人载脂蛋白H的分离、纯化和鉴定
Separation,purification and identification of human apolipoprotein H作者机构:复旦大学附属中山医院普外科上海200032 复旦大学上海医学院分子遗传学研究室上海200032 复旦大学生物医学研究院上海200032
出 版 物:《复旦学报(医学版)》 (Fudan University Journal of Medical Sciences)
年 卷 期:2009年第36卷第1期
页 面:61-64页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 1002[医学-临床医学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
基 金:上海市科学技术委员会科技发展基金项目(034119901)
摘 要:目的探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白H。方法用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量测定试剂盒测定获得载脂蛋白H的量。结果连续分离、纯化3次,每次获得的产品纯度均大于98%,且经Western blot分析均能与抗β2-GlycoproteinⅠ单克隆抗体呈阳性反应。3次纯化共获得apoH12.56 mg,平均21 mg/L。结论本方法重复性好、可靠性高,较传统方法更为简便和经济。