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畜牧与兽医 2015年第3期47卷 94-97页

作者：洪美珍巩雅静周伟娟方富贵李福宝王勇宋爽崔培蒋书东安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036

探讨麦芽糖结合蛋白-促性腺素释放激素六聚体（MBP-gnrh-i6）主动免疫对猫睾丸和附睾的影响。选取12周龄左右,体重1.0～1.2kg健康雄猫10只,随机分成免疫组（n=5）与对照组（n=5）。16周龄时给免疫组猫每只颈部肌肉注射MBP-gnrh-i6,22周... 详细信息

探讨麦芽糖结合蛋白-促性腺素释放激素六聚体（MBP-gnrh-i6）主动免疫对猫睾丸和附睾的影响。选取12周龄左右,体重1.0～1.2kg健康雄猫10只,随机分成免疫组（n=5）与对照组（n=5）。16周龄时给免疫组猫每只颈部肌肉注射MBP-gnrh-i6,22周龄时加强免疫1次。以同样的方式与剂量给对照组猫每只注射MBP。免疫前称重,以后每2周称重1次。28周龄时手术摘除睾丸和附睾,称重,取组织进行石蜡切片,HE染色,光学显微镜下观察组织结构变化,并用Motic image Plus 2.0软件分析图片。免疫后,免疫组雄猫的体重与对照组相比没有差异（P〉0.05）。免疫组雄猫的睾丸和附睾重量减少（P〈0.05）。组织切片显示：免疫组睾丸的曲精小管管腔内较空荡,细胞层数减少;附睾管内没有精子,附睾管腔变小,静纤毛变短。曲精小管与附睾管的纵径、横径、周长和面积与对照组相比明显减小（P〈0.05）。曲精小管内的精原细胞、初级精母细胞、精子细胞和精子显著小于对照组（P〈0.05）。本试验表明gnrh-i主动免疫不影响猫的体重增长,但抑制猫的睾丸和附睾的发育。

关键词： gnrh-i 猫主动免疫睾丸附睾

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gnrh-i主动免疫对犬生殖机能的影响

GnRH-I主动免疫对犬生殖机能的影响

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作者：赵熙杰安徽农业大学

学位级别：硕士

促性腺激素释放激素i (Gonadotrophin releasing hormone，gnrh-i)是下丘脑合成、分泌的十肽，它和脑垂体促性腺激素分泌细胞的特异性受体结合后刺激促性腺激素的产生和释放，起着调节生殖活动的作用。gnrh-i主动免疫动物，机体产生GnR... 详细信息

促性腺激素释放激素i (Gonadotrophin releasing hormone，gnrh-i)是下丘脑合成、分泌的十肽，它和脑垂体促性腺激素分泌细胞的特异性受体结合后刺激促性腺激素的产生和释放，起着调节生殖活动的作用。gnrh-i主动免疫动物，机体产生gnrh-i抗体中和内源性的gnrh-i，从而抑制动物的生殖。因此，gnrh-i主动免疫可作为生育调节的方法，具有抑制生殖内分泌、生殖器官发育等功能，可用于动物去势、避孕、终止妊娠。目前国内外学者用gnrh-i主动免疫对猪、牛、羊等的生殖机能和生产性能的影响进行了广泛研宄，但在犬方面的研宄却鲜有报道。鉴于本实验室已研制出gnrh-i疫苗，在猪、兔和鼠等动物显示了很强的免疫原性。本实验以犬为研宄对象，研宄该疫苗对其生殖功能的影响，为该疫苗将来的广泛应用和推广提供科学的理论依据。选取健康犬12只（雄犬6只，雌犬6只），年龄相近（3月龄），体重3.0?4.0kg，且发育正常。将6只雄、雌犬分别随机分成两组，每组3只，即对照组（n=3)与免疫组（n=3)。犬4月龄时，称取麦芽糖结合蛋白一促性腺激素释放激素六聚体（malotsebinding protein-gonadotropin releasing hormone i hexamer， MBP-gnrh-i6)1.5mg溶于3mL生理盐水，用等体积的Al(OH)3佐剂充分乳化后给每头试验组犬颈部肌肉注射2mL作为初始免疫，6周后加强免疫。试验期间，雄、雌犬每月采血一次，200xg离心20分钟提取血清，将血清保存在-20°C冰箱中，以备激素含量测定。7月龄时，手术摘取免疫组与对照组的犬睾丸与卵巢，并称重，测量睾丸与卵巢大小。然后用10%甲醛固定睾丸和卵巢组织，常规石蜡切片，厚度为祚m，苏木精-伊红（HE)染色，光学显微镜下观察并拍照。结果表明：免疫组雄犬的睾丸重量、直径、横径、纵周长与横周长、血清睾酮水平与对照组相比差异显著(Pgnrh-i6主动免疫抑制睾丸卵巢的生长发育，降低了血清睾酮与雌二醇浓度，精子发生与卵泡发育受到抑制，睾丸与卵巢萎缩。表明MBP-gnrh-i6对犬具有很强的免疫原性。

关键词： gnrh-i 主动免疫犬生殖机能

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gnrh-i主动免疫免疫对猫睾丸和附睾的影响

GnRH-I主动免疫免疫对猫睾丸和附睾的影响

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中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十八次学术研讨会

作者：洪美珍巩雅静周伟娟方富贵李福宝王勇宋爽崔培蒋书东安徽农业大学动物科技学院

为探讨麦芽糖结合蛋白一促性腺激素释放激素六聚体(MBP-gnrh-i6)主动免疫对猫睾丸和附睾的影响。选取12周龄左右,体重1.0.2 kg,健康的雄猫10只,随机分成免疫组(n=5)与对照组(n=5)。16周龄时给免疫组猫每只颈部肌肉注射MBP-gnrh-i6,22周... 详细信息

为探讨麦芽糖结合蛋白一促性腺激素释放激素六聚体(MBP-gnrh-i6)主动免疫对猫睾丸和附睾的影响。选取12周龄左右,体重1.0.2 kg,健康的雄猫10只,随机分成免疫组(n=5)与对照组(n=5)。16周龄时给免疫组猫每只颈部肌肉注射MBP-gnrh-i6,22周龄时加强免疫一次。以同样的方式与剂量给对照组猫每只注射MBP。免疫前称重,以后每2周称重一次。28周龄时手术摘除睾丸和附睾,称重,取组织进行石蜡切片,HE染色,光学显微镜下观察组织结构变化,并用Motic image Plus 2.0软件分析图片。结果显示:免疫后,免疫组雄猫的体重与对照组相比没有差异(P>0.05)。免疫组雄猫的睾丸和附睾重量减少(Pgnrh-i不影响猫的体重增长,但抑制猫的睾丸和附睾的发育。

关键词： gnrh-i 猫主动免疫睾丸附睾

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光周期对蛋鸡gnrh-i,gnrh-Ra mRNA表达和卵巢发育的影响

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激光生物学报 2015年第3期24卷 251-256页

作者：吕锦芳饶开晴姜锦鹏倪迎冬顾有方宁康健应如海周玉刚许百年安徽科技学院安徽凤阳233100 西南民族大学四川成都610041 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095 安徽省蚌埠市畜牧兽医技术推广站安徽蚌埠233000

60只75日龄iSA褐蛋鸡随机分成长光组(LL)和短光组(SL),试验期70 d。短光组恒定光/暗:8 h/16h;长光组起始光/暗:8 h/16 h,每周增加0.5 h,最长光/暗达到13 h/11 h。分别于105和136日龄每组取6羽蛋鸡采样,观察光周期对蛋鸡gnrh-i mRNA,gnrh... 详细信息

60只75日龄iSA褐蛋鸡随机分成长光组(LL)和短光组(SL),试验期70 d。短光组恒定光/暗:8 h/16h;长光组起始光/暗:8 h/16 h,每周增加0.5 h,最长光/暗达到13 h/11 h。分别于105和136日龄每组取6羽蛋鸡采样,观察光周期对蛋鸡gnrh-i mRNA,gnrh-Ra mRNA表达以及卵巢发育的影响。结果表明:136 d长光组gnrh-i mRNA表达的丰度显著高于短光组(Pgnrh-Ra mRNA表达较105 d显著下降(Pgnrh-Ra mRNA的表达丰度显著高于短光组(Pgnrh-i mRNA的表达,促进卵巢的发育;短光则明显下调垂体gnrh-Ra mRNA的表达,致使卵巢发育延缓。

关键词：光周期蛋鸡卵巢 gnrh-i mRNA gnrh-Ra

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单色光对肉鸡下丘脑gnrh-i表达的影响

单色光对肉鸡下丘脑GnRH-I表达的影响

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中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会

作者：张利卫王子旭曹静董玉兰陈耀星中国农业大学动物医学院

促性腺激素释放激素(gnrh)是由下丘脑分泌的一种神经肽,主要通过调节垂体促性腺激素的释放并作用于性腺,影响动物的繁殖。本实验室前期研究发现单色光影响肉鸡的生长发育,但其作用机制尚不明确。本研究以单色光为切入点,探讨单色光对肉... 详细信息

促性腺激素释放激素(gnrh)是由下丘脑分泌的一种神经肽,主要通过调节垂体促性腺激素的释放并作用于性腺,影响动物的繁殖。本实验室前期研究发现单色光影响肉鸡的生长发育,但其作用机制尚不明确。本研究以单色光为切入点,探讨单色光对肉鸡下丘脑gnrh-i表达的影响,为进一步阐明单色光影响肉鸡生长发育的作用途径提供理论依据。选择刚出壳的雄性AA肉鸡40只,随机分为4组,每组10只,分别饲养于白光、红光、绿光和蓝光下,14日龄取下丘脑。首先用免疫组化对肉鸡下丘脑gnrh-i进行定位,然后分别利用RT-PCR和Western Blot方法检测单色光对肉鸡下丘脑gnrh-i mRNA和多肽表达水平的影响。免疫组化染色结果显示,在肉鸡下丘脑的视前区(POA)、视前室周核(POP)、隔内侧核(SM)、隔外侧核(SL)和皮质联合核(nCPa)有gnrh-i的免疫反应阳性神经元,其中在nCPa中出现了大量的免疫反应阳性神经元。对于gnrh-i mRNA表达水平,不同光色相比,单色红光显著提高了14日龄肉鸡下丘脑gnrh-i mRNA表达水平。与白光相比,红光提高了gnrh-i mRNA的表达7.97%(P=0.273),绿光和蓝光分别比白光降低了13.18%(P=0.035)和3.68%(P=0.541)。此外,红光gnrh-i mRNA表达水平分别比绿光和蓝光提高了24.36%(P=0.002)和12.10%(P=0.076)。对于gnrh-i多肽表达水平,单色红光显著提高了14日龄肉鸡下丘脑gnrh-i多肽表达水平,且红光分别比白光,绿光和蓝光提高了6.08%(P=0.357)、27.76%和14.05%(P=0.06)。综上结果提示,在肉鸡下丘脑的nCPa存在大量的gnrh-i免疫反应阳性神经元,且单色红光显著提高了肉鸡下丘脑gnrh-i的表达水平。

关键词：单色光肉鸡下丘脑 gnrh-i

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gnrh-Ⅰ主动免疫对猫生殖功能的影响

GnRH-Ⅰ主动免疫对猫生殖功能的影响

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作者：洪美珍安徽农业大学

学位级别：硕士

gnrh-i (Gonadotrophin releasing hormone, gnrh-i)主动免疫可以用于避孕、终止妊娠、动物去势等。目前国内外学者对gnrh-Ⅰ主动免疫大动物猪、牛、羊等的研究较多,在小动物猫方面报道较少。本实验室研制出的gnrh-Ⅰ试剂已在猪、鼠和... 详细信息

gnrh-i (Gonadotrophin releasing hormone, gnrh-i)主动免疫可以用于避孕、终止妊娠、动物去势等。目前国内外学者对gnrh-Ⅰ主动免疫大动物猪、牛、羊等的研究较多,在小动物猫方面报道较少。本实验室研制出的gnrh-Ⅰ试剂已在猪、鼠和犬上做了研究,显示了很强的免疫作用。本试验以幼龄家猫为研究对象,探讨gnrh-Ⅰ主动免疫对猫体重、对猫血清gnrh-Ⅰ抗体水平、睾酮和雌二醇浓度、对猫生殖器官的影响,为该试剂的推广提供理论依据。从市场购买年龄相近(约12周龄),体重接近(1.0-1.2kg),发育正常的健康家猫雄性、雌性各10只。随机将雄猫、雌猫分别分成两组,每组各5只,即对照组(n=5)与免疫组(n=5)。上述猫饲养4周使其适应环境后,即猫16周龄时,进行初次免疫。称取麦芽糖结合蛋白—促性腺激素释放激素六聚体(maltose binding protein-gonadotropin releasing hormone i hexamer, MBP-gnrh-i6) 2.5mg或麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein, MBP) 2.5mg,将其溶于5mL生理盐水中,然后用相同体积的A1(OH)3佐剂充分乳化。每只免疫组猫颈部肌肉注射1mL MBP-gnrh-i6,对照组猫颈部肌肉注射1mL MBP。6周后加强免疫,免疫剂量和免疫方式与初次免疫相同。初次免疫前采血和称重,以后每4周(28天)采血一次,每2周(14天)称重一次。取得血样后立即进行离心,3000r/min离心20min,获得的血清保存在-20℃冰箱中,以备检测。用ELiSA测定血清gnrh-Ⅰ抗体水平,用放射免疫分析法检测雄猫的睾酮水平和雌猫的雌二醇浓度。28周龄时,手术摘除所有试验猫的生殖器官,称得睾丸、附睾、卵巢与子宫的重量,并测量睾丸和卵巢大小。4%多聚甲醛固定睾丸、附睾、卵巢、子宫等组织,采用常规石蜡切片,厚度为51μm,苏木精-伊红(HE)染色,光学显微镜下进行观察并拍照,并用Motic image Plus 2.0软件进行分析,测定100倍镜下附睾管与40倍镜下子宫腺体的数量、子宫粘膜厚度、曲精小管与附睾管的大小。结果表明：免疫后,免疫组雄猫和雌猫的体重分别与对照组相比均没有差异(P>0.05);免疫组雄猫或雌猫的gnrh-Ⅰ抗体水平均高于对照组(P0.05)。组织切片显示：免疫组雄猫睾丸的曲精小管发生萎缩,精原细胞分化不明显;而对照组曲精小管内细胞层数增多,精原细胞逐渐向管腔内发育,分化为初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子。免疫组雄猫附睾未发现精子,附睾管腔变小,静纤毛变短;而对照组附睾管中有精子存在,附睾黏膜上皮正常。免疫组雌猫的卵巢卵泡未见明显生长发育,含有大量的原始卵泡和初级卵泡,未见次级卵泡;而对照组卵巢皮质可见大量的原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡。免疫组雌猫子宫内膜上皮没有变化,腺体正常,各层结构清晰,与对照组没有差异。根据以上结果可以得出结论：MBP-gnrh-i6主动免疫不影响猫的体重,能升高gnrh-Ⅰ抗体水平,降低血清睾酮和雌二醇浓度,抑制精子发生与卵泡发育,使睾丸、附睾与卵巢萎缩。这表明MBP-gnrh-i6对猫有很强的免疫原性。

关键词： gnrh-i 猫免疫生殖功能

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gnrh类似物及其在动物繁殖上的应用

GnRH类似物及其在动物繁殖上的应用

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中国奶业协会第24次繁殖学术年会暨国家奶牛/肉牛产业技术体系第一届全国牛病防治学术研讨会

作者：宋亚攀孙丽萍宋洛文杨利国河南省畜牧局家畜改良站河南省奶业协会

gnrh在动物繁殖调控中的中枢地位毋庸置疑,很多因素都是通过影响下丘脑gnrh的释放或垂体对CmRH的应答而发挥作用的。在兽医临床实践中,gnrh和它的激动剂gnrha广泛地用于治疗卵巢功能异常而带来的不孕、刺激排卵和提高妊娠率。gnrha和其... 详细信息

gnrh在动物繁殖调控中的中枢地位毋庸置疑,很多因素都是通过影响下丘脑gnrh的释放或垂体对CmRH的应答而发挥作用的。在兽医临床实践中,gnrh和它的激动剂gnrha广泛地用于治疗卵巢功能异常而带来的不孕、刺激排卵和提高妊娠率。gnrha和其他一些激素合用,可用于同期发情和胚胎移植。然而,持续的给予gnrh可以导致垂体-卵巢轴的脱敏反应(desensitizing effect)。并且具有抑制排卵和阻断发情周期的抗生育效应。正因为这些,现在gnrh的拮抗剂也开始在临床中广泛地应用。很长一段时间,gnrh被认为是唯一可以调节促性腺激素的激素,然而,现在发现了很多能够与与gnrh受体(gnrh recoptor,gnrhR)结合的同源配体。在哺乳动物,至少已经发现了20种能与gnrhR结合的gnrh的变异体(gnrhs)。这些不同的gnrhs具有明显相同或不同的功能,这些都需要我们去深入的研究其繁殖功能和其他的生理功能。或许将来,这些gnrhs可以很好地在兽医临床实践中应用。本文对gnrh的类似物进行综述,以期为开发出有效并且对动物安全的内源性gnrhs和外源性类似物gnrha。

关键词： gnrh gnrh-i gnrh同型物(gnrhs) gnrh类似物(gnrha) gnrh激动剂 gnrh拮抗剂

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饲粮添加锰对肉种母鸡生殖性能的影响及其机制研究

饲粮添加锰对肉种母鸡生殖性能的影响及其机制研究

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作者：田传欢中国农业科学院

学位级别：硕士

锰是动物必需的微量元素之一。缺锰会影响蛋鸡的生殖性能和生殖激素。然而,关于缺锰对肉种母鸡生殖性能的影响及其可能的机制却少有人研究。本试验采用2x2两因子完全随机试验设计,选取120只处于21周龄的AA肉种母鸡,按体重随机分为5个处... 详细信息

锰是动物必需的微量元素之一。缺锰会影响蛋鸡的生殖性能和生殖激素。然而,关于缺锰对肉种母鸡生殖性能的影响及其可能的机制却少有人研究。本试验采用2x2两因子完全随机试验设计,选取120只处于21周龄的AA肉种母鸡,按体重随机分为5个处理组,每个处理组6个重复,每个重复4只鸡,饲养于2个三层阶梯式镀塑产蛋鸡笼中,每笼2只鸡。在21-29周龄期间饲喂含适宜水平锰的饲粮。适应9周后,于30-31周龄饲喂2周不添加外源锰的玉米-豆粕饲粮,使鸡只处于临界缺锰状态。从32周龄开始为期14周的正式试验期。各处理组鸡只分别饲喂不添加锰的基础饲粮(锰含量为14.45mg/kg,对照组)和添加120或240mg/kg的无机硫酸锰(MnSO4·H2O)或中等络合强度(Qf=-69.91)的蛋白锰的试验饲粮。结果发现,与对照组相比,饲粮添加锰显著提高了肉种母鸡所产种蛋的蛋壳强度(P0.21)。与添加120mg/kg锰处理组相比,添加锰240mg/kg显著提高了37至41周龄肉种母鸡的产蛋量(P0.20)。添加蛋白锰组种母鸡血清中的甘油三酯含量显著高于添加无机硫酸锰组(Pgnrh-i基因mRNA水平(Pgnrh-i基因和垂体FSH基因mRNA的水平显著高于添加120mg/kg锰处理组(Pgnrh-i基因的表达量显著高于有机锰组(Pgnrh-R(促性腺激素释放激素i受体)、iNOS(诱导型一氧化氮合成酶)和DRD1(多巴胺受体D1)基因及下丘脑TH(酪氨酸羟化酶)和iNOS基因的表达均无显著差异(P>0.10)。以上结果表明,饲粮添加锰可以提高肉种母鸡的产蛋性能和改善其蛋品质;240mg/kg锰添加水平可能通过激活下丘脑gnrh-i基因和垂体FSH基因的转录来参与对生殖系统的中枢调节;与有机锰相比,无机锰能更有效地诱导下丘脑gnrh-i基因mRNA的表达,可能是由于后者更易透过血-脑屏障的原故。

关键词：锰基因表达 gnrh-i FSH AA肉种鸡

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