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柱前衍生化HPLC法检测谷氨酸钠中的其他氨基酸

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中国医药工业杂志 2022年第12期53卷 1780-1787页

作者：杨锐许凯张靖王会娟肖新月中国食品药品检定研究院国家药品监督管理局药用辅料质量研究与评价重点实验室北京100050

建立了柱前衍生化HPLC法测定谷氨酸钠中其他氨基酸(天冬氨酸、丝氨酸、精氨酸、甘氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、异苯丙氨酸、组氨酸、盐酸赖氨酸、酪氨酸)的残留量,采用衍生化试... 详细信息

建立了柱前衍生化HPLC法测定谷氨酸钠中其他氨基酸(天冬氨酸、丝氨酸、精氨酸、甘氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、异苯丙氨酸、组氨酸、盐酸赖氨酸、酪氨酸)的残留量,采用衍生化试剂2,4-二硝基氟苯对氨基酸进行衍生化。结果表明,柱前衍生化HPLC法具有较好的专属性,上述氨基酸在相应浓度范围内线性关系良好,精密度和稳定性均良好,各氨基酸的平均回收率均在90.0%~110.0%,RSD(n=9)均小于5%。该方法准确、可靠、重复性好,可用于谷氨酸钠中其他残留氨基酸的测定。

关键词：柱前衍生化 HPLC 氨基酸谷氨酸钠 2 4-二硝基氟苯

柱前衍生化HPLC法测定植物水解蛋白中的17种氨基酸

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食品安全导刊 2023年第11期 99-104页

作者：陈建芳江学文梁科王莹莹华南师范大学生命科学学院广东广州510631 广东达元绿洲食品安全股份有限公司广东广州510631

本文建立了一种2,4-二硝基氟苯柱前衍生测定植物水解蛋白(Hydrolyzed Vegetable Protein,HVP)中17种氨基酸的高效液相色谱方法。色谱柱为Diamonsil AAA,柱温为45℃,检测波长为360nm,进样体积为10μL,流速为1.0 m L·min^(-1);流动相A为0... 详细信息

本文建立了一种2,4-二硝基氟苯柱前衍生测定植物水解蛋白(Hydrolyzed Vegetable Protein,HVP)中17种氨基酸的高效液相色谱方法。色谱柱为Diamonsil AAA,柱温为45℃,检测波长为360nm,进样体积为10μL,流速为1.0 m L·min^(-1);流动相A为0.02 mol·L^(-1)Na(2)HPO_(4)+0.02mol·L^(-1)NaH_(2)PO_(4)水溶液,流动相B为甲醇∶乙腈=10∶90(V∶V),梯度洗脱,17种氨基酸得到了很好的分离,衍生方法操作简单,方法精密度高、稳定性和重复性均良好,适用于植物水解蛋白中氨基酸的定量测定。HVP与酿造酱油中的氨基酸组成差异较大,主要体现在谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸、甘氨酸以及脯氨酸,可为酿造酱油与配制酱油的鉴别提供一定依据。

关键词：植物水解蛋白(HVP) 氨基酸 2 4-二硝基氟苯高效液相色谱法酿造酱油

清热除湿汤对NC/Nga小鼠特应性皮炎的作用研究

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中华中医药杂志 2018年第5期33卷 2056-2060页

作者：蒙玉娇李宁飞翟春艳底婷婷赵京霞王燕张璐张蕾李萍北京中医药大学北京100029 银屑病中医临床基础研究北京市重点实验室首都医科大学附属北京中医医院北京市中医研究所北京100010

目的:观察清热除湿汤对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导的NC/Nga小鼠特应性皮炎样模型的干预作用,并对其可能机制进行探讨。方法:48只NC/Nga小鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性对照(波尼松龙)组,清热除湿高、中、低剂量组,每组8只。观察特应... 详细信息

目的:观察清热除湿汤对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导的NC/Nga小鼠特应性皮炎样模型的干预作用,并对其可能机制进行探讨。方法:48只NC/Nga小鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性对照(波尼松龙)组,清热除湿高、中、低剂量组,每组8只。观察特应性皮炎小鼠模型皮损变化情况和行为学变化;HE与甲苯胺蓝染色观察皮损形态学变化;ELISA法检测血清中Ig E水平;流式细胞术检测脾脏Th1/Th2比例;RT-PCR法检测皮损中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)m RNA相对表达量。结果:模型组小鼠出现搔抓增加(P<0.01),皮损红斑、水肿、糜烂、结痂并伴随血清Ig E升高(P<0.01)等AD样表现。清热除湿汤治疗可以缓解小鼠症状,包括搔抓次数减少(P<0.05),SCORAD评分降低(P<0.05),红斑、水肿、糜烂减轻,Ig E水平降低(P<0.05),组织病理学改善,肥大细胞数目减少(P<0.05),Th1/Th2比值升高(P<0.05)等。结论:清热除湿汤可以改善DNFB诱导的NC/Nga小鼠特应性皮炎样皮损,抑制肥大细胞的活化和调节Th1/Th2平衡均是其作用机制,可深入探索;高剂量组较优。

关键词：特应性皮炎清热除湿汤 2 4-二硝基氟苯 NC/Nga

淋巴毒素β及其受体在变应性接触性皮炎小鼠皮肤中的表达

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中华皮肤科杂志 2012年第1期45卷 40-42页

作者：段瑞薛亚东栗玉珍党林王芳王丽哈尔滨医科大学附属第二医院皮肤科 150086

目的检测淋巴毒素β及淋巴毒素β受体（LTβR）在变应性接触性皮炎（ACD）小鼠皮肤中的表达.方法 6～8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为两组,实验组15只和对照组10只,实验组外用2,4-二硝基氟苯建立ACD模型,对照组不行任何处置,采用实时荧光... 详细信息

目的检测淋巴毒素β及淋巴毒素β受体（LTβR）在变应性接触性皮炎（ACD）小鼠皮肤中的表达.方法 6～8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为两组,实验组15只和对照组10只,实验组外用2,4-二硝基氟苯建立ACD模型,对照组不行任何处置,采用实时荧光定量PCR和免疫组化的方法分别检测ACD小鼠发生皮炎的耳廓皮肤和对照组小鼠耳廓皮肤中淋巴毒素β mRNA、LTβR mRNA及淋巴毒素β、LTβR蛋白的表达.结果 15只ACD小鼠组织标本淋巴毒素β及LT-βR mRNA相对含量中位数分别为3.630、1.148,其四分位间距分别为1.187、0.617;10只对照组组织标本淋巴毒素β及LTβR mRNA相对含量中位数都为1.000,其四分位间距都为0.000.经秩和检验两组间差异均有统计学意义（P＜0.01）.免疫组化结果显示,ACD小鼠中淋巴毒素β和LTβR表达明显升高,与对照组相比差异亦均有统计学意义（P＜0.01）.结论变应性接触性皮炎小鼠皮损中淋巴毒素β及其受体mRNA相对含量升高,其蛋白表达明显升高.

关键词： BALB/c小鼠变应性接触性皮炎淋巴毒素耳廓皮肤 β受体受体mRNA 实时荧光定量PCR 4-二硝基氟苯

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定板蓝根中的氨基酸

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色谱 2005年第4期23卷 408-410页

作者：万绍晖杨浩耿秀梅河南大学药学院河南开封475001

建立了板蓝根中指标性成分精氨酸、脯氨酸和谷氨酸的柱前衍生化反相高效液相色谱分析方法.以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,将氨基酸在碱性条件下衍生化,然后直接进样进行高效液相色谱测定.采用的色谱条件为:色谱柱Sinochrom ODS-BP柱(250... 详细信息

建立了板蓝根中指标性成分精氨酸、脯氨酸和谷氨酸的柱前衍生化反相高效液相色谱分析方法.以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,将氨基酸在碱性条件下衍生化,然后直接进样进行高效液相色谱测定.采用的色谱条件为:色谱柱Sinochrom ODS-BP柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm),流动相醋酸钠缓冲溶液(pH 6.4)-乙腈(体积比为850∶150),检测波长360 nm,采用外标法定量.该文同时对谷氨酸、精氨酸和脯氨酸进行定性,并对精氨酸和脯氨酸进行定量.精氨酸和脯氨酸的进样量分别为0.627～5.016 μg和0.874～7.000 μg时,其峰面积与进样量呈良好的线性关系(r分别为0.999 6和0.999 5).精氨酸和脯氨酸的平均回收率分别为98.5% (相对标准偏差(RSD)为2.5% (n=8))和98.4% (RSD为2.3% (n=8)).对板蓝根样品进行了测定,结果表明,板蓝根中精氨酸的含量最高,脯氨酸次之,谷氨酸含量很少.该法简便、准确、可靠,适用于板蓝根药材的质量控制.

关键词：反相高效液相色谱法柱前衍生化 2 4-二硝基氟苯精氨酸脯氨酸谷氨酸板蓝根

柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中盐酸半胱氨酸含量

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中国药业 2020年第17期29卷 74-76页

作者：陈娟陈志永孟雪崔小敏任慧乔园陈瑞明陕西省中医药研究院陕西西安710061

目的建立测定复方氨基酸注射液中盐酸半胱氨酸含量的柱前衍生高效液相色谱(HPLC)法。方法衍生化试剂选取2,4-二硝基氟苯(DNFB),色谱柱采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.014 mol/L磷酸氢二钾溶液(p H=8.2,35∶65,... 详细信息

目的建立测定复方氨基酸注射液中盐酸半胱氨酸含量的柱前衍生高效液相色谱(HPLC)法。方法衍生化试剂选取2,4-二硝基氟苯(DNFB),色谱柱采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.014 mol/L磷酸氢二钾溶液(p H=8.2,35∶65,V/V),检测波长为360 nm,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃。结果盐酸半胱氨酸的衍生化反应条件为衍生化试剂-盐酸半胱氨酸(80∶1,V/V),60℃水浴暗处反应5 min;盐酸半胱氨酸进样量在0.1320~0.6600μg(r=0.9997)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为98.85%,RSD为0.50%(n=6)。结论该方法反应温度低,反应时间短,且简便易操作,结果准确,可用于复方氨基酸注射液中盐酸半胱氨酸含量的测定。

关键词： 2 4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法盐酸半胱氨酸复方氨基酸注射液

柱前衍生化HPLC法测定齿瓣石斛中总氨基酸的含量

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中国药房 2012年第31期23卷 2927-2930页

作者：李光李学兰陈曦中国医学科学院药用植物研究所云南分所云南景洪666100 中国医学科学院药用植物研究所北京100193

目的:建立测定齿瓣石斛中总氨基酸含量的方法。方法:以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,与齿瓣石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量。色谱柱为SymmetryC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相A为0.05mol·L-1醋酸钠-醋酸缓冲液(pH6.4)-... 详细信息

目的:建立测定齿瓣石斛中总氨基酸含量的方法。方法:以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,与齿瓣石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量。色谱柱为SymmetryC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相A为0.05mol·L-1醋酸钠-醋酸缓冲液(pH6.4)-1%N,N-二甲基甲酰胺,流动相B为乙腈-水(1:1,V/V),梯度洗脱,检测波长为360nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:13种氨基酸的线性相关系数均>0.9990,平均加样回收率范围在99.34%～101.93%之间,RSD在0.54%～1.91%之间(n=6)。结论:本方法快速、简便、结果准确,可为齿瓣石斛的深入研究奠定基础。

关键词：柱前衍生化齿瓣石斛氨基酸 2 4-二硝基氟苯高效液相色谱法

柱前衍生化法测定五维牛磺酸口服液中牛磺酸的含量

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江苏医药 2010年第8期36卷 979-980页

作者：顾丽娟严相平南京医科大学第一附属医院药剂科 210029 南京工业大学药学院江苏省药物研究所

五维牛磺酸口服液作为维生素补充药物,在临床已应用多年。现行的国家标准未制定活性成份牛磺酸的含量测定方法。牛磺酸结构中不含共轭体系,无法通过普通的UV检测器直接测定。此类物质可通过柱前衍生化引入发色基团后进行检测。我们采用... 详细信息

五维牛磺酸口服液作为维生素补充药物,在临床已应用多年。现行的国家标准未制定活性成份牛磺酸的含量测定方法。牛磺酸结构中不含共轭体系,无法通过普通的UV检测器直接测定。此类物质可通过柱前衍生化引入发色基团后进行检测。我们采用柱前衍生化法,以2,4-二硝基氟苯作衍生化试剂测定牛磺酸的含量。[第一段]

关键词：柱前衍生化法直接测定牛磺酸口服液 4-二硝基氟苯 UV检测器维生素补充衍生化试剂

反相高效液相色谱-柱前衍生化法测定大青叶中氨基酸的含量

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中国药房 2006年第9期17卷 694-695页

作者：冯玲玲岳淑梅万绍晖康廷国河南开封市第一人民医院开封市475000 河南大学药学院开封市475001 辽宁中医学院沈阳市110032

目的:建立以反相高效液相色谱法测定大青叶中精氨酸和脯氨酸含量的方法。方法:采用2,4—二硝基氟苯柱前衍生化,将氨基酸在碱性条件下衍生后直接进样测定;色谱柱为KromasilC18,流动相为醋酸钠缓冲溶液(pH=6.4)-乙腈(850∶150),检测波长为... 详细信息

目的:建立以反相高效液相色谱法测定大青叶中精氨酸和脯氨酸含量的方法。方法:采用2,4—二硝基氟苯柱前衍生化,将氨基酸在碱性条件下衍生后直接进样测定;色谱柱为KromasilC18,流动相为醋酸钠缓冲溶液(pH=6.4)-乙腈(850∶150),检测波长为360nm,外标法计算含量。结果:精氨酸和脯氨酸进样量分别在0.627μg～5.016μg(r=0.9996)、0.874μg～7.000μg(r=0.9995)范围内线性关系良好;平均回收率均为98.2%(RSD=2.3%、2.2%)。结论:本法简便、准确、可靠,适用于大青叶中氨基酸的含量测定。

关键词：反相高效液相色谱法柱前衍生化 2 4-二硝基氟苯大青叶精氨酸脯氨酸