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中国组织工程研究 2023年第5期27卷 714-719页

作者：张晴高春兰于飞飞张正皓马芳高源李桂忠姜怡邓马胜超宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 银川第一人民眼科医院宁夏回族自治区银川市750004

背景:同型半胱氨酸水平增加会导致胰岛β细胞发生凋亡,但其具体机制尚不明确。目的:探讨胰岛β细胞中肝配蛋白a型受体2及其启动子区DNA高甲基化的具体机制。方法:体外培养小鼠胰岛β细胞株Min6,将其分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)和... 详细信息

背景:同型半胱氨酸水平增加会导致胰岛β细胞发生凋亡,但其具体机制尚不明确。目的:探讨胰岛β细胞中肝配蛋白a型受体2及其启动子区DNA高甲基化的具体机制。方法:体外培养小鼠胰岛β细胞株Min6,将其分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)和同型半胱氨酸组(120μmol/L同型半胱氨酸)。干预细胞48 h后,采用免疫荧光和Western blot法检测2组细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3表达情况;Western blot法检测DNA甲基化相关蛋白DNMT1、DNMT3a的表达水平;实时荧光定量PCR检测两组细胞中肝配蛋白a型受体2 mRNA水平;Western blot检测肝配蛋白a型受体2的蛋白表达情况;巢式甲基化特异性PCR检测EphA2启动子区DNA甲基化水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组胰岛β细胞中凋亡相关蛋白Bax和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3表达明显升高,Bcl-2表达明显下降;肝配蛋白a型受体2的mRNA和蛋白表达水平明显下降(P型半胱氨酸组肝配蛋白a型受体2 DNA甲基化水平明显升高(P型半胱氨酸组胰岛β细胞中DNMT1蛋白表达明显增高(P肝配蛋白a型受体2 DNA高甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞凋亡中的作用明显,而DNMT1可能参与其高甲基化过程。

关键词：胰岛β细胞同型半胱氨酸细胞凋亡肝配蛋白a型受体2 DNA甲基化

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浸润性乳腺癌中EphA2基因启动子区DNA低甲基化及与细胞焦亡的相关性

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肿瘤 2023年第12期43卷 960-970页

作者：揭育祯朱颖郭凤英纳莉姜怡邓吴立刚马胜超宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学中医学院针灸推拿学系宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学基础医学院病理学系宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学总医院肿瘤外科宁夏回族自治区银川750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004

目的:探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白a型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性。方法:应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况... 详细信息

目的:探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白a型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性。方法:应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况;采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检验细胞焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 1和炎性细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平;应用巢氏甲基化特异性PCR(nested methylation-specific PCR,nMS-PCR)检验EphA 2基因启动子区DNA甲基化水平;采用蛋白质印迹法测验DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,DNMT3a)蛋白表达水平;应用Pearson相关系数分别对患者癌组织中EphA2的蛋白表达和甲基化水平与NLRP3、Caspase 1、IL-1β、DNMT1和DNMT3a进行相关性分析。结果:与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中EphA2蛋白表达水平明显升高(P均蛋白表达水平明显降低(P均2基因启动子区DNA甲基化水平明显降低(P均蛋白表达明显降低(P蛋白表达的差异未有统计学意义;Pearson相关性分析结果显示,EphA2蛋白与NLRP3蛋白(r=-0.6512,P蛋白(r=-0.5712,P蛋白(r=-0.6546,P蛋白(r=-0.5374,P2基因的甲基化水平与NLRP3蛋白(r=0.6341,P=0.0268)、Caspase 1蛋白(r=0.6728,P=0.0165)、IL-1β蛋白(r=0.6940,P=0.0123)和DNMT3a蛋白(r=0.6871,P=0.0136)的表达水平呈正相关性。结论:乳腺癌组织中EphA2蛋白的表达水平上调并与细胞焦亡呈负相关性;DNMT3a可能参与了EphA 2基因启动子区发生DNA低甲基化的过程。

关键词：乳腺癌细胞焦亡肝配蛋白a型受体2 DNA甲基化

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