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载脂蛋白h基因多态性与脑卒中的相关性研究

中华医学杂志 2003年第7期83卷 537-540页

作者：夏健杨期东杨期明许宏伟张乐中南大学附属湘雅医院神经内科长沙410008

目的　探讨载脂蛋白h(apoh)基因多态性与长沙地区汉族人脑卒中的关系。方法　采用PCR 单链构象多态技术和DNA序列测定法检测长沙地区汉族 2 6 0例脑卒中患者、2 0个脑卒中家系成员和 10 0例健康对照者的apoh基因 3号外显子的多态性。结... 详细信息

目的　探讨载脂蛋白h(apoh)基因多态性与长沙地区汉族人脑卒中的关系。方法　采用PCR 单链构象多态技术和DNA序列测定法检测长沙地区汉族 2 6 0例脑卒中患者、2 0个脑卒中家系成员和 10 0例健康对照者的apoh基因 3号外显子的多态性。结果　长沙地区汉族人apoh基因 3号外显子存在G341A(Ser88Asn)多态 ,在脑出血 (Ch)组 ,G341A (Ser88Asn)多态A等位基因频率(0 12 7)明显高于对照组 (0 0 5 5 ) (P h组A等位基因频率 (0 15 1)明显高于对照组 (0 0 5 5 )及无高血压的Ch组 (0 0 78) (P 0 0 5 )。有家族史的Ch患者A等位基因频率 (0 15 0 )明显高于对照组 (0 0 5 5 ) (P h为主的家系中患病组与未患病组A等位基因 (0 16 0 ,0 12 8)频率均明显高于对照组 (0 0 5 5 ) (P h基因G341A(Ser88Asn)多态性与脑梗死无关。结论　G341A(Ser88Asn)多态A等位基因可能是长沙地区汉族人Ch ,特别是高血压性Ch及有家族史的Ch患者的遗传危险因素。

关键词：载脂蛋白h 基因多态性脑卒中相关性研究

载脂蛋白h基因7号外显子多态性与长沙地区汉族人脑卒中的相关性

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中华神经科杂志 2003年第4期36卷 256-260页

作者：夏健杨期东杨期明许宏伟张乐中南大学湘雅医院神经内科长沙410008

目的研究载脂蛋白h(apoh)基因7号外显子G817T(Leu247Val)多态性与长沙地区汉族人脑卒中的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态(PCR-SSCP)技术和DNA序列测定法检测长沙地区汉族260例脑卒中患者(脑梗死组和脑出血组各130例)、20个... 详细信息

目的研究载脂蛋白h(apoh)基因7号外显子G817T(Leu247Val)多态性与长沙地区汉族人脑卒中的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态(PCR-SSCP)技术和DNA序列测定法检测长沙地区汉族260例脑卒中患者(脑梗死组和脑出血组各130例)、20个脑卒中家系的成员(脑梗死组10个家系,142例成员,其中患病组25例;脑出血组10个家系,122例成员,其中患病组21例)、100名健康对照者的apoh基因7号外显子G817T(Leu247Val)多态;酶联免疫吸附法检测所有研究对象的血清抗磷脂抗体(APA)水平。结果在脑梗死组,G817T(Leu247Val)多态T等位基因频率(0.338)明显高于对照组(0.220,Ph基因G817T(Leu247Val)多态性与脑出血无关。结论长沙地区汉族人apoh基因G817T(Leu247Val)多态基因频率分布具有脑卒中家族聚集性。G817T(Leu247Val)多态GT基因型和T等位基?

关键词：载脂蛋白h 基因多态性长沙市汉族人脑卒中相关性遗传易患性发病机制

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脑卒中患者载脂蛋白h与血脂关系的研究

中华医学杂志 2002年第4期82卷 236-238页

作者：夏健史伟雄杨期东许宏伟中南大学湘雅医学院附属湘雅医院神经内科长沙市410008

目的　探讨脑卒中患者载脂蛋白h(Apoh)血清水平与血脂的相关性以及Apoh与脑卒中的关系。方法　采用放射免疫法检测急性动脉粥样硬化性血栓性脑梗死 (ACI)患者 33例和急性高血压性脑出血 (ACh)患者 2 8例的Apoh血清水平 ,酶法测定血脂各... 详细信息

目的　探讨脑卒中患者载脂蛋白h(Apoh)血清水平与血脂的相关性以及Apoh与脑卒中的关系。方法　采用放射免疫法检测急性动脉粥样硬化性血栓性脑梗死 (ACI)患者 33例和急性高血压性脑出血 (ACh)患者 2 8例的Apoh血清水平 ,酶法测定血脂各项。结果　ACI、ACh患者与健康对照组血清Apoh水平分别为 2 88mg/L± 85 4mg/L、2 4 8mg/L± 6 8mg/L、2 5 6mg/L± 71mg/L。ACI患者的Apoh血清水平与胆固醇 (ChO)、低密度脂蛋白 (LDL)呈正相关 (r=0 394 ,P h与高密度脂蛋白相关。结论　Apoh血清水平与ACI患者的ChO、LDL相关 ,与正常人及ACh患者无相关性。

关键词：脑梗死脑出血载脂蛋白h 血脂脑卒中

载脂蛋白h在肾病综合征患儿肾组织表达的研究

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中华肾脏病杂志 2005年第1期21卷 26-30页

作者：傅睿徐虹陈莲张志刚张秀荣复旦大学附属儿科医院肾脏科上海200032 复旦大学医学院病理学系

目的研究载脂蛋白h(Apoh)在原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织中的分布及表达变化,探讨其在PNS进展过程中的作用。方法利用荧光定量RT-PCR和免疫组化检测78例不同病理类型的PNS患儿肾组织Apoh的mRNA及蛋白表达,并对肾组织中的肾小管损伤... 详细信息

目的研究载脂蛋白h(Apoh)在原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织中的分布及表达变化,探讨其在PNS进展过程中的作用。方法利用荧光定量RT-PCR和免疫组化检测78例不同病理类型的PNS患儿肾组织Apoh的mRNA及蛋白表达,并对肾组织中的肾小管损伤、间质炎症细胞浸润进行评分。肾活检前检测血白蛋白(Alb)、血脂、Scr、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿蛋白定量。14例正常肾组织为对照。结果(1)正常和PNS患儿肾组织中均有Apoh蛋白表达,主要分布于皮质近肾小球的近端肾小管上皮细胞;正常及PNS患儿肾组织均有ApohmRNA表达,且肾组织Apoh蛋白与mRNA表达呈显著正相关,r=0.264,Ph.(2)不同病理类型PNS患儿肾组织ApohmRNA及蛋白表达存在差异,微小病变NS(MCNS)、膜性肾病(MN)组ApohmRNA及蛋白表达水平分别为4.95±0.40、4.73±0.60和12.06±2.04、12.35±0.61,与对照组(5.44±1.56和12.69±1.89)相比虽有减少,但差异无统计学意义,P>0.05;系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)、局灶性节段性肾小球坏死(FSGS)组ApohmRNA及蛋白表达水平分别为3.30±0.28、2.82±0.36和10.13±3.09、10.12±1.02,明显低于MCNS、MN及对照组,差异均有统计学意义,PhmRNA表达低于激素敏感组,分别为4.27±0.30、

关键词：载脂蛋白h 肾病综合征患儿肾组织表达

载脂蛋白h单核苷酸基因多态性与冠心病及其脂代谢的相关性

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现代预防医学 2008年第24期35卷 4852-4855页

作者：申瑞娟宋达琳何涛康维强青岛市市立医院心内科

[目的]探讨载脂蛋白h(apoh)单核苷酸基因多态性(SNP)与山东地区非亲属汉族人冠心病以及脂代谢的关系。[方法]采用PCR-单链构象多态性分析技术,测定195例冠心病和181例健康对照组的apoh基因3号外显子G341A(Ser88Asn)和8号外显子G1025C(Tr... 详细信息

[目的]探讨载脂蛋白h(apoh)单核苷酸基因多态性(SNP)与山东地区非亲属汉族人冠心病以及脂代谢的关系。[方法]采用PCR-单链构象多态性分析技术,测定195例冠心病和181例健康对照组的apoh基因3号外显子G341A(Ser88Asn)和8号外显子G1025C(Try316Ser)位点的SNP。[结果]山东地区汉族人外显子3G341A(Ser88Asn)和外显子8G1025C(Try316Ser)存在多态性;冠心病患者G1025C(Try316Ser)SNP改变具有统计学意义,GC基因和C等位基因频率明显高于对照组(P﹤0.05);而G341A(Ser88Asn)基因型和等位基因频率在冠心病与对照组之间比较时差异无统计学意义(P﹥0.05);GAD组G1025C(Try316Ser)基因GC型与GG型比较,GC型组甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平升高具有统计学意义(均为P﹤0.05),但G341A(Ser88Asn)基因分型在冠心病组中TG和hDL-C水平的差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]apoh G1025C(Try316Ser)GC基因和C等位基因可能是山东地区汉族人冠心病的遗传危险因素;该基因位点SNP对TG和LDL-C水平的改变也有意义;未观察到G341A(Ser88Asn)基因位点SNP对冠心病影响,而该位点基因分型对LDL-C水平变化也有一定的意义。

关键词：冠心病血脂载脂蛋白h 单核苷酸基因多态性

主动脉夹层组织中载脂蛋白h表达变化及其临床意义

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临床外科杂志 2022年第10期30卷 970-972页

作者：冯鑫何毅肖杰文蒋丁胜魏翔华中科技大学同济医学院附属同济医院心脏大血管外科武汉430030

目的探讨主动脉夹层中载脂蛋白h(Apoh)的表达变化及其临床意义。方法2015年8月~2020年1月我院收治Stanford A型主动脉夹层病人15例,手术中剪取的升主动脉组织作为夹层组。9例心脏移植或心肺移植病人术中修剪的正常升主动脉壁作为对照组... 详细信息

目的探讨主动脉夹层中载脂蛋白h(Apoh)的表达变化及其临床意义。方法2015年8月~2020年1月我院收治Stanford A型主动脉夹层病人15例,手术中剪取的升主动脉组织作为夹层组。9例心脏移植或心肺移植病人术中修剪的正常升主动脉壁作为对照组。检测Apoh蛋白在两组组织样本中表达量的变化,采用Pearson相关分析法对Apoh蛋白水平和主动脉夹层病人主动脉直径之间的相关性进行分析。结果夹层组主动脉壁中Apoh蛋白的表达水平高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P蛋白表达量与主动脉夹层病人的主动脉直径变化无相关性(P>0.05)。结论Apoh蛋白表达水平在主动脉夹层病人主动脉壁中偏高,提示Apoh可能参与主动脉夹层形成,靶向Apoh有可能成为延缓主动脉夹层的潜在策略。

关键词：主动脉夹层载脂蛋白h 脂代谢紊乱

rhBsAg 结合载脂蛋白 h 的机理研究

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中华微生物学和免疫学杂志 1997年第3期17卷 160-163页

作者：杨旭 Peep.,ME 湖南医科大学附二院肝病研究中心

用酶免疫测定、配体印迹、酶水解、化学修饰等方法研究ｒＨＢｓＡｇ结合ａｐｏＨ的机理。实验结果表明，ｒＨＢｓＡｇ结合ａｐｏＨ是不依赖于Ｃａ＋＋、Ｍｇ＋＋等二价阳离子的，其最适ｐＨ在６．５～８．０。切除ａｐｏＨ上的神经氨酸... 详细信息

用酶免疫测定、配体印迹、酶水解、化学修饰等方法研究ｒＨＢｓＡｇ结合ａｐｏＨ的机理。实验结果表明，ｒＨＢｓＡｇ结合ａｐｏＨ是不依赖于Ｃａ＋＋、Ｍｇ＋＋等二价阳离子的，其最适ｐＨ在６．５～８．０。切除ａｐｏＨ上的神经氨酸和Ｎ－糖苷键，ａｐｏＨ结合力无变化，说明糖基不是ａｐｏＨ结合ｒＨＢｓＡｇ所必需的。化学修饰ａｐｏＨ的精氨酸残基对ａｐｏＨ的结合力无影响。然而，修饰其中几个赖氨酸残基即可减弱直至完全破坏ａｐｏＨ的结合力，说明赖氨酸残基与ａｐｏＨ结合ｒＨＢｓＡｇ有关。由于ａｐｏＨ与脂蛋白，特别是ＣＭ和ＨＤＬ结合，ＨＢＶ有可能通过ａｐｏＨ，结合ＣＭ、ＨＤＬ等，在脂蛋白代谢过程中进入肝细胞。

关键词：受体载脂蛋白h 乙型肝炎表面抗原

载脂蛋白h在携带乙肝病毒不孕妇女中的表达及其与颗粒细胞凋亡和体外受精—胚胎移植结局相关性研究

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载脂蛋白H在携带乙肝病毒不孕妇女中的表达及其与颗粒细胞凋亡和...

作者：李苗浙江大学

学位级别：硕士

背景：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,hBV)是一种造成全世界约3.5亿人慢性感染的嗜肝DNA病毒。其广泛存在于乙肝患者的体液中,包括唾液、泪液、汗液、乳汁、血液、精液和卵泡液等。hBV传播途径包括水平传播(如输血、性交、医源性及... 详细信息

背景：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,hBV)是一种造成全世界约3.5亿人慢性感染的嗜肝DNA病毒。其广泛存在于乙肝患者的体液中,包括唾液、泪液、汗液、乳汁、血液、精液和卵泡液等。hBV传播途径包括水平传播(如输血、性交、医源性及密切的生活接触等)和垂直传播(即父婴和母婴垂直传播)。经精液和精子传递的父婴垂直传播近年来受到较为广泛的关注。尽管通过主动和被动免疫,90%的母婴垂直传播已得到有效控制,但仍有10%的婴儿因阻断失败而感染hBV。近年来在卵泡液,颗粒细胞和女方hBV不孕妇女胚胎中hBV DNA的阳性检出,为hBV母婴垂直传播的学说提供了更多的依据和猜测。载脂蛋白h(apoh),是血浆脂蛋白的一种,其生理作用尚不完全了解。主要作用是参与血液凝固和激活脂蛋白酶。与脂质代谢相关疾病、自身免疫性疾病如APS和SLE、细胞凋亡、细菌及病毒感染等也相关。apoh与包括hBV在内的多种病毒结合,从而促进病毒感染。国内外研究认为apoh可以促进hBV感染,但它们之间的真正关系尚未揭示,apoh促进hBV感染的机制更是未知。另外apoh可以与磷脂酰丝氨酸结合从而在识别和清除凋亡及衰老细胞中起着一定作用。颗粒细胞凋亡常被用来评估体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局。颗粒细胞凋亡率增加使IVF周期卵子质量和胚胎质量下降而导致妊娠率下降,换言之,降低颗粒细胞凋亡率能提高IVF成功率。而hBV对颗粒细胞凋亡的影响尚未有研究报道。 hBV感染不但可以引起肝脏一系列病变,亦可影响人类生殖能力。鉴于hBV对女性生殖力影响的相关报道及hBV母婴垂直传播的可能性的不断证实,IVF的开展为研究hBV经生殖细胞传播研究提供了良好平台的同时增加了人们对于IVF治疗结局的关注。然而,关于hBV不孕妇女IVF结局的观点并不一致。基于上述理论我们推测卵泡液中apoh是否能通过促进hBV感染并介导了hBV对颗粒细胞凋亡的影响从而对IVF结局产生影响。目的：拟观察携带乙肝病毒的不孕妇女血清和卵泡液中apoh表达水平与hBV感染之间关系,以及hBV感染与颗粒细胞凋亡的关系,以探讨apoh是否介导了hBV对颗粒细胞凋亡的影响从而影响体外受精治疗结局,为研究阻断hBV母婴垂直传播和提高临床携带乙肝病毒不孕妇女IVF的成功率提供理论依据。材料与方法：收集2011年3月～2012年10月在浙江大学医学院附属妇产科医院接受常规体外受精/卵胞浆单精子注射-胚胎移植治疗的137例包括83例携带乙肝病毒(其中59例hBsAg阳性组,19例hBeAg阳性)和59例非乙肝(hBsAg阴性)不孕妇女的血清和卵泡液;137例中的55例同时收集颗粒细胞。采用蛋白免疫印迹方法(Western blot, WB)检测血清和卵泡液中apoh的表达水平,利用荧光定量PCR方法分别检测血清与卵泡液中的hBV DNA浓度,根据实时定量逆转录PCR (Real-Time RT PCR)方法检测颗粒细胞的凋亡相关基因(bcl-2, bax,p53,capase3)的mRNA的表达水平。同时采集所有样本病例的临床资料进行统计分析。结果：乙肝组血清apoh表达水平显著高于非乙肝组(p=0.000),其中组间比较hBeAg阳性组明显高与hBsAg阳性组和对照组。卵泡液apoh表达水平乙肝组同样显著高于非乙肝组(p=0.047),但组间比较仅hBeAg阳性组高于对照组。线性分析显示血清apoh表达水平与卵泡液apoh呈中等程度线性相关(r=0.414,p=0.000)。血清apoh表达水平与血清hBV DNA含量不一定相关,但卵泡液中apoh表达水平与卵泡液hBV DNA含量呈正相关。乙肝不孕妇女颗粒细胞capase3基因mRNA水平明显高于非乙肝妇女(p=0.025),不同hBV感染及复制状态下hBV感染妇女2PN受精率明显高于而优质胚胎率明显低于非乙肝对照组(ph水平与颗粒细胞凋亡及IVF取卵周期妊娠结局无相关性(p>0.05)。结论： 1.携带乙肝病毒不孕妇女血清apoh表达水平高于非乙肝不孕妇女,血清hBeAg阳性不孕妇女卵泡液apoh表达水平明显高于非乙肝不孕妇女;2.携带乙肝病毒不孕妇女血清apoh表达水平与血清hBV DNA含量无明显相关,但其卵泡液中apoh表达水平与卵泡液hBV DNA含量呈正相关;3.hBV感染妇女颗粒细胞capase3基因mRNA水平明显高于非乙肝不孕妇女,提示hBV感染可以促进颗粒细胞凋亡。 4.hBV感染不孕妇女IVF周期2PN受精率增高和优质胚胎率下降。 5.血清和卵泡液apoh表达水平与颗粒细胞凋亡和IVF取卵周期妊娠结局无相关性。

关键词：载脂蛋白h 乙型肝炎病毒卵泡液颗粒细胞凋亡体外受精-胚胎移植结局

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人载脂蛋白h的分离、纯化和鉴定

复旦学报（医学版） 2009年第1期36卷 61-64页

作者：王聪孙益红汪学非马端李希汤其群秦新裕复旦大学附属中山医院普外科上海200032 复旦大学上海医学院分子遗传学研究室上海200032 复旦大学生物医学研究院上海200032

目的探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白h。方法用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量... 详细信息

目的探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白h。方法用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量测定试剂盒测定获得载脂蛋白h的量。结果连续分离、纯化3次,每次获得的产品纯度均大于98%,且经Western blot分析均能与抗β2-GlycoproteinⅠ单克隆抗体呈阳性反应。3次纯化共获得apoh12.56 mg,平均21 mg/L。结论本方法重复性好、可靠性高,较传统方法更为简便和经济。

关键词：载脂蛋白h 分离纯化鉴定