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、紫外-可见光光度计(UV-Vis)和凝胶渗透色谱(GPC)表征了聚合物的结构、分子量及其分布.采用有机共溶剂溶解、选择性溶剂(水)诱导组装并透析的方法,制备得到碗状胶束.通过扫描电子显微镜(SEM)、原子力显微镜(AFM)、透射电子显微镜(TEM)、动态激光光散射(DLS)和小角X射线散射仪(SAXS)表征了组装体的形貌与结构,并探究其自组装机理.结果表明,卟啉基团间的π-π堆叠作用使得胶束具有较为稳定结构;在透析过程中,胶束内部的溶剂向外扩散,导致胶束塌陷形成了纳米碗.增加PBLG链段长度,会进一步提高初始胶束的结构稳定性,导致在透析过程中胶束结构保持完整不能得到纳米碗.初始胶束的结构稳定性是决定其在后续溶剂交换过程中是否发生凹陷从而形成纳米碗的关键.

关键词：聚肽卟啉点击反应自组装碗状胶束

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基于KRAS突变肽段介导的胰腺癌免疫治疗

华东理工大学学报(自然科学版) 2024年

作者：贺心怡汤丁越张洁丁浩吴侠华东理工大学药学院华东理工大学生物工程学院

通过增加KRAS抗原负荷来增强机体主动免疫，开发一种KRAS靶向的免疫治疗药物。构建了4种质粒表达载体，每种载体含有的突变肽段种类、数量、排列顺序以及连接方式不同，但都包含Q61H突变肽段，表达载体包装腺病毒衣壳，并在体内外进行... 详细信息

通过增加KRAS抗原负荷来增强机体主动免疫，开发一种KRAS靶向的免疫治疗药物。构建了4种质粒表达载体，每种载体含有的突变肽段种类、数量、排列顺序以及连接方式不同，但都包含Q61H突变肽段，表达载体包装腺病毒衣壳，并在体内外进行验证及筛选。结果表明，这4种表达载体都能在体外成功表达，并在小鼠体内引起免疫反应。肿瘤药效实验表明，在含有KRASQ61H突变位点的移植瘤小鼠模型中，药物可刺激体内免疫反应从而抑制肿瘤生长，但这4种药物的药效存在明显差异。我们从中筛选出药效最好的Ad-SNP1载体，为后续进一步的研究奠定基础，并希望其能够为胰腺癌患者提供新的治疗机会。

关键词：胰腺导管癌 KRAS 免疫疗法腺病毒基因治疗

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基于AFP靶点的肝细胞癌的免疫治疗研究

华东理工大学学报(自然科学版) 2024年

作者：张洁汤丁越王成烨高雅文徐文青刘思雅肖啸吴侠华东理工大学生物工程学院华东理工大学药学院

AFP会在大约70%～80%的肝细胞癌患者中表达，可作为肝细胞癌免疫治疗的靶点。但目前大多以AFP为靶点的肿瘤疫苗的临床实验效果欠佳，因此急需开发一种更有效的、基于AFP抗原的治疗性肿瘤疫苗。以复制缺陷型腺病毒为载体，构建了一种肝... 详细信息

AFP会在大约70%～80%的肝细胞癌患者中表达，可作为肝细胞癌免疫治疗的靶点。但目前大多以AFP为靶点的肿瘤疫苗的临床实验效果欠佳，因此急需开发一种更有效的、基于AFP抗原的治疗性肿瘤疫苗。以复制缺陷型腺病毒为载体，构建了一种肝癌治疗性病毒载体Ad-hAFPm。该载体通过表达AFP/HSP70融合蛋白和GM-CSF来实现AFP抗原的特异性靶向治疗。在两种过表达人AFP的细胞系皮下移植瘤模型中模拟验证了Ad-hAFPm病毒载体的治疗效果。结果表明，Ad-hAFPm病毒在两种皮下移植瘤模型中均表现出良好的肿瘤抑制效果，肿瘤内免疫细胞浸润水平显著升高，并呈现出一定的靶向性优势，为肝细胞癌治疗性疫苗的研究奠定了实验基础。

关键词：肝细胞癌 AFP 免疫疗法腺病毒治疗性肿瘤疫苗

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苦味肽的苦味机制及脱苦策略研究进展

食品科学 2024年第21期45卷 344-356页

作者：蒲明慧吴昊文李陈茂龙程云辉长沙理工大学食品与生物工程学院湖南长沙410114 齐鲁工业大学食品科学与工程学院山东济南250353

蛋白质水解过程中形成的苦味肽会导致食品出现苦味,苦味肽从口感角度往往被认为是不受欢迎的成分。然而,有研究表明其中一些苦味肽显示出对人类健康有益的生物活性及有助于缓解慢性疾病的特性。因此,阐明苦味肽的苦味机制对于改善食品... 详细信息

蛋白质水解过程中形成的苦味肽会导致食品出现苦味,苦味肽从口感角度往往被认为是不受欢迎的成分。然而,有研究表明其中一些苦味肽显示出对人类健康有益的生物活性及有助于缓解慢性疾病的特性。因此,阐明苦味肽的苦味机制对于改善食品口味和生物活性开发利用具有重要意义。前期研究报道提出了Q值、苦味氨基酸、苦味指示基序和空间结构等肽苦味影响因素,但普适的机制尚未得到阐明。酶法或非酶法去苦味策略已在实验室及工业化规模中实施应用,其中酶法因高效、安全而广受关注,具有脱苦能力或潜力的和来源于动物、植物与微生物的酶被研究者不断鉴定并报道。本文较全面地总结苦味肽的研究进展,内容包括苦味肽的来源、生物活性、鉴定方法、苦味机制及酶法/非酶法脱苦方法等,同时归纳总结不同来源的具有脱苦味能力或潜力的酶的共有特性,并展望苦味肽未来研究方向。

关键词：苦味肽生物活性苦味机制脱苦微生物酶

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普洱生茶加工过程中非挥发性成分的变化

中国食品学报 2024年第5期24卷 405-414页

作者：李文婷范晓伟易伦朝胡永丹任达兵昆明理工大学食品科学与工程学院昆明650000

采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术分析普洱生茶加工过程中的非挥发性成分。结果表明:共鉴定或表征了141个化合物,其中25个化合物的含量变化较为明显,被筛选为差异性化合物(VIP>1,P<0.05)。4个加工阶段中,杀青和蒸压成型是引起这... 详细信息

采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术分析普洱生茶加工过程中的非挥发性成分。结果表明:共鉴定或表征了141个化合物,其中25个化合物的含量变化较为明显,被筛选为差异性化合物(VIP>1,P生物碱、氨基酸的含量。综合分析非挥发性成分的变化,有利于厘清普洱生茶生产过程中品质形成的机理。

关键词：普洱生茶加工过程非挥发性物质超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术

基于氧化聚合规律和特征质谱信息鉴定云南红茶中的新型茶黄素

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分析化学 2024年第6期52卷 846-867页

作者：李咏琳郭洁俞之豪李斯屿胡永丹易伦朝任达兵昆明理工大学食品科学与工程学院

茶黄素类化合物（TFs）是红茶中决定感官品质的一类重要物质，具有显著的生物活性。茶叶中除了存在4种常见的TFs外，还存在许多其它具有类似化学结构的茶黄素类似物（TFAs）。针对TFs及TFAs，本研究采用超高效液相色谱-高分辨质谱（UPLC... 详细信息

茶黄素类化合物（TFs）是红茶中决定感官品质的一类重要物质，具有显著的生物活性。茶叶中除了存在4种常见的TFs外，还存在许多其它具有类似化学结构的茶黄素类似物（TFAs）。针对TFs及TFAs，本研究采用超高效液相色谱-高分辨质谱（UPLC-HRMS）技术，结合该类成分的特征结构及一、二级质谱信息，提出了基于氧化聚合规律和特征质谱信息的TFAs识别和鉴定方法。通过分析现有TFs的氧化聚合过程，总结形成TFs的理论反应模型，并基于此计算潜在成分的前体离子值；同时，根据标准品和文献数据分析TFs的质谱裂解规律，总结该类成分的特征碎片离子及中性丢失碎片。最终，基于计算获得的前体离子值以及特征碎片离子或中性丢失信息，从原始的色谱-质谱数据中共鉴定出36种TFAs，其中6种为首次报道，并采用体外合成实验进行了部分验证。基于36种成分的定性和定量分析结果，采用偏最小二乘判别分析（PLS-DA）研究了这些成分在红茶加工中的变化，结果表明，TFAs可用于有效区分红茶发酵前后的样品。

关键词：茶黄素氧化缩合质谱中性丢失特征碎片离子

来源：博看期刊

预制肉类食品中晚期糖基化终末产物的形成及抑制

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食品科学技术学报 2024年第3期42卷 23-34页

作者：黄轶群周军豪李琳王发祥长沙理工大学食品与生物工程学院湖南长沙410114

随着人民生活水平的提高和生活节奏的加快,方便快捷、营养美味的畜禽鱼肉类预制菜肴(简称“预制肉”)正逐步成为老百姓餐桌上的常客。然而,肉类食品通常含有丰富的蛋白质、脂肪及一定量的还原糖,在预制肉加工及其成品后续贮藏、复热过... 详细信息

随着人民生活水平的提高和生活节奏的加快,方便快捷、营养美味的畜禽鱼肉类预制菜肴(简称“预制肉”)正逐步成为老百姓餐桌上的常客。然而,肉类食品通常含有丰富的蛋白质、脂肪及一定量的还原糖,在预制肉加工及其成品后续贮藏、复热过程中不可避免地会发生美拉德反应、脂肪氧化等化学反应,易于导致晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)的形成。过多摄入食源性AGEs会增加人体多种慢性病的发生率。基于肉类食品加工、贮藏过程中2种典型AGEs(羧甲基赖氨酸、羧乙基赖氨酸)的主要形成途径,以预制肉从原辅料到餐桌的全过程为主线,重点介绍了原料肉品质、肉类食品加工过程中常用的调味料及食品添加剂、加热熟制、成品贮藏及复热对预制肉中AGEs形成的影响。在此基础上,进一步探讨了预制肉加工及贮藏过程中AGEs形成的抑制策略,主要包括:采用新鲜的优质原料肉,合理选用调味料和添加剂,尽量缩短贮藏时间,在不影响产品质量安全的前提下尽量降低或缩短加热熟制及复热的温度和时间。通过这些阐述,希望为有效控制预制肉中AGEs的形成提供参考,为消费者提供更安全、更健康的预制肉类食品。

关键词：预制菜贮藏复热化学性危害物晚期糖基化终末产物

基于活细胞仪优化毕赤酵母发酵生产植酸酶研究

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食品与发酵工业 2024年

作者：徐鸿飞李连伟王凤超李超李玉强王永红青岛蔚蓝生物集团有限公司华东理工大学生物工程学院

为了进一步提高毕赤酵母发酵生产植酸酶的产量和原材料利用率，该文在毕赤酵母生产植酸酶过程中引入在线活细胞传感仪，在验证电容值与活菌浓度呈良好线性相关的基础上，通过在线活细胞仪反映的电容值、电导率值并结合氧消耗速率(oxygen... 详细信息

为了进一步提高毕赤酵母发酵生产植酸酶的产量和原材料利用率，该文在毕赤酵母生产植酸酶过程中引入在线活细胞传感仪，在验证电容值与活菌浓度呈良好线性相关的基础上，通过在线活细胞仪反映的电容值、电导率值并结合氧消耗速率(oxygen uptake rate，OUR)研究了营养盐添加量和诱导阶段甲醇流加速率对植酸酶产量的影响。结果表明，在营养盐添加量75%、甲醇最大流加速率1:10(占空比)的工艺条件下，发酵终点植酸酶的最大酶活力和总酶活力分别达到16 900 U/mL和853.39×106U，比优化前提高了29.8%和42.6%。

关键词：植酸酶毕赤酵母在线活细胞仪电容值过程优化