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血热型银屑病动物模型的建立及凉血消斑汤对其治疗作用机制研究

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血热型银屑病动物模型的建立及凉血消斑汤对其治疗作用机制研究

作者：杜欣北京中医药大学

学位级别：硕士

目的本研究拟建立血热型银屑病的动物模型并探讨凉血消斑汤对其治疗作用及机制。研究以雄性BABL/c小鼠为对象,采用干姜肉桂灌胃给药与涂抹咪喹莫特乳膏的混合方式进行血热型银屑病的造模,探讨多种因素及造模条件对血热型银屑病动物模型... 详细信息

目的本研究拟建立血热型银屑病的动物模型并探讨凉血消斑汤对其治疗作用及机制。研究以雄性BABL/c小鼠为对象,采用干姜肉桂灌胃给药与涂抹咪喹莫特乳膏的混合方式进行血热型银屑病的造模,探讨多种因素及造模条件对血热型银屑病动物模型的持续时间及稳定性的影响,初步总结优化后血热型银屑病的动物模型的整体行为学改变和证候特点。在此基础上,以不同剂量的凉血消斑汤干预给药,观察其对BABL/c小鼠血热型银屑病动物模型皮损的干预作用。方法(1)SPF级雄性BABL/c小鼠125只,体重20-25g,10-12周龄,实验前适应性喂养3-5天,自由饮水饮食。分为空白组、模型组、血热高剂量组、血热中剂量组、血热低剂量组,每组25只,空白组背部涂抹凡士林,模型组和血热低、中、高剂量组小鼠进行常规涂抹咪喹莫特乳膏造模。血热低、中、高剂量组灌胃不同剂量的干姜肉桂水煎液,药物剂量分别为2.25g/kg、4.5g/kg、9g/kg,从实验第1天开始,第14天结束。于实验第1天到第28天观察银屑病模型的变化情况。(2)SPF级雄性BABL/c小鼠112只,体重20-25g,10-12周龄,实验前适应性喂养3天,自由饮水饮食。然后分为空白组、模型组、凉血消斑汤低剂量组、中剂量组、高剂量组、复方青代胶囊组、雷公藤多苷组一共7组,每组16只。按照实验进程,先造模再给药治疗。血热造模持续14天,于第11天开始涂抹咪喹莫特乳膏,直到第22天实验结束,于第19天、第23天取材;从第15天到22天进行治疗。空白组和模型组给予生理盐水,复方青黛胶囊组2g/kg/d给药干预,雷公藤多苷组10mg/kg/d。凉血消斑汤低、中、高剂量是27.5g/kg、55g/kg、110g/kg,每天灌胃一次,每次0.2ml。(3)整体观察各组小鼠的不同表现:以体重、PASI评分、表皮厚度、脾指数、HE染色、酶联免疫法、流式细胞等指标评价药物干预效果。结果(1)血热型银屑病的动物模型最佳造模条件是干姜、肉桂水煎液灌胃14天,于第7天开始涂抹咪喹莫特乳膏,第15天病证结合造模完成后,银屑病皮损处于高峰期,随着时间的推移,皮损状态逐渐减轻,模型组和血热低、中剂量组的皮损状态相当,血热高剂量组的皮损最严重,最佳给药量是9g/kg;(2)采用背部涂抹咪喹莫特乳膏与灌胃给药干姜肉桂水煎液的方法可使小鼠发病的皮损时间延长,皮损程度加重,是一种有效的血热型银屑病造模方法。肉眼观察小鼠皮损,皮肤出现红色的斑点、白色的鳞屑和皮肤有不同程度的增厚;在HE染色的病理切片中,模型组和血热低、中、高剂量组的小鼠表皮增厚,真皮炎症细胞浸润和毛细血管增生;PASI评分中,血热高剂量组的皮损最严重,相关甲状腺的指标T3、T4升高,脾指数升高。(3)经各项指标的动态观察发现BABL/c小鼠血热型银屑病模型有明显的特点。动物一般在2-3天内发病,皮损逐渐严重,各组PASI评分开始上升,约7天之内即可达到发病高峰期,而后进入慢性迁延期,皮损有所消退,病理损伤维持在一定的水平。(4)与雷公藤多苷组、复方青黛胶囊相比,凉血消斑汤高剂量组对于BABL/c小鼠皮损的保护作用更加明显。凉血消斑汤不同剂量对于血热型银屑病动物模型的抑制作用不同,高剂量组的综合调节作用要优于中、低剂量组。凉血消斑汤能够调节Th1/Th2、Th17/Treg淋巴细胞的平衡,通过降低TNF-γ、IL-17实现的。结论(1)通过对BABL/c小鼠血热型银屑病模型造模方法的探索,使血热型银屑病的动物模型得以建立,该血热证模型能够从病症特点方面模拟银屑病的发展,发病时间延长,皮损更严重。(2)凉血消斑汤对于BABL/c小鼠血热型银屑病动物模型有较好的治疗作用,能够抑制动物模型急性期的皮肤损伤,对免疫系统有一定的调整作用,还能改善血热症状,降低体内甲状腺激素的代谢水平。

关键词： BABL/c小鼠银屑病动物模型凉血消斑汤

FGF10单克隆抗体软膏对小鼠银屑病动物模型作用的实验研究

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FGF10单克隆抗体软膏对小鼠银屑病动物模型作用的实验研究

作者：王敬医吉林大学

学位级别：硕士

背景:银屑病俗称“牛皮癣”，是一种慢性炎症性免疫异常性皮肤病，病因多种多样，可以被认为是一种以T细胞为主介导的，患者机体免疫功能紊乱，正常细胞被攻击，多种细胞因子参与的疾病。T细胞、巨噬细胞等细胞分泌的细胞因子可调控新... 详细信息

背景:银屑病俗称“牛皮癣”，是一种慢性炎症性免疫异常性皮肤病，病因多种多样，可以被认为是一种以T细胞为主介导的，患者机体免疫功能紊乱，正常细胞被攻击，多种细胞因子参与的疾病。T细胞、巨噬细胞等细胞分泌的细胞因子可调控新的炎性细胞移入皮肤，增加T细胞的活性，最终导致角质形成细胞增生过度。临床症状以红斑上覆盖银白色鳞屑、剥开后有薄膜现象和点状出血为主要特征。病理表现有角化过度、角化不全、表皮突延长、颗粒层缺失、炎症细胞浸润、真皮毛细血管扩张等。成纤维细胞生长因子-10(Fibroblast growth factor-10，FGF10)是成纤维细胞生长因子家族的一员，其生物学功能研究结果显示：FGF10不仅能够促进角质形成细胞的生长和增殖，还对其移行具有影响。体外实验有研究证明FGF10单克隆抗体对体外培养的角质形成细胞具有负增长作用(待发表)。但FGF10单克隆抗体在银屑病动物模型中是否有抑制细胞增生作用，国内外尚未见文献报道。FGF10单克隆抗体作为一种新开发的生物制剂，对银屑病是否有治疗作用，有待动物实验及临床实验的进一步研究证实。银屑病为一种难治性皮肤病，国内外很多学者致力于银屑病生物治疗的研究，并证实了生物制剂的有效性和安全性，生物治疗有其自身优势，如针对性强，疗效确切，不良反应少等，是银屑病治疗的一个新方法和新途径，为广大银屑病患者带来新的希望。目的:探讨成纤维细胞生长因子-10（FGF10）单克隆抗体软膏在银屑病动物模型中是否有抑制细胞增生的作用;了解FGF10单克隆抗体及成纤维细胞生长因子家族的生物学意义;为银屑病的生物治疗提供理论基础。方法:将FGF10单克隆抗体（3.76mg/ml）分别稀释成20倍(0.188mg/ml)，40倍(0.094mg/ml)，60倍(0.063mg/ml)三个组别，制作成软膏，选取雌性小鼠为研究对象，随机选取13只小鼠为空白对照组，其余的小鼠用于制作银屑病动物模型，造模成功后，将小鼠随机分组，分别为FGF10单克隆抗体低浓度组，中浓度组，高浓度组，阳性对照组（丁酸氢化可的松软膏组），模型对照组，分别于小鼠阴道给药，给药3天后，将小鼠处死切取阴道组织，福尔马林溶液固定，石蜡包埋，苏木精-伊红染色（Hematoxylin-eosin staining，HE）。在光镜下计数300个小鼠阴道上皮基底细胞中的有丝分裂数，折算出每100个基底细胞中的有丝分裂数，为有丝分裂指数。比较各组小鼠阴道上皮基底细胞的有丝分裂指数，对各组数据进行单因素方差分析(One-wayANOVA)。光镜下观察不同组小鼠阴道上皮的变化及区别。结果:***13.0统计软件分析：方差齐性检验结果显示各样本所在总体的方差齐，选用LSD法将空白对照组，阳性对照组，FGF10单克隆抗体高浓度组，中浓度组，低浓度组分别同模型对照组进行各组间均数的两两比较，p值分别为0.000，0.037，0.001，0.001，0.031，p值均＜0.05，组间差值有统计学意义，且差值为正;FGF10单克隆抗体低浓度组，中浓度组，高浓度组，阳性对照组进行各组间均数的两两比较，结果p值均＞0.05，组间差值无统计学意义。2.小鼠阴道口外观观察发现造模组比空白对照组阴道口较湿润、肿胀，偶有分泌物。光镜下观察，可见模型对照组小鼠阴道组织被覆分化良好的鳞状上皮，基底层可见多个处于核分裂期细胞;阳性对照组和FGF10单克隆抗体软膏三个浓度组小鼠阴道组织被覆分化良好的鳞状上皮，但基底层可见较少量处于核分裂期细胞。结论:1.雌激素致小鼠阴道上皮细胞异常增生的银屑病动物模型造模成功。***10单克隆抗体对小鼠阴道上皮基底细胞有丝分裂有抑制作用。推测FGF10单克隆抗体对银屑病动物模型有抑制作用，可以用于银屑病的治疗，为银屑病生物治疗提供了一个新思路。***10单克隆抗体低浓度组，中浓度组，高浓度组，阳性对照组的小鼠阴道上皮基底细胞有丝分裂指数组间比较无统计学意义，4个组的药物疗效相当，不能推断出某组药物疗效更佳。

关键词：银屑病治疗 FGF10单克隆抗体银屑病动物模型

咪喹莫特诱导小鼠银屑病样动物模型的建立与评价

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中国临床药理学杂志 2019年第1期35卷 73-75页

作者：青玉巴图德力根韩志强塔娜内蒙古民族大学附属医院蒙药药理研究所内蒙古通辽028007

目的用咪喹莫特诱导的方法激发银屑病样模型并研究模型的形态学变化与稳定性。方法按体重将BALB/c小鼠随机分为2组:空白组和模型组,每组10只。模型组小鼠于背部涂抹咪喹莫特乳膏(涂抹面积2cm×2cm),空白组小鼠于背部涂抹凡士林,每次涂抹... 详细信息

目的用咪喹莫特诱导的方法激发银屑病样模型并研究模型的形态学变化与稳定性。方法按体重将BALB/c小鼠随机分为2组:空白组和模型组,每组10只。模型组小鼠于背部涂抹咪喹莫特乳膏(涂抹面积2cm×2cm),空白组小鼠于背部涂抹凡士林,每次涂抹21 mg,1次/天,连续7 d。于末次涂药后,眼球取血,处死,背部皮肤固定于福尔马林中,用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-22(IL-22)的含量,以免疫组织化学法检测皮损组织的增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)、Toll样受体2(TLR2)的水平(灰度值)。结果模型组和空白组的血清IL-17分别为(0. 48±0. 24),(0. 27±0. 15) pg·m L^(-1);这2组的IL-18分别为(0. 48±0. 06),(0. 36±0. 09) pg·m L^(-1);这2组的IL-22分别为(0. 59±0. 12),(0. 46±0. 06) ng·m L^(-1);这2组的PCNA分别为62. 28±3. 23,135. 51±5. 07;这2组的VEGF分别为90. 16±3. 11,132. 31±4. 02;这2组的TLR2分别为65. 24±2. 03,142. 81±4. 26,上述指标,模型组与空白组比较,差异均有统计学意义(均P 模型是一种有效的、稳定的、值得推广的银屑病模型。

关键词：银屑病动物模型咪喹莫特白细胞介素-17 血管内皮生长因子

咪喹莫特诱导血热型银屑病模型体内微环境变化观察

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延安大学学报（医学科学版） 2024年第1期22卷 15-19页

作者：段亚倩王宇航张玉桐马佳蕊赵忻未曹朵赵菊梅张正祥延安大学医学院陕西延安716000

目的评价采用干姜、肉桂灌胃结合咪喹莫特乳膏涂抹,建立血热型银屑病动物模型的皮损和体内微环境变化情况。方法48只8周龄健康BALB/c小鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组和银屑病模型组。第1天起,模型组给予0.9 g/mL干姜、肉桂水煎液,按0.... 详细信息

目的评价采用干姜、肉桂灌胃结合咪喹莫特乳膏涂抹,建立血热型银屑病动物模型的皮损和体内微环境变化情况。方法48只8周龄健康BALB/c小鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组和银屑病模型组。第1天起,模型组给予0.9 g/mL干姜、肉桂水煎液,按0.1 mL/10 g·d剂量灌胃,对照组给予生理盐水0.1 mL/10 g·d剂量灌胃,持续12 d。灌胃第6天起,模型组背部涂抹咪喹莫特乳膏42 mg,对照组背部涂抹等量凡士林乳膏,每天观察皮损情况,持续7 d。第13天,小动物麻醉机麻醉后,采集两组小鼠血液,ELISA法检测两组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)含量变化;取两组小鼠背部涂抹处皮肤,制作病理学组织切片观察皮损情况。结果模型组小鼠涂抹部位皮肤表皮增厚,表面凹凸不平,有红斑散在分布。显微镜下显示表皮角化不全、棘层增厚、皮脂腺增多;血清中TNF-α、IFN-γ、IL-21、IL-17水平均升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P银屑病动物模型,皮损变化和体内微环境改变符合银屑病患者特点。

关键词：银屑病 BALB/c小鼠银屑病动物模型干姜肉桂咪喹莫特乳膏

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银屑Ⅰ号对咪喹莫特诱导BALB/c小鼠银屑病模型的干预作用

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中国中西医结合杂志 2020年第4期40卷 453-458页

作者：杭怡宁黎锦添王金华谢玉彬李秋怿钟欣欣查旭山广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院皮肤科广州510405

目的观察银屑Ⅰ号对咪喹莫特(IMQ)诱导的BALB/c小鼠银屑病模型局部皮损及外周血的干预作用。方法 SPF级BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、模型组、银屑Ⅰ号高、中、低剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组每日外涂62.5 mg 5%IMQ诱导银屑... 详细信息

目的观察银屑Ⅰ号对咪喹莫特(IMQ)诱导的BALB/c小鼠银屑病模型局部皮损及外周血的干预作用。方法 SPF级BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、模型组、银屑Ⅰ号高、中、低剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组每日外涂62.5 mg 5%IMQ诱导银屑病样动物模型,银屑Ⅰ号高、中、低剂量组小鼠造模期间同时灌胃相应剂量银屑Ⅰ号,共7日。分别观察小鼠背部皮损厚度变化、皮损面积和疾病严重程度指数(PASI),光镜下观察局部皮损组织病理变化,对局部皮损组织依次使用反转录聚合酶链式反应(qPCR)、免疫印迹(Western Blot)法检测维生素D受体(VDR)、血管内皮生长因子(VEGF)在mRNA及蛋白水平表达,采用ELISA法检测外周血白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)含量。结果与对照组比较,模型组小鼠背部皮损皮肤显著增厚,并出现典型银屑病表现,PASI评分随时间推移显著上升;与模型组比较,银屑Ⅰ号各组小鼠背部皮损红斑及鳞屑相对较少、浸润程度较轻,造模区域皮肤厚度及PASI评分与剂量梯度成反比。光镜下模型组小鼠背部皮损表皮全层增厚,呈典型银屑病病理改变;与模型组比较,银屑Ⅰ号高剂量组病理改变最轻,中剂量组次之,低剂量组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组VDR mRNA及蛋白表达降低(P模型组比较,银屑Ⅰ号中、高剂量组VDR mRNA及蛋白表达升高(P0.05)。结论一定剂量的银屑Ⅰ号可通过抑制异常新生血管形成及炎症环境改善IMQ诱导银屑病小鼠模型的银屑病表现,这可能与其调控VDR/VEGF信号网络有关。

关键词：银屑Ⅰ号维生素D受体银屑病动物模型新生血管炎症因子

银屑Ⅰ号方对银屑病小鼠模型角质细胞增殖及外周血T淋巴细胞的干预作用

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中华中医药杂志 2021年第12期36卷 7333-7337页

作者：杭怡宁黎锦添查旭山广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院皮肤科广州510405

目的:探讨银屑Ⅰ号方对咪喹莫特(IMQ)诱导的BABL/c小鼠银屑病模型角质细胞增殖及外周血T淋巴细胞的干预作用。方法:SPF级BABL/c小鼠30只,随机分为对照组,模型组,银屑Ⅰ号方低、中、高剂量组,每组6只。除对照组外,其余各组每日于背部皮... 详细信息

目的:探讨银屑Ⅰ号方对咪喹莫特(IMQ)诱导的BABL/c小鼠银屑病模型角质细胞增殖及外周血T淋巴细胞的干预作用。方法:SPF级BABL/c小鼠30只,随机分为对照组,模型组,银屑Ⅰ号方低、中、高剂量组,每组6只。除对照组外,其余各组每日于背部皮损处外涂62.5mg 5%IMQ诱导银屑病小鼠模型,银屑Ⅰ号方低、中、高剂量组小鼠于造模期间同时灌胃1.02、2.03、4.06g/mL银屑Ⅰ号方,共7d。分别评价小鼠背部皮损面积和疾病严重程度(PASI)评分、局部皮损病理变化、脾肿胀情况并采用qPCR,Western Blot及流式分析法检测皮损及外周血中维A酸受体(RAR)、维A酸X受体(RXR)表达水平及外周血T淋巴细胞分化水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠背部皮损出现典型银屑病表现,PASI评分及脾肿胀指数显著上升(P模型组比较,银屑Ⅰ号方各组小鼠背部皮损红斑、鳞屑相对较少、浸润程度较轻,PASI评分及脾肿胀指数随剂量增加依次减低(P银屑Ⅰ号方高剂量组RAR、RXR mRNA及蛋白表达显著升高(P银屑Ⅰ号方可有效改善银屑病小鼠病理状态及免疫失衡,其机制可能与其发挥类维A酸类药物作用调控局部皮损中RAR、RXR表达及外周血中T淋巴细胞分化水平有关,但存在剂量依赖性。

关键词：银屑Ⅰ号方银屑病维A酸受体 T淋巴细胞银屑病动物模型

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银屑灵片对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响

中药新药与临床药理 2010年第3期21卷 231-233页

作者：卢传坚闫玉红赵瑞芝广州中医药大学第二附属医院广州510120

目的观察不同剂量中药银屑灵片对小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响。方法使用小鼠鼠尾鳞片表皮模型,计数连续100个鳞片中有颗粒层的鳞片数,观察银屑灵片对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响。结果银屑灵片各剂量组与阴性对照组比较差异有... 详细信息

目的观察不同剂量中药银屑灵片对小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响。方法使用小鼠鼠尾鳞片表皮模型,计数连续100个鳞片中有颗粒层的鳞片数,观察银屑灵片对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响。结果银屑灵片各剂量组与阴性对照组比较差异有高度统计学意义(P银屑灵片高、中高、中剂量组与之差异无统计学意义(P>0.05);与迪银片组比较,银屑灵片低、中剂量组与之差异无统计学意义(P>0.05),银屑灵片高、中高剂量组与之差异有非常显著性意义(P银屑灵片不同剂量组间比较,银屑灵片中、中高、高剂量组与银屑灵片低剂量组相比差异有非常显著性意义(P银屑灵片中、中高、高各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论银屑灵片各剂量组对小鼠鼠尾鳞片颗粒层的形成均有明显的促进作用。

关键词：银屑灵片银屑病动物模型颗粒层形成小鼠

蒙药森登四味汤对银屑病小鼠炎症抑制作用的实验研究

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蒙药森登四味汤对银屑病小鼠炎症抑制作用的实验研究

作者：李娇娇内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的:探索蒙药森登四味汤对咪喹莫特（IMQ）乳膏诱导的银屑病小鼠模型的治疗作用及机制,为蒙药森登四味汤在治疗银屑病临床进一步推广应用提供理论依据。方法:采用95%乙醇提取蒙药森登四味汤,用冻干技术将其制为冻干粉;筛选60只8周龄BAB... 详细信息

目的:探索蒙药森登四味汤对咪喹莫特（IMQ）乳膏诱导的银屑病小鼠模型的治疗作用及机制,为蒙药森登四味汤在治疗银屑病临床进一步推广应用提供理论依据。方法:采用95%乙醇提取蒙药森登四味汤,用冻干技术将其制为冻干粉;筛选60只8周龄BABL/c雄性小鼠,随机分为6组,每组各10只,即空白对照组（简称CK组）、模型组（简称MODEL组）、甲氨蝶呤组（简称MTX组）、森登低剂量组（简称森登L组）、森登中剂量组（简称森登M组）、森登高剂量组（简称森登H组）。CK组每日背部涂抹62.5mg凡士林乳膏,其余5组每日背部涂抹62.5mg5%IMQ乳膏,连续10天,CK组、MTX组、森登L组、森登M组、森登H组从第4天开始分别用生理盐水、MTX（2mg/kg）、低剂量蒙药森登四味汤（0.315g/kg）、中剂量蒙药森登四味汤（0.63g/kg）、高剂量蒙药森登四味汤（1.26g/kg）0.2ml/d灌胃,连续7天。肉眼观察背部皮肤变化,并计算银屑病皮损面积和严重程度指数评分（PASI评分）;组织切片HE染色检测组织病理变化,Ki67免疫组化检测增殖情况;计算各组小鼠脾脏指数,脾脏指数=脾脏重量（mg）/体重（g）;利用流式细胞学检测腹股沟淋巴结中Th17/Treg细胞比例;采用western blot方法检测皮损中p-p38、p38、P-STAT3、STAT3、P-JAK1、JAK1通路蛋白的表达。结果:（1）与CK组相比,MODEL组小鼠出现显著皮肤肥厚、红斑、鳞屑;与MODEL组相比,在同一时间,森登L、M、H组和MTX组小鼠红斑减少,鳞屑稀少,皮肤厚度减少,PASI评分下降。其中MTX组和森登M组的作用最明显,森登L组和森登H组次之;（2）组织切片HE染色、Ki67免疫组化:与CK组相比,MODEL组小鼠出现表皮角质层增厚、角化不全、Munro微脓肿及真皮毛细血管增生及淋巴细胞浸润,Ki67高表达;与MODEL组相比,森登M组和MTX组表现为角质层厚度减少、角化不全减少,Munro微脓肿减少甚至消失,真皮毛细血管增生及淋巴细胞浸润程度降低,Ki67低表达;森登L组和森登H组也可改善小鼠病理结构,但程度不及森登M组;（3）与CK组相比,MODEL组的脾脏指数升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;经治疗后MTX组和森登M组的脾脏指数均比MODEL组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;森登L组小鼠脾脏指数与MODEL组相比差异无统计学意义;森登H组与MODEL组相比脾脏指数降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;（4）流式细胞学:与CK相比,MODEL组Treg细胞比例降低,Th17细胞比例升高;与MODEL组相比,MTX组、森登M组、森登L组和森登H组Treg细胞比例升高,Th17细胞比例降低,其中MTX组和森登M组的作用最明显,森登L组和森登H组次之;（5）western blot法:与CK组相比,MODEL组p-p38、p38、p-STAT3、p-JAK1表达增加;与MODEL组相比,MTX组和森登M组可明显降低p-p38、p38、p-STAT3、p-JAK1的表达,森登L组和森登H组也可降低p-p38、p38、p-STAT3、p-JAK1的表达,但程度不及森登M组,各组STAT3、JAK1的表达无明显差异。结论:（1）蒙药森登四味汤能有效减轻IMQ诱导的银屑病小鼠皮炎症状,降低PASI评分,改善病理结构特征,降低Ki67的表达,降低脾脏指数,中等剂量（0.63g/kg）为最佳浓度;（2）蒙药森登四味汤对IMQ诱导的银屑病样小鼠有抑制作用,与调节Th17/Treg细胞（上调Treg细胞、下调Th17细胞）、降低p38及p38、STAT3、JAK1的磷酸化水平有关,可能通过JAKSTAT、p38 MAPK蛋白通路发挥作用。

关键词：银屑病蒙药森登四味汤银屑病动物模型 Th17/Treg细胞蛋白通路

咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究

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皮肤性病诊疗学杂志 2019年第2期26卷 61-66页

作者：黄钟洲陈小彦徐敏艾雪忱唐增奇郭庆中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科广东广州510120

目的:研究咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的皮肤组织学及免疫学特征。方法:将20只BALB/c小鼠随机分为造模组和对照组,每组10只。所有小鼠背部剃毛后,造模组小鼠于背部皮肤及单侧耳部每日涂抹共计62.5 mg的5%咪喹莫特乳膏1次,连续7 d,... 详细信息

目的:研究咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的皮肤组织学及免疫学特征。方法:将20只BALB/c小鼠随机分为造模组和对照组,每组10只。所有小鼠背部剃毛后,造模组小鼠于背部皮肤及单侧耳部每日涂抹共计62.5 mg的5%咪喹莫特乳膏1次,连续7 d,空白组小鼠涂抹等量凡士林。每日记录小鼠PASI评分及耳部厚度,并于末次涂药24 h后处死,取背部皮肤进行多聚甲醛固定,行HE染色及Ki-67免疫组化分析。取脾脏称重,以流式细胞术检测脾脏中的Th细胞亚群。结果:造模组小鼠于第二天逐渐出现红斑、鳞屑、皮肤增厚及耳部肿胀,其PASI评分随造模时间延长而增加。造模组小鼠皮损出现银屑病样病理改变,其表皮厚度明显增加(t=15.12,P0.05)。结论:咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型可较好地模拟寻常型银屑病的临床、组织病理和免疫学特征,是一种有效的银屑病模型。

关键词：银屑病动物模型咪喹莫特 Ki-67 Th1细胞 Th17细胞