检索结果-南通市图书馆

mir-296-5p靶向SRF调控COX2参与分娩启动

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MiR-296-5p靶向SRF调控COX2参与分娩启动

作者：张中远华中农业大学

学位级别：硕士

由妊娠到分娩是多种因素相互协调的过程,子宫肌层从静息过渡到活跃而有节奏的收缩状态,需要胎盘、母体和胎儿间复杂的相互作用,炎症和激素是分娩的最终共同途径。近年来的研究发现,mirNA也参与调控分娩启动。课题组前期构建不同妊娠阶... 详细信息

由妊娠到分娩是多种因素相互协调的过程,子宫肌层从静息过渡到活跃而有节奏的收缩状态,需要胎盘、母体和胎儿间复杂的相互作用,炎症和激素是分娩的最终共同途径。近年来的研究发现,mirNA也参与调控分娩启动。课题组前期构建不同妊娠阶段大白猪和清平猪胎盘组织的mirNA表达谱,本研究从中筛选差异表达的mir-296-5p作为研究对象。mir-296-5p通过促进血管生成维持妊娠,本论文旨在探究mir-296-5p在分娩启动过程中的作用。为了探究mir-296-5p是否参与分娩启动,我们在妊娠15.5 d的孕鼠腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharides,LpS)构建小鼠早产模型,检测分娩标志基因c-fos和COX2的表达变化,以及mir-296-5p和血清响应因子(Serum response factor,SRF)的表达模式。通过双荧光素酶报告系统验证mir-296-5p和SRF之间的靶向关系。人羊膜上皮(WISH)细胞中模拟mir-296-5p超表达和抑制,检测SRF和分娩标志基因COX2的变化,验证mir-296-5p是否参与分娩启动。通过转染pcDNA3.1-SRF和干扰片段进一步验证SRF对COX2的靶向关系,证明mir-296-5p通过靶向SRF调控COX2表达。激素水平检测mir-296-5p和SRF对pGE2分泌的作用,以及pGE2对mir-296-5p、SRF和COX2的反馈调节机制。试验主要研究结果如下:1)小鼠早产模型中分娩标志基因c-fos和COX2表达水平显著高于对照组,mir-296-5p表达水平降低,同时mir-296-5p潜在靶基因SRF表达水平升高,表明mir-296-5p可能靶向SRF参与分娩启动。2)利用mir-296-5p mimics分别与SRF 3’UTR和SRF 3’UTR mutant的pmirGLO载体共转染WISH细胞。mir-296-5p mimics显著抑制pmirGLO-SRF 3’UTR载体的双荧光活性,而对突变载体荧光活性无影响,证明mir-296-5p与SRF的靶向关系。3)将mir-296-5p inhibitor转染至WISH细胞,SRF和COX2表达显著增高,表明mir-296-5p调控分娩标志基因COX2参与分娩启动。WISH细胞转染pcDNA3.1-SRF,COX2表达极显著升高,说明mir-296-5p是通过靶向SRF调控COX2的表达。4)激素水平检测mir-296-5p和SRF对pGE2分泌的作用,发现干扰mir-296-5p和超表达SRF均促进pGE2分泌。WISH细胞中添加1μM pGE2对mir-296-5p、SRF和COX2具有反馈调节机制。结论:分娩启动时mir-296-5p表达降低,解除了对SRF的抑制,进而使COX2表达升高,pGE2分泌增加,且pGE2对mir-296-5p、SRF和COX2存在反馈调节机制。

关键词： mir-296-5p SRF COX2 pGE2 分娩启动

橙皮素通过circ_0039411/mir-296-5p影响IL-1β诱导的软骨细胞凋亡

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2022年第2期38卷 151-156,163页

作者：郭玲王兆领黄振滕州市中心人民医院药学部 277599

目的探讨橙皮素对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及分子机制。方法关节软骨细胞分为对照(control)组、IL-1β组、IL-1β+橙皮素低、中、高剂量组、IL-1β+si-circ_0039411组、IL-1β+si-NC组、IL-1β+HES+pcDNA-circ_0039411组、IL-1β+HES+pcDNA组。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、TNF-α、IFN-γ水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;实时荧光定量pCR(RT-qpCR)检测circ_0039411和mir-296-5p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circ_0039411和mir-296-5p的靶向关系。结果橙皮素低、中、高浓度组软骨细胞中IL-6、TNF-α、IFN-γ水平降低,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达水平降低,软骨细胞凋亡率降低,circ_0039411表达水平降低,mir-296-5p表达水平升高,且呈浓度依赖性(p5)。circ_0039411靶向调控mir-296-5p;抑制circ_0039411表达后,IL-6、TNF-α、IFN-γ水平降低,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达水平降低,软骨细胞凋亡率降低(p5)。circ_0039411过表达逆转了橙皮素对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的作用。结论橙皮素可能通过调控circ_0039411/mir-296-5p抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤。

关键词：橙皮素 circ_0039411 mir-296-5p 软骨细胞损伤

mir-296-5p/GAB对雌激素信号通路的调节及功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MiR-296-5p/GAB对雌激素信号通路的调节及功能研究

作者：杜佩云福建农林大学

学位级别：硕士

近年来,乳腺癌的发病率己占所有癌症的7%～10%。乳腺癌是危害女性健康的恶性肿瘤之一。各种因素导致的人体过度的暴露在高水平的激素环境中容易导致乳腺癌的发生,大量的研究表明雌激素及其信号通路在乳腺癌的致病机理中占有重要作用,其... 详细信息

近年来,乳腺癌的发病率己占所有癌症的7%～10%。乳腺癌是危害女性健康的恶性肿瘤之一。各种因素导致的人体过度的暴露在高水平的激素环境中容易导致乳腺癌的发生,大量的研究表明雌激素及其信号通路在乳腺癌的致病机理中占有重要作用,其中雌激素受体α(ERα)在乳腺癌细胞中发挥着类似癌基因的功能。实验室前期工作筛选到的雌激素受体相互作用蛋白GAB,本文就GAB蛋白对ERα的转录功能调控,以及其上游的mirNA做了以下研究:我们首先利用免疫共沉淀实验验证了 GAB与ERα在细胞内存在相互作用,激光共聚焦实验证明GAB与ERα在细胞核中共定位,这为GAB与ERα的相互作用提供物理基础。我们构建了过表达及敲低GAB的稳定克隆,并在mRNA及蛋白水平上验证克隆构建成功。荧光素酶活性实验验证GAB能够上调ERα的转录活性。为了明确GAB对雌激素信号通路的调节,我们在蛋白水平及mRNA水平上检测ERα及其下游基因的表达情况,结果证明敲低GAB明显抑制ERα及其下游基因的表达。有研究表明雌激素与ERα结合通过核转导途径调控相关蛋白表达调控细胞存活增殖等。生长曲线及克隆形成实验结果表明敲低GAB抑制乳腺癌细胞生长。为了完善GAB在细胞中的调控机制,我们利用软件对靶向GAB的mirNA进行预测并筛选。实验结果发现mir-296-5p能够调控GAB蛋白的表达水平但不影响GAB的mRNA水平,故mir-296-5p是在转录后水平上调控GAB的表达。接着我们在不同的细胞系中检测GAB与mir-296-5p的表达,发现在293T、ZR75-1、MCF7细胞中两者的表达呈一定的负相关。通过软件预测mir-296-5p能够靶向GAB的5'UTR,荧光素酶活性实验表明mir-296-5p通过下调GAB的5'UTR的活性而达到调控GAB蛋白及其下游相关基因的表达。在之前的实验中我们确定了 GAB通过调节ERα而在雌激素信号通路中发挥重要的作用并影响细胞生长。我们发现在乳腺癌细胞中高表达mir-296-5p会使得细胞生长能力和细胞非锚着依赖性生长能力发生抑制,及细胞周期在GOG2其发生阻滞。通过在敲低GAB的乳腺癌细胞中过表达mir-296-5p的生长曲线实验进一步证明mir-296-5p抑制乳腺癌细胞生长是通过靶向GAB实现的。总结:***作为ERα的共调节因子,通过调节ERα的转录活性功能参与了雌激素信号通路,调控乳腺癌细胞的生长。是雌激素诱导的乳腺癌发生发展中的重要因子;***-296-5p通过靶向GAB的5'UTR调控GAB的表达并参与到雌激素信号通路中,使得乳腺癌细胞周期在G0G2期发生阻滞从而抑制细胞生长。mir-296-5p/GAB的研究丰富了乳腺癌发生发展的理论。

关键词：乳腺癌 GAB mir-296-5p 生物学功能

Circ-0033074靶向mir-296-5p对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国老年学杂志 2023年第7期43卷 1740-1745页

作者：于峰刘先艮杨帆谈树宾徐钱南通市第三人民医院泌尿外科江苏南通226000

目的探讨Circ-0033074对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养前列腺癌细胞DU-145、22Rv1和LNCap及前列腺上皮细胞RWpE-1,RT-qpCR法检测细胞中Circ-0033074和mir-296-5p表达水平。以前列腺癌细胞DU-145为... 详细信息

目的探讨Circ-0033074对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养前列腺癌细胞DU-145、22Rv1和LNCap及前列腺上皮细胞RWpE-1,RT-qpCR法检测细胞中Circ-0033074和mir-296-5p表达水平。以前列腺癌细胞DU-145为研究对象,分为si-NC组、si-Circ-0033074组、si-Circ-0033074+anti-mir-NC组和si-Circ-0033074+anti-mir-296-5p组。CCK-8试剂盒、Transwell小室、流式细胞术分别检测细胞增殖、细胞迁移和侵袭及细胞凋亡,Western印迹检测CyclinD1、p21、基质金属蛋白酶(MMp)-2、MMp-9、Bax和Bcl-2蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证Circ-0033074和mir-296-5p调控关系。结果前列腺癌细胞系DU-145、22Rv1和LNCap中Circ-0033074的表达显著高于前列腺上皮细胞RWpE-1(p5),而mir-296-5p的表达显著低于RWpE-1细胞(p5)。与si-NC组比较,si-Circ-0033074组OD值、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMp-2、MMp-9和Bcl-2的蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达显著升高(均p5)。Circ-0033074靶向负调控mir-296-5p,沉默mir-296-5p逆转沉默Circ-0033074对DU-145细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结论沉默Circ-0033074可靶向上调mir-296-5p表达抑制前列腺癌细胞DU-145增殖、迁移和侵袭,并诱导DU-145细胞凋亡。

关键词：前列腺癌 Circ-0033074 mir-296-5p 细胞增殖迁移侵袭凋亡

沉默circ0000745通过靶向mir-296-5p对结直肠癌细胞增殖及转移的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华中科技大学学报（医学版） 2022年第1期51卷 31-37页

作者：覃先蓬赵高平杨春朱学强刘浩杨洲四川省人民医院胃肠外科成都610072 四川省人民医院肿瘤科成都610072

目的探讨circ;000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法收集2013年3月~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量pCR(qRT-pCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ;000745与mir-296-5... 详细信息

目的探讨circ;000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法收集2013年3月~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量pCR(qRT-pCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ;000745与mir-296-5p表达,分析circ;000745与mir-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系。将人结直肠癌细胞HCT-116分为si-NC组、si-circ;000745组、mir-NC组、mir-296-5p过表达组、si-circ;000745+anti-mir-NC组、si-circ;000745+anti-mir-296-5p组;采用CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ;000745与mir-296-5p的靶向关系;采用Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMp-2)、基质金属蛋白酶9(MMp-9)蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,结直肠癌组织中circ;000745的表达升高(p5),mir-296-5p的表达降低(p5);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56例,与存活患者相比,死亡患者的circ;000745明显增高(p5),mir-296-5p明显降低(p5)。与HT-29细胞相比,HCT-116细胞的circ;000745 mRNA表达升高(p5),mir-296-5p的表达降低(p5),选择HCT-116细胞进行下一步研究。与si-NC组比较,si-circ;000745组细胞存活率、MMp-2、MMp-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均p5);circ;000745可靶向调控mir-296-5p的表达;与mir-NC组比较,mir-296-5p过表达组细胞存活率、MMp-2、MMp-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均p5);与si-circ;000745+anti-mir-NC组比较,si-circ;000745+anti-mir-296-5p组细胞存活率、MMp-2、MMp-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增多(均p5)。结论结直肠癌组织中circ;000745呈高表达,mir-296-5p呈低表达,高表达circ;000745及低表达mir-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ;000745通过靶向mir-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转移,沉默circ;000745可为结直肠癌治疗提供新思路。

关键词：结直肠癌 circ_0000745 mir-296-5p 细胞增殖迁移侵袭

CEBpα/mir-296-5p/pES1轴调节细胞衰老

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

CEBPα/miR-296-5p/PES1轴调节细胞衰老

作者：麦宏旭大连医科大学

学位级别：硕士

大多数哺乳动物体细胞达到增殖极限,会导致细胞步入衰老进程。细胞衰老表现为形态变大,变扁平,细胞核增大,细胞周期发生不可逆的阻滞,细胞分泌衰老相关的功能因子,导致细胞微环境发生改变,加强细胞衰老并促使周围细胞发生衰老。癌基因... 详细信息

大多数哺乳动物体细胞达到增殖极限,会导致细胞步入衰老进程。细胞衰老表现为形态变大,变扁平,细胞核增大,细胞周期发生不可逆的阻滞,细胞分泌衰老相关的功能因子,导致细胞微环境发生改变,加强细胞衰老并促使周围细胞发生衰老。癌基因激活或抑癌基因失活,若不进行修正,将会导致细胞的增殖异常甚至是癌变。然而衰老这一机制恰好能够促使衰老细胞本身更容易被识别清除,从这一角度看来,衰老是对机体肿瘤预防的一种有效机制。既然衰老是对肿瘤形成的一种防御机制,如果肿瘤细胞发生衰老,其增殖能力就会丧失,并逐渐发生凋亡或被清除,那么肿瘤就有可能得到治愈。我们在研究雌激素信号通路调节蛋白pES1时发现,pES1作为在癌细胞中高表达的基因,当其被敲低能够明显抑制肿瘤细胞的增殖能力。并且,在pES1敲低的肿瘤细胞中,我们发现细胞形态发生了改变。敲低pES1后细胞明显变大变扁平,细胞核增大,这正是细胞衰老的形态特征。于是我们对pES1敲低的细胞进行了衰老染色的检测,发现pES1敲低的细胞衰老比例明显上升。接下来我们就需要寻找pES1调节细胞衰老是通过怎样的机制,在后续的实验中我们发现pES1能够抑制p53抑癌基因的表达,而p53又是细胞周期阻滞及细胞衰老的重要环节。并且核仁应激能够激活p53引起细胞衰老,pES1又定位于核仁中,我们推测pES1通过p53来调控肿瘤细胞衰老。随后,我们筛选了调控pES1的microRNA(mirNA)。发现mir-296-5p既能调控pES1,又能够调节肿瘤细胞衰老,于是我们对mir-296-5p是否是通过pES1调节衰老进行了相关实验验证。我们通过敲低pES1后观察mir-296-5p对衰老调节情况的分析发现,mir-296-5p调控衰老的能力是要依赖pES1,至少部分依赖pES1,因为pES1敲低后mir-296-5p对肿瘤细胞衰老的促进作用大大减弱。我们进一步分析了调节mir-296-5p转录的转录因子。利用生物信息学工具,通过启动子预测在调节衰老的转录因子中找到了C/EBpα/β,这两个基因均能够升高mir-296-5p的表达水平。经过进一步验证,我们发现只有C/EBpα能够降低pES1的表达水平,而C/EBpβ虽然同样能升高mir-296-5p,却不能够改变pES1。因此接下来的研究中,需要证实C/EBpα/mir-296-5p/pES1通路和衰老是否存在相关性,在肿瘤的临床标本中它们之间的调节作用是否依旧存在。我们在收集到的乳腺癌临床病理标本及不同年龄的小鼠组织中分别对C/EBpα/mir-296-5p/pES1以及衰老的相关性进行了分析。发现在乳腺癌病例标本中C/EBpα、mir-296-5p与衰老呈正相关,pES1和衰老呈负相关。在不同年龄小鼠组织中,组织衰老比例随年龄增长而升高,并且mir-296-5p也随年龄增长有升高趋势,而pES1相反,即随年龄增长反而表达量下降。这与我们之前的细胞实验相互印证,说明C/EBpα/mir-296-5p/pES1调节肿瘤细胞的衰老具有生理学以及病理学意义。综上所述,我们首次发现了以pES1为核心通过p53调控衰老的一条通路,该通路在生理病理中都具有意义。该研究阐明了肿瘤细胞衰老的新机制,同时也为从衰老着手治疗肿瘤提供了更多可能的靶点。

关键词： pES1 mir-296-5p C/EBpα 衰老肿瘤细胞

mir-296-5p靶向pLK1调控pI3K/AKT通路诱导骨肉瘤细胞中的自噬并抑制上皮-间质转化

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

医学分子生物学杂志 2022年第4期19卷 287-294页

作者：孟爱霞官秀梅李桂芝孙风祥潍坊医学院生物化学与分子生物学实验室山东省潍坊市261053

目的探讨mir-296-5p靶向pLK1对骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞自噬及抑制上皮-间质转化(EMT)的作用机制.方法 qRT-pCR检测mir-296-5p在OS细胞中的表达.采用生物信息学分析预测mir-296-5p的靶基因,验证mir-296-5p对靶基因pLK1的直接靶向调... 详细信息

目的探讨mir-296-5p靶向pLK1对骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞自噬及抑制上皮-间质转化(EMT)的作用机制.方法 qRT-pCR检测mir-296-5p在OS细胞中的表达.采用生物信息学分析预测mir-296-5p的靶基因,验证mir-296-5p对靶基因pLK1的直接靶向调控;细胞转染构建mir-296-5p过表达和干扰细胞,CCK-8、克隆形成、Transwell小室、流式、蛋白免疫印迹实验检测mir-296-5p的不同表达对U2OS细胞中pTBp1表达水平及细胞增殖、侵袭、凋亡、自噬及EMT的影响.结果与对照组比较,mir-296-5p在OS中表达降低,而pLK1则升高(p5);与mir-NC组比较,mimic组的克隆形成率、侵袭细胞数目及pTBp1、p62、N-cadherin、Vimentin、p-pI3K/pI3K、p-AKT/AKT水平降低,细胞凋亡率、Bec-lin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、E-cadherin水平升高(p5);与pLK1组比较,pLK1+mimic组的克隆形成率、侵袭细胞数目及pTBp1、p62、N-cadherin、Vimentin、p-pI3K/pI3K、p-AKT/AKT水平降低,细胞凋亡率、Bec-lin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、E-cadherin水平升高(p5).结论 mir-296-5p可能能够靶向pLK1调控pI3K/AKT通路诱导OS细胞中的自噬并抑制EMT.

关键词：骨肉瘤 mir-296-5p pLK1 pI3K/AKT通路细胞自噬上皮-间质转化

mir-296-5p对胰腺癌细胞体外生物学行为的影响

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代肿瘤医学 2017年第3期25卷 335-339页

作者：尹健朱光辉单远洲张明南通大学医学院研究生院江苏南通226001 上海市奉贤区中心医院上海201499 南方医科大学附属奉贤医院上海201499

目的:探讨microRNA-296-5p(mir-296-5p)对胰腺癌细胞体外生物学行为的影响。方法:分别转染mir-296-5p类似物(Agomir)及mir-296-5p拮抗物(Antagomir)至胰腺癌细胞系(As pC-1、panc-1和Capan-2),应用CCK-8法、Annexin-V ApC/7-AAD法、细胞黏附实验、Transwell侵袭迁移实验检测mir-296-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡、黏附、侵袭和迁移能力的影响。结果:转染mir-296-5p Agomir后胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力显著降低,凋亡率和黏附能力增加;而转染mir-296-5p Antagomir后胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力增强,凋亡率和黏附能力降低。结论:体外实验证实mir-296-5p影响胰腺癌细胞体外生物学行为,抑制其转移。

关键词： mir-296-5p 胰腺癌转移

沉默circ_0081143调控mir-296-5p抑制肾癌细胞786-O发生的作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重庆医学 2022年第9期51卷 1463-1467页

作者：邓春燕熊蓓蓓彭玲徐敬根四川省成都市双流区第一人民医院肿瘤科 610200

目的探讨circ_0081143对肾癌细胞786-O的恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法选取37例肾癌组织及其癌旁组织,实时荧光定量pCR(RT-qpCR)检测circ_0081143和mir-296-5p的表达水平;将肾癌细胞786-O随机分为si-circ_0081143组、si-NC组... 详细信息

目的探讨circ_0081143对肾癌细胞786-O的恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法选取37例肾癌组织及其癌旁组织,实时荧光定量pCR(RT-qpCR)检测circ_0081143和mir-296-5p的表达水平;将肾癌细胞786-O随机分为si-circ_0081143组、si-NC组、mir-296-5p mimic组、mir-NC组、si-circ_0081143+mir-296-5p inhibor组;双荧光素酶报告实验检测circ_0081143和mir-296-5p的靶向关系;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell小室法检测迁移细胞数;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与癌旁组织相比,肾癌组织中circ_0081143表达水平升高,mir-296-5p表达水平降低(p5)。沉默circ_0081143表达或过表达mir-296-5p后,786-O细胞抑制率升高,克隆形成数和迁移细胞数减少,786-O细胞凋亡率升高(p5)。抑制mir-296-5p表达逆转了沉默circ_0081143对786-O细胞的影响。结论circ_0081143通过mir-296-5p调节肾癌细胞786-O的增殖、迁移及凋亡。

关键词： circ_0081143 mir-296-5p 肾癌增殖迁移凋亡

维普期刊数据库博看期刊