芦丁在BV2细胞中抗弓形虫的作用及机制分析

作     者：韩成全 刘婧陶 于淼 关立增 徐璐 王悦尚 

作者机构：临沂大学农林科学学院 齐齐哈尔市龙沙区农业综合服务中心 上海美迪西生物医药股份有限公司病理研究部 临沂大学医学院 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica)

年 卷 期：2024年第7期

页      面：3119-3131页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(31660614) 大学生创新创业训练计划项目(X202210452489) 

主　　题：芦丁 抗弓形虫作用 BV2细胞 抗氧化 抗炎 PI3K/AKT/Nrf2/HO-1 TLR4/NF-κB P2X7R/NLRP3 

摘      要：本研究旨在分析芦丁在BV2细胞中的体外抗弓形虫作用及其潜在机制。首先通过CCK8法、间接荧光染色法等测定芦丁的细胞毒性、弓形虫抑制率及增殖情况以探究芦丁在BV2细胞中的抗弓形虫作用；随后，将细胞分成4组，分别为：空白组（Normal）、感染对照组（T.gondii）、感染后低剂量芦丁治疗组（Rut 50）和感染后高剂量芦丁治疗组（Rut 100）,进行弓形虫感染及芦丁处理试验，并用ELISA等方法检测细胞培养液上清液中抗氧化酶SOD、GSH及脂质氧化产物MDA水平，炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β水平，用Western blot检测BV2细胞中PI3K/AKT/Nrf2/HO-1、TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3信号通路中关键蛋白表达量。结果表明，在BV2细胞中，50和100μg·mL-1的芦丁具有明显的抗虫效果，可显著抑制弓形虫感染率、入侵能力和增殖（P0.05）。50和100μg·mL-1的芦丁还可显著增多上清液中的SOD、GSH含量并降低MDA含量（P0.05）,且降低TNF-α、IL-6及IL-1β水平（P0.05）,并显著上调抗氧化通路PI3K/AKT/Nrf2/HO-1、下调炎症通路TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3中关键蛋白表达量（P0.05）。结果提示，芦丁在BV2细胞中具有明显的抗弓形虫作用，这可能与其可以通过激活PI3K/AKT/Nrf2/HO-1通路从而增强细胞抗氧化能力、以及抑制TLR4/NF-κB及P2X7R/NLRP3通路从而减弱炎症反应有关。研究结果可为后续探究芦丁体内抗虫效果及分析其对弓形虫性脑损伤保护机制相关研究提供一定的理论参考，并为将芦丁开发成治疗人畜弓形虫病的潜在药物提供科学依据。