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β淀粉样蛋白25-35对bv2细胞TREM2/NF-κB信号通路的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2024年第12期22卷 2164-2168页

作者：张秀文倪敬年王宗亮李婷魏明清时晶北京中医药大学东直门医院北京100700 北京王府中西医结合医院

目的:探讨不同浓度β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对小胶质细胞髓样细胞触发受体2(TREM2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将bv2细胞随机分为5组,分别加入0、5、10、20、40μmol/L的Aβ25-35,作用24、48 h,镜下观察细胞形态... 详细信息

目的:探讨不同浓度β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对小胶质细胞髓样细胞触发受体2(TREM2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将bv2细胞随机分为5组,分别加入0、5、10、20、40μmol/L的Aβ25-35,作用24、48 h,镜下观察细胞形态,CCK-8法测定细胞活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,实时荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定NF-κBp65、TREM2 mRNA表达。结果:显微镜下观察干预48 h后Aβ25-35≥10μmol/L细胞成片死亡,干预24 h后,CCK-8检测显示,不同浓度Aβ25-35干预bv2细胞的存活率均>70%,ELISA和RT-PCR检测显示,Aβ25-3520μmol/L和40μmol/L组促炎因子TNF-α和TREM2 mRNA的表达均明显升高,Aβ25-3520μmol/L的NF-κB p65 mRNA表达明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P细胞发生炎症反应,可能与TREM2/NF-κB信号通路的激活有关。

关键词：阿尔茨海默病炎症反应 bv2细胞 β-淀粉样蛋白25-35,Aβ25-35 实验研究

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雷公藤甲素通过调控NLRP3通路抑制LPS诱导的bv2小胶质细胞炎性反应

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山西大同大学学报（自然科学版） 2024年第1期40卷 75-80页

作者：穆秉桃李玉璐刘淇源孙肖乐胡芬琦曹佳蕾杨凤君李佩佩毕宇锦王泽涛张慧宇山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室山西大同037009 山西大同大学医学院山西大同037009 山西大同大学中医药健康服务学院山西大同037009

目的基于炎症小体(NLRP3)通路探讨雷公藤甲素(Triptolide TP)抑制小胶质细胞炎性反应的机制。方法脂多糖(LPS)刺激bv2小胶质细胞促细胞炎症损伤,建立体外模型,观察TP对LPS刺激的小胶质细胞的影响。bv2小胶质细胞分为对照组、LPS诱导的... 详细信息

目的基于炎症小体(NLRP3)通路探讨雷公藤甲素(Triptolide TP)抑制小胶质细胞炎性反应的机制。方法脂多糖(LPS)刺激bv2小胶质细胞促细胞炎症损伤,建立体外模型,观察TP对LPS刺激的小胶质细胞的影响。bv2小胶质细胞分为对照组、LPS诱导的模型组(1 mg/L LPS)、TP组(1 nmol/L TP+1 mg/L LPS)。对照组不做处理,其它组药物作用24 h,镜下观察药物组细胞发生的形态变化并和对照组比较;细胞上清液用Griess法测定一氧化氮(NO)的释放量;免疫荧光染色和Western blot法检测各组细胞间炎症小体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-1)和白细胞介素-18(IL-18)的水平差别。结果LPS诱导bv2细胞炎性活化,形态呈阿米巴样,降低细胞活性,促进NO的释放。TP作用后降低NO水平,使NLRP3炎性小体激活受到抑制,NLRP3、ASC、caspase-1和IL-18表达水平低下。结论TP对小胶质细胞炎性反应有抑制作用,发挥了TP的抗炎作用,抑制了NLRP3炎性小体的活化和表达。

关键词：雷公藤甲素脂多糖 bv2细胞 NLRP3炎症小体炎症反应

术后谵妄小鼠外周血源性外泌体对bv2小胶质细胞的影响

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宁夏医科大学学报 2024年第4期46卷 360-365页

作者：汤莎灵张芸冯蓓杨晓霞高宇博宁夏医科大学总医院麻醉与围术期医学科宁夏医科大学第一临床医学院银川750004

目的探讨术后谵妄(postoperative delirium,POD)小鼠外周血源性外泌体对bv2小胶质细胞的影响。方法选择12~14月龄的C57BL/6J雄性小鼠16只,随机分为空白对照组(Con组)和POD组,采用莫里斯水迷宫和Y迷宫实验评价POD模型是否建立成功,随... 详细信息

目的探讨术后谵妄(postoperative delirium,POD)小鼠外周血源性外泌体对bv2小胶质细胞的影响。方法选择12~14月龄的C57BL/6J雄性小鼠16只,随机分为空白对照组(Con组)和POD组,采用莫里斯水迷宫和Y迷宫实验评价POD模型是否建立成功,随后采用纳米颗粒跟踪分析、透射电子显微镜和Western blot法对血清中的外泌体进行鉴定,用PKH26染料标记外泌体。将bv2细胞随机分为对照组(Nor组)、正常小鼠外周血源性外泌体组(Con-Exo组)和麻醉/手术小鼠外周血源性外泌体组(POD-Exo组),共孵育24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞的活性,RT-qPCR和Western blot检测IL-1β、IL-6和TNF-α的相对mRNA和蛋白的表达。结果与Con组相比,POD组小鼠的认知能力下降(Pbv2细胞能够内吞被PKH26染料标记的外泌体;与Nor组和Con-Exo组比较,POD-Exo组bv2细胞活性下降(Pbv2细胞炎症反应。

关键词：术后谵妄 bv2细胞外泌体炎性因子

STAT3调控NLRP3炎症小体在麦芽酚铝致bv2细胞炎症反应中的作用

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环境与职业医学 2023年第11期40卷 1250-1256页

作者：王天枢高丹赵丹宦佳萍韩笑宋静王林平张慧芳牛侨路小婷山西医科大学公共卫生学院山西太原030001

[背景]铝激活信号转导和转录激活因子3(STAT3)致小胶质细胞活化核苷酸结合和寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体产生炎症反应并造成神经毒性。[目的]探讨STAT3调控NLRP3炎症小体在麦芽酚铝(Al(mal)_(3))致小鼠小胶质细胞株(bv2)细... 详细信息

[背景]铝激活信号转导和转录激活因子3(STAT3)致小胶质细胞活化核苷酸结合和寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体产生炎症反应并造成神经毒性。[目的]探讨STAT3调控NLRP3炎症小体在麦芽酚铝(Al(mal)_(3))致小鼠小胶质细胞株(bv2)细胞炎症反应中的作用。[方法]选取bv2细胞株,利用Al(mal)_(3)染毒和STAT3拮抗剂C188-9干预,实验分为5组:对照组,Al(mal)_(3)低、中、高剂量组(40、80和160μmol·L^(-1)Al(mal)_(3)),C188-9干预组(10μmol·L^(-1)C188-9+160μmol·L^(-1)Al(m al)_(3))。采用CCK8检测细胞活力;采用Western blotting检测bv2细胞M1/M2型标志物CD68/CD206的表达,以及STAT3、p-STAT3、NLRP3、cleaved-casepase-1、衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达量;采用ELISA检测促炎因子白细胞介素(IL)-1β、IL-18和抗炎因子IL-10的含量。[结果]细胞活力测定显示:随着染铝浓度的增加,各剂量组细胞活力逐渐降低。与对照组相比,Al(mal)_(3)高剂量组细胞活力下降18%(P细胞活力升高14%(P0.05)。[结论]铝能引起bv2小胶质细胞的炎症反应并且以促炎反应为主,其机制可能与STAT3调控NLRP3炎症小体分泌炎症因子有关。

关键词：麦芽酚铝 bv2细胞信号转导和转录激活因子3 寡聚化结构域样受体蛋白3

盐酸羟哌吡酮对脂多糖诱导小鼠抑郁样和焦虑样行为的改善作用及对bv2细胞抗炎作用相关机制

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第10期37卷 725-732页

作者：常海霞崔林雨李云峰代威张继国山东第一医科大学(山东省医学科学院)药学院山东泰安271016 军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所北京100850 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850

目的评价抗抑郁新药盐酸羟哌吡酮(代号:YL-0919)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠抑郁样和焦虑样行为的作用及对LPS诱导的bv2细胞炎症因子转录水平的影响。方法①将雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+YL-0919组和模型+YL-0919+B... 详细信息

目的评价抗抑郁新药盐酸羟哌吡酮(代号:YL-0919)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠抑郁样和焦虑样行为的作用及对LPS诱导的bv2细胞炎症因子转录水平的影响。方法①将雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+YL-0919组和模型+YL-0919+BD1047(Sigma-1受体拮抗剂)组,在实验第1天和第6天分别ip给予小鼠LPS 0.5 mg·kg^(-1),并于第2~6天每天2次ig给予YL-09192.5 mg·kg^(-1),或同时每天1次伴随ip给予BD10474 mg·kg^(-1)。以开场实验评价小鼠自发活动和焦虑样行为,以强迫游泳实验评价小鼠抑郁样行为。Western印迹法检测各组小鼠前额叶皮质NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和白细胞介素1β(IL-1β)蛋白表达水平。②bv2细胞分为细胞对照组、LPS组(LPS 1 mg·L^(-1)孵育6 h)、LPS+YL-0919组(YL-09192μmol·L^(-1)预处理1 h后加入LPS 1 mg·L^(-1)孵育6 h)和LPS+YL-0919+NE-100组(同时给予YL-09192μmol·L^(-1)和Sigma-1受体拮抗剂NE-10010μmol·L^(-1)预处理1 h后加入LPS 1 mg·L^(-1)孵育6 h),用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测bv2细胞内IL-6和IL-1βmRNA表达水平。结果①与正常对照组相比,LPS模型组小鼠自发活动无显著变化,但开场实验中央区的停留时间和进入中央区次数显著减少(P细胞对照组比较,LPS模型组bv2细胞IL-1β和IL-6 mRNA水平上调(P细胞上述变化显著逆转(Pbv2细胞炎症因子转录水平的增加,其机制可能由Sigma-1受体介导。

关键词：盐酸羟哌吡酮抑郁焦虑炎症小鼠 bv2细胞脂多糖

白藜芦醇对脂多糖诱导的bv2细胞炎症与凋亡反应的保护机制

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中成药 2022年第11期44卷 3663-3667页

作者：陈二华朱慧芳谭东明张建华丁旭殷紫江苏护理职业学院药学与中药学院江苏淮安223005 江苏护理职业学院护理与助产学院江苏淮安223005

目的研究白藜芦醇对脂多糖诱导的bv2细胞炎症与凋亡反应的保护机制。方法脂多糖刺激bv2细胞建立炎症模型,随机分为对照组、脂多糖组、脂多糖+白藜芦醇组、白藜芦醇组。采用Western blot、RT-qPCR、荧光染色与细胞流式分析,检测白藜芦醇... 详细信息

目的研究白藜芦醇对脂多糖诱导的bv2细胞炎症与凋亡反应的保护机制。方法脂多糖刺激bv2细胞建立炎症模型,随机分为对照组、脂多糖组、脂多糖+白藜芦醇组、白藜芦醇组。采用Western blot、RT-qPCR、荧光染色与细胞流式分析,检测白藜芦醇对bv2细胞的保护作用及分子机制。结果白藜芦醇可抑制脂多糖引起的细胞凋亡及IL-6、IL-1、TNF-αmRNA表达升高,增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,降低SQSTM1蛋白表达,减少脂多糖引起的溶酶体细胞器损伤,提高bv2细胞中溶酶体的荧光强度。结论白藜芦醇对脂多糖引起bv2细胞的炎症与凋亡反应有保护作用,其分子机制可能是通过调控TLR4-FOXO3信号通路影响细胞的自噬水平,从而减轻炎症因子的释放与细胞的凋亡反应。

关键词：白藜芦醇 bv2细胞脂多糖炎症凋亡自噬

人参皂苷Rg1通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控脂多糖诱导的炎症反应中bv2小胶质细胞的极化

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解剖学报 2023年第3期54卷 269-275页

作者：李婷钰王兴航迟晓晨李昆芳包翠芬锦州医科大学组织学胚胎学教研室锦州医科大学基础医学实验教学中心辽宁锦州121001

目的通过脂多糖刺激bv2小胶质细胞建立炎症模型,探讨人参皂苷Rg1是否通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)受体蛋白对炎症的调控作用。方法bv2小胶质细胞随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg1组、罗格列酮组、GW9662组。对照... 详细信息

目的通过脂多糖刺激bv2小胶质细胞建立炎症模型,探讨人参皂苷Rg1是否通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)受体蛋白对炎症的调控作用。方法bv2小胶质细胞随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg1组、罗格列酮组、GW9662组。对照组不做任何处理,模型组加入1 mg/L脂多糖,其他组在加入脂多糖处理后,再分别加入0.4 mmol/L人参皂苷Rg1、10μmol/L罗格列酮或10μmol/L GW9662。CCK-8法检测各组bv2小胶质细胞增殖情况;采用免疫荧光和免疫印迹法检测PPARγ、磷酸化核因子κBp65(p-NF-κB p65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和人精氨酸酶1(ARG-1)蛋白的表达。ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果与对照组相比,模型组细胞增殖率明显上升,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α炎症因子含量明显增高,免疫荧光和免疫印迹结果显示,iNOS和p-NF-κB p65阳性表达明显增多,PPARγ和ARG-1阳性表达明显减少(均P细胞增殖率降低,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表达水平降低,iNOS和p-NF-κB p65阳性表达明显减弱,PPARγ和ARG-1阳性表达明显增强(均Pbv2小胶质细胞的炎症反应,其机制可能与调控PPARγ/NF-κB通路从而促进小胶质细胞M2型极化有关。

关键词：人参皂苷Rg1 过氧化物酶体增殖物激活受体γ bv2细胞极化免疫印迹法

盐酸纳洛酮调控TRL4/NF-κB通路对缺氧缺糖诱导的bv2细胞炎症反应的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2023年第16期21卷 2962-2967页

作者：刘虎军贾菲张春瑞延安大学附属医院陕西延安716000 汉中市人民医院陕西汉中723000

目的:观察盐酸纳洛酮通过调控Toll样受体4(TRL4)/核转录因子κB(NF-κB)通路对缺氧缺糖诱导的bv2细胞炎症反应的影响。方法:培养bv2细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8测定不同浓度(0、0.01、0.10、1.00、5.00、10.00、20.00、40.00μmol/L... 详细信息

目的:观察盐酸纳洛酮通过调控Toll样受体4(TRL4)/核转录因子κB(NF-κB)通路对缺氧缺糖诱导的bv2细胞炎症反应的影响。方法:培养bv2细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8测定不同浓度(0、0.01、0.10、1.00、5.00、10.00、20.00、40.00μmol/L)盐酸纳洛酮对bv2细胞活性的影响。将bv2细胞分为对照组、缺氧缺糖诱导组、盐酸纳洛酮低浓度组(0.01μmol/L)、盐酸纳洛酮高浓度组(5.00μmol/L)、盐酸纳洛酮高浓度+TLR4激活剂组(5.00μmol/L盐酸纳洛酮+1 mg/L脂多糖)。采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测盐酸纳洛酮对bv2细胞的毒性;CCK-8法检测盐酸纳洛酮对bv2细胞增殖率的影响;倒置显微镜观察bv2细胞形态;检测bv2细胞培养上清液一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平;逆转录定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测bv2细胞TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、IL-1β mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测bv2细胞TRL4/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:浓度为0.01~5.00μmol/L的盐酸纳洛酮对bv2细胞活性无明显影响。与对照组比较,缺氧缺糖诱导组bv2细胞增殖率及LDH、NO、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、TRL4、细胞核NF-κB p65均升高(P细胞质NF-κB p65水平降低(Pbv2细胞增殖率及LDH、NO、IL-1β、TNF-α、IL-6、 IL-1βmRNA、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、TRL4、细胞核NF-κB p65降低(P细胞质NF-κB p65水平升高(Pbv2细胞增殖率及LDH、NO、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、TRL4、细胞核NF-κB p65升高(P细胞质NF-κB p65水平降低(Pbv2细胞炎症反应。

关键词：缺氧缺糖盐酸纳洛酮 Toll样受体4/核转录因子κB通路 bv2细胞炎症反应实验研究

氧糖剥夺再灌注后bv2细胞中差异表达关键基因的筛选及鉴定

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贵州医科大学学报 2022年第3期47卷 273-278页

作者：郭冬芬任真奎安小琼陈明孙嫚彬吴昌学禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州省第二人民医院检验科贵州贵阳550004 贵州医科大学儿科系贵州贵阳550004

目的筛选氧糖剥夺再灌注后bv2细胞中差异表达的基因。方法取小鼠小胶质细胞bv2分为正常组(control组)和氧糖剥夺再灌注组(OGD/R组),对两组细胞进行转录测序筛选差异表达基因,在线网站(https://www.***.love/products)对差异表达基... 详细信息

目的筛选氧糖剥夺再灌注后bv2细胞中差异表达的基因。方法取小鼠小胶质细胞bv2分为正常组(control组)和氧糖剥夺再灌注组(OGD/R组),对两组细胞进行转录测序筛选差异表达基因,在线网站(https://www.***.love/products)对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析;数据库String(https://***/)对差异表达基因进行蛋白质互作网络分析后,Cytoscape软件中选择cytoHubba插件筛选出评分较高的关键基因;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组关键基因的mRNA表达水平。结果与control组比较,OGD/R组有122个基因发生明显差异表达(P细胞介素-17(IL-17)信号通路中;蛋白质互作网络分析筛选出差异表达基因中10个评分较高的基因;qRT-PCR结果显示,与control组比较,OGD/R组中IL-6、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Csf 2)、IL-1β、丝氨酸(或半胱氨酸)肽酶抑制剂B分支成员2(Serpinb 2)mRNA表达增加(P细胞集落刺激因子(Csf 3)、Cd 40抗原(Cd 40)、前列腺素内过氧化物合酶2(Ptgs 2)、IL-10、CXC基序趋化因子配体2(Cxcl 2)以及IL-12 b mRNA表达降低(Pbv2细胞基因差异表达,生物信息学分析可筛选出差异表达基因中的关键基因,qRT-PCR可检测关键基因发生差异表达的情况。

关键词：脑卒中 bv2细胞氧糖剥夺再灌注生物信息学分析差异表达基因蛋白质互作网络分析