沉默circ0000745通过靶向miR-296-5p对结直肠癌细胞增殖及转移的影响

作     者：覃先蓬 赵高平 杨春 朱学强 刘浩 杨洲 Qin Xianpeng;Zhao Gaoping;Yang Chun

作者机构：四川省人民医院胃肠外科成都610072 四川省人民医院肿瘤科成都610072 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2022年第51卷第1期

页      面：31-37页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81771723) 四川省卫生计生委科研项目(No.17PJ109) 四川省科学技术厅重点研发计划项目(No.22ZDYF0706) 

主　　题：结直肠癌 circ_0000745 miR-296-5p 细胞增殖 迁移 侵袭 

摘      要：目的探讨circ;000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法收集2013年3月~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ;000745与miR-296-5p表达,分析circ;000745与miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系。将人结直肠癌细胞HCT-116分为si-NC组、si-circ;000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-circ;000745+anti-miR-NC组、si-circ;000745+anti-miR-296-5p组;采用CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ;000745与miR-296-5p的靶向关系;采用Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,结直肠癌组织中circ;000745的表达升高(P0.05),miR-296-5p的表达降低(P0.05);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56例,与存活患者相比,死亡患者的circ;000745明显增高(P0.05),miR-296-5p明显降低(P0.05)。与HT-29细胞相比,HCT-116细胞的circ;000745 mRNA表达升高(P0.05),miR-296-5p的表达降低(P0.05),选择HCT-116细胞进行下一步研究。与si-NC组比较,si-circ;000745组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P0.05);circ;000745可靶向调控miR-296-5p的表达;与miR-NC组比较,miR-296-5p过表达组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P0.05);与si-circ;000745+anti-miR-NC组比较,si-circ;000745+anti-miR-296-5p组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增多(均P0.05)。结论结直肠癌组织中circ;000745呈高表达,miR-296-5p呈低表达,高表达circ;000745及低表达miR-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ;000745通过靶向miR-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转移,沉默circ;000745可为结直肠癌治疗提供新思路。