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低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制

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中国高原医学与生物学杂志 2024年第2期45卷 90-97页

作者：王雪妮陈文静李丹李建华青海大学西宁810016

目的探讨低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制。方法选择成年SD雌性大鼠20只,将其分为常氧组(Normoxia组,8只)和低氧组(Hypoxia组,12只),按雌雄比例2∶1将10只成年SD雄性大鼠分配到以上两组,与雌鼠合笼饲养建立妊娠动物模型。... 详细信息

目的探讨低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制。方法选择成年SD雌性大鼠20只,将其分为常氧组(Normoxia组,8只)和低氧组(Hypoxia组,12只),按雌雄比例2∶1将10只成年SD雄性大鼠分配到以上两组,与雌鼠合笼饲养建立妊娠动物模型。应用ELISA法检测雌鼠血清维生素D水平;采用Real-time qPCR技术分析与肝、肾、胎盘维生素D代谢相关基因的表达情况;通过常规染色和免疫组织化学技术对胎盘进行形态学观察、分析。结果Normoxia组血清维生素D代谢活性物25(OH)2D3含量低于Hypoxia组,差异有统计学意义(Pcyp2R1基因表达量上调(Pcyp27B1基因表达量上调(Pcyp24a1基因表达量下调(Pcyp2R1、cyp27B1基因表达量在两组无明显差异(P>0.05);胎盘的免疫组织化学结果显示,与Normoxia组相比,Hypoxia组cyp2R1、cyp27B1蛋白在胎盘的表达增加(Pcyp24a1蛋白表达下降(Pcyp24a1介导的维生素D负反馈机制;胎盘滋养层细胞中存在维生素D代谢系统和自分泌调节系统,且滋养层细胞可能是妊娠母体1,25(OH)2D3的来源。

关键词：低氧妊娠维生素D cyp2R1 cyp27B1 cyp24a1 实时荧光定量聚合酶链式反应大鼠

Vitamin D in prostate cancer

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Asian Journal of Andrology 2018年第3期20卷 244-252页

作者： Donald L Trump Jeanny B Aragon-Ching Inova Schar Cancer Institute Inova Health System Fairfax VA 22037 USA.

Signaling through the vitamin D receptor has been shown to be biologically active and important in a number of preclinical studies in prostate and other cancers. Epidemiologic data also indicate that vitamin D signaling may be important in the cause and prognosis of prostate and other cancers. These data indicate that perturbation of vitamin D signaling may be a target for the prevention and treatment of prostate cancer. Large studies of vitamin D supplementation will be required to determine whether these observations can be translated into prevention strategies. This paper reviews the available data in the use of vitamin D compounds in the treatment of prostate cancer. Clinical data are limited which support the use of vitamin D compounds in the management of men with prostate cancer. However, clinical trials guided by existing preclinical data are limited.

关键词： androgens cyp24a1 inflammation prostate cancer vitamin D analogs

cyp24 A1基因多态性与大肠癌发生及预后的关系

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实用肿瘤学杂志 2015年第4期29卷 289-293页

作者：宫晨周军德迟强崔滨滨赵亚双王帆哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠外科哈尔滨医科大学附属肿瘤医院腹外科

目的：探讨cyp24a1基因多态位点对大肠癌发生和预后的影响。方法采用病例－对照研究方法对528例大肠癌患者和605例对照进行维生素 D 代谢相关基因cyp24 A1的 Rs4809957和Rs2762934多态位点与大肠癌发病关系的分析，并探讨多态位点与饮... 详细信息

目的：探讨cyp24a1基因多态位点对大肠癌发生和预后的影响。方法采用病例－对照研究方法对528例大肠癌患者和605例对照进行维生素 D 代谢相关基因cyp24 A1的 Rs4809957和Rs2762934多态位点与大肠癌发病关系的分析，并探讨多态位点与饮食因素的联合作用和交互作用与大肠癌发生的关系；随访317例大肠癌患者，探讨多态位点与大肠癌预后的关系。结果 Rs4809957和Rs2762934多态位点与饮食因素的联合作用与大肠癌的发病有关。对于Rs4809957多态位点，与GG／GA基因型相比，携带AA基因型的大肠癌患者、结肠癌患者和直肠癌患者的预后均较差（ Log－rank检验分别为P＝0．01，P＝00．1，P＝0．02）；与野生型GG相比，AA基因型可导致大肠癌患者（ HR＝2．35，95％ CI：1．28～4．30）、结肠癌患者（ HR＝2．37，95％ CI：1．09～5．14）、直肠癌患者（HR ＝2．11，95％CI：1．11～4．01）预后不良。结论 cyp24a1基因Rs4809957和Rs2762934多态位点与饮食因素的联合作用与大肠癌的易感性有关，且Rs4809957多态位点可能会影响大肠癌患者的预后。

关键词：大肠癌 cyp24a1 单核苷酸多态性风险预后

孕前超重/肥胖对人体胎盘和小鼠相关组织维生素D代谢酶的影响

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营养学报 2023年第6期45卷 565-573页

作者：谢冬芹凌亦可李李皖南医学院第二附属医院临床营养科芜湖241000 上海市第一人民医院临床转化研究中心上海201600 安徽医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系合肥230032

目的本研究旨在探讨孕前超重/肥胖是否会影响人胎盘和小鼠相关组织中维生素D代谢酶的表达。方法(1)99名正常体重女性(18.5 kg/m^(2)≤BMI20%)组,于PND21处死。检测人鼠血浆总25羟基维生素D[25(OH)D],人胎盘和小鼠胎盘和肝脏维生素D代谢... 详细信息

目的本研究旨在探讨孕前超重/肥胖是否会影响人胎盘和小鼠相关组织中维生素D代谢酶的表达。方法(1)99名正常体重女性(18.5 kg/m^(2)≤BMI24.0 kg/m^(2))参与本横断面研究,产妇和新生儿信息通过问卷获得。孕妇自然分娩,分娩后采集胎盘样本。(2)将4w龄雌性C57BL/6J小鼠采用对照饮食(Ctrl)或高脂饮食(HFD)喂养10w。根据其体重比Ctrl组平均值大的百分比,将HFD喂养的小鼠分为肥胖抵抗(DIR,20%)组,于PND21处死。检测人鼠血浆总25羟基维生素D[25(OH)D],人胎盘和小鼠胎盘和肝脏维生素D代谢酶基因和蛋白质表达水平。结果与正常体重相比,孕前超重/肥胖的孕妇血浆中总25(OH)D和1,25(OH)_(2)D_(3)的浓度显著降低。此外,孕前超重/肥胖与脐带血浆中1,25(OH)_(2)D_(3)浓度有相关性。孕前超重/肥胖胎盘中1a羟化酶(cyp27B1)、转运受体(LRP2-CUBN)和维生素D受体(VDR)的表达降低,而24羟化酶蛋白(cyp24a1)的表达呈相反趋势。在小鼠中,DIR、DIW、DIO的母体血浆中总25(OH)D和1,25(OH)_(2)D_(3)的浓度明显低于Ctrl;DIO组胎鼠血浆总25(OH)D浓度明显低于Ctrl组;HFD母体肝脏25羟化酶(cyp2R1)、VDR以及肾脏和胎盘中的cyp27B1、LRP2、CUBN、VDR的表达显著降低,cyp24a1的表达显著增加。胎鼠的结果与母鼠的结果相似。结论孕前超重/肥胖对人体胎盘和小鼠相关组织的维生素D代谢酶(cyp2R1、cyp27B1、cyp24a1、LRP2-CUBN、VDR)表达有影响,这可能是超重/肥胖孕妇和胎儿维生素D水平较低的原因。

关键词：维生素D 孕前肥胖 cyp2R1 cyp27B1 LRP2-CUBN cyp24a1

右旋糖酐铁对缺铁性贫血SD大鼠维生素D3代谢水平的影响及机制研究

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右旋糖酐铁对缺铁性贫血SD大鼠维生素D3代谢水平的影响及机制研究

作者：李蕊山西医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究采用SD大鼠缺铁性贫血(Iron deficiency anemia,IDA)模型,探究铁代谢与维生素D(Vitamin D,VD)代谢水平之间的关系,并进一步探究铁是否通过调节VD羟化酶进而影响到25-(OH)D和1,25-(OH)D的水平。方法:40只SD大鼠(雄性),体重66... 详细信息

目的:本研究采用SD大鼠缺铁性贫血(Iron deficiency anemia,IDA)模型,探究铁代谢与维生素D(Vitamin D,VD)代谢水平之间的关系,并进一步探究铁是否通过调节VD羟化酶进而影响到25-(OH)D和1,25-(OH)D的水平。方法:40只SD大鼠(雄性),体重66.46±4.22g,适应性喂养1w,按体质量随机分为对照组(Control,C,n=8正常饲料)和模型组(Model,M,n=32缺铁饲料),后者造IDA模型,自由饮用去离子水。造模期间观察各组大鼠的精神状况、活动情况、皮肤黏膜颜色等,判定造模情况。6w后,M组按血红蛋白(Hemoglobin,Hb)水平随机分为缺铁组(Deficiency iron,DFe)[0mg/(100g·bw·d)]、低剂量铁组(Low iron,LFe)[1.1mg/(100g·bw·d)]、中剂量铁组(Medium iron,MFe)[3.3mg/(100g·bw·d)]、高剂量铁组(High iron,HFe)[9.9mg/(100g·bw·d)],每组8只,2ml/d相应剂量右旋糖酐铁连续灌胃4w。4w后,用8%水合氯醛溶液5ml/kg麻醉大鼠。腹主动脉采血,并取肝、肾组织。将分离的血清、组织分装后于-80℃冻存待测。ELISA法检测大鼠血清中25-(OH)D和1,25-(OH)D水平,铁代谢相关指标;Western blotting、免疫荧光染色与q-PCR检测肝脏cyp2R1、cyp27A1,肾脏cyp27B1、cyp24a1在翻译水平与转录水平的表达情况。结果:***组大鼠精神状态差,血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、肝脏铁和肾脏铁水平明显低于其它4组。***组的总铁结合力(Total iron binding capacity,TIBC)、二价金属转运蛋白1(Divalent metal transporter1,DMT1)、转铁蛋白(Transferrin,TF)、转铁蛋白受体(Transferrin receptor,Tfr)、膜铁转运蛋白1(Membrane transporter,FPN1)水平较其它组升高,与C组相比,DFe组TIBC、DMT1、Tfr和FPN1水平显著升高,差异均有统计学意义(P1,25-(OH)D水平显著降低(P1,25-(OH)D水平也随之升高。4.经相关性分析,25-(OH)D和1,25-(OH)D水平与TIBC、DMT1、TF、Tfr和FPN1指标均呈显著负相关,与SI无相关性。***组cyp2R1、cyp27A1、cyp24a1蛋白及mRNA表达水平较其它4组明显下调,cyp27B1蛋白及mRNA表达水平较其它4组明显上调。6.免疫荧光结果显示,DFe组cyp2R1、cyp27A1、cyp24a1总光密度(Integrated optical density,IOD)值低于C组,cyp27B1表达量在DFe组表达最高,显著高于C组(P1.缺铁降低了肝脏与肾脏的铁储备,可能影响到羟化酶活性。2.铁可能通过调节羟化酶在翻译和转录水平,进而降低25-(OH)D和1,25-(OH)D水平。3.在铁充足情况下,cyp450酶家族的VD羟化酶有效利用铁作为辅助因子,促进VD的羟化;铁缺乏时,肝脏VD羟化酶表达量下调,肾脏VD羟化酶表达上调。或者可能由于缺铁造成cyp2R1、cyp27B1氢化酶活性中心障碍,转化为具有活性形式VD能力变弱。

关键词：铁 25-(OH)D3 1,25-(OH)2D3 cyp2R1 cyp27A1 cyp27B1 cyp24a1

维生素D及其受体与维生素D代谢酶在强直性脊柱炎患者中的表达及其临床意义

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维生素D及其受体与维生素D代谢酶在强直性脊柱炎患者中的表达及其...

作者：兰由玉泸州医学院

学位级别：硕士

目的：研究强直性脊柱炎患者(ankylosing spondylitis, AS)外周血单核细胞维生素D受体(VDR)与维生素D代谢酶相关基因25-羟基维生素D-24羟化酶(cyp24a1)、25-羟基维生素D-1α-羟化酶(cyp27B1) mRNA的表达以及AS患者血清25-羟基维生素D3(2... 详细信息

目的：研究强直性脊柱炎患者(ankylosing spondylitis, AS)外周血单核细胞维生素D受体(VDR)与维生素D代谢酶相关基因25-羟基维生素D-24羟化酶(cyp24a1)、25-羟基维生素D-1α-羟化酶(cyp27B1) mRNA的表达以及AS患者血清25-羟基维生素D3(25-(OH)D3/25-D)和1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/1,25-D)的水平,探讨其与AS疾病活动性[Bath强直性脊柱炎疾病活动指数(BASDAI)、C-反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)]的相关性以及在AS发病中的作用,并为寻找新的治疗靶点提供理论依据。方法：选取26例强直性脊柱炎患者(AS病人组)和年龄、性别与之相匹配的健康正常者13例(正常对照组)。用Ficoll密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞后,利用单核细胞贴壁生长的特性分离出外周血单核细胞,然后采用Trizol提取总RNA,并逆转录为cDNA,通过SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析其VDR、cyp24a1、cyp27B1 mRNA的表达水平,实验数据以内参基因β-actin标化,根据相对定量公式：2-△△CT分析VDR、cyp24a1和cyp27B1 mRNA的相对表达水平。同时分析VDR mRNA的表达水平与临床相关指标(BASDAI、CRP、ESR)的相关关系。用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测AS患者和正常对照者血清中25-羟基维生素D3和1,25-二羟基维生素D3的水平,并与疾病活动性指标进行相关性分析。结果：***病人组VDR mRNA的表达明显高于正常对照组,且有显著的统计学差异(Pcyp24a1和cyp27B1 mRNA的表达均低于正常对照组,但没有统计学差异(P>0.05)。*** mRNA的相对表达水平与临床相关指标(BASDAI、CRP、ESR)无相关关系存在(P>0.05)。***患者血清25-羟基维生素D3的浓度为(5.27±2.57 ng/ml)明显低于正常对照组(14.73±3.52 ng/ml),差异有统计学意义(Pcyp27B1和cyp24a1的表达,说明肾外组织也有cyp27B1的表达。***患者外周血单核细胞的VDR mRNA的表达增加,可能是机体固有免疫应答增强的原因之一。***的表达增加可能与AS的发生发展有一定的相关性,但与疾病活动性无相关关系。4.血清25-D和1,25-D的水平与AS的疾病活动有关,说明其可能是反映AS疾病活动的指标之一。***的活化可能与其自动调节功能有关,而并不是依赖于1,25-D的,即VDR的活化可能与1,25-D的作用无关。***患者可能是通过VDR的异常活化或维生素D的缺乏来抑制cyp27B1的表达,从而减少了1,25-D的合成。***24A1可能在维持AS患者血清25-D和1,25-D水平的动态平衡方面起了一定的作用。***患者VDR mRNA的表达增加和血清1,25-D的水平降低可能与AS的发病有一定的相关性。

关键词：维生素D 25-羟基维生素D3 1,25-二羟基维生素D3 维生素D受体强直性脊柱炎 cyp24a1 cyp27B1

孕前肥胖对母鼠和胎鼠维生素D水平的影响及机制探讨

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孕前肥胖对母鼠和胎鼠维生素D水平的影响及机制探讨

作者：谢冬芹安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究在高脂喂养小鼠建立肥胖模型的基础上,检测母鼠和胎鼠血浆维生素D水平,合成代谢酶和维生素D转运受体表达水平以探讨孕前肥胖影响母鼠和胎鼠维生素D水平可能的机制。方法:采用4周龄C57BL/6J雌性小鼠适应性喂养一周后根据体重... 详细信息

目的:本研究在高脂喂养小鼠建立肥胖模型的基础上,检测母鼠和胎鼠血浆维生素D水平,合成代谢酶和维生素D转运受体表达水平以探讨孕前肥胖影响母鼠和胎鼠维生素D水平可能的机制。方法:采用4周龄C57BL/6J雌性小鼠适应性喂养一周后根据体重进行分组。对照组（CON）继续普通饲料喂养,高脂组（HFD）选用高脂饲料喂养。10周后,高脂组中根据小鼠体重在CON组小鼠平均体重10%以内、10%～20%之间、高于20%的小鼠分别记为肥胖抵抗组（DIR）、超重组（DIW）和肥胖组（DIO）。之后雌雄比1:2进行合笼,小鼠受孕后饮食不变。记录各组小鼠孕期食物和维生素D摄入以及体重增长情况。于孕18天（GD18）给予小鼠麻醉处理,取母鼠血液、肝脏、肾脏;剥离胎鼠取胎盘,测量胎鼠身长和胎盘直径,称量胎鼠体重和胎盘重;收集胎血,取肝脏、肾脏。血液离心后收集血浆。采用放射免疫法测定血浆总25（OH）D水平,采用酶联免疫吸附实验测定1,25（OH）2D3水平。采用q RT-PCR检测母鼠和胎鼠肝脏、肾脏、胎盘维生素D合成代谢酶cyp2R1、cyp27B1、cyp24a1、VDR和转运受体LRP2-CUBN的m RNA表达水平。采用Western Blot的方法检测母鼠和胎鼠肝脏、肾脏、胎盘维生素D合成代谢酶cyp2R1、cyp27B1、cyp24a1、VDR和转运受体LRP2-CUBN蛋白表达水平。结果:喂养10周后,分组后的小鼠体重差异具有统计学意义（F=58.090,P＜0.05）,DIR组小鼠的平均体重与CON组无差异（P=0.448）,DIW组和DIO组小鼠的平均体重均显著高于CON组和DIR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。与CON组和DIR组相比,DIW组和DIO组的胎体比均明显下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与CON组相比,DIR组,DIW组,DIO组母鼠血浆中总25（OH）D水平显著降低（P＜0.05）;与DIR组相比,DIW组和DIO组母鼠血浆中总25（OH）D水平显著降低（P＜0.05）。与CON组相比,DIR组,DIW组,DIO组胎鼠血浆中总25（OH）D水平显著降低（P＜0.05）;与DIR组相比,DIW组和DIO组胎鼠血浆中总25（OH）D水平显著降低,且差异具有统计学意义（P＜0.05）。与CON组相比,DIW组,DIO组母鼠血浆中1,25（OH）2D3水平显著降低（P＜0.05）;与DIR组相比,DIW组和DIO组母鼠血浆中1,25（OH）2D3水平显著降低（P＜0.05）。在母鼠肝脏中,与CON组相比,DIR组、DIW组和DIO组的cyp2R1和VDR基因和蛋白表达水平均显著下降（P＜0.05）。在母鼠肾脏中,与CON组相比,DIR组、DIW组和DIO组cyp27B1,LRP2-CUBN,VDR基因和蛋白表达水平有下调趋势（P＜0.05）;cyp24a1基因和蛋白表达水平相反（P＜0.05）。在胎盘中,与CON组相比,DIR组、DIW组和DIO组cyp27B1,LRP2-CUBN,VDR基因和蛋白表达水平有下调趋势（P＜0.05）;与cyp24a1基因和蛋白表达水平相反（P＜0.05）。在胎鼠肝脏中,与CON组相比,DIR组、DIW组和DIO组的cyp2R1和VDR基因和蛋白表达水平均显著下降（P＜0.05）。在胎鼠肾脏中,与CON组相比,DIO组cyp27B1和VDR蛋白表达水平有下调趋势（P＜0.05）;cyp24a1蛋白表达水平没有差异（P＞0.05）;与CON组相比,DIR组、DIW组和DIO组LRP2-CUBN蛋白表达水平显著下调（P＜0.05）。结论:孕前肥胖通过母鼠肝脏cyp2R1、肾脏cyp27B1活性下降使维生素D合成不足,cyp24a1表达升高使维生素D分解增加,胎盘cyp27B1和转运受体LRP2-CUBN表达降低使维生素D合成和转运受限以及胎鼠肝脏cyp2R1、肾脏cyp27B1和cyp24a1表达异常,最终导致母鼠和胎鼠维生素D营养水平不足。

关键词：孕前肥胖维生素D cyp2R1 cyp27B1 cyp24a1 LRP2-CUBN

402例慢性HBV感染的不同阶段患者体内维生素D3代谢的横断面研究

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402例慢性HBV感染的不同阶段患者体内维生素D3代谢的横断面研究

作者：王婧涵天津医科大学

学位级别：硕士

目的：研究慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)感染的不同阶段患者血清25-羟维生素D3(25-hydroxyvitamin D3,25(OH)D3)和羟化酶(isoenzymes of Cytochrome P450, cyp)cyp2R1、cyp27A1、cyp24a1的含量情况,慢性HBV感染的不同阶段包括乙肝携带者(慢性HBV携带状态和非活动性乙肝表面抗原携带状态)、慢性乙型肝炎、代偿期肝硬化、失代偿期肝硬化和肝细胞癌。将慢性HBV感染者存在羟化酶代谢紊乱作为导致25(OH)D3缺乏的假设,探寻25(OH)D3缺乏的发生机制。方法：横断面研究。收集2012年8月1日至2013年4月30日首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心收治的乙肝表面抗原(Hepatitis B surface antigen, HBsAg)阳性患者(1278例)常规检查之后的残余血清,以及2013年1月1日至4月30日于北京友谊医院体检中心健康检查的体检者残余血清(408例),共计1686例,避光保存于-80℃。回顾性查阅患者的病例资料,根据《排除标准》剔除956例血清,最终有730例标本纳入研究。共分为6组,包括健康者328例、乙肝携带者75例、慢性乙型肝炎患者142例、代偿期肝硬化患者66例、失代偿期肝硬化患者59例、肝细胞癌患者60例。首先,对全部标本进行25(OH)D3含量检测,使用高效液相色谱／质谱联用技术,仪器为Transcend高效液相色谱系统(Transcend, ThermoFisher Scientific, Pennsylvania, USA)和API3000串联四级杆质谱仪(Applied Biosystems/MDS Sciex, USA),色谱柱为Agilent ZORBAXSB-C18,孔径3.5μm (Agilent, HP, California, USA)。随后,采用酶联免疫吸附试验方法检测3种羟化酶含量,分别为肝细胞微粒体内的25-羟化酶(cyp2R1)、肝细胞线粒体内的25-羟化酶(cyp27A1)、肾小管上皮细胞内的24-羟化酶(cyp24a1)。为了降低羟化酶因25(OH)D3离散程度较大带来的影响,稳定羟化酶各组的25(OH)D3检测值处于均值附近,因此在每组中挑选25(OH)D3检测值位于又±2s范围内的血清,并保证每组间的性别构成及样本例数匹配,最终共136例纳入研究,其中包括健康者14例、乙肝携带者14例、慢性乙型肝炎患者27例、代偿期肝硬化患者27例、失代偿期肝硬化患者28例、肝细胞癌患者26例。结果： (1)、各组慢性HBV感染者的血清25(OH)D3含量均低于健康者(7.08±4.11vs8.22±1.33ng/mL,P15±4.47vs8.22±1.33ng/mL,P>0.05),随着肝病进展,25(OH)D3呈现逐渐降低的趋势,失代偿期肝硬化最低。但是,只有代偿期肝硬化和失代偿期肝硬化与健康者相比,差异有统计学意义。肝细胞癌患者血清25(OH)D3含量稍低于慢性乙型肝炎,明显高于代偿期肝硬化,远远高于失代偿期肝硬化(7.75±4.34vs4.33±3.11ng/mL,P118,P0.05)。 (3)、健康对照组25(OH)D3的95%参考范围及不同缺乏程度如下：正常水平5.61-10.83ng/mL、轻度缺乏4-5.61ng/mL、中度缺乏2-4ng/mL、重度缺乏≤2ng/mL.健康者中81.7%处于正常水平,并且不存在重度缺乏,随着肝病的进展：25(OH)D3正常水平所占的比例逐渐减少,失代偿期肝硬化最低;轻-中度缺乏的比例逐渐升高,失代偿期肝硬化最高;重度缺乏首先出现在慢性乙型肝炎,失代偿期肝硬化最高。 (4)、与健康者相比,3种羟化酶含量在慢性HBV感染者中出现整体升高。随着肝病的进展：cyp2R1逐渐升高,cyp27A1逐渐降低,cyp24a1逐渐升高。 (5)、慢性HBV感染者的血清25(OH)D3与cyp2R1呈负相关(r=-0.208,Pcyp27A1呈正相关(r=0.201,Pcyp24a1呈负相关(r=-0.266,Pcyp27A1有随着cyp2R1增加而增

关键词： 25(OH)D3 HBV 羟化酶 cyp27A1 cyp2R1 cyp24a1

维生素D系统在视神经脊髓炎谱系疾病中的作用及意义探讨

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维生素D系统在视神经脊髓炎谱系疾病中的作用及意义探讨

作者：吴钦华贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在探讨低日照、低纬度地区视神经脊髓炎谱系疾病(Neuromyelitis optica spectrum disorder,NMOSD)患者维生素D受体(Vitamin D receptor,VDR)基因单核酸苷多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点的分布情况,寻找NMOSD易感/保护性SNPs位点。方法:选取2017年03月至2018年09月在贵州医科大学附属医院神经内科收治的83例NMOSD患者,采集外周血并提取DNA,通过聚合酶链反应-直接测序法对VDR基因进行分段测序,采用电化学发光免疫分析法(electro-chemi lum i nescence immunoassay,ECLI)检测血清维生素D水平。结果:在NMOSD患者中检测出2个新SNPs位点,其分别位于VDR基因 NM01017536.1:2143 C>A,2296G>T位置,此2个位点CA、GT基因型在NMOSD患者的频率高于健康对照组,差异有统计学意义(P1)本研究发现了NMOSD患者VDR基因2个新的SNPs位点,扩充了NMOSD患者VDR基因突变数据库,有助于NMOSD高危人群的筛查;(2)VDR基因新的SNPs位点与NMOSD的易感性相关,且携带该2个SNPs位点的患者血清维生素D水平普遍低下,可能通过减弱维生素D/VDR信号传导通路参与疾病发病。(3)NMOSD患者血清低维生素D水平与疾病严重程度、复发次数密切相关,血清维生素D可能参与NMOSD的发病,并反映疾病严重程度。目的:探讨维生素D代谢相关基因在视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NM0SD)中发病机制中的作用,为NMOSD的治疗提供新的思路。方法:采用化学发光免疫分析法(electro-chemi luminescence immunoassay,ECLI)对40例NMOSD患者和40例健康对照者的血清维生素D进行检测,采用实时定量聚合酶链反应測定维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、GYP24A1、GYP27B1 mRNA的表达。结果:(1)NM0SD患者血清维生素D水平为18.36(95%Gl:16.27-20.44),低于健康对照组,差异具有统计学意义(代0.001),分性别比较发现:在女性中,NMOSD患者维生素D水平低于健康对照组,差异具有统计学意义(P=0.006);分年龄段进一步比较发现:在小于30岁女性中,NM0SD患者维生素D水平低于健康对照组,差异具有统计学意义(P＜0.001);(2)NM0SD患者VDR mRNA表达水平为3.11(95%Cl:2.24-3.97),高于健康对照组,差异具有统计学意义(P＜0.001);NM0SD患者cyp27B1 mRNA表达水平为2.25(95%Cl:1.25-3.25),高于健康对照组,差异具有统计学意义(P=0.016);NMOSD患者cyp24a1 mRNA表达水平为2.04(95%Cl:0.85-3.23),与健康对照组相比,差异不具有统计学意义(P=0.093)。(3)对NM0SD患者VDR、GYP27B1、GYP24A1 mRNA表达水平与性别、年龄、病程、AQP4-lgG进行分析发现,VDR、cyp27B1、cyp24a1 mRNA的异常表达与NM0SD患者的性别、年龄、病程、AQP4-lgG无关(P＞0.05)。(4)Spearman相关分析发现,VDR、GYP27B1、GYP24A1与EDSS评分、复发次数无显著相关性。结论:在NM0SD患者中,可能出现VDR以及cyp27B1 mRNA的增高,高表达的VDR和cyp27B1可能是维生素D加工缺陷的反应,导致維生素D信号通路减弱,从而参与疾病的发生发展。本研究没有观察到cyp24a1基因表达水平的变化,可能是小样本导致的统计误差,需要扩大样本进一步分析维生素D代谢相关基因来验证当前的结果。

关键词：维生素D受体基因单核酸苷多态性视神经脊髓炎谱系疾病维生素D 维生素D受体 cyp27B1 cyp24a1