检索结果-南通市图书馆

miR-153-5p通过靶向FZD3基因抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤 2021年第7期41卷 460-474页

作者：陈炎坤姜雪毅陈鹏刘欣原江建新贵州医科大学临床医学院贵州贵阳550004 武汉大学人民医院肝胆外科湖北武汉430079 贵州医科大学附属医院肝胆外科贵州贵阳550004

目的:研究微RNA(microRNA,mir)-153-5p对胰腺导管腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:采用实时荧光定量pCR法检测miR-153-5p在9例胰腺导管腺癌及相应的癌旁组织中的表达水平,以及其在胰腺正常导管上皮细胞HpD... 详细信息

目的:研究微RNA(microRNA,mir)-153-5p对胰腺导管腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:采用实时荧光定量pCR法检测miR-153-5p在9例胰腺导管腺癌及相应的癌旁组织中的表达水平,以及其在胰腺正常导管上皮细胞HpDE和胰腺癌各个细胞系pANC-1、MIApaCa-2、SW1990及BxpC-3中的表达水平,从中筛出pANC-1和SW1990细胞用于后续实验。采用脂质体法将miR-153-5p-模拟物(mimics)转入pANC-1及SW1990细胞使miR-153-5p过表达,以转入阴性对照(negative control,NC)-mimics作为阴性对照组。采用CCK-8法及Transwell小室实验检测miR-153-5p过表达对pANC-1及SW1990细胞增殖、迁移和侵袭的影响。通过Targetscan等多种在线预测软件及生物信息学分析miR-153-5p可能的靶基因,并采用实时荧光定量pCR法检测腺导管腺癌及相应的癌旁组织中卷曲蛋白家族受体3(Frizzled3,FZD3)mRNA的表达水平。采用实时荧光定量pCR法和蛋白质印迹法检测miR-153-5p过表达对FZD3 mRNA和蛋白表达水平的影响,并进一步利用双荧光素酶报告实验验证FZD3基因是否为miR-153-5p的靶基因。通过脂质体法将miR-153-5p-mimics以及携带有FZD3全基因的重组质粒共转入pANC-1和SW1990细胞,再用实时荧光定量pCR法及蛋白质印迹法检测FZD3 mRNA及蛋白的表达水平,并通过CCK-8法以及Transwell小室实验检测miR-153-5p和FZD3表达水平的变化对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:相较于正常胰腺组织或细胞,miR-153-5p在胰腺癌组织及各个细胞中的表达量明显更低(p均5)。CCK-8和平板克隆实验显示,过表达miR-153-5p后对pANC-1和SW1990细胞的增殖能力被明显抑制(p均5);划痕愈合实验结果显示,miR-153-5p过表达能够有效地延缓划痕伤口的愈合,抑制胰腺癌细胞的横向迁移能力(p均5);Transwell小室实验提示,miR-153-5p过表达能明显抑制胰腺癌细胞侵袭和纵向迁移能力(p均5)。利用在线预测软件及生物信息学分析得到FZD3基因可能是miR-153-5p的下游靶点;相较于正常胰腺组织,FZD3 mRNA在胰腺癌组织中的表达量明显升高(pmiR-153-5p的表达呈负相关(r=-0.5515,p=0.0219)。与阴性对照组相比,过表达miR-153-5p后pANC-1和SW1990细胞中FZD3 mRNA和蛋白的表达量明显减少(p均5)。双荧光素酶报告实验显示,miR-153-5p与FZD3 mRNA的3’-非翻译区(untranslated region,UTR)结合,下调FZD3蛋白的表达水平。当共转染miR-153-5p-mimics及携带有全基因的FZD3重组质粒后,过表达FZD3能够减弱miR-153-5p对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(p均5)。结论:miR-153-5p通过靶向FZD3基因抑制胰腺癌的侵袭和迁移,提示miR-153-5p可能是胰腺癌治疗中一种潜在生物标志物。

关键词：胰腺导管腺癌 miR-153-5p FZD3基因细胞增殖细胞运动

异补骨脂素通过LncRNA THOR/miR-153-5p影响喉癌细胞Tu686增殖、迁移和侵袭的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国老年学杂志 2022年第1期42卷 161-166页

作者：徐茂林陈晓华淄博市第一医院耳鼻咽喉科山东淄博255200 淄博市第一医院口腔科山东淄博255200

目的探索异补骨脂素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)THOR/微小RNA-153-5p(miR-153-5p)影响喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法使用10、30、90μg/ml浓度的异补骨脂素处理喉癌细胞Tu686,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵... 详细信息

目的探索异补骨脂素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)THOR/微小RNA-153-5p(miR-153-5p)影响喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法使用10、30、90μg/ml浓度的异补骨脂素处理喉癌细胞Tu686,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵袭,Western印迹检测细胞核相关抗原(Ki-67)、增殖细胞核抗原(pCNA)、基质金属蛋白酶(MMp)-2、MMp-9蛋白表达,实时荧光定量pCR(qpCR)检测LncRNA THOR和miR-153-5p表达。DINAN工具和双荧光素酶报告实验分析LncRNA THOR与miR-153-5p的靶向关系。在Tu686细胞中转染si-LncRNA THOR或miR-153-5p,观察沉默LncRNA THOR或过表达miR-153-5p对Tu686细胞增殖、迁移和侵袭的影响。在Tu686细胞中转染pcDNA-LncRNA THOR或anti-miR-153-5p,并使用异补骨脂素处理,评价过表达LncRNA THOR或干扰miR-153-5p对异补骨脂素作用的Tu686细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果不同浓度的异补骨脂素明显减少Tu686细胞的Ki-67、pCNA蛋白表达量、细胞增殖率、MMp-2、MMp-9蛋白表达量、细胞迁移数和细胞侵袭数、LncRNA THOR表达量(p5),显著增加miR-153-5p表达量(p5),均呈浓度依赖性。LncRNA THOR靶向调控miR-153-5p的表达。沉默LncRNA THOR或过表达miR-153-5p明显降低Tu686细胞的LncRNA THOR表达量、Ki-67、pCNA、MMp-2、MMp-9蛋白水平、细胞增殖率、细胞迁移数、细胞侵袭数(p5),显著提高miR-153-5p表达量(p5)。过表达LncRNA THOR或干扰miR-153-5p部分逆转异补骨脂素对Tu686细胞增殖、迁移、侵袭、Ki-67、pCNA、MMp-2、MMp-9蛋白表达的抑制作用。结论异补骨脂素显著抑制喉癌细胞Tu686的增殖、迁移和侵袭能力,其机制与上调LncRNA THOR表达和下调miR-153-5p表达有关。

关键词：异补骨脂素喉癌 LncRNA THOR miR-153-5p 增殖迁移侵袭

子宫内膜癌患者血清和癌组织中LncRNA CRNDE、miR-153-5p表达及临床诊断价值

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

河北医药 2023年第6期45卷 820-823,828页

作者：王丽娟吴文林秀芬海南医学院第二附属医院妇产科海口市571100 海南省文昌市人民医院妇产科

目的探讨miR-153-5p、LncRNA CRNDE在子宫内膜癌(EC)患者血清和癌组织中的表达及对EC的诊断价值。方法选取2019年12月至2021年12月手术治疗的115例EC患者为观察组,收集手术患者的癌组织及癌旁组织,同时选取100例体检健康者为对照组。... 详细信息

目的探讨miR-153-5p、LncRNA CRNDE在子宫内膜癌(EC)患者血清和癌组织中的表达及对EC的诊断价值。方法选取2019年12月至2021年12月手术治疗的115例EC患者为观察组,收集手术患者的癌组织及癌旁组织,同时选取100例体检健康者为对照组。实时荧光定量pCR(qRT-pCR)法检测血清和癌组织中miR-153-5p、LncRNA CRNDE表达水平,分析血清中miR-153-5p、LncRNA CRNDE表达水平与患者临床病理参数的关系;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LncRNA CRNDE、miR-153-5p表达水平对EC发生的诊断价值。结果与癌旁组织相比,LncRNA CRNDE在癌组织中的表达水平升高,miR-153-5p表达水平降低,且二者呈负相关(r=-0.268,p5);与对照组比较,LncRNA CRNDE在观察组患者血清中的表达水平升高,miR-153-5p表达水平降低,且二者呈负相关(r=-0.315,p5)。EC患者血清中LncRNA CRNDE、miR-153-5p表达水平均与年龄、肿瘤直径、组织类型无关(p>0.05),均与肌层浸润深度、分化程度、淋巴结转移、FIGO分期有关(p5);ROC曲线结果显示,血清miR-153-5p、LncRNA CRNDE表达水平诊断EC发生的曲线下面积分别为0.901(95%CI:0.855~0.936)、0.944(95%CI:0.906~0.970),对应的敏感度分别为90.43%、87.83%,特异度分别为76.52%、92.17%,LncRNA CRNDE、miR-153-5p联合诊断的曲线下面积为0.971(95%CI:0.940~0.988),敏感度为89.57%,特异度为98.26%。结论 EC患者癌组织及血清中miR-153-5p呈低表达,LncRNA CRNDE呈高表达,二者联合检测对EC的诊断效能较高,可以为临床早期诊断提供参考依据。

关键词：子宫内膜癌 LncRNA CRNDE miR-153-5p

LncRNA LINC00174调控miR-153-5p对乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖凋亡及迁移的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国妇幼保健 2021年第24期36卷 5777-5781页

作者：孙云菊张星陆幼波何英宁波大学附属人民医院浙江宁波315100

目的分析长链非编码RNA(LncRNA)LINC00174调控miR-153-5p对乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及迁移的影响。方法收集2018年6月-2019年12月在宁波大学附属人民医院接受手术治疗的35例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织,分为si-NC组、si-LI... 详细信息

目的分析长链非编码RNA(LncRNA)LINC00174调控miR-153-5p对乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及迁移的影响。方法收集2018年6月-2019年12月在宁波大学附属人民医院接受手术治疗的35例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织,分为si-NC组、si-LINC00174组、si-LINC00174+anti-mir-NC组及si-LINC00174+anti-miR-153-5p组。采用qRT-pCR检测LINC00174、miR-153-5p的表达水平,采用MTT检测细胞增殖率,采用平板克隆形成实验检测克隆形成能力,采用划痕实验检测细胞迁移率,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用双荧光素酶报告基因检测LINC00174与miR-153-5p的靶向关系。结果癌旁组织中LINC00174和miR-153-5p的表达水平分别为(1.03±0.11)和(0.96±0.15),乳腺癌组织中LINC00174和miR-153-5p的表达水平分别为(5.54±0.44)和(0.21±0.05),差异均有统计学意义(t=58.829,p=0.000;t=28.062,p=0.000)。si-NC组的LINC00174表达水平、miR-153-5p表达水平、抑制率、划痕愈合率及克隆形成数分别为(1.00±0.00)、(1.00±0.00)、(0.00±0.00)%、(65.78±2.92)%及(96.00±3.74)个,si-LINC00174组的LINC00174表达水平、miR-153-5p表达水平、抑制率、划痕愈合率及克隆形成数分别为(0.15±0.01)、(5.28±0.09)、(58.60±3.48)%、(24.71±1.46)%及(47.67±1.25)个,差异均有统计学意义(t=147.224,p=0.000;t=82.369,p=0.000;t=19.166,p=0.000;t=48.723,p=0.000;t=21.228,p=0.000)。si-NC组细胞凋亡率为(6.50±0.35)%,Bax蛋白水平为(0.17±0.02),Bcl-2蛋白水平为(0.60±0.06);si-LINC00174组细胞凋亡率为(24.40±0.70)%,Bax蛋白水平为(0.72±0.06),Bcl-2蛋白水平为(0.11±0.01)。与si-NC组比较,si-LINC00174组细胞凋亡率升高,Bcl-2蛋白水平降低,Bax蛋白水平升高,差异均有统计学意义(t=52.562,15.062,13.953,均p5)。与si-LINC00174+anti-mir-NC组比较,si-LINC00174+anti-miR-153-5p组细胞增殖抑制率降低,划痕愈合率升高,克隆形成数增多,差异均有统计学意义(均p5)。与si-LINC00174+anti-mir-NC组比较,si-LINC00174+anti-miR-153-5p组细胞凋亡率降低,Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,差异均有统计学意义(均p5)。结论乳腺癌组织中LINC00174的表达水平升高,miR-153-5p的表达水平降低,乳腺癌细胞增殖、迁移及克隆形成可通过干扰LINC00174的表达而有效抑制,进而促进细胞凋亡。

关键词： LncRNA LINC00174 miR-153-5p 乳腺癌增殖凋亡迁移

miR-153-5p靶向SNAI1介导结直肠癌细胞的放疗抵抗

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织化学与细胞化学杂志 2023年第6期32卷 547-553页

作者：彭炼田晓彩肖胜英邱俊湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院肿瘤二科长沙410001

目的探讨miR-153-5p在结直肠癌放疗抵抗中的作用,并进一步研究其潜在分子机制。方法首先对放疗敏感细胞系SW480及放疗抵抗结直肠癌细胞系SW480R中miR-153-5p表达水平进行RT-qpCR检测;然后利用转染技术构建过表达miR-153-5p的SW480R细... 详细信息

目的探讨miR-153-5p在结直肠癌放疗抵抗中的作用,并进一步研究其潜在分子机制。方法首先对放疗敏感细胞系SW480及放疗抵抗结直肠癌细胞系SW480R中miR-153-5p表达水平进行RT-qpCR检测;然后利用转染技术构建过表达miR-153-5p的SW480R细胞株,检测过表达mir-153后SW480R在接受放射后其细胞活力、侵袭能力、集落形成能力、凋亡水平的改变;免疫组织化学染色观察放疗敏感及放疗抵抗结直肠癌组织中SNAI1的表达差异;TargetScan分析miR-153-5p潜在靶点并利用荧光素酶实验验证;检测过表达miR-153-5p及SNAI1后SW480R细胞侵袭能力、集落形成能力及凋亡水平。结果与SW480组相比,SW480R组细胞中miR-153-5p表达降低;过表达miR-153-5p的SW480R细胞细胞活力、侵袭能力、集落形成能力均明显减弱,而凋亡水平显著增加;与放疗敏感结直肠癌组织相比,放疗抵抗结直肠癌组织中SNAI1显著增加;SNAI1可能为miR-153-5p的作用靶点;过表达miR-153-5p及SNAI1后SW480R细胞侵袭能力、集落形成能力显著增加,凋亡水平显著下降。结论 miR-153-5p通过靶向SNAI1参与调控结直肠癌细胞放疗抵抗。

关键词： miR-153-5p SNAI1 结直肠癌放疗抵抗

MicroRNA-153-5p在大鼠骨癌痛中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MicroRNA-153-5p在大鼠骨癌痛中的作用

作者：卫世有江苏大学

学位级别：硕士

癌症转移到骨所引起的骨癌痛(bone cancer pain,BCp)是癌症患者中重度疼痛的主要来源,是降低癌症患者生活质量的重要因素。现有的癌痛三阶梯疗法不能完全有效控制BCp,究其原因,其复杂的发生发展机制尚不十分清楚,故探明BCp的机制将为临... 详细信息

癌症转移到骨所引起的骨癌痛(bone cancer pain,BCp)是癌症患者中重度疼痛的主要来源,是降低癌症患者生活质量的重要因素。现有的癌痛三阶梯疗法不能完全有效控制BCp,究其原因,其复杂的发生发展机制尚不十分清楚,故探明BCp的机制将为临床治疗提供帮助。微RNA(microRNA,mirNA)是长约22nt,具有转录后调控功能的非编码RNA,其广泛参与机体的病理生理过程,且与疼痛具有相关性。其中mir-153在机体各器官广泛表达,能够抑制多种肿瘤的侵袭和迁移,参与氧化应激,控制炎症和信号通路传到等过程,但尚缺乏关于疼痛的研究。本研究将模拟临床BCp,建造、验证大鼠胫骨BCp模型,并探讨miR-153-5p在BCp中的作用。第一章建造BCp模型目的建造、验证大鼠胫骨BCp模型。方法取36只雌性清洁级SD大鼠随机分成3组:正常组(normal group,N组)n=12;骨癌痛模型组(BCp group,BCp组)n=12,向大鼠左胫骨骨髓腔接种10μl Walker 256乳腺癌细胞悬液;假手术组(sham group,sham组)n=12,同样方法接种相同体积热杀死细胞。并于0、1、3、6、9、12、15、18 d,进行疼痛行为学观测即行走痛评分(ambulatory score,AS)测定和大鼠患肢机械痛敏缩足阈值(paw withdrawal threshold,pWT)测定;并分别在造模后6、12、18 d,行X线摄片检查左胫骨结构改变情况。结果08 d,sham组与N组之间比较,AS及pWT差异均无统计学意义;BCp组在造模后08 d,AS从0±0分逐渐增加至3.46±0.31分,pWT从30.25±5.87g下降至3.33±1.01 g。造模后68 d BCp组的AS及pWT与sham组相比,差异有统计学意义(p5或0.01)。左胫骨X线检查显示,N组和sham组骨质无明显异常;而BCp组大鼠,于造模后6 d出现骨密度降低,造模后12 d骨密度降低的范围增大,且可伴有骨皮质破坏缺损;造模后18 d出现肿大,向周围侵犯伴形态改变。结论大鼠胫骨骨髓腔种植Walker256乳腺癌细胞可建立BCp模型,通过影像学、疼痛行为学实验验证模型稳定可靠,为进一步的机制研究奠定基础。第二章miR-153-5p在BCp大鼠脊髓中的表达变化目的探讨miR-153-5p在BCp大鼠脊髓中的表达变化情况。方法取32只雌性清洁级SD大鼠随机分成BCp组和sham组,每组16只,各组的建造方法同第一章。每组于0、9、12、18 d,取材脊髓腰膨大,通过RT-q pCR测定miR-153-5p的相对表达。结果与0 d相比,BCp组miR-153-5p的相对表达逐渐降低;与sham组相比,造模后9、12、18 d BCp组miR-153-5p的相对表达明显下降(p5或0.01),差异具有统计学意义。结论miR-153-5p在BCp大鼠脊髓表达下降,表明其有可能参与BCp。第三章鞘内注射agomiR-153-5p对BCp的影响目的研究鞘内注射agomiR-153-5p对BCp的影响。方法取24只大鼠,BCp造模后随机分为BCp+鞘内注射生理盐水(BCp+NS)组、BCp+鞘内注射agomiR-153-5p(BCp+agomir)组和BCp+鞘内注射agomiR-153-5p negative control(BCp+NC)组,每组8只。造模后9 d各组大鼠行鞘内置管,3 d修复期后,行鞘内注射,每次注射10μl,连续注射3 d。BCp+agomir组注射10μl共1nmol agomiR-153-5p,BCp+NC组注射10μl共1nmol agomiR-153-5p NC,而BCp+NS组按相同方法注射等体积的NS。分别观察记录注药前和注药后大鼠AS和pWT。结果BCp+NS组与BCp+NC组相比较,AS和pWT在整个观察期间差异无统计学意义。而BCp+agomir组在鞘内注射agomiR-153-5p后AS从2.59±0.16分逐渐降低至0.79±0.25分,pWT从5.67±0.62 g升高至13.96±1.24g,与BCp+NS组相比,差异具有统计学意义(p5或0.01)。结论agomiR-153-5p鞘内注射可有效缓解BCp,提示miR-153-5p可能参与骨癌痛过程。

关键词： BCp 动物模型 AS pWT miR-153-5p RT-q pCR 骨癌痛模型鞘内置管 agomiR-153-5p

LINC01426调控胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2022年第8期30卷 356-363页

作者：刘栋夏阿东李松张凯陈丹金华市人民医院肝胆外科浙江省金华市321000 金华市人民医院消化内科浙江省金华市321000

背景胃癌发病机制复杂,其中癌基因和抑癌基因表达失调是其进展的关键因素.miR-153-5p已被证实在肝癌中具有抑癌作用,lncRNA位于细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义RNA(ANRIL)促进肝癌细胞迁移.但LINC01426是否靶向miR-153-5p参与... 详细信息

背景胃癌发病机制复杂,其中癌基因和抑癌基因表达失调是其进展的关键因素.miR-153-5p已被证实在肝癌中具有抑癌作用,lncRNA位于细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义RNA(ANRIL)促进肝癌细胞迁移.但LINC01426是否靶向miR-153-5p参与胃癌进展仍有待研究.目的探讨长基因间非编码RNA 01426(LINC01426)是否靶向miR-153-5p影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭.方法实时定量pCR(RT-qpCR)分析LINC01426和miR-153-5p在胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)和正常胃上皮细胞(GES1)中表达量.pearson相关性分析胃癌组织中LINC01426和miR-153-5p表达的相关性.生物信息学在线分析、双荧光素酶报告实验、RT-qpCR分析和证实LINC01426对miR-153-5p调控作用.噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)实验、Transwell实验分析LINC01426和miR-153-5p表达对SNU-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结果胃癌组织、细胞中LINC01426表达量显著高于癌旁组织和GES1细胞(p5),miR-153-5p表达量显著高于癌旁组织和GES1细胞(p5).pearson相关性分析结果显示,胃癌组织中LINC01426和miR-153-5p的表达呈负相关(r=-0.828,p5).LINC01426靶向结合并负调控miR-153-5p.抑制LINC01426表达或过表达miR-153-5p显著降低SNU-1细胞活力、迁移和侵袭能力(p5),而抑制miR-153-5p表达显著升高SNU-1细胞活力、迁移和侵袭能力(p5).抑制miR-153-5p表达显著逆转LINC01426抑制对SNU-1细胞活力、迁移和侵袭的影响(p5).结论抑制LINC01426可阻碍胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,这与LINC01426负调控miR-153-5p有关.

关键词： LINC01426 miR-153-5p 胃癌细胞增殖迁移侵袭

circ-BMI1在食管癌中的表达及生物学功能研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

circ-BMI1在食管癌中的表达及生物学功能研究

作者：朱昕江苏大学

学位级别：硕士

目的:食管癌（Esophageal Cancer,EC）是一种常见的癌症类型,发病率高,死亡率高。尽管外科手术、化学疗法、放射疗法和生物靶向疗法已被用于治疗食管癌,但患者总体预后仍然很差。随着临床分期和病理分级的提高,食管癌的预后明显恶化。目... 详细信息

目的:食管癌（Esophageal Cancer,EC）是一种常见的癌症类型,发病率高,死亡率高。尽管外科手术、化学疗法、放射疗法和生物靶向疗法已被用于治疗食管癌,但患者总体预后仍然很差。随着临床分期和病理分级的提高,食管癌的预后明显恶化。目前,迫切需要找到合适的分子生物标志物和治疗靶点进行早期诊断,并提高食管癌患者的生存率。本研究拟检测食管癌患者中BMI1环状RNA（circ-BMI1）的表达水平,并探索食管癌发生发展过程中circRNA发挥的生物学功能及其分子机制。方法:1.应用实时定量pCR（RQ-pCR）检测10例初发食管癌患者癌组织和癌旁组织标本中circ-BMI1的转录本水平;检测49例食管癌患者和28例健康对照的血清中的circ-BMI1的转录本水平,分析其临床相关性。2.circ-BMI1转染Eca109细胞株,经流式细胞仪分选,构建稳定转染的NC-Eca109细胞和circBMI1-Eca109细胞,并利用RQ-pCR检测转染效率。3.通过CCK8法、流式细胞技术进行细胞增殖、迁移、凋亡实验、化疗药物敏感性等实验,进一步分析circ-BMI1在Eca109细胞中生物学功能。4.通过裸鼠致瘤实验分析circ-BMI1对体外裸鼠成瘤的影响,并检测肿瘤组织中circBMI1、EBF3等基因的表达水平。5.生物信息学网站预测circ-BMI1的靶向mirNA,并进一步寻找下游靶基因。6.RQ-pCR检测NC-Eca109细胞和circBMI1-Eca109细胞中miR-153-5p、mir-4666a-3p转录本水平。结果:1.circ-BMI1表达水平在食管癌中较对照显著下调（p＜0.01）。接受者操作特征曲线（Receiver operating characteristic curve,ROC）显示,血清circ-BMI1的表达水平可区分食管癌患者与健康对照。结合临床资料分析,circ-BMI1低表达组的低分化患者与高表达组相比,低分化率显著升高（p=0.016）,淋巴结转移率明显升高（p=0.010）。2.circ-BMI1稳定转染Eca109细胞,RQ-pCR检测,circ-BMI1在circBMI1-Eca109细胞的表达量明显高于NC-Eca109细胞（p＜0.001）。3.细胞功能实验结果显示,circBMI1-Eca109细胞生长速度显著慢于NC-Eca109细胞（p＜0.01）;circBMI1-Eca109细胞在营养不良的环境下的生长明显慢于对照组（p＜0.01）;circBMI1-Eca109细胞的迁移能力、集落形成能力均明显弱于对照组细胞（p＜0.01;p＜0.01）;circBMI1-Eca109细胞对于顺铂、5-氟尿嘧啶的敏感性显著高于对照组（p＜0.05）。4.circBMI1-Eca109组裸鼠生长的肿瘤体积较对照组明显减小（p＜0.05）,同时circBMI1-Eca109组中circ-BMI1表达量明显高于对照组（p＜0.01）。5.生物信息学网站预测circ-BMI1的靶向mirNA为miR-153-5p及mir-4666a-3p,进一步寻找mirNA下游靶基因,查阅相关文献,找出EBF3为与食管癌相关的基因。6.过表达circ-BMI1的Eca109细胞中miR-153-5p、mir-4666a-3p表达较对照下调（p＜0.01;p＜0.05）。结论:circ-BMI1在食管癌中表达下调,circ-BMI1的转录本水平可能作为区分食管癌患者及健康对照的潜在标志物,具有辅助诊断标记意义。circ-BMI1可能通过海绵吸附miR-153-5p、mir-4666a-3p而促进EBF3的表达来调控食管癌细胞功能及肿瘤的发展。

关键词：食管癌 BMI1环状RNA miR-153-5p mir-4666a-3p 早期B细胞因子3

circ0093335在急性髓系白血病中的表达及生物学功能研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

circ0093335在急性髓系白血病中的表达及生物学功能研究

作者：易晶江苏大学

学位级别：硕士

目的:急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML),作为临床以及分子异质性疾病,治疗以高剂量化疗为主,异常细胞遗传学和化疗耐药性使复发率居高不下,因此,迫切需要确定新的靶点,减少复发,改善患者生存。本文拟检测AML患者骨髓中circ09... 详细信息

目的:急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML),作为临床以及分子异质性疾病,治疗以高剂量化疗为主,异常细胞遗传学和化疗耐药性使复发率居高不下,因此,迫切需要确定新的靶点,减少复发,改善患者生存。本文拟检测AML患者骨髓中circ093335的转录本水平,进行细胞功能实验探索circ093335在AML发生、发展过程中的生物学功能。方法:1.应用实时定量pCR(RQ-pCR)检测125例初发AML和17例健康对照的骨髓标本中circ093335的转录本水平,分析临床相关性。2.circ093335转染的HL60细胞株,经流式细胞仪分选,构建稳定转染的NC-HL60和93335-HL60细胞,RQ-pCR检测转染效率。3.通过CCK8、流式细胞技术进行细胞增殖实验、凋亡实验、化疗药物敏感性实验,分析circ093335在HL60细胞中的功能。4.生物信息学网站预测circ093335的靶向mirNA,并进一步寻找下游靶基因。5.运用RQ-pCR技术检测circ093335转染细胞的mir-338-5p、miR-153-5p、ID4转录本水平,western blot技术检测circ093335转染细胞中ID4的蛋白表达。6.分析AML临床标本中circ093335和ID4的相关性。结果:1.与对照相比,在AML患者中circ093335下调(p=0.001)。接受者操作特征(ROC)曲线显示,circ093335转录本水平能够区分AML和健康人(AUC=0.736,p=0.002)。在Non-ApL AML患者中,低表达组较高表达组有更高的白细胞计数(中位数36.2×10/L和17.35×10/L,p=0.024)。在总AML和Non-ApL AML中,circ093335在男性患者中的低表达率明显高于女性患者(p=0.003和p=0.013)。此外,circ093335低表达组较高表达组的血小板计数更低(p=0.007和p=0.007)。2.稳定转染的93335-HL60细胞经RQ-pCR检测,circ093335的表达量明显高于NC-HL60(p5-HL60细胞生长速度明显慢于NC-HL60,在无血清环境下增殖能力也明显低于NC-HL60;过表达circ093335的HL60细胞对柔红霉素、高三尖杉酯碱的抑制率增高;NC-HL60和93335-HL60两组细胞的凋亡率无明显差异,但经高三尖杉酯碱处理后93335-HL60的凋亡率增加(p5);4.生物信息学网站预测circ093335的靶向mirNA为mir-338-5p、miR-153-5p,进一步寻找mir-338-5p、miR-153-5p下游靶基因,查阅文献,找出与AML相关的基因:ID4。5.过表达circ093335的HL60细胞中mir-338-5p、miR-153-5p表达下调(ppp5),western blot结果显示ID4的蛋白水平也上调。6.在AML临床标本中,circ093335和ID4的表达呈正相关(p5,r=0.32)。结论:circ093335低表达在AML中是常见分子事件,circ093335的转录本水平可作为区分总AML及Non-ApL AML亚型与健康对照的潜在生物标志物。circ093335抑制HL60细胞增殖,增加HL60细胞对柔红霉素、高三尖杉酯碱的敏感性,促进高三尖杉酯碱诱导的细胞凋亡。circ093335可能通过海绵吸附mir-338-5p、miR-153-5p而上调ID4的表达,来调控AML细胞功能及AML的发展。

关键词：急性髓系白血病 circ0093335 mir-338-5p miR-153-5p ID4