检索结果-南通市图书馆

作者：谷友刚北京化工大学

学位级别：硕士

十字花科植物中含有大量的植物化学成分，其中的硫代葡萄糖苷(简称硫苷)是植物生长过程中产生的含硫的次级代谢产物。经流行病学证明，硫苷的水解产物异硫氰酸酯是目前公认的具有防癌和抗癌活性的天然产物之一。人们发现异硫氰酸酯不仅... 详细信息

十字花科植物中含有大量的植物化学成分，其中的硫代葡萄糖苷(简称硫苷)是植物生长过程中产生的含硫的次级代谢产物。经流行病学证明，硫苷的水解产物异硫氰酸酯是目前公认的具有防癌和抗癌活性的天然产物之一。人们发现异硫氰酸酯不仅能够抑制多种癌细胞的形成，而且还可以提高机体组织中谷胱甘肽的水平，能够显著增强Ⅱ型解毒酶的活性。本文以芝麻菜种子为原料，研究并开发了芝麻菜苷(glucoerucin)和异硫氰酸酯(Erucin)的分离纯化条件;研究了双氧水氧化芝麻菜苷耦合黑芥子酶制备莱菔硫烷的工艺条件;利用DPPH自由基、OH自由基和还原力的方法，对比分析glucoerucin(GER)，glucoraphani(nGRA)，glucoraphenin(GRE)，erucin(ERN)，sulforaphane(SFN)，GRE-ITC的体外抗氧化活性。优化了利用大孔树脂和制备色谱分离纯化芝麻菜苷及Erucin的条件。通过静态树脂的筛选，确定了分离芝麻菜苷的树脂为大孔阴离子交换树脂D261。洗脱剂为100mM/L的KCl溶液。利用制备型色谱纯化芝麻菜苷时，流动相为2%甲醇溶液，采用等度洗脱模式，流速为8ml/min，进样量100mg。利用50mM/L pH=7的磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液水解芝麻菜种子2h，得到的水解液经离心过滤后利用大孔树脂SP850吸附，吸附流速为8ml/min，去离子水冲洗完杂质后，采用80%的乙醇溶液洗脱Erucin，洗脱流速为10ml/min。利用制备色谱进一步纯化Erucin，流动相为25%的甲醇溶液，检测波长为254nm，采用等度洗脱，流动相流速为8ml/min。研究了双氧水氧化芝麻菜苷耦合黑芥子酶制备莱菔硫烷的工艺条件。先将芝麻菜苷氧化成GRA，氧化剂为双氧水。氧化反应的条件为：室温下，等浓度的芝麻菜苷与双氧水反应体积比为1:7，避光下反应3h后，芝麻菜苷转化成GRA。从西兰花种子中提取黑芥子酶，利用黑芥子酶将GRA水解为莱菔硫烷。实验同时将氧化得到的GRA加入到西兰花种子水解液中，莱菔硫烷生成量明显增加。研究硫苷及异硫氰酸酯抗氧化活性时，清除DPPH自由基的能力与硫苷及异硫氰酸酯的浓度成正比。其清除率顺序由大到小为：GER> GRE>ERN> GRE-ITC> GRA>SFN。芝麻菜苷的清除DPPH自由基的效果最好，二级反应速率常数为9.04Ms，EC为2.5mM/L。硫苷及异硫氰酸酯能够清除OH自由基，清除效果与反应的时间成正比。以α-tocopherol为对照，实验对硫苷及异硫氰酸酯进行了还原力的测定，其还原力顺序由大到小为：α-tocopherol> GER> ERN> GRE> GRE-ITC> GRA> SFN。实验发现芝麻菜苷及水解产物Erucin具有更好的体外抗氧化活性。

关键词：硫代葡萄糖苷异硫氰酸酯芝麻菜苷 Erucin 莱菔硫烷制备色谱 DPPH自由基 OH自由基总还原力

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

高效液相色谱-串联质谱法检测新鲜芝麻菜中芝麻菜苷

引用

食品安全质量检测学报 2021年第21期12卷 8466-8471页

作者：余静冷桃花吴新宫衡葛宇华东理工大学生物工程学院上海200237 上海市质量监督检验技术研究院/国家食品检验检测中心(上海) 上海200233

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定新鲜芝麻菜中芝麻菜苷的检测新技术。方法芝麻菜样品采用80%(V:V)甲醇-水在70℃水浴下振荡提取20 min,离心取上清液于45℃氮气条件下吹干,超纯水超声复溶,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,经C_(18)色谱柱进行分离,采用电喷雾负离子多反应监测(multiple response monitoring,MRM)模式对新鲜蔬菜中芝麻菜苷进行检测,外标法定量。结果芝麻菜苷在10;00 ng/mL浓度范围内线性良好(r^(2)≥0.998),检出限为3.0μg/kg,定量限为10.0μg/kg,新鲜芝麻菜中加标回收率为92.1%;01.0%,相对标准偏差为3.86%。应用本研究建立的方法对不同生长周期芝麻菜中芝麻菜苷含量检测,其含量及变化趋势与文献报道基本一致。结论本方法操作简便、灵敏度和回收率高、重复性好,适用于新鲜芝麻菜中芝麻菜苷的检测。

关键词：芝麻菜苷芝麻菜高效液相色谱-串联质谱法

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

双酶共固定及选择性氧化芝麻菜苷

双酶共固定及选择性氧化芝麻菜苷

引用

作者：周筱北京化工大学

学位级别：硕士

十字花科植物拥有优良的防癌抗癌效果,这与其含量丰富的硫代葡萄糖苷有着密不可分的关系。莱菔硫烷是十字花科植物的一种次级代谢产物,它可由一种名叫glucoraphanin的硫代葡萄糖苷经黑芥子酶水解产生。莱菔硫烷是阶段Ⅱ酶的主要诱导物,... 详细信息

十字花科植物拥有优良的防癌抗癌效果,这与其含量丰富的硫代葡萄糖苷有着密不可分的关系。莱菔硫烷是十字花科植物的一种次级代谢产物,它可由一种名叫glucoraphanin的硫代葡萄糖苷经黑芥子酶水解产生。莱菔硫烷是阶段Ⅱ酶的主要诱导物,并且具有很高的抗癌活性。芝麻菜是十字花科植物的一种,起源于地中海地区现在广泛分布于世界各地。芝麻菜中芝麻菜苷的含量占其干重的3%,通过将芝麻菜苷的硫醚基团氧化成亚砜基团可以将芝麻菜苷转化为glucoraphanin。多种酶和细胞均已被用于硫醚的选择性氧化,其中辣根过氧化物酶一种血红素过氧化物酶表现出了良好的硫醚选择性氧化功能。而通过葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖在体系中原位生成双氧水可以使双氧水在体系中均一缓慢的产生,而产生的双氧水又很快的被辣根过氧化物酶所利用可以提高辣根过氧化物酶的活性。近年来,多酶系统已通过许多方法被开发。多酶共固定化技术的主要优点是不同酶的活性位点在纳米材料彼此接近,从而将连续反应中中间体的扩散限制在一个很小的范围内以提高反应的整体效率和特异性。在本文中,我们首先利用双酶体系催化氧化芝麻菜苷制备具有手性亚砜基团的glucoraphanin。之后将双酶用四乙氧基硅烷包埋。并应用于芝麻菜苷的氧化。(1)对芝麻菜苷进行了纯化,纯度在95%以上,优化了双酶共催化氧化芝麻菜苷的条件：温度28℃,pH=7.0,葡萄糖浓度36 mM,葡萄糖氧化酶与辣根过氧化物酶浓度都为0.2 mg·mL-1,反应240min。并最终得到了光学纯的亚砜基团。(2)利用TEOS对双酶进行了包埋,最佳的包埋反应条件：链接好的酶5mg,0.4mL去离子水,7.5mL环己烷,并加入[riton-X-100 1.75mL,正己醇1.8mL, TEOS 250μL,25%氨水60gL,搅拌24h(其包埋率可以达到91.6%)。其催化反应速率为游离酶的2.12倍。(3)对双酶包埋物的温度和pH稳定性进行了研究,证明其温度和pH稳定性明显好于游离酶。接着考察了双酶包埋物的周转数,在经过9次反应后,转化量为第一次的73%。

关键词：芝麻菜苷莱菔硫烷葡萄糖氧化酶辣根过氧化物酶选择性氧化固定化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：