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作者：曾先燕山西医科大学

学位级别：硕士

研究背景:缺血性心脏病(Ischemic heart disease,IHD)是世界上关注度极高的心血管疾病之一。目前,心脏再灌注是其主要治疗措施,但在心脏再灌注血流恢复的过程中会加重组织和器官的额外损伤,严重时甚至危及患者生命,通常将这种损伤称为缺... 详细信息

研究背景:缺血性心脏病(Ischemic heart disease,IHD)是世界上关注度极高的心血管疾病之一。目前,心脏再灌注是其主要治疗措施,但在心脏再灌注血流恢复的过程中会加重组织和器官的额外损伤,严重时甚至危及患者生命,通常将这种损伤称为缺血/再灌注损伤(Ischemia/reperfusion injury,I/RI)。在缺血心肌再灌注时,受损的心肌细胞与内皮细胞可释放一系列细胞因子引起局部炎症反应,导致心肌梗死面积增加、心肌纤维化和心功能受损,从而加重缺血性心脏病。越来越多研究证实,Toll样受体4(tlr4)是Ⅰ跨膜蛋白,活化后激活下游核转录因子nf-кb表达,引起大量炎症因子(如IL-6、Tnf-α、IL-1β等)的释放,进而加重心肌损伤。诸多研究表明,心肌再灌注期间过表达的自噬会加速心肌细胞的丢失。而炎症与自噬之间的关系众说纷纭,但tlr4/nf-кb信号通路促进炎性因子分泌,进而介导自噬的发生是其主要激活途径。因此,我们需要寻找一种新物质来平衡它们之间的关系显得尤为重要。多项流行病学研究报告指出,富含草药、水果和香料的饮食可以降低心血管疾病的风险。橙皮素(Hesperetin,HES)来源于芸香科柑橘类植物果实,其主要药效成分是生物黄烷酮类,存在多种生物学活性,如改善血脂、抗氧化、抗肿瘤等。近几年研究表明,橙皮素对视网膜、脑及其他器官的缺血/再灌注损伤具有保护效应。但对心脏缺血/再灌注的影响尚不明确。本课题组前期研究已发现,橙皮素能减轻HO诱导的心肌H9c2细胞氧化损伤。因此,本研究旨在探讨橙皮素对大鼠心肌缺血/再灌注的影响及机制,为临床治疗缺血性心脏病提供新的思路。本研究分为二部分:在体实验橙皮素对大鼠进行灌胃6周后观察其对心肌缺血/再灌注的效应及其机制是否与炎症、自噬相关;离体实验建立心肌H9c2细胞低氧/复氧(Hypoxia/reoxygenation,H/R)模型,使用橙皮素进行预处理,观察其对低氧/复氧诱导心肌H9c2细胞线粒体途径凋亡、炎症及自噬之间的影响。目的:1.观察橙皮素对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响;2.探究橙皮素对心肌缺血/再灌注发挥保护效应的具体机制。方法:1.动物实验分组:选取清洁级健康雄性SD大鼠(4周,90-100 g,50只),橙皮素进行灌胃6周,随机分5组:假手术组(Sham),心肌缺血/再灌组(I/R),橙皮素预处理+心肌I/R组(HES+I/R),橙皮素预处理+假手术组(HES),TAK-242+心肌I/R组(TAK-242)。缺血45 min,再灌注3 h。(1)心电图检测橙皮素对大鼠I/R发生心律失常影响;(2)术前术后24 h进行超声心动图检测橙皮素对大鼠I/R心功能影响;(3)采用LDH、CK-Mb确定橙皮素对大鼠I/R所致心肌损伤的作用;(4)ELISA法测橙皮素对大鼠I/R心肌组织的MPO活性、血清(IL-6、Tnf-α、IL-1β)含量;(5)HE染色观察心肌组织的炎症浸润情况;(6)TUNEL染色和Caspase3活性检测橙皮素对I/R所致心肌细胞凋亡影响;(7)IHC/IF检测CD45、beclin1、LC3、p62表达;(8)Western blot法检测心肌组织的IL-6、Tnf-α、IL-1β、tlr4、p65、beclin1、LC3、p62蛋白表达;(9)用RT-PCR法检测IL-6、Tnf-α、IL-1β、tlr4、p65、beclin1、LC3的mRNA表达水平。2.细胞实验分组:细胞实验分为常氧对照组(Control),低氧/复氧组(Hypoxia/reoxygenation,H/R),橙皮素+低氧/复氧组(HES+H/R),TAK-242+低氧/复氧组(TAK-242+H/R),橙皮素组+正常组(HES+Control,HES)。(1)利用CCK-8、LDH法分别测定细胞的存活率与细胞损伤;(2)Hoechst33258染色和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;(3)利用ELISA试剂盒检测上清液中IL-6、Tnf-α、IL-1β含量;(4)采用Western blot测橙皮素对H/R诱导心肌H9c2细胞tlr4、p65、beclin1、LC3、p62的蛋白表达;(5)JC-1染色检测线粒体膜电位变化。结果:1.橙皮素通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护效应及调控炎症、自噬表达1.1橙皮素改善心脏I/R所致心功能降低心电图结果显示,I/R组发生心律失常个数明显增多,HES+I/R组发生心律失常频率少。术前及术后24 h大鼠超声心动图显示,术前各组大鼠心功能无明显变化;术后24 h:与Sham组相比,I/R组LVFS、LVEF明显降低(P<0.01);与I/R组相比,给予橙皮素处理后明显提高LVFS、LVEF(P<0.05)。1.2橙皮素减少I/R的心肌损伤结果显示与S

关键词：橙皮素 I/R H/R 炎症自噬凋亡 TLR4/NF-κB

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清肠化湿法治疗溃疡性结肠炎的疗效评价及对TLR4/NF-κB通路和肠黏膜屏障的影响

清肠化湿法治疗溃疡性结肠炎的疗效评价及对TLR4/NF-κB通路和肠...

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作者：刘智群南京中医药大学

学位级别：硕士

目的运用清肠化湿法治疗溃疡性结肠炎,评价其临床疗效及用药安全性,通过实验研究观察清肠化湿方对溃疡性结肠炎tlr4、nf-κb、IL-8、occludin、claudin-1表达的影响,揭示清肠化湿方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法临床部分：采用随... 详细信息

目的运用清肠化湿法治疗溃疡性结肠炎,评价其临床疗效及用药安全性,通过实验研究观察清肠化湿方对溃疡性结肠炎tlr4、nf-κb、IL-8、occludin、claudin-1表达的影响,揭示清肠化湿方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法临床部分：采用随机、对照的方法,将40例经结肠镜确诊为轻、中度溃疡性结肠炎活动期及中医辨证属湿热内蕴证的患者分为试验组(20例)和对照组(20例)。试验组患者给予中药清肠化湿方加减口服配合中药保留灌肠治疗;对照组予美沙拉嗪肠溶片(5-ASA)4g/d,总疗程为6个月。观察症状消失率、中医证候学疗效、综合疗效、肠镜评分(包括黏膜愈合率)、缓解率等,并监测用药安全性。实验部分：体外实验：予hTnf-α、 LPS诱导HT-29细胞炎症模型,分为空白对照组、模型对照组、SASP组、清肠化湿方低剂量、清肠化湿方中剂量、清肠化湿方高剂量。用transwell观察巨噬细胞趋化情况,免疫细胞荧光法检测nf-κb、tlr4蛋白,Elisa法检测细胞上清液中IL-8的含量。体内实验：TNbS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型,并随机分为空白对照组、模型对照组、清肠化湿方组、SASP组,治疗10天后处死大鼠,取新鲜结肠标本,观察黏膜大体形态及组织学改变,并采用Western blot法检测occludin、claudin-1蛋白表达水平。结果临床部分：试验组治疗后肠镜黏膜表现的改善优于对照组(P45.0%)无统计学差异。两组均无不良事件发生。实验部分：体外实验：模型组巨噬细胞趋化增加,nf-κb明显活化入核、tlr4蛋白表达增加,IL-8分泌增加,高剂量清肠化湿方抑制nf-κb活化入核的作用强于SASP组(Pnf-κb、tlr4、IL-8、occludin以及claudin-1等均有不同程度的干预和调控作用,并且可能是通过以上作用机制发挥抑制免疫,减轻炎症反应的作用,达到治疗溃疡性结肠炎的目的。

关键词：溃疡性结肠炎清肠化湿临床疗效 TLR4/NF-κB 紧密连接蛋白

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短期高脂饮食诱导小鼠肠道TLR4/NF-κB通路表达

短期高脂饮食诱导小鼠肠道TLR4/NF-κB通路表达

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作者：娜迪拉新疆医科大学

学位级别：硕士

目的：观察短期高脂饮食诱导后小鼠肠道TLR4/NF-κB信号通路的表达与变化，探讨该信号通路与高脂所致的肠道局部炎症反应之间的关系。方法：60只C57bL/6小鼠随机分为高脂饮食实验组0、1、3、5、7、9天，6个时间组（每组10只）。通过HE... 详细信息

目的：观察短期高脂饮食诱导后小鼠肠道TLR4/NF-κB信号通路的表达与变化，探讨该信号通路与高脂所致的肠道局部炎症反应之间的关系。方法：60只C57bL/6小鼠随机分为高脂饮食实验组0、1、3、5、7、9天，6个时间组（每组10只）。通过HE染色法，镜下观察肠道组织的病理学变化;免疫组织化学法检测炎症因子Tnf-α、IL-6的表达;蛋白质免疫印迹法（Western blot）测定Toll样受体4（tlr4）、核因子（nf-κb）和nf-κb p65磷酸化蛋白（PIκb）的表达量;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定tlr4、nf-κb mRNA表达。结果：HE染色发现第0-5天小鼠肠道均未见明显病理学改变，第7、9天可见少量巨噬细胞散在分布;免疫组织化学法结果显示，除第0天时间组外，余各组内均有Tnf-α、IL-6表达，其数量随时间呈递增趋势与实验前期TLR4/NF-κB的活化趋势基本一致;Western-blot、RT-PCR示，第1-7天TLR4/NF-κB的表达呈时间递增趋势且表达量于第7天时达峰值（P＜0.05），随后表达量减少;各时间组内均有PIκb蛋白表达，呈递减趋势，第9天时与基线比较有统计学差异。结论：短期高脂饮食喂养即可引起小鼠肠道局部炎症反应，炎症形成初始出现TLR4/NF-κB信号通路的活化，且活化程度与高脂饮食具有一定的时间一致性。TLR4/NF-κB信号通路的激活在高脂饮食诱导的肠道局部炎症形成中起重要作用，可能为其始动因子。

关键词： TLR4/NF-κB 短期高脂饮食肠道局部炎症

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葛根素通过TLR4/NF-κB诱导结肠癌sw480细胞死亡的作用机制

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解剖学研究 2017年第4期39卷 245-248页

作者：刁文晶上海交通大学医学院附属新华医院检验科上海200025

目的探讨葛根素(puerarin,Pue)通过TLR4/NF-κB信号通路诱导结肠癌sw480细胞死亡的作用机制。方法结肠癌sw480细胞给予50μmol/L Pue培养24 h,48 h和72 h后,细胞计数CCK-8法检测结肠癌sw480细胞的存活率;TUNEL法检测结肠癌sw480细胞凋亡... 详细信息

目的探讨葛根素(puerarin,Pue)通过TLR4/NF-κB信号通路诱导结肠癌sw480细胞死亡的作用机制。方法结肠癌sw480细胞给予50μmol/L Pue培养24 h,48 h和72 h后,细胞计数CCK-8法检测结肠癌sw480细胞的存活率;TUNEL法检测结肠癌sw480细胞凋亡;Real-Time PCR法和Western blot法检测结肠癌sw480细胞中tlr4、nf-κb和Caspase 3的基因和蛋白表达水平。结果与对照组相比,葛根素组中sw480细胞存活率显著降低,细胞凋亡显著增加,差异有统计学意义(Ptlr4、nf-κb和Caspase 3 m RNA水平和蛋白表达含量均明显增加,差异有统计学意义(P480细胞生长,诱导细胞凋亡的发生,且TLR4/NF-κB信号通路在此过程中起到重要作用。

关键词：葛根素结肠癌,sw480细胞 Toll样受体4 TLR4/NF-κB

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解毒化瘀通腑颗粒治疗亚急性和慢加急性肝衰竭患者的疗效及其对TLR4/NF-κB炎性通路的影响

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中西医结合肝病杂志 2018年第5期28卷 264-267页

作者：刘巧红刘江凯李素领河南中医药大学第一临床医学院河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院脾胃肝胆科

目的:评价解毒化瘀通腑颗粒对亚急性和慢加急性肝衰竭(SALF及ACLF)患者的治疗效果,并观察该方对TLR4/NF-κB炎性通路的影响。方法:将68例SALF及ACLF患者按随机数字表法随机分为两组,其中对照组患者给予常规内科综合支持治疗,试验组患者... 详细信息

目的:评价解毒化瘀通腑颗粒对亚急性和慢加急性肝衰竭(SALF及ACLF)患者的治疗效果,并观察该方对TLR4/NF-κB炎性通路的影响。方法:将68例SALF及ACLF患者按随机数字表法随机分为两组,其中对照组患者给予常规内科综合支持治疗,试验组患者在对照组基础上加用解毒化瘀通腑颗粒。结果:治疗后试验组患者治疗总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P bil)、血清直接胆红素(Dbil)、PTA、ET指标改善方面明显优于对照组(P b)、谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)水平方面,差异无统计学意义(P> 0. 05);治疗后两组患者的肿癌坏死因子-α(Tnf-α)、白细胞介素-6(IL-6)均降低,且试验组均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P tlr4mRNA及nf-κbm RNA的表达较治疗前均降低,且试验组明显低于对照组,差异具有统计学意义(P TLR4/NF-κB信号通路,减少Tnf-a、IL-6等相关炎性因子的产生及释放,达到减轻肝损伤的目的。

关键词：肝衰竭内毒素血症解毒化瘀通腑颗粒 TLR4/NF-κB

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姜黄素介导TLR4/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎的作用及机制研究

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临床医学进展 2024年第5期14卷 1125-1131页

作者：李家涛杜敏李畅姜英健王江张佃良青岛大学医学部山东青岛青岛市市立医院胃肠外科山东青岛

目的:观察姜黄素(CUR)对重症急性胰腺炎(SAP)的影响,并基于Toll样受体4 (tlr4)/核因子κb (nf-κb)信号转导通路探究其可能的作用机制。方法:选取40只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机把其分为4组,分别为:假手术组(SO)、重症急性胰腺炎组... 详细信息

目的:观察姜黄素(CUR)对重症急性胰腺炎(SAP)的影响,并基于Toll样受体4 (tlr4)/核因子κb (nf-κb)信号转导通路探究其可能的作用机制。方法:选取40只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机把其分为4组,分别为:假手术组(SO)、重症急性胰腺炎组(SAP)、SAP CUR预处理组(SAP CUR)、SAP CUR预处理 tlr4受体激活剂脂多糖(LPS)组(SAP CUR LPS)。SAP CUR组、SAP CUR LPS组的大鼠分别CUR (200 mg/kg)灌胃,SAP CUR LPS组在CUR灌胃干预前30 min腹腔注射tlr4受体激活剂LPS (0.1 mg/kg),SO组和SAP组分别给予相同剂量的无菌生理盐水溶液灌胃及腹腔内注射。各组均给药1次/天,连续4周。采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠的方法建立SAP大鼠模型,术后24 h采集胰腺组织以及下腔静脉血液以供后续分析。使用自动生化分析仪以检测大鼠血清中淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIPA)的活性水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α (Tnf-α)、白细胞介素6 (IL-6)的表达水平;苏木素-伊红(HE)染色用以观察胰腺的组织病理变化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定胰腺组织中tlr4、nf-κb的mRNA表达水平。结果:相较于SO组,SAP组大鼠的血清中AMY、LIPA、Tnf-α、IL-6的表达水平显著升高(均P κb信号通路相应mRNA水平显著升高(均P α、IL-6的表达水平显著降低(均P κb信号通路相应mRNA水平显著降低(均P P κb信号传导通路抑制炎症反应减轻SAP相关损伤。

关键词：重症急性胰腺炎姜黄素 TLR4/NF-κB 炎症因子

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胰瘅贴治疗重症急性胰腺炎模型大鼠tlr4/nf-Kb信号机制研究

胰瘅贴治疗重症急性胰腺炎模型大鼠TLR4/NF-KB信号机制研究

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作者：康晓征泸州医学院

学位级别：硕士

目的：观察胰瘅贴治疗重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠治疗后不同时间点血清淀粉酶(AMY)、肿瘤坏死因子(Tnf-α)、白介素-1β(IL-1β)水平的变化;观察胰腺组织大体形态和光镜下改变、Toll样受体4(Toll like recepto... 详细信息

目的：观察胰瘅贴治疗重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠治疗后不同时间点血清淀粉酶(AMY)、肿瘤坏死因子(Tnf-α)、白介素-1β(IL-1β)水平的变化;观察胰腺组织大体形态和光镜下改变、Toll样受体4(Toll like receptor 4, tlr4)和核因子-Kb (nf-Kb)表达的变化以探讨胰瘅贴外敷综合治疗在SAP大鼠胰腺细胞炎症信号转导通路中的效应机制。方法:wistar大鼠120只,雌雄各半,体重约220-260g,随机分为假手术组(J组)、模型组(M组)、善宁治疗组(S组)、胰瘅贴组(Y组)、善宁胰瘅贴组(Z组)。J组采取开腹翻动腹腔脏器数次后,使用一次性注射针头在胆胰管开口处的十二指肠对侧壁穿刺进入胆胰管开口进入约1.0cm,不注射牛磺胆酸钠即关腹;M组用0.5%的牛磺胆酸钠按1.0ml/kg逆行胰胆管注射诱发SAP;S组造模前半小时用善宁50 ug/kg于皮下注射;Y组造模成功后用胰瘅贴外敷于大鼠上腹部,每天换药一次,7次为一疗程;Z组造模前半小时用善宁50ug/kg于皮下注射,造模后用胰瘅贴外敷于大鼠上腹部,每天换药一次,7次为一疗程;分别于3h、12h、72h、2W[1-3]时间点.每组各处死6只大鼠,光镜下观察胰腺组织病理改变,同时测定大鼠血清AMY;用ELISA法检测血清Tnf-α、IL-1β的含量,用免疫组织化学法检测tlr4和nf-Κb的蛋白表达。所有结果均用SPSS 16.0软件分析,行方差分析。结果：1.胰腺组织形态变化及组织病理评分：①J组各时间点胰腺组织形态均未见明显异常。M组各时间点胰腺小叶间弥慢性水肿、炎性细胞浸润均明显,随着时间的推移,炎症逐渐扩展至腺管边缘,胰腺实质炎症>50%,核仁胞浆成分着色不清楚,胰腺实质性出血>50%,腺管点状坏死灶、小叶缺失,12h时最明显;S组、Y组胰腺小叶间弥慢性性水肿、炎性细胞浸润均明显,胰腺实质炎症>50%,实质性出血>50%,腺管点状坏死灶、小叶缺失,随着时间的推移,胰腺小叶间弥漫性水肿、实质性炎症、出血、坏死程度减轻;Z组3h时胰腺小叶间弥慢性性水肿、胰腺实质性炎性细胞浸润均明显,实质炎症>50%,实质性出血>50%,腺管点状坏死灶、小叶缺失均明显,随着时间的推移,胰腺小叶间弥漫性水肿、炎症、出血、坏死程度明显减轻。②各组胰腺组织的病理学评分：J组的病理学评分值各时间点均无明显差异(P>0.05)。M组、S组、Y组与Z组各时间点的病理学评分值均明显高于J组(Pnf-α(pg/m1)：M组、S组、Y组、Z组与J组相比血清Tnf-α均明显升高(Pnf-α低于M组、S组、Y组。(P4.IL-1β(pg/m1)：M组、S组、Y组、Z组血清IL-1β均明显高于J组(Ptlr4蛋白表达：免疫组织化学结果显示：M组、S组、Y组、Z组tlr4蛋白表达随时间延长而增强,以IOD表示,J组tlr4蛋白活性很低。造模成功后3h内tlr4蛋白迅速被激活,在12h处于高峰,72h后降低至正常水平。Z组tlr4蛋白活性变化规律与M组、S组、Y组大致相同,但各时间点活性均比M组、S组、Y组明显降低(Pnf-K b蛋白表达：J组nf-K b活性很低。造模成功后,M组、S组、Y组、Z组在3h内nf-K b迅速被激活,在3h处于高峰,12h仍处于高峰,72h后渐降低,2W最低。Z组nf-Κb活性变化规律与M组、S组、Y组基本相同,但各时间点活性低于M组、S组、Y组(Pnf-α、IL-1β,Z组低于M组、S组、Y组;Z组胰腺组织中tlr4和nf-Κb蛋白表达活性低于M组、S组、Y组。结论：胰瘅贴治疗SAP疗效优于单纯善宁治疗;胰瘅贴治疗SAP大鼠的可能机制：其降低tlr4表达,从而抑制tlr4对炎症信号的转导,减少了nf-Κb活化,使nf-Κb调控的多种炎症因子基因表达减弱,从而使细胞炎症因子

关键词：胰瘅贴重症急性胰腺炎 TLR4/NF-κB

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睡眠障碍后小胶质细胞活化相关信号通路的研究进展

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生理学报 2023年第4期75卷 569-574页

作者：舒治钧张全怡徐义鹏赵征宇成都中医药大学针灸推拿学院成都610075

睡眠是维持人类生命极其重要的生理状态,睡眠障碍不仅会导致焦虑、抑郁情绪的产生,还会通过诱发多系统疾病严重影响脑功能和身体健康。神经炎症反应是睡眠障碍后的关键病理过程,可导致一系列神经系统疾病的发生。近年来,小胶质细胞活化... 详细信息

睡眠是维持人类生命极其重要的生理状态,睡眠障碍不仅会导致焦虑、抑郁情绪的产生,还会通过诱发多系统疾病严重影响脑功能和身体健康。神经炎症反应是睡眠障碍后的关键病理过程,可导致一系列神经系统疾病的发生。近年来,小胶质细胞活化在神经炎症产生机制中所起的作用越来越受到重视,已成为该领域的研究热点。睡眠障碍后中枢微环境的失衡,导致小胶质细胞活化和极化状态改变,从而触发神经炎症反应。小胶质细胞活化受多个信号通路和复杂分子机制的调控,本文总结了睡眠障碍诱发神经炎症中小胶质细胞活化相关的5条信号通路:嘌呤P2X7受体(P2X7 receptor, P2X7R)、p38MAPK、Toll样受体4 (Toll-like receptor 4, tlr4)/nf-κb、JAK/STAT、α7-烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor, α7-nAChR)通路,以期为睡眠障碍后续深入研究和临床治疗靶点选择提供参考。

关键词：睡眠障碍神经炎症小胶质细胞 P2X7R p38MAPK TLR4/NF-κB JAK/STAT α7-nAChR

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澳洲坚果油脂对脂多糖诱导小鼠肠道损伤的改善作用研究

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中国粮油学报 2023年第11期38卷 149-155页

作者：缪福俊单春兰耿树香宁德鲁郭刚军云南省林业和草原科学院昆明650201 贵州大学动物科学学院贵阳550025 云南省热带作物科学研究所景洪666100

澳洲坚果油(MO)富含单不多饱和脂肪酸,尤其是棕榈油酸,具有多种生物活性。研究采用脂多糖(LPS)构建小鼠肠道损伤模型,探究澳洲坚果油脂对肠道损伤的改善作用及其机理。将小鼠随机分为4组:对照组(CON)、MO组[2.5 mL/(kg·d)]、LPS组(5 mg... 详细信息

澳洲坚果油(MO)富含单不多饱和脂肪酸,尤其是棕榈油酸,具有多种生物活性。研究采用脂多糖(LPS)构建小鼠肠道损伤模型,探究澳洲坚果油脂对肠道损伤的改善作用及其机理。将小鼠随机分为4组:对照组(CON)、MO组[2.5 mL/(kg·d)]、LPS组(5 mg/kg)、LPS+MO组,检测小鼠空肠组织病理变化、抗氧化指标、Toll样受体4/细胞核转录因子(TLR4/NF-κB)基因炎性因子、空肠组织病理学变化、细胞凋亡及炎症通路关键因子表达水平。结果表明:澳洲坚果油改善了LPS诱导的小鼠肠道病理形态;与LPS组相比,LPS+MO组显著增强了总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平(Ptlr4和nf-κb mRNA转录水平以及nf-κb蛋白表达水平显著低于LPS组;MO显著抑制了LPS诱导的肠道促炎因子肿瘤坏死因子-α(Tnf-a)和白细胞介素-6(IL-6)表达水平(PTLR4/NF-κB通路有关。

关键词：澳洲坚果油脂多糖肠道损伤抗氧化 TLR4/NF-κB 改善作用

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芦丁在bV2细胞中抗弓形虫的作用及机制分析

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畜牧兽医学报 2024年

作者：韩成全刘婧陶于淼关立增徐璐王悦尚临沂大学农林科学学院齐齐哈尔市龙沙区农业综合服务中心 3. 上海美迪西生物医药股份有限公司病理研究部临沂大学医学院

本研究旨在分析芦丁在bV2细胞中的体外抗弓形虫作用及其潜在机制。首先通过CCK8法、间接荧光染色法等测定芦丁细胞毒性、弓形虫抑制率及增殖情况以探究芦丁在bV2细胞中的抗弓形虫作用；随后，将细胞分成4组，分别为：空白组(Normal)、... 详细信息

本研究旨在分析芦丁在bV2细胞中的体外抗弓形虫作用及其潜在机制。首先通过CCK8法、间接荧光染色法等测定芦丁细胞毒性、弓形虫抑制率及增殖情况以探究芦丁在bV2细胞中的抗弓形虫作用；随后，将细胞分成4组，分别为：空白组(Normal)、感染对照组(T. gondii)、感染后低剂量芦丁治疗组(Rut 50)和感染后高剂量芦丁治疗组(Rut 100)，进行弓形虫感染及芦丁处理试验，并用ELISA等方法检测细胞培养液上清液中抗氧化酶SOD、GSH及脂质氧化产物MDA水平，炎症因子Tnf-α、IL-6及IL-1β水平，用Western blot检测bV2细胞中PI3K/AKT/Nrf2/HO-1、TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3信号通路中关键蛋白表达量。结果表明，在bV2细胞中，50和100 μg·mL－1的芦丁具有明显的抗虫效果，可显著抑制弓形虫感染率、入侵能力和增殖(Pnf-α、IL-6及IL-1β水平(PTLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3中关键蛋白表达量(PbV2细胞中具有明显的抗弓形虫作用，这可能与其可以通过激活PI3K/AKT/Nrf2/HO-1通路从而增强细胞抗氧化能力、以及抑制TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3通路从而减弱炎症反应有关。研究结果可为后续探究芦丁体内抗虫效果及分析其对弓形虫性脑损伤保护机制相关研究提供一定的理论参考，并为将芦丁开发成治疗人畜弓形虫病的潜在药物提供科学依据。

关键词：芦丁抗弓形虫作用 bV2细胞抗氧化抗炎 PI3K/AKT/Nrf2/HO-1 TLR4/NF-κB P2X7R/NLRP3

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