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虎纹蛙肠道微生物结构与功能分析

野生动物学报 2020年第1期41卷 171-181页

作者：刘文舒陈彦良郭小泽唐艳强肖海红李思明江西省农业科学院畜牧兽医研究所

利用高通量测序方法对虎纹蛙前肠、中肠和后肠微生物结构和功能进行分析。结果表明,虎纹蛙(Rana rugulosa)肠道核心菌群是厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)和放线菌门... 详细信息

利用高通量测序方法对虎纹蛙前肠、中肠和后肠微生物结构和功能进行分析。结果表明,虎纹蛙(Rana rugulosa)肠道核心菌群是厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)和放线菌门(Actinobacteria)。Romboutsia属、鲸杆菌属(Cetobacterium)、叶杆菌属(Phyllobacterium)是绝对优势菌属。肠道中存在弧菌(Vibro)、邻单胞菌(Plesiomonas)、气单胞菌(Aeromonas)、爱德华氏菌(Edwardsiella)不动杆菌属(Acinetobacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、鞘脂单胞菌属(Sphingomonas)、伊丽莎白菌(Elizabethkingia)等常见的条件致病菌和芽孢杆菌(Bacillus)、乳酸杆菌(Lactobacillus)和双歧杆菌(Bifidobacterium)等潜在益生菌。比较发现,前肠和中肠微生物丰度和多样性显著高于后肠,且在门和属水平菌群结构差异明显;前肠和中肠微生物功能相似,与能量代谢、维生素代谢、氨基酸代谢、脂代谢、外源物质降解和代谢关联微生物丰度较高,而后肠中与核酸代谢、碳水化合物代谢关联微生物丰度较高。前肠和中肠中与信号转导、神经系统、内分泌系统、转运和分解等关联微生物丰度较高,后肠中与信号分子互作、细胞过程与信号、增殖与修复、免疫系统、翻译、转录、酶家族、环境适应、膜转运等关联微生物丰度较高。本研究解析了虎纹蛙肠道菌群结构和功能,为虎纹蛙健康养殖提供理论基础。

关键词：虎纹蛙肠道微生物结构功能

套养虎纹蛙对稻田不同形态无机磷含量及水稻产量的影响

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中国土壤与肥料 2022年第1期 90-96页

作者：刘志达曹津桥费加良肖雯馨罗文莫亿伟绍兴文理学院生命科学学院浙江绍兴312000

为探明稻蛙种养对稻田土壤不同形态磷含量变化的影响,以正常施用化肥的稻田为对照,测定套养虎纹蛙后其对各个时期稻田不同形态无机磷、有效磷含量变化及水稻产量构成的影响。结果发现,在虎纹蛙养殖后10~90 d,试验田与对照田不同形态磷... 详细信息

为探明稻蛙种养对稻田土壤不同形态磷含量变化的影响,以正常施用化肥的稻田为对照,测定套养虎纹蛙后其对各个时期稻田不同形态无机磷、有效磷含量变化及水稻产量构成的影响。结果发现,在虎纹蛙养殖后10~90 d,试验田与对照田不同形态磷含量的变化趋势各有不同;其中Ca_(2)-P含量不断下降,Ca_(8)-P、Al-P、Fe-P含量则表现出先增加后下降的趋势,Ca_(10)-P和O-P含量则不断增加,有效磷的含量在试验田和对照田均出现先增加后下降的趋势。在相同种养时期内,试验田的不同形态无机磷、总无机磷和有效磷含量均显著低于对照田(P虎纹蛙,会导致稻田不同形态无机磷含量下降,有效磷供应不足,并造成水稻有效穗数、每穗粒数和总产量降低。因此,在稻蛙种养时应补充适量的磷肥才能防止供磷不足,从而提高水稻的产量。研究结果为稻蛙种养时土壤养分管理的改善提供新的理论依据。

关键词：稻田虎纹蛙磷肥无机磷形态水稻

虎纹蛙表型变异的温度和芳香化酶抑制剂影响及性腺转录组学分析

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虎纹蛙表型变异的温度和芳香化酶抑制剂影响及性腺转录组学分析

作者：唐韵南京师范大学

学位级别：硕士

当前受全球气候变暖和人类活动等的影响,自然环境发生改变,两栖动物的表型可塑性极易被环境影响,同时也受到基因型的调控。据此,本研究提出以下科学问题:在变化的环境下,两栖动物的表型特征是否会发生变异?会发生怎样的变异?对整个种群... 详细信息

当前受全球气候变暖和人类活动等的影响,自然环境发生改变,两栖动物的表型可塑性极易被环境影响,同时也受到基因型的调控。据此,本研究提出以下科学问题:在变化的环境下,两栖动物的表型特征是否会发生变异?会发生怎样的变异?对整个种群是否会产生影响?基因如何对其表型可塑性进行调控?为解决上述问题,本文选取了对两栖动物表型影响较大的环境因子（温度、类固醇激素）进行实验,进一步了解环境对两栖动物表型可塑性的影响,同时选取较为直观的性别表型进行转录组分析,探究分子水平上两栖动物表型可塑性发生的机制。虎纹蛙（Hoplobatrachus rugulosus）在我国的分布范围较广,具有重要的保护价值和经济价值。故本研究以虎纹蛙为实验对象开展了相关实验,得到如下结果:温度因子的实验中发现:（1）温度过低会影响虎纹蛙蝌蚪的变态率和存活率,并不利于虎纹蛙蝌蚪的生长发育,但低温下能产出更多个头较大的个体,且对于虎纹蛙来说,24℃已经属于低温环境。（2）温度越高,虎纹蛙蝌蚪发育成幼蛙的个体越小,变态时间越短,但29℃环境下发育的蝌蚪,生长和繁殖表现都更具有优势。（3）高温会影响虎纹蛙的性腺发育,导致虎纹蛙的性比偏雄,雌雄个体的体积存在二态性,雌性个体总是大于雄性个体。（4）虎纹蛙的发育温度在温和及偏高的时候对其后代影响并不显著,但是温度偏低会影响到虎纹蛙的繁殖,使其在繁殖期不能成功繁育后代。温度×芳香化酶抑制剂（来曲唑）的两因子实验中发现:（1）34℃能加速虎纹蛙蝌蚪的生长发育,缩短变态时间,而29℃下饲养的蝌蚪虽然生长缓慢,但变态后的幼蛙具有较大的个体;来曲唑浓度、温度与来曲唑的交互作用对这些变量则无影响。（2）变态后虎纹蛙幼蛙的跳跃距离与肥满度呈正相关,在控制肥满度时,跳跃距离不受温度、来曲唑浓度及其交互作用的影响。（3）对照组（0mg/g来曲唑）在29℃时性比为1:1,在34℃时雄性较多。在来曲唑处理组中,在29℃和34℃环境下雄性比例均有显著偏倚,且雄性比随来曲唑浓度的增加而增加。此外,在每个来曲唑浓度下,34℃也比29℃产生更多的雄性。虎纹蛙性腺转录组测序分析中发现:（1）不同性腺的基因表达存在显著差异。与卵巢相比,睾丸在发育过程中有更多的基因上调。（2）与雌性未成熟的卵巢相比,成熟卵巢有更多的基因参与表达;而在睾丸发育早期则有更多的基因上调。（3）类固醇激素在虎纹蛙性腺发育中具有重要的作用,根据GO和KEGG差异基因富集分析,本研究确定了类固醇在性腺发育过程中的主要调控途径,揭示了cyp17α、hsd3β、hsd11β1、cyp19α和hsd17β12通过调控类固醇激素参与了虎纹蛙性腺发育过程。（4）cyp3α、cyp17α、hsd3β、hsd11β1、sox2、sox9、sox30、soat、cyp19α、hsd17β12和hspα1s都和性腺的发育和分化有关。综上所述,虎纹蛙个体的生长发育受温度的影响较大,而其性别发育则会受到环境温度和类固醇激素的影响,说明当今全球变暖和环境污染的进一步加剧会对虎纹蛙的种群造成极大影响,甚至可能会造成物种灭绝。因此,加大对全球气候变暖的关注,以及防治环境污染的工作刻不容缓。此外在分子水平上,也证实了类固醇激素在性腺发育中的重要作用,根据本研究得出的结果,可深入对所得基因进行进一步研究,探索性别发育及性腺分化过程中更具体的分子机制,细化基因作用,为该领域的进一步研究奠定基础。

关键词：温度类固醇激素虎纹蛙蝌蚪生长发育运动性别分子通路

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虎纹蛙稻田综合种养技术

科学养鱼 2022年第9期44卷 44-46页

作者：林德忠武平县水产技术推广站福建武平364300

一、稻田选择田块选择适宜稻谷种植、保水性能良好、壤土或沙质土为宜,要求水源充足、无污染、环境和水质良好、远离居民区和交通要道、安静无噪音。二、田间工程1.田块依田块原有地形进行平整或按“利于管理、提高土地使用率”的原则,... 详细信息

一、稻田选择田块选择适宜稻谷种植、保水性能良好、壤土或沙质土为宜,要求水源充足、无污染、环境和水质良好、远离居民区和交通要道、安静无噪音。二、田间工程1.田块依田块原有地形进行平整或按“利于管理、提高土地使用率”的原则,把同一平面的田块合并平整。

关键词：田间工程田块选择稻田选择沙质土保水性能虎纹蛙居民区稻田综合种养

虎纹蛙(Hoplobatra chuschinensis)繁殖后期的生境特征及生境选择

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生态学杂志 2014年第11期33卷 3018-3025页

作者：李世森王宇邵晨潘太仲浙江师范大学生态研究所浙江金华321004 永嘉县碧莲中学浙江温州325116

了解动物的生境特征及其生境选择性,对于动物野生种群的保护具有重要意义。2013年9月,在浙江温州楠溪江流域对国家二级保护动物虎纹蛙的野外生境进行了研究,并利用生境喜好系数和主成分分析法对其生境选择性进行了分析。结果表明:虎纹... 详细信息

了解动物的生境特征及其生境选择性,对于动物野生种群的保护具有重要意义。2013年9月,在浙江温州楠溪江流域对国家二级保护动物虎纹蛙的野外生境进行了研究,并利用生境喜好系数和主成分分析法对其生境选择性进行了分析。结果表明:虎纹蛙偏好的生境特征为地形较平缓,坡度较小;地表基质类型为淤泥和细沙,相对湿度较大;植被类型为水稻和草丛,高度和盖度适中;离大型水体的距离较远,离小型水体的距离较近,其栖息水域为静水水域,流速较缓、深度较浅、水质较好、温度较高;离农田的距离较近,离道路的距离适中,离居民点的距离较远;影响虎纹蛙生境选择的主要因子为坡度、坡位、植被高度、植被盖度、地表基质类型、地表温度、离水体的距离、水体温度、水体p H、水体氧含量、离农田的距离和离道路的距离。

关键词：虎纹蛙生境特征生境选择生境喜好系数主成分分析法

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虎纹蛙夏季养殖管理注意事项

农村新技术 2023年第4期 34-35页

作者：钟祥伟广西钦州市浦北县张黄镇农业农村服务中心 535319

虎纹蛙也叫泰蛙,是常见的青蛙养殖品种,近年来被越来越多的养殖户接受。夏季光照充足,是虎纹蛙快速生长阶段,以下简述虎纹蛙夏季养殖管理需要注意的事项。一、注意消毒蝌蚪培育前必须用生石灰消毒清池。水深6~10厘米的养殖池,每667平方... 详细信息

虎纹蛙也叫泰蛙,是常见的青蛙养殖品种,近年来被越来越多的养殖户接受。夏季光照充足,是虎纹蛙快速生长阶段,以下简述虎纹蛙夏季养殖管理需要注意的事项。一、注意消毒蝌蚪培育前必须用生石灰消毒清池。水深6~10厘米的养殖池,每667平方米(1亩)用60~70千克生石灰消毒。7天后,排干旧水,注入新水,即可进行蝌蚪培育。

关键词：虎纹蛙养殖池快速生长

虎纹蛙MHCⅠ类、Ⅱ类基因的克隆与多态性分析

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虎纹蛙MHCⅠ类、Ⅱ类基因的克隆与多态性分析

作者：程岩岩浙江师范大学

学位级别：硕士

MHC (Major histocompatibility complex)即主要组织相容性复合体,是脊椎动物中直接介导免疫反应的一类细胞表面蛋白。MHC基因即是编码这类蛋白的基因家族,许多的研究已经表明MHC基因家族是脊椎动物体内变异最大的功能基因之一,具有较... 详细信息

MHC (Major histocompatibility complex)即主要组织相容性复合体,是脊椎动物中直接介导免疫反应的一类细胞表面蛋白。MHC基因即是编码这类蛋白的基因家族,许多的研究已经表明MHC基因家族是脊椎动物体内变异最大的功能基因之一,具有较高的其变异主要出现在抗原结合部位,因为该部位与动物抵抗病原体的能力以及对环境的适应性直接相关,所以很多研究集中分析这个变异最大的区域。对于MHC Ⅰ类、Ⅱ类基因来说,exon3与exon2分别编码其抗原结合部位,是变异最大的区域,了解该区域的变异特性能为进一步研究生态学中的适应性进化、性选择等问题提供便利。而目前两栖类MHC基因的结构特点和进化模式的研究非常有限,为了更加系统全面的了解两栖类MHC基因的多态性情况,本研究的目标是从虎纹蛙(Hoplobatrachus chinensis)中克隆MHC Ⅰ类exon3基因与Ⅱ类exon2基因,并分析其多态性的维持机制。本文首先通过设计通用引物成功的获得了MHC基因Ⅰ类exon3 126bp, MHC Ⅱ类exon2 132bp。我们通过常规PCR方法以及Genomic Walking的方法共获得虎纹蛙MHC Ⅰ类基因1020bp,Ⅱ类基因2020bp,其中包含了全部的外显子部分。通过设计虎纹蛙特异性引物分别扩增虎纹蛙MHC Ⅰ类exon3与Ⅱ类exon2。然后在碧莲、大若岩与下廖三个种群中检测虎纹蛙的MHC Ⅰ类、Ⅱ类基因的多态性。获得了如下的研究结果：1、在27个野生虎纹蛙个体中检测出Ⅰ类等位基因10条,而在一个个体中最多达到了7个,表明虎纹蛙MHC Ⅰ类基因最少具有4个基因座;II类等位基因检测到7条等位基因,在一个个体中最多达到3个等位基因,表明虎纹蛙MHC Ⅱ类基因最少有2个基因座。2、通过DNAsp软件计算出其I类基因的10条等位基因的核苷酸序列变异位点为27.3%;II类基因的7条等位基因的核苷酸序列变异位点为13%。3、通过MEGA6.0计算所得到等位基因的氨基酸距离以及核苷酸距离,结果得到MHCⅠ类与Ⅱ类的氨基酸距离均大于核苷酸距离,暗示其经历过正选择,4、利用MEGA与一些其他在线程序一共检测到Ⅰ类6个正选择位点,其中有3个位于假定的抗原结合区;Ⅱ类一共检测到5个正选择位点,其中有两个位于抗原结合区。所以,我们得出虎纹蛙的MHC基因受到的正选择作用可能与寄生虫调控的平衡选择有关。5、通过构建系统进化发育树以及GRAD在线检测,均未发现有重组现象以及跨物种多态性。本研究为以后虎纹蛙的后续研究提供了较好的理论基础和分子标记。1、可以作为一种与功能相关的分子标记来研究虎纹蛙的不同地理种群的地理变异,也可以将虎纹蛙和其它两栖类联系起来系统的阐释两栖类基因的进化模式。2、可以将该基因与虎纹蛙抵抗病原菌的能力联系起来,揭示虎纹蛙抗病的分子机制。3、可以用该基因与虎纹蛙的配偶选择联系起来,揭示虎纹蛙的配偶选择机制。

关键词： MHC基因多态性正选择虎纹蛙

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虎纹蛙养殖技术要点

农村新技术 2022年第4期 33-34页

作者：钟祥伟广西钦州市浦北县张黄镇农业农村服务中心 535300

虎纹蛙也叫泰蛙,我国广东省俗称田鸡,是常见的一个青蛙养殖品种,适合生长在热带和亚热带地区。根据新的《国家重点保护野生动物名录》,虎纹蛙被列为水生野生动物,并特别强调“仅限野外种群”,这意味着只要取得相关合法证件,就可以进行... 详细信息

虎纹蛙也叫泰蛙,我国广东省俗称田鸡,是常见的一个青蛙养殖品种,适合生长在热带和亚热带地区。根据新的《国家重点保护野生动物名录》,虎纹蛙被列为水生野生动物,并特别强调“仅限野外种群”,这意味着只要取得相关合法证件,就可以进行人工繁育、养殖和销售。虎纹蛙养殖每667平方米(1亩)产量可达1500千克,利润超过1万元,是效益较好的特种养殖品种。现将其养殖技术要点介绍如下。

关键词：水生野生动物特种养殖虎纹蛙人工繁育养殖品种

虎纹蛙皮肤分泌物抗氧化二肽——Gln/Lys-Met的纯化及鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2013年第5期29卷 463-468页

作者：洪晶刘华苏美铃汪少芸户佩福州大学生物科学与工程学院福建福州350108

目前已自青蛙皮肤分泌物中提取出多种属于"第三套抗氧化系统"的多肽,它们具有较强的抗氧化作用.本文从虎纹蛙皮肤分泌物中提取具有抗氧化活性的多肽物质,并检测其活性.利用电刺激虎纹蛙背部腺和耳后腺获得其皮肤分泌物,利用凝胶过滤色谱... 详细信息

目前已自青蛙皮肤分泌物中提取出多种属于"第三套抗氧化系统"的多肽,它们具有较强的抗氧化作用.本文从虎纹蛙皮肤分泌物中提取具有抗氧化活性的多肽物质,并检测其活性.利用电刺激虎纹蛙背部腺和耳后腺获得其皮肤分泌物,利用凝胶过滤色谱Sephadex G-50和反相高效液相色谱(reverse-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)进行分离纯化.以2,2-二苯基-1-苦肼基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH.)清除率为指标,测定多肽的抗氧化活性,经ESI-MS(electrospray ionization mass spectrometry)质谱测定该多肽的相对分子质量.结果显示,自虎纹蛙皮肤分泌物中获得一种具有抗氧化活性的二肽,其分子质量为0.277 kD,可能的氨基酸序列为Gln/Lys-Met.虎纹蛙皮肤分泌物中的该二肽是发挥抗氧化作用的重要组成部分.

关键词：虎纹蛙分离纯化二肽抗氧化