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肺炎克雷伯氏杆菌对动物的致病性试验

中国兽医科学 1994年第12期 25-26页

作者：黄昭斌广西防城港市防城区畜牧兽医站

肺炎克雷伯氏杆菌对动物的致病性试验黄昭斌（广西防城港市防城区畜牧兽医站５３８０２１）自１９８１年以来，在我市猪群中发生一种以高热、鼻流请液、呼吸困难、脓性眼结膜炎以及皮肤充血、出血为主要特征的疫病。我们从猪群中分离出... 详细信息

肺炎克雷伯氏杆菌对动物的致病性试验黄昭斌（广西防城港市防城区畜牧兽医站５３８０２１）自１９８１年以来，在我市猪群中发生一种以高热、鼻流请液、呼吸困难、脓性眼结膜炎以及皮肤充血、出血为主要特征的疫病。我们从猪群中分离出３株菌株，通过实验室诊断，鉴定为肺...

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌动物致病性猪群肺充血肺疾病实验室诊断小白鼠弓形体皮肤充血呼吸困难剖检

肺炎克雷伯氏杆菌与大肠杆菌代谢调控及转录传感元件的研究

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肺炎克雷伯氏杆菌与大肠杆菌代谢调控及转录传感元件的研究

作者：陈柳霓北京化工大学

学位级别：硕士

3-羟基丙酸(3-HP)为非手性有机酸,化学性质活跃,可转化为一系列重要化合物,且具有化学变通性。目前,商业化生产3-HP多为化学合成法,成本高、转化率低、分离纯化难度大,使得其生产方法亟待完善。微生物法产3-HP具有成本低和污染少等优势... 详细信息

3-羟基丙酸(3-HP)为非手性有机酸,化学性质活跃,可转化为一系列重要化合物,且具有化学变通性。目前,商业化生产3-HP多为化学合成法,成本高、转化率低、分离纯化难度大,使得其生产方法亟待完善。微生物法产3-HP具有成本低和污染少等优势。随着合成生物学的发展,微生物生产3-HP引起人们关注。然而,微生物产3-HP的模式化生产仍然存在挑战。3-HP的研究需从多方面提高其产量和底物转化率,比如代谢调控、转录调控等。为此,本实验对肺炎克雷伯氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)与大肠杆菌(Escherichia coli)的代谢调控及转录传感元件进行了研究。本实验设计与工作包括以下三方向内容：1.K. pneumoniae中转录传感元件与pk启动子相互作用的研究。考察了RNA聚合酶的σ因子与甘油脱水酶pk启动子的亲和性,旨在增强3-HP合成基因的转录表达,提高3-HP的产量。实验筛选了3个sigma因子rpoE、rpoS、dksA并对其进行超表达。引入卡那霉素抗性基因的启动子Pkana以排除甘油脱水酶自身的pk启动子对此3个因子超表达的干扰,采用绿色荧光蛋白基因(gfp)以验证表达量的强弱。结果发现,rpoE的表达增强了pk启动子的效率。于是将醛脱氢酶的基因ald4替换gfp,得到重组菌K. pneumoniae(pET-pk-ald4-pkana-rpoE)。酶活和SDS-PAGE分析发现,ald4的酶活所提高,SDS-PAGE中显示ald4的表达条带。摇瓶发酵结果显示,重组工程菌K. pneumoniae(pET-pk-ald4-pkana-rpoE)的3-HP产量是对照组K. pneumoniae(pET-pk-ald4)的1.6倍。上罐发酵结果表明,重组菌K. pneumoniae(pET-pk-ald4-pkana-rpoE)的3-HP和1,3-丙二醇(1,3-PD)的转化率分别为0.105 mol/mol和0.34 mol/mol,总转化率为0.445 mol/mol。3-HP和1,3-PD的产量得以显著提高。因此,rpoE和pk启动子的适配性更高,提高了pk启动子的转录效率,促进了后续基因的转录翻译。2. E. coli和K. pneumoniae的共培养研究。构建出携带不同抗性的***与E. coli,以辨别并探究两菌的混菌体系。因此,克隆了***中的cm基因,构建了重组工程菌E. coli(pET-cm)和K. pneumoniae(pET-28a)。E. coli(pET-cm)携带氯霉素和卡那霉素双重抗性,而K. pneumoniae(pET-28a)只携带卡那霉素抗性。考察了K. pneumoniae与E. coli单独培养和共培养的相对菌落数及存活率,结果显示,共培养中E. coli受到的生长抑制比K. pneumoniae更大,K. pneumoniae为共培养中的优势菌种。3.针对K. pneumoniae中3-HP代谢分向的研究。弱化K. pneumoniae中产3-HP的副产物途径,降低或消除其中一些副产物对3-HP的影响。本实验设计以提高3-HP的产量为前提,探究3-HP代谢流之间的相互关系。实验涉及K. pneumoniae甘油途径中的八个相关酶基因：pmd(KPN 01632)、poxB(KPN 00904)、frdB(KPN 04552)、fumC(KPN 01517)、 dhaT(KPN 03491)、ilvH(KPN 00083)、adhP(KPN 01853)和pflB(KPN 00931)。分别敲除了以上8个酶基因,弱化了八条代谢分支途径,构建了八株单基因敲除工程菌。对8株单基因敲除工程菌途径代谢物进行检测,分析单基因敲除工程菌中代谢流的变化,筛选出高产3-HP的工程菌。此外,对筛选出的最合适的两种酶基因进行组合敲除,测定组合敲除菌途径中代谢物的变化。在组合敲除菌中导入高产3-HP重组质粒tac-puuC,分析代谢物产量。由8株单基因敲除工程菌的摇瓶发酵结果可知,*** (△adhP)、K. pneumoniae(△pflB)的3-HP和1,3-PD相对产量较高,更适合做多基因敲除的表达宿主。由组合敲除菌的摇瓶和上罐发酵结果可知,K. pneumoniae △adhP△pflB (tac-puuC)在60 h时3-HP的产量达到了66.91 g/L,1,3-丙二醇的产量达到了3.85 g/L。此外,该重组菌K. pneumoniae △adhP△pflB (tac-puuC)的乳酸产量最高只为19.40 g/L,副产物的产量降低至对照组的1/3。该菌是生产3-HP的理想菌株。

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌大肠杆菌代谢调控 sigma因子 3-羟基丙酸

大熊猫感染性泌尿生殖道血尿症病原—肺炎克雷伯氏杆菌

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四川动物 2006年第1期25卷 83-85,F0004页

作者：王成东兰景超罗娌杨智张再蓉成都大熊猫繁育研究基地成都610081 四川大学基础与法医学院微生物室

对一只长期在秋冬季节交替或炎热夏季发生血尿症大熊猫的尿液进行细菌的分离、培养,并对分离株进行了小白鼠毒性试验和药敏试验。通过对分离菌株的染色镜检和生化试验,最后确定为肺炎克雷伯氏杆菌。作者对肺炎克雷伯氏杆菌引发大熊猫的... 详细信息

对一只长期在秋冬季节交替或炎热夏季发生血尿症大熊猫的尿液进行细菌的分离、培养,并对分离株进行了小白鼠毒性试验和药敏试验。通过对分离菌株的染色镜检和生化试验,最后确定为肺炎克雷伯氏杆菌。作者对肺炎克雷伯氏杆菌引发大熊猫的疾病类型进行了探讨,指出肺炎克雷伯氏杆菌除可引发大熊猫肠炎和败血症外,还可导致大熊猫发生以排血样尿液为主要临床表现的泌尿生殖道感染。

关键词：大熊猫肺炎克雷伯氏杆菌血尿

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基于非理性设计的肺炎克雷伯氏杆菌甘油脱水酶的分子定向进化

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基因组学与应用生物学 2014年第1期33卷 42-50页

作者：陈云来韦旭钦杜丽琴韦宇拓黄日波广西大学生命科学与技术学院广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁530004 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心南宁530003

1,3-丙二醇是一种具有广泛应用前景和巨大市场潜力的平台化合物。在生物体转化甘油合成1,3-丙二醇的代谢途径中,甘油脱水酶是代谢途径的限速酶,然而自然界中的甘油脱水酶却存在着诸多的不足。本研究采用易错PCR技术对来源于肺炎克雷伯... 详细信息

1,3-丙二醇是一种具有广泛应用前景和巨大市场潜力的平台化合物。在生物体转化甘油合成1,3-丙二醇的代谢途径中,甘油脱水酶是代谢途径的限速酶,然而自然界中的甘油脱水酶却存在着诸多的不足。本研究采用易错PCR技术对来源于肺炎克雷伯氏杆菌的甘油脱水酶进行非理性设计的分子定向进化,通过高通量筛选方法筛选获得了一个酶学性质得到了改善的突变酶γ-F97G。当以甘油作为酶催化的底物时,突变酶的酶比活力为(583.8±49.4)U/mg,相比较野生型的酶比活力提高了约94%;当以1,2-丙二醇作为酶催化底物时,突变酶的酶比活力为(147.9±5.5)U/mg,相比较野生型的酶比活力提高了约72%。经分析酶蛋白的三维结构后发现酶蛋白发生突变的位点属于远距离突变位点,实验结果表明远距离突变有时同样是一条优化和改善酶的酶学性质的好途径。

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌 1,3-丙二醇甘油脱水酶分子定向进化

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肺炎克雷伯氏杆菌致病因子的测定

中国兽医科学 1984年第5期 27-29页

作者：陈传强,阿马杜孔代,谢芝勋,罗廷荣广西农学院广西农学院广西农学院广西农学院兽医79级留学生

A、B型肺炎克雷伯氏杆菌对人和家畜以及多种实验动物都具有致病性。但该菌的致病因子是什么?有关书刊中都非常缺乏这方面的材料,只是在上海二医院编著的《医用微生物》(人民出版社出版)一书中有“荚膜是很重要的致病因素”的论述,另在... 详细信息

A、B型肺炎克雷伯氏杆菌对人和家畜以及多种实验动物都具有致病性。但该菌的致病因子是什么?有关书刊中都非常缺乏这方面的材料,只是在上海二医院编著的《医用微生物》(人民出版社出版)一书中有“荚膜是很重要的致病因素”的论述,另在余编著的《细菌学》(人民出版社,1955)一书中也曾写道:“肺炎克雷伯氏杆菌对人体的致病力不

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌培养物动物上清液菌体致病因子小白鼠致病力

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肺炎克雷伯氏杆菌在水果罐头中的危害

食品与发酵工业 1979年第4期 42-44页

根据国家卫生标准规定,罐头食品的微生物指标是不得检出致病菌和微生物引起的腐败现象。致病菌主要是包括肠道致病菌中的沙门氏菌和痢疾志贺氏菌,致病学性链球菌,金黄色葡萄球菌和肉毒梭状芽孢杆菌。对肺炎克雷伯氏杆菌在罐头中所引起... 详细信息

根据国家卫生标准规定,罐头食品的微生物指标是不得检出致病菌和微生物引起的腐败现象。致病菌主要是包括肠道致病菌中的沙门氏菌和痢疾志贺氏菌,致病学性链球菌,金黄色葡萄球菌和肉毒梭状芽孢杆菌。对肺炎克雷伯氏杆菌在罐头中所引起的危害至今未见报道,一九七八年七月份在济南肉类联合加工厂发生大批瓶装糖水桃罐头败坏,经

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌水果罐头果蔬罐头产气杆菌

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肺炎克雷伯氏杆菌致病性试验

中国兽医科学 1983年第8期 38-40页

作者：陈传强广西农学院畜牧兽医系

肺炎克雷伯氏杆菌(Klebsiella Pneumoniae)又称荚膜粘液杆菌、肺炎杆菌、佛里兰德(Friedlander)杆菌。该菌存于人类呼吸道,为引起肺炎的病原体。在家畜方面,有人曾自肺炎和败血症的患马、患猪的肺组织及内脏器官中分离到该菌。作者也从... 详细信息

肺炎克雷伯氏杆菌(Klebsiella Pneumoniae)又称荚膜粘液杆菌、肺炎杆菌、佛里兰德(Friedlander)杆菌。该菌存于人类呼吸道,为引起肺炎的病原体。在家畜方面,有人曾自肺炎和败血症的患马、患猪的肺组织及内脏器官中分离到该菌。作者也从6个病猪场患“猪抽气病”的病猪体内和广东、广西、湖南等省、区流行的“牛喘气病”的病牛体内分离到该菌。通过人工复制、疫区病愈牛血清中免疫抗体的测定、流行病学调查、防治经验和药敏试验等都已证实A、B型肺炎克雷伯氏杆菌确实是牛喘气病的主要病原,也很可能就是原发性病原。为了进一步证实此问题,特进行了本试验。

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌喘气病病原菌致病性小白鼠三门江林场

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肺炎克雷伯氏杆菌肠炎合并肠套叠1例报告

哈尔滨医药 1988年第2期 45-47页

作者：程应钿于春彦王秀华张兰哈尔滨市红十字儿童医院哈尔滨市卫生防疫站

肺炎克雷伯氏杆菌为一种革兰氏阴性杆菌,此菌正常存在于人的肠道,当机体免疫力降低或长期大量使用抗生导致素菌群失调时可以引起严重腹泻。此病国内报导不多。本文报告的1例系1987年3月在我院住院的病例,报告如下。

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌抗生素肠炎肠疾病肠套叠菌群失调

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肺炎克雷伯氏杆菌的药敏试验

中国兽医科学 1984年第7期 25-27页

作者：陈传强广西农学院

作者曾报道肺炎克雷伯氏杆菌对人和家畜以及多种实验动物都具有致病性(详见本刊1984年第5期-编者)发病家畜死亡率很高,目前还缺乏特效疗法。为了寻求一些对该菌感染症具有更高疗效的药物以供临床上使用,我们进行了20株肺炎杆菌对20种中... 详细信息

作者曾报道肺炎克雷伯氏杆菌对人和家畜以及多种实验动物都具有致病性(详见本刊1984年第5期-编者)发病家畜死亡率很高,目前还缺乏特效疗法。为了寻求一些对该菌感染症具有更高疗效的药物以供临床上使用,我们进行了20株肺炎杆菌对20种中西药物的敏感性测定,然后以小白鼠和山羊为模型进行了药物的治疗试验,现将试验结果报告如下:

关键词：肺炎克雷伯氏杆菌山羊药敏试验庆大霉素艮他霉素青霉素抗菌素卡那霉素抗结核抗菌素试管法链霉素小白鼠