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柱前衍生化反相高效液相色谱法测定板蓝根中的氨基酸

Determination of Amino Acids in Isatis indigotica Fort by Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatography with Pre-column Derivatization

作     者:万绍晖 杨浩 耿秀梅 WAN Shaohui;YANG Hao;GENG Xiumei

作者机构:河南大学药学院河南开封475001 

出 版 物:《色谱》 (Chinese Journal of Chromatography)

年 卷 期:2005年第23卷第4期

页      面:408-410页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

主  题:反相高效液相色谱法 柱前衍生化 2 4-二硝基氟苯 精氨酸 脯氨酸 谷氨酸 板蓝根 

摘      要:建立了板蓝根中指标性成分精氨酸、脯氨酸和谷氨酸的柱前衍生化反相高效液相色谱分析方法.以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,将氨基酸在碱性条件下衍生化,然后直接进样进行高效液相色谱测定.采用的色谱条件为:色谱柱Sinochrom ODS-BP柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm),流动相醋酸钠缓冲溶液(pH 6.4)-乙腈(体积比为850∶150),检测波长360 nm,采用外标法定量.该文同时对谷氨酸、精氨酸和脯氨酸进行定性,并对精氨酸和脯氨酸进行定量.精氨酸和脯氨酸的进样量分别为0.627~5.016 μg和0.874~7.000 μg时,其峰面积与进样量呈良好的线性关系(r分别为0.999 6和0.999 5).精氨酸和脯氨酸的平均回收率分别为98.5% (相对标准偏差(RSD)为2.5% (n=8))和98.4% (RSD为2.3% (n=8)).对板蓝根样品进行了测定,结果表明,板蓝根中精氨酸的含量最高,脯氨酸次之,谷氨酸含量很少.该法简便、准确、可靠,适用于板蓝根药材的质量控制.

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