浸润性乳腺癌中EphA2基因启动子区DNA低甲基化及与细胞焦亡的相关性

作     者：揭育祯 朱颖 郭凤英 纳莉 姜怡邓 吴立刚 马胜超 JIE Yuzhen;ZHU Ying;GUO Fengying;NA Li;JIANG Yideng;WU Ligang;MA Shengchao

作者机构：宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学中医学院针灸推拿学系宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学基础医学院病理学系宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学总医院肿瘤外科宁夏回族自治区银川750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 

出 版 物：《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期：2023年第43卷第12期

页      面：960-970页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学项目(81760139,81900273,82270492) 宁夏回族自治区重点研发计划一般项目(2018BEG03011) 宁夏自然科学基金优秀青年项目(2023AAC005035) 第三批宁夏青年科技人才托举工程项目(TJGC2018010) 2019年自治区重点研发计划(对外科技合作专项)“西部之光”项目 大学生创新项目(XAB2018AW07) 

主　　题：乳腺癌 细胞焦亡 肝配蛋白A型受体2 DNA甲基化 

摘      要：目的:探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白A型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性。方法:应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况;采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检验细胞焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 1和炎性细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平;应用巢氏甲基化特异性PCR(nested methylation-specific PCR,nMS-PCR)检验EphA 2基因启动子区DNA甲基化水平;采用蛋白质印迹法测验DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,DNMT3a)蛋白表达水平;应用Pearson相关系数分别对患者癌组织中EphA2的蛋白表达和甲基化水平与NLRP3、Caspase 1、IL-1β、DNMT1和DNMT3a进行相关性分析。结果:与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中EphA2蛋白表达水平明显升高(P均0.01),NLRP3、Caspase 1和IL-1β的蛋白表达水平明显降低(P均0.05);同时与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组织中EphA2基因启动子区DNA甲基化水平明显降低(P均0.05),DNMT3a蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05),而DNMT1蛋白表达的差异未有统计学意义;Pearson相关性分析结果显示,EphA2蛋白与NLRP3蛋白(r=-0.6512,P0.05)、Caspase 1蛋白(r=-0.5712,P0.05)、IL-1蛋白(r=-0.6546,P0.05)和DNMT3a蛋白(r=-0.5374,P0.05)的表达水平均呈负相关性;而EphA 2基因的甲基化水平与NLRP3蛋白(r=0.6341,P=0.0268)、Caspase 1蛋白(r=0.6728,P=0.0165)、IL-1β蛋白(r=0.6940,P=0.0123)和DNMT3a蛋白(r=0.6871,P=0.0136)的表达水平呈正相关性。结论:乳腺癌组织中EphA2蛋白的表达水平上调并与细胞焦亡呈负相关性;DNMT3a可能参与了EphA 2基因启动子区发生DNA低甲基化的过程。