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羊栖菜褐藻糖胶寡糖组分分析及抗凝血活性

食品科学 2022年第12期43卷 260-266页

作者：刘雪任晨瑜刘新张绵松白新峰王令书崔婷婷史亚萍刘昌衡贾爱荣齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所山东济南250103 齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院山东济南250353 潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053

为研究褐藻糖胶中具有抗凝血活性的寡糖组分,从羊栖菜中分离纯化得到褐藻糖胶(命名为SFF),通过高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、化学法测定SFF的单糖组成、分子质量、理化性质。采用盐酸降解法降解SFF,并通过Bio-gel P4凝胶色谱柱... 详细信息

为研究褐藻糖胶中具有抗凝血活性的寡糖组分,从羊栖菜中分离纯化得到褐藻糖胶(命名为SFF),通过高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、化学法测定SFF的单糖组成、分子质量、理化性质。采用盐酸降解法降解SFF,并通过Bio-gel P4凝胶色谱柱对寡糖组分进行有效分离。采用活化部分凝血酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间评价寡糖组分的抗凝血活性,筛选高活性且低分子质量的寡糖组分,通过质谱法解析其结构,探究抗凝血SFF寡糖的结构特征。结果表明,SFF主要由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖组成,物质的量比为67.11∶26.69∶2.54∶3.66。SFF分子质量较大为708 kDa,总糖、蛋白、硫酸基质量分数分别为56.44%、1.14%和26.22%。盐酸降解产物经凝胶色谱柱分离得到5种寡糖组分P1~P5,这5种寡糖组分均可延长活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT),其中P1、P2、P3对APTT的延长作用高于P4、P5,P3的延长作用尤为明显;对凝血酶时间和凝血酶原时间无延长作用。高抗凝血、低分子质量寡糖组分P3的质谱分析表明,P3是一种高纯度寡糖组分,主要由二硫酸化岩藻三糖组成。本实验筛选出一种具有良好抗凝血活性的高纯度寡糖组分,丰富了抗凝血褐藻糖胶寡糖的研究。

关键词：羊栖菜褐藻糖胶寡糖抗凝血

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褐藻糖胶调节肠道菌群改善2型糖尿病

中国海洋药物 2023年第5期42卷 19-26页

作者：孙妍华王天宇何珊张秀云山东中医药大学药学院是的济南250355

目的探讨褐藻糖胶(fucoidan,FPS)对2型糖尿病(type 2 diabetes millitus,T2DM)大鼠的疗效及肠道菌群的调节作用。方法采用高脂饮食(high fat diet,HFD)联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导T2DM大鼠模型,灌胃给予FPS。给药2个月后取血清,测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting serum insulin,FINS)及血脂四项;取大鼠新鲜粪便样本进行16S r DNA测序,分析大鼠肠道菌群。结果与空白组比较,模型组大鼠的FBG、FINS、血脂及肠道菌群都发生紊乱(P糖脂代谢,其作用机制可能与调节肠道菌群,特别是与乳杆菌属密切相关。

关键词：褐藻糖胶 2型糖尿病肠道菌群乳杆菌属

不同分子量褐藻糖胶的制备及其对肝癌的防治作用研究

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不同分子量褐藻糖胶的制备及其对肝癌的防治作用研究

作者：刘咏轩齐鲁工业大学

学位级别：硕士

褐藻糖胶是一种主要来源于褐藻细胞壁和海洋无脊椎动物中的硫酸化多糖,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等丰富的生物活性,是当下研究的热点。在褐藻糖胶制备过程中由于原料的种类、收获季节、地理位置以及提取的方法不同等原因,导致褐藻... 详细信息

褐藻糖胶是一种主要来源于褐藻细胞壁和海洋无脊椎动物中的硫酸化多糖,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等丰富的生物活性,是当下研究的热点。在褐藻糖胶制备过程中由于原料的种类、收获季节、地理位置以及提取的方法不同等原因,导致褐藻糖胶的结构、分子量也不尽相同。由于褐藻糖胶结构的复杂性以及分子量较大的特点,导致其生物利用度低,限制了其生物活性的研究。所以有关不同分子量褐藻糖胶的制备以及明确生物活性与分子量联系的研究意义重大。因此本文旨在研究海带源褐藻糖胶的提取工艺并通过分子量截留分级的方式制备不同分子量的褐藻糖胶,并对其进行初步表征和活性研究。探讨不同分子量褐藻糖胶对小鼠肝癌的防治作用。主要研究内容如下:我们采用生物酶解实现海带活性成分的有效释放、通过分级醇沉获得褐藻糖胶粗品,进而采用分子量截留分级,制备不同分子量组分F-1(300 k Da)用于活性研究。得率分别为26.8%、19.4%、10.7%、33.6%、6.3%,总回收率为96.8%。检测各组分的化学组成,总糖含量分别为56.28%、59.66%、68.1%、62.14%、77.56%;硫酸根含量分别为22.8%、16%、21.03%、15.61%、19.8%;岩藻糖含量分别为48.98%、33.67%、31.55%、24.78%、38.14%。通过高效液相色谱法(HPLC)测定其单糖组成发现F-1、F-2、F-3、F-4、F-5均是由甘露糖、岩藻糖、木糖、鼠李糖、半乳糖五种单糖所构成的多聚糖,F-1岩藻糖含量最高,为48.98%。通过红外光谱测定各组分的官能团发现五种组分均含有多糖的和硫酸根的特征吸收峰。通过GC-MS分析,证明其主链均为由α(1→3)连接的L-岩藻糖组成,并具有部分1→4连接的岩藻糖支链,硫酸根主要连接在岩藻糖C2、C4位,还含有其它的取代基,如半乳糖、糖醛酸。通过不同分子量褐藻糖胶验证对人肝癌Hep G2细胞的细胞存活率和集落形成能力以及对小鼠BALB/3T3胚胎成纤维细胞转化能力的作用,探索其体外抗肿瘤活性。MTT结果表明,五种组分的褐藻糖胶IC值分别为184.7μg/m L、274.3μg/m L、416.2μg/m L、790.1μg/m L以及1556μg/m L,结果表明,F-1具有最好的体外抗肿瘤活性。对Hep G2细胞集落形成能力和BALB/3T3细胞转化能力的作用来看,F-1组分均具有显著的体外抗肿瘤活性。通过比较褐藻糖胶对H22小鼠体内肿瘤化学预防的能力的影响,褐藻糖胶组成瘤率结果表明,褐藻糖胶能通过免疫调节显著抑制肿瘤生成,小鼠血液免疫学指标结果表明,白细胞数量、中性粒细胞数量及百分比、中性粒细胞/淋巴细胞比值和血小板/淋巴细胞比值均显著增高,其胸腺指数和脾脏指数较模型组显著升高(**p褐藻糖胶有较好的体内抗肿瘤活性,抑瘤率为58%。肿瘤病理学切片表明褐藻糖胶作用的肿瘤细胞出现核碎裂、核浓缩等凋亡的特征,细胞体积缩小,胞质致密、嗜酸性染色增强,细胞较为分散,模型组肿瘤细胞则比较紧密。分析血清中炎性因子IL-1β、IL-6以及肿瘤坏死因子TNF-α的水平以及胸腺和脾脏指数的变化,褐藻糖胶可能是通过激活机体的免疫调节,提高其免疫功能实现抗肿瘤作用。我们通过ELISA测定了VEGF(血管内皮生长因子)的水平,并通过以及q PCR测定了的其下游信号分子PI3K/AKT/m TOR的表达水平,结果表明,褐藻糖胶可显著降低VEGF的表达,并进一步降低其下游基因PI3K/AKT/m TOR的表达,表明其可能通过VEGF通路发挥抗肿瘤作用。

关键词：分子量褐藻糖胶结构表征抗肿瘤

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褐藻糖胶抗肿瘤及免疫调节作用的研究进展

国际生物医学工程杂志 2022年第4期45卷 321-327页

作者：刘俐彤阿地拉·艾皮热李金耀新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046

褐藻糖胶是一种具有多种生物活性的硫酸化多糖,主要存在于褐藻的细胞壁,在海洋无脊椎动物如海参和海胆中也有发现,因其良好的抗肿瘤和免疫调节作用而被广泛研究。不仅如此,褐藻糖胶与化疗药物联合治疗肿瘤,不仅增强抗肿瘤功效,还减轻了... 详细信息

褐藻糖胶是一种具有多种生物活性的硫酸化多糖,主要存在于褐藻的细胞壁,在海洋无脊椎动物如海参和海胆中也有发现,因其良好的抗肿瘤和免疫调节作用而被广泛研究。不仅如此,褐藻糖胶与化疗药物联合治疗肿瘤,不仅增强抗肿瘤功效,还减轻了化疗所带来的不良反应。褐藻糖胶的功能与结构、相对分子质量、硫酸基团取代度、单糖组成、藻类来源以及采集时间密切相关。从褐藻糖胶促进细胞凋亡、诱导细胞周期阻滞、抗血管生成及细胞迁移以及对免疫细胞的激活等方面综述了其抗肿瘤和免疫调节作用的研究进展,为其开发利用及临床应用提供理论指导。

关键词：褐藻糖胶影响因素抗肿瘤免疫调节

叶黄素复合纳米颗粒的制备工艺优化及其稳定性和抗氧化活性分析

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食品工业科技 2024年

作者：张欣孙敬蒙贾珍珍张诗雨张佳慧张炜煜辰欣药业股份有限公司吉林大学第一医院临床药学部长春中医药大学药学院

为提高叶黄素（Lutein，LUT）溶解度和稳定性，本研究采用静电自组装法以大豆分离蛋白（Soybean protein isolates，SPI）及褐藻糖胶（Fucoidin，FUD）分别构建蛋白纳米粒和复合纳米粒的食品级纳米载药体系对LUT进行包埋。考察SPI/FUD... 详细信息

为提高叶黄素（Lutein，LUT）溶解度和稳定性，本研究采用静电自组装法以大豆分离蛋白（Soybean protein isolates，SPI）及褐藻糖胶（Fucoidin，FUD）分别构建蛋白纳米粒和复合纳米粒的食品级纳米载药体系对LUT进行包埋。考察SPI/FUD质量比对叶黄素-大豆分离蛋白-褐藻糖胶三元复合纳米粒（LUT-SPI-FUD NPs）的影响，在此条件下，通过单因素实验和Box-Behnken响应面法优化其制备工艺；采用X射线衍射、差示扫描量热法和傅里叶红外光谱等表征方法来探讨两种纳米粒形成机制，对比研究两种纳米粒的溶解度、稳定性和抗氧化活性。结果表明，SPI/FUD质量比4:1时LUT-SPI-FUD NPs的Zeta电位绝对值大于30 mV、多分散指数和粒径较小；其最佳处方及工艺为：LUT/SPI质量比1:7.587，SPI质量浓度为0.83 mg/mL，搅拌时间为1.493 h；表征分析研究验证了两种纳米粒粒径大小理想，分布较为集中，结合作用力为氢键、疏水和静电相互作用；溶解度、稳定性及抗氧化试验表明将LUT制备成LUT-SPI NPs、LUT-SPI-FUD NPs后，其在纯化水中的溶解度分别提高了350.74、432.42倍，两者均显著提高（P＜0.01）LUT的紫外光、高温、氧气条件下的稳定性和抗氧化能力，且LUT-SPI-FUD NPs优于LUT-SPI NPs。因此，SPI与FUD构建的复合食品级纳米载药体系是更加有效提高LUT的溶解度、增强其稳定性和抗氧化活性并极具前途的技术，为LUT提供了新的选择。

关键词：叶黄素纳米粒大豆分离蛋白褐藻糖胶工艺优化稳定性抗氧化

褐藻糖胶对U266细胞自噬、迁移及侵袭的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2017年第3期37卷 312-317页

作者：罗国平刘芬谷文陈力学吕敬龙肖青重庆医科大学附属第一医院血液科重庆404000 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科重庆404000 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆400016 重庆三峡中心医院血液科重庆404000

目的·探讨褐藻糖胶对多发性骨髓瘤U266细胞自噬、迁移及侵袭的影响。方法·褐藻糖胶处理细胞后,透射电子显微镜(TEM)观察细胞自噬小体,Transwell小室观察细胞迁移及侵袭能力,Western blotting测定LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、P62、MMP9、... 详细信息

目的·探讨褐藻糖胶对多发性骨髓瘤U266细胞自噬、迁移及侵袭的影响。方法·褐藻糖胶处理细胞后,透射电子显微镜(TEM)观察细胞自噬小体,Transwell小室观察细胞迁移及侵袭能力,Western blotting测定LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、P62、MMP9、CXCR4、p-AKT/T-AKT、p-m TOR/T-m TOR蛋白表达,ELISA法检测细胞培养液中MMP9含量。结果·(1)TEM观察发现,褐藻糖胶处理组自噬小体增加。(2)褐藻糖胶可降低U266细胞迁移及侵袭能力,并呈现出剂量依赖性,氯喹可阻断该抑制作用。(3)Western blotting结果显示,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及MMP9蛋白表达随褐藻糖胶浓度增加而增加,P62、CXCR4、p-AKT/T-AKT及p-m TOR/T-m TOR蛋白表达随褐藻糖胶浓度增加而降低。(4)ELISA结果显示,褐藻糖胶处理组细胞培养液中MMP9的含量下降。结论·褐藻糖胶可诱导多发性骨髓瘤U266细胞自噬,抑制该细胞的迁移、侵袭能力。

关键词：褐藻糖胶多发性骨髓瘤自噬迁移侵袭

褐藻糖胶对缺血再灌注损伤大鼠小肠近端肠道动力的影响及机制研究

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褐藻糖胶对缺血再灌注损伤大鼠小肠近端肠道动力的影响及机制研究

褐藻糖胶对大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及潜在机制

第七届海峡两岸暨港澳营养科学大会

作者：何宝国栾晓马莉青岛大学附属医院青岛大学大学医学院

目的:探究褐藻糖胶对大鼠小肠近端缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法:构建大鼠小肠近端I/R模型,通观察大鼠摄食量改变,观察大鼠在体/离体肠动力改变,观察大鼠小肠近端氧化应激相关因子、TrkB-MAPK-Erk1/2通路蛋白以及炎性因... 详细信息

目的:探究褐藻糖胶对大鼠小肠近端缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法:构建大鼠小肠近端I/R模型,通观察大鼠摄食量改变,观察大鼠在体/离体肠动力改变,观察大鼠小肠近端氧化应激相关因子、TrkB-MAPK-Erk1/2通路蛋白以及炎性因子表达改变。结果:I/R术后大鼠摄食量显著降低(P褐藻糖胶,可显著升高I/R大鼠摄食量(P褐藻糖胶处理后的I/R大鼠小肠近端对CCh的收缩反应显著增强(P褐藻糖胶可缓解I/R对大鼠小肠近端肠道动力造成的损伤,这可能与褐藻糖胶的抗炎抗氧化效应有关。

关键词：褐藻糖胶小肠近端缺血再灌注损伤肠动力氧化应激

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国病理生理杂志 2019年第7期35卷 1296-1301页

作者：刘雪环胡沙沙王程栾晓郭菲菲孙向荣徐珞青岛大学基础医学院生理与病理生理学系山东青岛266021 青岛大学附属医院病理科山东青岛266555

目的:探讨褐藻糖胶(fucoidan)对大鼠肠缺血再灌注(I/R)损伤的作用及潜在机制。方法:30只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组:假手术(sham)组,缺血再灌注(I/R)组和褐藻糖胶(Fucoidan+I/R)组。Fucoidan+I/R组大鼠在缺血再灌注前7 d开始每天腹... 详细信息

目的:探讨褐藻糖胶(fucoidan)对大鼠肠缺血再灌注(I/R)损伤的作用及潜在机制。方法:30只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组:假手术(sham)组,缺血再灌注(I/R)组和褐藻糖胶(Fucoidan+I/R)组。Fucoidan+I/R组大鼠在缺血再灌注前7 d开始每天腹腔内注射褐藻糖胶(160 mg/kg);sham组及I/R组大鼠每天腹腔内注射等量的生理盐水,连续7 d。Sham组大鼠仅进行剖腹及肠系膜上动脉分离,I/R组及Fucoidan+I/R组大鼠剖腹后均将肠系膜上动脉夹闭1 h,再灌注2 h,建立肠缺血再灌注模型。各组大鼠经腹主动脉采血,测定血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β的水平;采血后取回肠末端组织,常规HE染色,观察组织损伤情况,同时检测肠组织中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,此外,采用Western blot法检测肠组织中Bax、cleaved caspase-3和Bcl-2的蛋白水平。结果:与sham组和Fucoidan+I/R组比较,I/R组大鼠血清DAO、D-LA、TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著增高(P褐藻糖胶可减轻I/R引起的肠组织损伤,机制可能与抗氧化、抗炎和抗凋亡效应有关。

关键词：缺血再灌注损伤褐藻糖胶细胞凋亡炎症

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铜藻多糖制备工艺优化及漂白对其性质的影响

食品工业科技 2024年

作者：李婷王雷高昕许加超付晓婷中国海洋大学食品科学与工程学院海洋食品加工与安全控制全国重点实验室

针对铜藻应用传统高温消化工艺提取褐藻多糖时存在的产品得率低、颜色深的问题，本研究尝试在60℃这一较低的Na2CO3消化温度下，通过响应面法对工艺条件进行优化，以褐藻胶、褐藻糖胶的得率及白度指数(whiteness index，WI)的综合评分... 详细信息

针对铜藻应用传统高温消化工艺提取褐藻多糖时存在的产品得率低、颜色深的问题，本研究尝试在60℃这一较低的Na2CO3消化温度下，通过响应面法对工艺条件进行优化，以褐藻胶、褐藻糖胶的得率及白度指数(whiteness index，WI)的综合评分为评价指标，确定最佳工艺条件。然后，在所得最佳提取条件下改变NaClO添加量，探究其对褐藻胶及褐藻糖胶性质的影响。结果表明，多糖综合评分与消化浓度、时间及NaClO添加量显著相关(P＜0.01)，最佳提取工艺为：消化时间7.0 h、消化浓度3.7%(w/v)、NaClO(4%，w/v)添加量2.7 mL，得到褐藻糖胶得率9.90%、褐藻胶得率19.95%、褐藻糖胶WI 62.10%、褐藻胶WI 87.83%、综合评分为44.84。漂白工艺对多糖性质影响的研究结果表明，NaClO的添加使褐藻胶分子量、黏度、M/G值下降，且NaClO的适度添加能提高其凝胶强度；同时，添加NaClO使褐藻糖胶的纯度提升，硫酸基含量及抗氧化活性显著提高(P褐藻胶及褐藻糖胶两种多糖的制备工艺进行了系统的研究，为铜藻资源的产业化利用提供了理论指导和实践经验。

关键词：铜藻褐藻胶褐藻糖胶响应面优化漂白理化性质抗氧化活性