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伴epor重排的Ph样急性淋巴细胞白血病二例报告并文献复习

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中华血液学杂志 2018年第9期39卷 773-775页

作者：杨倩邵海刚刘恒芳白淑潇张俊王勇沈娟吴春晓仇惠英陈苏宁潘金兰苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

2016年WHO提出了一类新的急性淋巴细胞白血病（ALL）亚型，即Ph样／BCR-ABL样ALL（Ph-like／BCR-ABL—like ALL）。该类ALL因与Ph＋／BCR-ABL＋ALL有着相似的基因表达谱，但无Ph染色体或BCR-ABL融合基因而得名。该类患者对常规化疗不敏... 详细信息

2016年WHO提出了一类新的急性淋巴细胞白血病（ALL）亚型，即Ph样／BCR-ABL样ALL（Ph-like／BCR-ABL—like ALL）。该类ALL因与Ph＋／BCR-ABL＋ALL有着相似的基因表达谱，但无Ph染色体或BCR-ABL融合基因而得名。该类患者对常规化疗不敏感，疗效差，易复发，预后不良。最近研究发现，Ph样ALL患者中具有多种遗传学异常和突变，且这些异常涉及酪氨酸激酶或细胞因子受体信号激活基因，使得该类ALL患者对酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗有效。

关键词：急性淋巴细胞白血病 Ph+ BCR-ABL融合基因文献复习 epor 酪氨酸激酶抑制剂基因表达谱重排

epor移码突变导致先天性红细胞增多症家系报告并文献复习

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中国实用内科杂志 2022年第7期42卷 568-572页

作者：韩迎弟张宇卉高超胡耐博滕广帅王艳杜晨霄陈亚芳李艳旗张会勤彭岚柳义白洁天津医科大学第二医院血液科天津300211

目的报道1例携带epor移码突变的先天性红细胞增多症(CE)的家系病例,丰富此类疾病的基因突变位点,总结CE患者基本特征,提高对该疾病的认识。方法2019年天津医科大学第二医院分析CE患者的临床特征、实验室特征、内源性红细胞集落(EEC)、... 详细信息

目的报道1例携带epor移码突变的先天性红细胞增多症(CE)的家系病例,丰富此类疾病的基因突变位点,总结CE患者基本特征,提高对该疾病的认识。方法2019年天津医科大学第二医院分析CE患者的临床特征、实验室特征、内源性红细胞集落(EEC)、促红细胞生成素(EPO)水平及基因测序结果,总结CE患者的诊疗过程,并进行相关文献复习。结果患儿,女性,8岁6个月,“发现红细胞增多5年”,RBC 6.31×10^(12)/L,HGB 186 g/L,HCT 56.4%,EPO水平降低,骨髓EEC培养结果阳性,JAK2^(V617F)、JAK2^(EXON12)基因突变均阴性。epor存在1个移码突变,为c.1299_1305del:p.S433fs,口腔黏膜脱落细胞验证为胚系突变,先证者验证发现,突变遗传自其父亲。共检测家系成员21人,发现该家系共12例成员存在epor基因同一位点突变。几乎所有存在epor基因突变的家系成员的RBC、HGB、HCT高于正常参考范围,但临床症状较轻。结论此类疾病国内报道很少,该家族为国内首次报道epor c.1299_1305del:p.S433fs突变的CE患者;该类患者临床症状轻,血常规检查提示RBC增多,HCT增高,血清EPO水平低于正常参考值、EEC阳性,骨髓活检示粒红巨三系增生,诊断时应注意与PV鉴别。

关键词：先天性红细胞增多症 epor 基因突变

epor在急性白血病细胞的表达及其临床意义

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中国实验血液学杂志 2011年第1期19卷 15-18页

作者：程国丽王伟汪洪毅崔中光青岛大学医学院附属医院血液内科山东青岛266003

本研究旨在探讨红细胞生成素受体(epor)在急性白血病(AL)细胞上的表达及其临床意义。收集我院门诊及住院40例急性白血病患者骨髓,并选择24例骨髓正常患者的骨髓作为对照。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测白血病细胞epor mRNA的... 详细信息

本研究旨在探讨红细胞生成素受体(epor)在急性白血病(AL)细胞上的表达及其临床意义。收集我院门诊及住院40例急性白血病患者骨髓,并选择24例骨髓正常患者的骨髓作为对照。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测白血病细胞epor mRNA的表达。结果显示,急性白血病细胞有epor的表达,表达率为57.5%,平均表达量(灰度值)为0.3549±0.2800,均低于正常对照(p0.05),表达量灰度值AML高于ALL(pepor,表达率和平均表达量均低于正常对照(p0.05),表达量AML高于ALL(p<0.05)。

关键词：急性髓系白血病急性淋巴系白血病 epor

花斑裸鲤Epo和epor基因克隆及其低氧诱导的mRNA表达

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动物学杂志 2018年第2期53卷 220-233页

作者：赵永丽吴蓉蓉晁燕陈祺昌夏明哲祁得林青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室西宁810016 青海大学生态环境工程学院西宁810016 青海大学农牧学院动物科学系西宁810016

促红细胞生成素(EPO)是一种糖蛋白激素,在动物低氧适应中发挥着重要作用。本研究采用RT-PCR方法克隆了花斑裸鲤(Gymncypris eckloni)Epo和epor基因的编码序列,并开展了分子进化和低氧诱导表达研究。结果表明,花斑裸鲤Epo基因编码序列长... 详细信息

促红细胞生成素(EPO)是一种糖蛋白激素,在动物低氧适应中发挥着重要作用。本研究采用RT-PCR方法克隆了花斑裸鲤(Gymncypris eckloni)Epo和epor基因的编码序列,并开展了分子进化和低氧诱导表达研究。结果表明,花斑裸鲤Epo基因编码序列长度为552 bp,编码183个氨基酸;epor基因编码序列长度为1 590 bp,编码529个氨基酸。氨基酸序列同源性分析显示,花斑裸鲤促红细胞生成素(EPO)和促红细胞生成素受体(epor)与鲤科其他鱼类均有较高的同源性,表明在进化过程中具有较强保守性,同时花斑裸鲤Epo和epor基因均未经历正向选择。在重度低氧[溶解氧为(0.3±0.1)mg/L]和中度低氧[溶解氧为(3.0±0.1)mg/L]胁迫下,花斑裸鲤部分关键组织如红肌、脑组织中Epo m RNA表达量急剧升高,表明促红细胞生成素(EPO)可能在花斑裸鲤运动、神经营养和神经保护方面发挥了重要作用,是对低氧环境适应的一种调节机制。

关键词：花斑裸鲤点Epp epor 表达分子进化低氧

猪epor和MYPN基因SNPs检测及其与肉质、胴体性状关联分析

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中国畜牧兽医 2009年第10期36卷 80-84页

作者：杜东升翟丽维徐丹丹王楚端中国农业大学动物科技学院北京100193 广东温氏食品集团有限公司广东527439

对epor、MYPN2个候选基因进行SNPs检测,并与肉质性状的关联分析,以期为分子育种提供依据。采用PCR-SSCP及PCR-RFLP方法对目的基因片段进行SNPs检测,结果显示,在研究群体内,epor基因不存在SNP,而MYPN基因存在2个SNP。用SAS软件对MYPN基因... 详细信息

对epor、MYPN2个候选基因进行SNPs检测,并与肉质性状的关联分析,以期为分子育种提供依据。采用PCR-SSCP及PCR-RFLP方法对目的基因片段进行SNPs检测,结果显示,在研究群体内,epor基因不存在SNP,而MYPN基因存在2个SNP。用SAS软件对MYPN基因的2个SNP位点与部分肉质、胴体性状进行关联分析,结果表明,在本试验群体中,SNP1对背膘厚、导电性、眼肌面积和肌内脂肪的影响都达到了显著水平(P<0.05);SNP2对其中的背膘厚和肌内脂肪含量影响达到了显著水平(P<0.05);另外性别、品种对部分性状也有较大影响(P<0.05)。结合本研究结果和其它相关研究结果,可以推断MYPN基因可能是影响肉质、胴体性状的主效基因或与控制这些性状的主效基因连锁,可以作为肉质、胴体性状的候选基因。

关键词： epor MYPN 肉质胴体性状

COX17、epor、VEGF-A基因的多态性与藏羊高海拔低氧适应性的关联性研究

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COX17、EPOR、VEGF-A基因的多态性与藏羊高海拔低氧适应性的关联...

作者：王朝风甘肃农业大学

学位级别：硕士

为解析藏羊高原低氧适应的分子机制，本研究以分布在不同海拔高度的不同绵羊群体为研究对象，选择与氧、能量代谢相关的COX17、 epor、 VEGF-A基因为候选基因，利用DNA混合池、直接测序法和高分辨率溶解曲线对COX17、epor、VEGF-A进行... 详细信息

为解析藏羊高原低氧适应的分子机制，本研究以分布在不同海拔高度的不同绵羊群体为研究对象，选择与氧、能量代谢相关的COX17、 epor、 VEGF-A基因为候选基因，利用DNA混合池、直接测序法和高分辨率溶解曲线对COX17、epor、VEGF-A进行基因分型，分析其在不同绵羊群体中基因多态性，并进行COX17、epor、VEGF-A基因多态性与藏羊不同群体高海拔低氧适应的关联性分析，以期为藏羊遗传资源的保护利用与新品种选育提供科学依据。***17基因多态性与藏羊高海拔低氧适应性的关联性研究在不同海拔高度的绵羊群体中COX17基因内含子区发现2个SNP位点，SNP1(g.402T/C)，SNP2(g.408T/C)，其基因型和等位基因频率在低海拔和中海拔与高海拔绵羊群体间均差异显著（P0.05）。SNP1(g.402T/C)、SNP2(g.408T/C)在中海拔与高海拔绵羊群体中的优势基因型均为TT，在低海拔绵羊群体中CC为优势基因型，三个绵羊群体中SNP1、SNP2均处于紧密连锁不平衡状态（D’>0.75，r2>0.33）。藏羊群体中的优势等位基因是T，优势基因型是TT，优势单倍型是TT。2. epor基因多态性与藏羊高海拔低氧适应性的关联性研究在不同海拔高度的绵羊群体中epor内含子区发现3个SNP位点，SNP1(g.237A/G)、SNP3(g.4657G/A)、SNP4(g.4857G/A)，在编码区发现1个SNP位点SNP2(g.2922C/G)，SNP2使编码氨基酸由丙氨酸突变为苏氨酸，但未引起蛋白高级结构的变化，SNP1(g.237A/G)、SNP2(g.2922C/G)的基因型频率和等位基因频率在低海拔和高海拔海拔绵羊群体中差异极显著（P0.05），SNP2(g.2922C/G)中海拔与高海拔绵羊群体中的优势基因型均为GG，在低海拔绵羊群体中CC是优势基因型，三个绵羊群体中SNP1、SNP2、SNP3和SNP4呈紧密连锁不平衡状态（D’>0.75r2>0.33）。藏羊群体中优势等位基因均为G，优势基因型是GG，GCGG是主要单倍型。3. VEGF-A基因多态性与藏羊高海拔低氧适应性的关联性研究在不同海拔高度的绵羊群体中VEGF-A的编码区发现3个SNP位点，SNP1(g.15005T/A)、SNP2(g.15020T/A)、SNP3(g.15028T/A)，SNP2(g.15020T/A)突变使编码氨基酸由半胱氨酸突变为丝氨酸，但未引起蛋白质二级与高级结构的变化， SNP2(g.15020T/A)、SNP3(g.15028T/A)的基因型和等位基因频率在高海拔与低海拔绵羊群体间差异显著（P0.05）。SNP2(g.15020T/A)、SNP3(g.15028T/A)在高海拔绵羊群体中的优势基因型为TT，在低海拔绵羊群体中AA是优势基因型，绵羊群体中SNP2和SNP3处于紧密连锁不平衡状态（D’>0.75，r2>0.33），SNP1与SNP2和SNP3之间则不存在连锁不平衡（D’<0.75，r2<0.33）。藏羊优势等位基因是Ｔ，基因型TT是优势基因型，TTT单倍型是优势单倍型。

关键词：藏羊 VEGF-A COX17 epor 多态性低氧适应性关联分析

基于EPO-epor通路的“见肝之病，知肝传脾，当先实脾”生物学机制研究

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基于EPO-EPOR通路的“见肝之病，知肝传脾，当先实脾”生物学机制...

作者：高艺宁北京中医药大学

学位级别：硕士

1 探讨《金匮要略》“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观证据。2 基于EPO/epor途径探讨《金匮要略》“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制。方法:采用药理学研究方法,慢性束缚和皮下注射四氯化碳CCL4橄榄油溶液的方法建立肝郁... 详细信息

1 探讨《金匮要略》“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观证据。2 基于EPO/epor途径探讨《金匮要略》“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制。方法:采用药理学研究方法,慢性束缚和皮下注射四氯化碳CCL4橄榄油溶液的方法建立肝郁叠加慢性肝损伤模型。四逆散组连续42d四逆散干预,代表“疏肝”治疗法则;六君子汤组连续42d六君子汤干预,代表“健脾”治疗法则;柴芍六君子汤甲组连续42d柴芍六君子汤干预,代表“疏肝健脾”治疗法则;柴芍六君子汤乙组前21d四逆散干预,后21d柴芍六君子汤干预,代表“当先治肝”治疗法则;柴芍六君子汤丙组前21d六君子汤干预,后21d柴芍六君子汤干预,代表“当先实脾”治疗法则。模型组、正常组、双环醇组给予同等容量蒸馏水或药物灌胃。观察大鼠日常饮食、行为、体重等一般状态;检测血清肝生化功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)以评价大鼠肝功能;ELISA法检测大鼠血清中I-FABP含量,以观察大鼠肠粘膜屏障功能;通过光学显微镜、透射电镜观察肝、胃、结肠组织的病理及超微结构变化。观察不同干预方式上述指标的变化,寻求“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观证据。以EPO/epor途径为切入点,ELISA法检测各组大鼠血清中EPO、epor含量;Western blot 法检测肝组织中的 EPO、epor、S1P、p-PI3K、p-AKT 表达。基于 EPO/epor途径探讨《金匮要略》“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的部分生物学机制。结果:1根据各组大鼠的日常一般情况可以看出,肝郁叠加慢性肝损伤组大鼠有明显的气滞、抑郁倾向,有活跃度减少、便溏等脾虚表现。随着时间的推移,该模型组大鼠出现了肝失疏泄的临床表现如暴躁易怒、与同伴撕咬等行为,血清肝功能ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、LDH升高,TP、ALB降低,提示大鼠肝郁叠加慢性肝损伤造模成功;胃肠粘膜屏障敏感指标I-FABP升高,提示模型组大鼠胃肠粘膜屏障受到损伤;肝、胃、结肠组织病理及超微结构可视模型组大鼠有明显的损伤。各给药组均有不同程度疗效,治疗法则,该治法下的大鼠肝损伤及肝郁脾虚症状都有显著的改善,较模型组减少暴郁情绪及其他异常行为。从肝、肠、胃组织病理及超微结构以及血清肝生化情况分析,“当先实脾”治法使血清ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、LDH下调,TP、ALB上调,对肝组织损伤状态及肝功能均有良好的效果。从胃肠粘膜屏障敏感指标I-FABP来分析,“当先实脾”的治法促进大鼠胃肠粘膜修复,降低了血清I-FABP表达量,其疗效优于其他治法给药组,证明“知肝传脾,当先实脾”客观存在性。2血清ELISA检测结果显示,肝郁叠加慢性肝损伤模型组大鼠血清EPO、epor含量显著升高,差异有统计学意义;在western bolt检测法下,肝郁叠加慢性肝损伤模型组大鼠肝脏EPO、epor表达升高,差异具有统计学意义,提示肝损伤存在,未经治疗的模型组大鼠肝细胞开启内源性自我保护,EPO、epor显著上调。在westernbolt检测法下,肝郁叠加慢性肝损伤模型组大鼠肝脏S1P表达显著降低,p-PI3K表达显著降低,p-AKT表达显著降低,各给药组对比模型组各项指标均有不同程度的改善,中药组中柴芍六君子汤丙组(模拟先健脾,后疏肝健脾的“当先实脾”治法)效果更优,EPO、epor下调,S1P表达升高,p-PI3K表达升高,p-AKT表达升高,分析其主要原因可能是“当先实脾法”更好地参与调控了 EPO/epor、促进S1P合成,激活PI3K/AKT通路,激活了 epor并再作用于EPO,进而保护肝脏免受损伤,促进肝细胞生存及抗凋亡作用。结论:1肝郁叠加慢性肝损伤大鼠造模成功时,其血清肝生化功能异常,肝、胃、结肠的病理及超微结构受损,胃肠黏膜屏障也受到损伤,说明“知肝传脾”客观存在。2“疏肝、健脾、全病程疏肝健脾、当先治肝(先疏肝后疏肝健脾)、当先实脾(先实脾后疏肝健脾)”治法均可不同程度改善肝郁叠加慢性肝损伤模型大鼠的肝功能和胃肠运动功能,其中“当先实脾(先实脾后疏肝健脾)”组疗效最优,说明“当先实脾”客观存在。3“见肝之病,知肝传脾”发病机制与EPO/epor及其信号转导途径有关。4“疏肝、健脾、全程疏肝健脾、当先治肝(先疏肝后疏肝健脾)、当先实脾(先实脾后疏肝健脾)”可调节EPO/epor途径,其中“当先实脾(先实脾后疏肝健脾)”组疗效最优,说明EPO/epor途径与“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”生物学机制密切相关。

关键词：当先实脾 EPO epor 肝郁慢性肝损伤

EPO及epor的DNA甲基化在低氧预适应小鼠低氧耐受中作用的研究

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EPO及EPOR的DNA甲基化在低氧预适应小鼠低氧耐受中作用的研究

作者：杨洁内蒙古科技大学包头医学院

学位级别：硕士

目的利用低氧预适应小鼠模型,观察低氧预适应小鼠海马组织中促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)及其受体epor的表达变化,同时利用甲基转移酶抑制剂5-aza-cdR,探究低氧预适应形成过程中EPO发挥神经保护作用与其启动子甲基化变化的关系... 详细信息

目的利用低氧预适应小鼠模型,观察低氧预适应小鼠海马组织中促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)及其受体epor的表达变化,同时利用甲基转移酶抑制剂5-aza-cdR,探究低氧预适应形成过程中EPO发挥神经保护作用与其启动子甲基化变化的关系。方法取体重18～22 g,6-8周龄成年雄性小鼠进行侧脑室注射甲基转移酶抑制剂5-aza-cdR,术后1 d进行低氧预适应模型复制:小鼠随机分为5-aza-cdR处理组和BSA对照组,然后对其进行低氧处理,根据小鼠低氧暴露次数以及低氧暴露几天处死的天数分组。各组小鼠均断头处死,剥离海马。Real-time PCR检测各组小鼠海马组织中EPO、epor以及三种甲基转移酶DNMT1、DNMT3A与DNMT3B m RNA的表达水平。Western blot检测各组小鼠海马组织中EPO与epor蛋白水平的变化。PCR扩增小鼠海马组织EPO启动子区序列(0-320bp),并插入到含有荧光素酶报告基因载体PGL3-Basic中构建重组质粒,利用双荧光素酶报告基因检测系统检测低氧预适应对EPO启动子区荧光素酶表达活性的影响。利用活力测定试剂盒检测小鼠海马组织中DNMT1、DNMT3B与总DNMT活力的变化。结果(1)急性重复低氧预适应处理小鼠后,DNMT3B的m RNA表达即刻下调(Pepor m RNA的表达水平(Pepor的蛋白表达(Pepor的蛋白表达水平在低氧的情况下也增加(Pepor在低氧预适应条件下表达增加可能与DNMT介导的EPO启动子区甲基化程度以及甲基化酶的活力有关。

关键词：低氧预适应低氧/缺血 DNA甲基化 EPO epor 小鼠神经保护

红系条件性敲除促红细胞生成素受体epor对小鼠红系发育的影响

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红系条件性敲除促红细胞生成素受体EpoR对小鼠红系发育的影响

作者：李妍郑州大学

学位级别：硕士

作为人体含量最丰富,也是血液中数量最多的一类细胞,红细胞在体内氧气运输过程中发挥着重要作用。红细胞的产生过程被称为红系发育,它是指造血干细胞经历一系列的细胞分裂、分化最终生成成熟红细胞的过程,期间受到复杂而精细的调控。其... 详细信息

作为人体含量最丰富,也是血液中数量最多的一类细胞,红细胞在体内氧气运输过程中发挥着重要作用。红细胞的产生过程被称为红系发育,它是指造血干细胞经历一系列的细胞分裂、分化最终生成成熟红细胞的过程,期间受到复杂而精细的调控。其中促红细胞生成素及其受体(Epo/epor)对红系细胞的增殖、分化以及生存至关重要,在红系发育过程中发挥着不可或缺的调控作用。在之前的研究中,全身性epor基因缺失小鼠(epor)的胎肝红系祖细胞成熟存在严重障碍,导致其于妊娠13-15天死亡;而同窝的epor单倍剂量成体小鼠(epor)则表现出中度贫血,其骨髓红系祖细胞数量减少、有核红细胞发育受到抑制。由于长期以来人们都认为epor特异性表达于红系细胞,因此全身性epor基因缺陷小鼠出现的造血障碍被认为就是红系细胞epor的表达受到影响所致。然而,随着研究的深入,越来越多的证据表明epor在多种非红系细胞表面也有一定的表达。值得注意的是,本课题组最近的研究显示epor在骨髓造血干祖细胞、红系造血岛巨噬细胞、与衰老或者损伤红细胞清除密切相关的脾脏红髓巨噬细胞以及肝脏Kupffer细胞上均有表达。这表明全身性敲除epor不仅会影响红细胞本身,还可能会影响造血谱系早期发育,或是通过改变红系发育的微环境甚至红细胞生命周期而间接影响了体内红细胞的生成和存活。因此,早期研究中epor全身性敲除小鼠出现的发育异常表现,可能是由多种类型细胞功能改变共同导致的,红系细胞特异性epor表达缺失对红细胞发育过程的影响并不明确。为了细化epor在机体中的作用,本课题旨在通过Cre/Lox P系统,获得特异地在红系细胞中敲除epor基因的小鼠模型,更精细地探索epor在体内红系发育过程中发挥的作用及机制。血型糖蛋白A(Glycophorin A,Gypa)是红细胞膜上含量最高的唾液糖蛋白,在红细胞中特异性高表达,长期以来被作为红系特异性标记物,因此本课题选择Gypa作为靶点构建工具小鼠模型用于特异性研究红系发育。我们首先根据数据库中Gypa和epor基因的序列信息,结合CRISPR/Cas9基因编辑技术,设计并构建出两种不同打靶策略的基因敲入小鼠模型:Gypa-td Tomato-i Cre和epor-e GFP-Lox P。基因型鉴定、Western Blot鉴定、血常规检测和骨髓红系发育进程检测等证明构建的两种小鼠外源敲入序列均成功在小鼠体内表达且发育正常。随后,本研究利用流式细胞术对两种小鼠荧光表达进行检测,证明Gypa-td Tomato在红系细胞特异性高表达;且epor-e GFP也能够准确地反映epor在各阶段红系细胞表面的表达趋势。此外,Gypa-td Tomato-i Cre与Rosa26-loxp-stop-loxp-EYFP报告小鼠交配后代的流式检测结果表明Cre酶具有在红系细胞(从红系祖细胞到晚幼红细胞)高效地切割目的基因的效率。随后,本研究将Gypa-td Tomato-i Cre与epor-e GFP-Lox P小鼠进行交配以获得红系细胞特异性敲除epor小鼠。对小鼠杂交后代的基因型进行统计发现新生仔鼠数量少且不符合孟德尔遗传定律,无纯合epor缺失小鼠(eporGypa-i Cre)出生。因此,本课题检测了E12.5(Embryo 12.5)时期eporGypa-i Cre小鼠胚胎,发现其红系发育出现严重障碍,无定向红细胞产生;E14.5时期的小鼠已不能维持正常胚胎形态。而相应的,同窝epor单倍剂量小鼠(eporGypa-i Cre)正常存活且可育,但表现出中度贫血。血常规检测结果显示其RBC、HGB、HCT等红系相关指标显著降低;此外,该小鼠脾脏也出现了明显代偿性造血。本课题接下来以eporGypa-i Cre小鼠为模型详细分析epor单倍剂量不足对小鼠成体红系发育的具体影响。统计结果显示:与epor小鼠不同,eporGypa-i Cre小鼠骨髓总细胞数、Ter119细胞数均显著增加。全骨髓细胞克隆形成实验结果证明eporGypa-i Cre小鼠骨髓中红系祖细胞BFU-E和CFU-E数量均显著增多,这也与epor小鼠CFU-E细胞减少的表型不同。然而当对红系终末分化进行检测时发现,eporGypa-i Cre小鼠骨髓中有核红细胞的生成并没有随红系祖细胞的显著扩增而增加。随后本课题利用分选获得的BFU-E和CFU-E细胞进行克隆形成实验,发现其克隆形成的能力均显著下降;这表明eporGypa-i Cre小鼠终末分化进程存在明显缺陷。接着本课题又分析了eporGypa-i Cre小鼠红系发育障碍是否对上游的造血干祖细胞稳态有影响,流式检测结果显示该小鼠骨髓中造血干细胞减少,而巨核-红系祖细胞的比例和数量均明显增加。这提示本研究中红系细胞epor单倍剂量小鼠的

关键词： epor Epo 红系发育红系条件性基因敲除小鼠模型造血发育