同型半胱氨酸致胰岛β细胞凋亡中肝配蛋白A型受体2 DNA甲基化升高

作     者：张晴 高春兰 于飞飞 张正皓 马芳 高源 李桂忠 姜怡邓 马胜超 Zhang Qing;Gao Chunlan;Yu Feifei;Zhang Zhenghao;Ma Fang;Gao Yuan;Li Guizhong;Jiang Yideng;Ma Shengchao

作者机构：宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 银川第一人民眼科医院宁夏回族自治区银川市750004 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2023年第27卷第5期

页      面：714-719页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100215[医学-康复医学与理疗学] 0836[工学-生物工程] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81760139),项目负责人:马胜超 宁夏回族自治区重点研发计划一般项目(2018BEG03011),项目负责人:马胜超 第三批宁夏青年科技人才托举工程项目(TJGC2018010),项目负责人:马胜超 2019年宁夏回族自治区重点研发计划(对外科技合作专项)“西部之光”项目,项目负责人:马胜超 宁夏医科大学校级项目(XM2020002),项目负责人:于飞飞 

主　　题：胰岛β细胞 同型半胱氨酸 细胞凋亡 肝配蛋白A型受体2 DNA甲基化 

摘      要：背景:同型半胱氨酸水平增加会导致胰岛β细胞发生凋亡,但其具体机制尚不明确。目的:探讨胰岛β细胞中肝配蛋白A型受体2及其启动子区DNA高甲基化的具体机制。方法:体外培养小鼠胰岛β细胞株Min6,将其分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)和同型半胱氨酸组(120μmol/L同型半胱氨酸)。干预细胞48 h后,采用免疫荧光和Western blot法检测2组细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3表达情况;Western blot法检测DNA甲基化相关蛋白DNMT1、DNMT3a的表达水平;实时荧光定量PCR检测两组细胞中肝配蛋白A型受体2 mRNA水平;Western blot检测肝配蛋白A型受体2的蛋白表达情况;巢式甲基化特异性PCR检测EphA2启动子区DNA甲基化水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组胰岛β细胞中凋亡相关蛋白Bax和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3表达明显升高,Bcl-2表达明显下降;肝配蛋白A型受体2的mRNA和蛋白表达水平明显下降(P0.05);②与对照组相比,同型半胱氨酸组肝配蛋白A型受体2 DNA甲基化水平明显升高(P0.05),同型半胱氨酸组胰岛β细胞中DNMT1蛋白表达明显增高(P0.05);③提示肝配蛋白A型受体2 DNA高甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞凋亡中的作用明显,而DNMT1可能参与其高甲基化过程。