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不同临床分期子宫内膜异位症患者血清MMP-9、sHLA-G、SDC-1水平变化及临床意义

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实验与检验医学 2020年第2期38卷 323-325页

作者：贾晓慧周晓丽张丽丽郑州人民医院妇产科河南郑州450000

目的探讨不同临床分期子宫内膜异位症(EMS)患者血清金属基质酶-9(MMP-9)、可溶性人类白细胞抗原-g(sHLA-G)及多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)水平变化与临床意义。方法选取我院2017年2月-2018年10月收治的47例EMS患者设为观察组,另取同期健康... 详细信息

目的探讨不同临床分期子宫内膜异位症(EMS)患者血清金属基质酶-9(MMP-9)、可溶性人类白细胞抗原-g(sHLA-G)及多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)水平变化与临床意义。方法选取我院2017年2月-2018年10月收治的47例EMS患者设为观察组,另取同期健康体检者43例设为对照组。入院后均抽取清晨空腹状态下外周静脉血,离心处理取血清,以酶联免疫吸附法检测血清MMP-9、sHLA-G、-SDC-1水平,对比两组间及EMS不同临床分期血清MMP-9、sHLA-G、SDC-1水平,分析血清因子水平与临床分期相关性及在EMS诊断中的价值。结果观察组血清MMP-9、sHLA-G、SDC-1水平高于对照组(PsHLA-G、SDC-1水平高于Ⅰ~Ⅱ期者(PsHLA-G、SDC-1水平与EMS临床分期呈正相关(r=0.684,0.623,0.715,P均sHLA-G、SDC-1呈高表达状态,且临床分期越高其水平越高,二者呈明显正相关,联合血清MMP-9、sHLA-G、SDC-1水平检测亦有利于提高EMS诊断准确度,减少漏诊、误诊,进而为临床治疗方案的制定与实施提供客观依据。

关键词：子宫内膜异位症临床分期 MMP-9 sHLA-G SDC-1 诊断价值

液态芯片检测胚胎培养上清中sHLA-G技术的建立和应用

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液态芯片检测胚胎培养上清中sHLA-G技术的建立和应用

作者：李欣凝中南大学

学位级别：硕士

目的：可溶性白细胞抗原g （souluble human leukocyte antigen g, sHLA-G）是妊娠过程中母体耐受胎儿的重要免疫分子,因此sHLA-G被视为重要的非侵入性移植胚胎选择指标。而我们的研究希望能够在我室建立使用Luminex-x-MAP技术快速有效... 详细信息

目的：可溶性白细胞抗原g （souluble human leukocyte antigen g, sHLA-G）是妊娠过程中母体耐受胎儿的重要免疫分子,因此sHLA-G被视为重要的非侵入性移植胚胎选择指标。而我们的研究希望能够在我室建立使用Luminex-x-MAP技术快速有效检测sHLA-G的方法。该方法所需样本体积小,速度快,有望在生殖中心实际操作。同时,我们希望根据实验数据的分析,对于如何应用sHLA-G的检测来预测移植胚胎的妊娠结局提出自己的意见。方法：随机选取中南大学湘雅医院生殖中心自2009年3月至2011年1月收集的共1182个周期的2106个胚胎的胚胎培养（embryo culture, EC）上清,用Luminex-x-MAP技术快速检测。得出的数据进行回顾性分析,分为以下几组进行比较：（1）sHLA-G与妊娠率和出生率的关系：移植胚胎数目;（2）临床与实验室参数对ART后妊娠结果的影响：移植胚胎数目、年龄、移植胚胎是否分泌sHLA-G和胚胎质量;（3）不同培养条件与sHLA-G检测的关系：培养时间、卵裂期和培养体积;（4）各种培养与检测条件是否为sHLA-G检测的影响因素：检测体积、培养体积、两者之比、培养时间、移植胚胎数目和卵裂期;（5）移植分泌sHLA-G阳性胚胎的女性分布的临床特征：年龄、授精方式、不孕原因和移植胚胎数目。结果：（1）比较了sHLA-G检测与ART的妊娠结局的关系,发现两者显著相关（P＜0.001）,说明sHLA-G检测可能可以提高妊娠率。更重要的是,在单个胚胎移植时,在检测sHLA-G水平后,移植分泌sHLA-G的胚胎可以使妊娠可能成倍增加（26%）。（2）分析了实验室和临床参数对妊娠结局的影响,发现病人年龄,移植胚胎数目和形态学评分[P＜0.001;OR：4.3（95%CI：2.1-8.9）]以及胚胎的sHLA-G状态（是否分泌sHLA-G）[P＜0.001;OR：2.3（95%CI：1.8-3.1）]是预测妊娠结局的独立因素,而后两者更为重要。（3）比较多种培养条件与sHLA-G阳性胚胎之间的关系,仅有胚胎的卵裂期被证明是与sHLA-G检测有显著关系（P＜0.001）;培养时间和培养体积与sHLA-G的检测无显著关系（P＞0.05）;（4）探讨了培养与检测条件中影响sHLA-G检测的有关因素,发现仅有卵裂期是影响sHLA-G检测的唯一因素[P＜0.01;OR：1.782(95%CI：1.448-2.192],而胚胎的检测体积、培养体积与培养时间和移植胚胎数目不是影响sHLA-G的检测的因素（P＞0.05）。（5）比较了女性临床特征与移植sHLA-G阳性胚胎女性分布的关系,仅有不孕原因和移植胚胎数对于移植sHLA-G阳性胚胎女性分布有显著关系（P＜0.05）,其中不明原因不孕的夫妇移植sHLA-G阳性胚胎的几率更大（48.3%）;而年龄、授精方式与移植sHLA-G阳性胚胎女性分布无显著关系（P＞0.05）。结论：本研究在我室建立了使用Luminex-x-MAP技术快速有效检测sHLA-G的方法;提供了显著的证据证明形态学评分系统仍旧是目前胚胎选择移植时最重要的策略,但sHLA-G检测也可以被用来与形态学评分综合预测胚胎种植潜力,尤其当存在多个相同评级的胚胎而无法选择的时候,此策略更为适用。

关键词：妊娠免疫辅助生殖 IVF/ICSI结局 sHLA-G

间充质干细胞调控sHLA-G上调Treg治疗SLE的作用及机制研究

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间充质干细胞调控sHLA-G上调Treg治疗SLE的作用及机制研究

sHLA-G在弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制研究

第十一届全国免疫学学术大会

作者：陈晨梁军孙凌云南京鼓楼医院

目的 :间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗难治性系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)疗效显著,可溶性主要组织相容性人类白细胞抗原g(s HLA-g)具有较强的免疫抑制功能,在此基础上,本研究旨在探讨s HLA-g... 详细信息

目的 :间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗难治性系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)疗效显著,可溶性主要组织相容性人类白细胞抗原g(s HLA-g)具有较强的免疫抑制功能,在此基础上,本研究旨在探讨s HLA-g在MSC移植治疗SLE中的作用及机制。方法 :酶联免疫吸附法(ELISA)检测SLE患者与健康对照者血清中s HLA-g的水平,将SLE患者s HLA-g

关键词：系统性红斑狼疮 sHLA-G Treg MSCs

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sHLA-G在弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制研究

作者：王海凤大连医科大学

学位级别：硕士

目的：探索可溶性非经典主要组织相容抗原g（soluble non-classic MajorHistocompatibility Antigen/Human Leukocyte Antigen-g，sHLA-G）在弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制。方法：1.体内试验:建立C57BL/6小鼠妊娠期弓形虫感染动物模型，实验分为正常对照组、感染组。感染组于孕8天腹腔注射弓形虫速殖子400条;正常组于孕8天腹腔注射等体积的生理盐水。孕14天，对孕鼠进行眼底静脉取血，断颈处死孕鼠，记录妊娠结局，收集羊水、分离子宫和胎盘，制备胎盘组织上清。ELISA检测孕鼠外周血、羊水及胎盘组织上清可溶性非经典主要组织相溶性抗原（Qa-2）的浓度;制备子宫和胎盘细胞悬液，流式细胞术检测Qa-2受体，即蜕膜NK细胞表面抑制性受体NKg2A表达。2.体外实验:建立滋养层细胞系BeWo细胞体系，分别设正常对照组和弓形虫感染组，ELISA检测其上清分泌液中非经典人可溶性白细胞抗原g（sHLA-G）的水平;建立人早孕期蜕膜NK细胞体系，分别设正常对照组和弓形虫感染组，感染组组内再分别设单纯感染组、sHLA-G干预组（sHLA-G组）及sHLA-G抗体中和组（抗体中和组），用流式细胞术检测蜕膜NK细胞表面抑制性受体KIR2DL4表达。通过以上实验明确妊娠期经弓形虫感染后，母胎界面sHLA-G的变化趋势，并进一步验证sHLA-G与NK细胞抑制性受体KIR2DL4表达的相关性，进而揭示sHLA-G在弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制。结果：1.体内试验：正常对照组孕鼠状态较好，行为活动灵活自如，胎盘和胎鼠大小均匀，血供良好，外观肉红色;感染组孕鼠自感染2天后出现耸毛、精神萎靡等现象，感染后7天明显站立不稳、体温下降，胎盘苍白缺血，平均重量下降，胎鼠血供缺乏，大小不一，重量下降。与正常对照相比，感染后胎盘组织上清、羊水及孕鼠外周血Qa-2的浓度明显升高（P＜0.05），蜕膜NK细胞表面的NKg2A的表达亦显著升高（P＜0.05）。2.体外实验：与对照组相比，感染组BeWo培养上清中其sHLA-G水平明显升高（P＜0.05）;与对照组相比，sHLA-G干预组蜕膜NK细胞表面KIR2DL4表达显著升高（P＜0.05）;与sHLA-G干预组相比，sHLA-G抗体中和组蜕膜NK细胞表面KIR2DL4的表达显著降低（P＜0.05）。结论：通过体内外实验均证实弓形虫感染后可导致母胎界面非经典主要组织相容性抗原分泌升高，升高了的sHLA-G导致蜕膜NK细胞表面的抑制性受体KIR2DL4表达升高，sHLA-G及其受体KIR2DL4为母胎界面的参与免疫耐受的一对重要免疫分子，二者表达的升高可能会破坏胎盘免疫防御屏障，而导致弓形虫免疫逃逸，容易穿过胎盘垂直传播，引起胎儿感染，导致流产、胎儿畸形、死胎等不良妊娠结局的发生。

关键词：弓形虫 sHLA-G Qa-2 KIR2DL4 不良妊娠

Expression and clinical significance of sHLA-G in plasma exosome in patients with colorectal cancer

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Expression and clinical significance of sHLA-G in plasma exo...

The role of sHLA-G on the abnormal pregnant outcome induced by Toxoplasma gondii infection

浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会

作者： Zhao Zhangsheng Zhang Xia Zhang Ruili Yan Weihua Lin Aifen School of Laboratory Medicine and Life Sciences Wenzhou Medical University Medical Research Center Taizhou Hospital of Zhejiang Province

Objective:To detect sHLA-G expression in plasma exosomes in patients with colorectal cancer and evaluate the clinical significance.Methods:Plasma was collected from 52 primary CRC patients,20 colorectal polyps patients,20 inflammatory bowel disease patients and 25 healthy donors in the Taizhou Hospital of Zhejiang province from May 2017 to August 2018.The exosomes were extracted by exoEasy Maxi kit and identified by nanosight and western blot.Exosomal sHLA-G was detected by flow cytometry(FCM)and ELISA.The diagnostic value of exosomal sHLA-G detected by FCM and ELISA was assessed and the diagnosis efficiency was compared with carcinoembryonic antigen(CEA)and carbohydrate antigen CA19-9 by ROC curve and Youden index.Results:The peak size of exosomes extracted from plasma was 101.lnm and western blot showed exosomes expressed marker CD63,CD81,and TSg101.Exosomal sHLA-G was significantly higher than that in healthy controls,colorectal polyps patients as well as inflammatory bowel disease patients,and the postoperative sHLA-G level was significantly lower than that in pre-operation.Exosomal sHLA-G was significantly correlated with tumor status(P = 0.006),lymph node metastasis(P=0.003)and TNM stage(P= 0.015)in patients with CRC.ROC curve showed exosomal sHLA-G detected by FCM and ELISA was superior to CEA and CA19-9 in the diagnosis of CRC and their Youden index was 0.864,0.704,0.367,0.200,respectively.The AUC of exosomal sHLA-G detected by FCM was 0.962,with 90.4% sensitivity and 96.0% specificity when the cutoff point was 52%.The AUC of exosomal sHLA-G detected by ELISA was 0.899,with 80.4% sensitivity and 90.0%specificity when the cutoff point was 24.4 U/ml.Conclusion:Plasma exosomal sHLA-G was associated with the progression of CRC and its diagnostic value was superior to the traditional tumor markers CEA and CA19-9.

关键词： Colorectal cancer exosome sHLA-G tumor marker

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The role of sHLA-G on the abnormal pregnant outcome induced ...

复发性生殖器疱疹sHLA-G及外周血T细胞亚群和NK细胞的表达

第九届全国免疫学学术大会

作者： Xuemei Hu Haifeng Wang Medicine & Pharmacy Research Center Department of ImmunologyBinzhou Medical College

Background:T.gondii can affect fetus via vertical transmission and lead to adverse pregnant outcomes.The soluble human leukocyte antigen molecules g(sHLA-G)play a key role in the success of pregnancy through interacting with decidual natural killer cell(dNK)inhibitory receptors at the maternal-fetal interface.Objective:In this study,we aimed to investigate the role of sHLA-G on the abnormal pregnancy outcomes induced byToxoplasma gondii through the vivo and vitro experiments.Materials and methods:Concentration of the sHLA-G in BeWo culture supernatant,and the Qa-2 in the placenta supernatant,amniotic fluid and serum of pregnant CBL/6 mice were all analyzed by ELISA.Levels of NKg2A in mouse and KIR2DL4 expressed on human dNK cells were analyzed by flow cytometry,respectively.Results:Results showed that the levels of Qa-2 and its ligand NKg2A of mice in infected group were significantly higher than that controls(psHLA-G and the KIR2DL4 in human were significantly up-regulated(pgondii infection.Furthermore,blocking experiment of sHLA-G revealed that sHLA-G could up-regulate the expression of KIR2DL4.Conclusions:Theses results demonstrated that sHLA-G could cause the imbalance of immune molecules leading to excessive immunological tolerance at the maternal-fetal interface,which then contributed to T.gondii immunity escaping and affecting fetus via vertical transmission and resulted in adverse pregnant outcomes.

关键词： sHLA-G Qa-2 KIR2DL4 NKg2A T.gondii adverse pregnant outcome

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中国麻风皮肤病杂志 2016年第2期32卷 98-100页

作者：黄蓉刘剑熊洪平叶尚勉成都中医药大学第二附属医院皮肤科成都610041

目的:明确复发性生殖器疱疹(RgH)患者治疗前后外周血T细胞亚群和NK细胞及sHLA-G水平变化。方法:采用酶联免疫吸附法和流式细胞仪分别检测60例RgH患者治疗前后血浆sH LA-g水平及外周血T细胞亚群和NK细胞表达。结果:RgH患者血浆sH LA-g水... 详细信息

目的:明确复发性生殖器疱疹(RgH)患者治疗前后外周血T细胞亚群和NK细胞及sHLA-G水平变化。方法:采用酶联免疫吸附法和流式细胞仪分别检测60例RgH患者治疗前后血浆sH LA-g水平及外周血T细胞亚群和NK细胞表达。结果:RgH患者血浆sH LA-g水平治疗前后分别为(11.03±14.57)U/mL和(0.41±0.45)U/mL,差异有统计学意义(P0.05)。结论:外周血sH LA-g及NK细胞表达可能与RgH患者病情发展有关。

关键词：复发性生殖器疱疹 sHLA-G T细胞亚群 NK细胞

血清sHLA-G水平及HLA-g基因14bp插入/缺失多态性与复发性流产的相关性研究

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血清sHLA-G水平及HLA-G基因14bp插入/缺失多态性与复发性流产的相...

作者：赵一梅山西医科大学

学位级别：硕士

目的:通过测定正常妊娠妇女和有复发性流产史的妊娠妇女外周血清可溶性人类白细胞抗原g（soluble human leucocyte antigen-g,sHLA-G）水平及HLA-g基因14bp插入/缺失基因型,以探讨血清sHLA-G水平及HLA-g基因14bp插入/缺失多态性与复发... 详细信息

目的:通过测定正常妊娠妇女和有复发性流产史的妊娠妇女外周血清可溶性人类白细胞抗原g（soluble human leucocyte antigen-g,sHLA-G）水平及HLA-g基因14bp插入/缺失基因型,以探讨血清sHLA-G水平及HLA-g基因14bp插入/缺失多态性与复发性流产的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（ polymerase chain reaction-restrictive fragment length polymorphism ,PCR-RFLP）分析法,对60例复发性流产患者（病例组）和60例健康早期妊娠妇女（对照组）的HLA-g基因14bp插入/缺失多态性进行分析;采用酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA）测定两组妇女血清sHLA-G水平。病例组和对照组血清sHLA-G水平的比较采用成组样本t检验;两组基因型分布比较采用行*列表资料的卡方检验分析（由于14bp插入纯合子和14bp缺失杂合子同为可溶性HLA-g低分泌的基因型,所以放在一起统计）;不同基因型妇女对应血清sHLA-G水平比较采用方差分析（LSD-t检验）。结果: （1）病例组血清sHLA-G水平较对照组低（t=2.583, P＜0.01）,差异有统计学意义;（2）病例组较对照组,HLA-g基因+14bp/+14bp纯合子和+14bp/-14bp杂合子基因型频率高（χ2 =7.28 , P ＜0.05）,差异有统计学意义;（3）HLA-g基因+14bp/+14bp和+14bp/-14bp基因型与-14bp/-14bp基因型的妇女相比,血清中sHLA-G水平降低（P ＜0.01）,差异有统计学意义。结论: （1）血清sHLA-G水平降低及HLA-g基因纯合子（ +14bp/+14bp）和杂合子（+14bp/-14bp）基因型可能是导致复发性流产的危险因素;（2）血清sHLA-G水平可能与HLA-g基因14bp插入/缺失多态性相关。

关键词： sHLA-G HLA-g基因14bp插入/缺失多态性复发性流产

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正常孕妇不同孕周血清中sHLA-G的水平

细胞与分子免疫学杂志 2008年第9期24卷 926-927页

作者：侯彩英闵保华王珺姚元庆第四军医大学唐都医院妇产科陕西西安710038

目的:探讨正常妊娠妇女不同孕周血清可溶性人类白细胞抗原g(sHLA-G)在妊娠过程中的作用。方法:采用ELISA法检测20例正常孕妇不同孕周血清中的sHLA-G水平。结果:血清sHLA-G的水平在正常妊娠的早、中、晚孕期的均值依次为(11.96±4.27)μ... 详细信息

目的:探讨正常妊娠妇女不同孕周血清可溶性人类白细胞抗原g(sHLA-G)在妊娠过程中的作用。方法:采用ELISA法检测20例正常孕妇不同孕周血清中的sHLA-G水平。结果:血清sHLA-G的水平在正常妊娠的早、中、晚孕期的均值依次为(11.96±4.27)μg/L、(11.50±4.17)μg/L、(10.72±3.40)μg/L;差异无统计学意义。结论:血清sHLA-G的水平在正常妊娠的整个过程中差别不大,对维持胎儿的正常发育具有重要意义。

关键词： sHLA-G 正常妊娠免疫耐受