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CK18和CK13在含有纤毛柱状细胞的根端囊肿衬里上皮中的表达

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口腔颌面外科杂志 2009年第2期19卷 94-96页

作者：贾海鸥刘思思刘三霞鲁大鹏张敏尾崎登喜雄首都医科大学口腔医学院口腔细胞生物学实验室北京100050 日本高知大学医学部口腔颌面外科

目的:探讨细胞角蛋白CK13和CK18在含有纤毛柱状细胞的根端囊肿衬里上皮中的表达意义。方法:利用单克隆CK18和CK13抗体,采用免疫组化SP法检测32例含有纤毛柱状细胞的根端囊肿衬里上皮中CK13和CK18的表达情况。结果:CK18在此32例含纤毛柱... 详细信息

目的:探讨细胞角蛋白CK13和CK18在含有纤毛柱状细胞的根端囊肿衬里上皮中的表达意义。方法:利用单克隆CK18和CK13抗体,采用免疫组化SP法检测32例含有纤毛柱状细胞的根端囊肿衬里上皮中CK13和CK18的表达情况。结果:CK18在此32例含纤毛柱状上皮细胞的根端囊肿衬里中呈现3种表达形式:①伴随纤毛柱状上皮细胞呈连续带状表达在根端囊肿衬里上皮的表层;②呈片段状表达在根端囊肿衬里上皮中;③呈零星散在状表达于衬里上皮细胞中。CK13表达在根端囊肿衬里上皮的鳞状细胞中。一部分基底细胞层细胞和上皮片断既不表达CK18,也不表达CK13。结论:根端囊肿衬里上皮中除含有鳞状细胞外还含有以多种形式分布存在的纤毛柱状细胞及可能处于化生过渡阶段的细胞或上皮发生细胞。根端囊肿衬里上皮中存在着多种细胞类型为根端囊肿的发生机制及组织来源的进一步研究探讨提供了一定的依据。

关键词：细胞角蛋白13 细胞角蛋白18 根端囊肿化生

三种炎性因子在慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病患者血清中的表达及作用

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中华传染病杂志 2017年第10期35卷 600-604页

作者：梁静韩涛景丽高英堂马喆天津市第三中心医院消化肝病科 300170 天津市第三中心医院分子生物室 300170 天津市第三中心医院病理科 300170

目的探讨细胞角蛋白（CK18）片段M30和M65、胸腺素β4（Tβ4）及TNF-α在CHB合并脂肪肝患者的脂肪变及炎症、纤维化发展过程中的作用。方法选择CHB合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者46例，单纯CHB患者42例。采用ELISA法检测两组患者... 详细信息

目的探讨细胞角蛋白（CK18）片段M30和M65、胸腺素β4（Tβ4）及TNF-α在CHB合并脂肪肝患者的脂肪变及炎症、纤维化发展过程中的作用。方法选择CHB合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者46例，单纯CHB患者42例。采用ELISA法检测两组患者血清CK-18 M30、CK-18 M65、Tβ4及TNF-α水平。同时分析CHB合并NAFLD患者血清炎性因子与生物化学指标和病理指标的相关性。统计学处理采用t检验和χ2检验，相关性分析采用Pearson和Logistic回归分析。结果CHB合并NAFLD患者血清CK-18 M30的水平为（614.48±471.43） U/L，明显高于单纯CHB患者的（374.50±231.04） U/L，差异有统计学意义（t＝2.988，P〈0.01）。CHB合并NAFLD患者血清CK18 M65、Tβ4和TNF-α水平分别为（369.41±262.21） U/L、（0.80±0.32） mg/L和（54.87±20.36） ng/L，单纯CHB患者分别为（296.50±231.44） U/L、（0.68±0.30） mg/L和（51.88±20.60） ng/L，差异均无统计学意义（t值分别为1.378、1.810、0.685，均P〉0.05）。CHB合并NAFLD患者血清CK-18 M30水平与ALT、三酰甘油、空腹血糖、肝组织炎症活动度分级（G）、纤维化分期（S）及脂肪变分级（F）呈正相关（r值分别为0.507、0.456、0.384、0.551、0.458、0.457，均P〈0.01），Tβ4水平与肝组织炎症活动度和纤维化分期呈负相关（r值分别为－0.371、－0.308，均P〈0.05），TNF-α水平与肝组织炎症活动度及脂肪变分级呈正相关（r值分别为0.570、0.441，均P〈0.01）。Logistic回归提示，CK-18 M30、Tβ4和TNF-α分别是CHB合并NAFLD、显著炎症纤维化及中重度脂肪变的独立预测因子。结论CK-18 M30、Tβ4和TNF-α与CHB合并NAFLD患者肝组织脂肪变的发生、炎症纤维化进展相关。

关键词：肝炎乙型慢性非酒精性脂肪性肝病细胞角蛋白18 胸腺素β4 肿瘤坏死因子a

胃癌组织中胃癌相关成纤维细胞、胃正常成纤维细胞的分离鉴定及增殖情况观察

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山东医药 2018年第31期58卷 5-8页

作者：封兰兰孙伟朱吉海刘珺赵珺刘燕青海大学医学院西宁810016

目的从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能。方法3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织。采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜组织... 详细信息

目的从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能。方法3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织。采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜组织中的胃NFs。原代培养胃CAFs、胃NFs,差速贴壁传代法分离并纯化细胞,差速贴壁20 min。倒置显微镜下观察胃CAFs、胃NFs细胞形态,采用免疫细胞化学染色法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK18)、波形蛋白(Vimentin)。取3个来源分离的胃CAFs、胃NFs,分别于细胞贴壁24 h、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d采用MTT法测算细胞光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线。结果胃癌CAFs细胞大小不一,呈梭形或星形,排列不规则并呈重叠生长;胃NFs细胞均匀一致,呈长梭形,排列规则。胃CAFs细胞存在α-SMA、Vimentin阳性表达,CK18阴性表达,胃NFs细胞存在Vimentin阳性表达,α-SMA、CK18阴性表达。培养3~6天,各来源胃CAFs细胞OD值均高于胃NFs(P均<0.05)。结论成功分离胃CAFs、胃NFs。胃CAFs、胃NFs均存在Vimentin表达。胃CAFs增殖能力优于胃NFs。

关键词：胃癌癌相关成纤维细胞正常成纤维细胞细胞角蛋白18 波形蛋白 α-平滑肌肌动蛋白细胞增殖

CK18对沉默HIF-1α的人“三阴”乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

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山西医科大学学报 2018年第12期49卷 1451-1455页

作者：海玲杜华赵静师永红内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010110

目的研究CK18对HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法采用shRNA干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中的HIF-1α基因,选择RT-PCR及Western blot技术确定HIF-1α干扰效果。构建真核表达载体CK18-PEGFP-C1,以脂质体转染... 详细信息

目的研究CK18对HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法采用shRNA干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中的HIF-1α基因,选择RT-PCR及Western blot技术确定HIF-1α干扰效果。构建真核表达载体CK18-PEGFP-C1,以脂质体转染法将其转染入HIF-1α干扰后的MDA-MB-231细胞中,荧光显微镜下评估转染效率,Western blot检测CK18蛋白的表达情况。同时以空载体PEGFP-C1转染HIF-1α干扰后的MDA-MB-231细胞为阴性对照组。实验分别通过流式细胞术及Hoechst凋亡检测试剂盒检测CK18对细胞周期及凋亡的影响。结果构建了CK18-PEGFP-C1真核表达载体,基因测序结果与Gen Bank报道的完全一致,并转染了封闭HIF-1α基因的MDA-MB-231细胞,Western blot显示CK18蛋白表达上调。AnnexinⅤ-FITC/PI双染细胞凋亡检测分析CK18转染组早期凋亡率[(4. 9±0. 17)%]高于对照转染组[(3. 09±0. 25)%],差异有统计学意义(P 细胞凋亡显示CK18转染组的细胞凋亡率[(53±11)%]高于对照转染组[(21±13)%],差异有统计学意义(P 18真核表达载体,并在HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞中稳定表达后,可促进细胞凋亡。

关键词：细胞角蛋白18 缺氧诱导因子-1α “三阴”乳腺癌 MDA-MB-231 细胞凋亡

血清CK18-M65、M30与非酒精性脂肪肝病的相关性

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世界华人消化杂志 2013年第24期21卷 2378-2384页

作者：蔡雯宋江美米合日古丽.热西提王利芳郭子双李格丁燕姚华新疆医科大学新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆医科大学第一附属医院新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

目的:分析血清CK18-M30、M65与非酒精脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的相关性.探讨其在NAFLD形成过程中的可能作用机制,为预防NAFLD的向严重肝病发展提供临床依据.方法:选取2011-06/2013-01在新疆医科大学第一附属... 详细信息

目的:分析血清CK18-M30、M65与非酒精脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的相关性.探讨其在NAFLD形成过程中的可能作用机制,为预防NAFLD的向严重肝病发展提供临床依据.方法:选取2011-06/2013-01在新疆医科大学第一附属医院选择非酒精性脂肪肝患者309例,选择健康对照人群290例;平均年龄44.09岁±9.99岁;对所有研究对象进行问卷调查、体格检查、腹部超声检查以及血液生化指标;同时采用酶联免疫吸附法检测血清中细胞角蛋白18-M30和细胞角蛋白18-M65浓度.结果:维吾尔族、汉族人群N A F L D组CK18-M30水平分别为249.03 ng/L±133.58n g/L、244.06 n g/L±73.76 n g/L,对照组C K18-M30水平分别为142.30 n g/L±31.89ng/L、143.16 ng/L±93.31ng/L,病例组高于对照组且差异具有统计学意义(P18-M65水平分别为154.69 ng/L±138.07 ng/L、222.08ng/L±170.52 ng/L,对照组CK18-M65水平分别为160.70 ng/L±134.19 ng/L、239.52 ng/L±196.16 ng/L,NAFLD与对照组CK18-M65水平差异无统计学意义.在校正年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、中性粒细胞计数(neutrophil count,NEUT)、淋巴细胞计数(lymphocyte count,LY)、血红蛋白浓度、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、血清甘油三酯(serum triglyceride,TG)、血清胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)等后,NAFLD组CK18-M30水平高于对照组,而NAFLD组与对照组间CK18-M65水平差异无统计学意义.多因素Logistic回归分析结果提示在校正了性别、年龄、BMI、SBP、DBP、TG、TC、HDL、LDL等因素影响的情况下,血清CK18-M30水平是患NAFLD危险因素,OR值为1.300(P18-M30水平升高与NAFLD密切相关,且是NAFLD独立危险因素,而CK18-M65水平与NAFLD无相关性.

关键词：非酒精性脂肪性肝病细胞角蛋白18 细胞凋亡

太原市冬夏季PM2.5亚慢性染毒对大鼠肺炎症因子和CK-18表达的影响

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山西大学学报(自然科学版) 2017年第3期40卷 622-627页

作者：李瑞金张玫赵利芳王影苏瑞军刘小娜李卓玉山西大学环境科学研究所生物技术研究所

研究采集PM样本,制备PM生理盐水混悬液,对雄性SD大鼠进行染毒实验,检测大鼠肺组织病理学改变,测定肺中炎症因子和CK-18mRNA和蛋白表达。结果显示,随着PM染毒剂量增加,肺组织出现肺充血和炎性细胞浸润等炎症反应,冬季PM所致肺病理学损伤... 详细信息

研究采集PM样本,制备PM生理盐水混悬液,对雄性SD大鼠进行染毒实验,检测大鼠肺组织病理学改变,测定肺中炎症因子和CK-18mRNA和蛋白表达。结果显示,随着PM染毒剂量增加,肺组织出现肺充血和炎性细胞浸润等炎症反应,冬季PM所致肺病理学损伤比夏季严重。冬季PM中、高剂量组和夏季高剂量组大鼠肺中TNF-α、IL-6、TGF-β、CK-18mRNA和蛋白表达比对照组显著增加。这说明PM亚慢性染毒可增加炎症因子表达水平,促进肺炎症反应。CK-18表达上调提示PM致肺组织处于氧化应激状态。太原市冬季PM引起大鼠肺炎症损伤效应比夏季严重。

关键词：细颗粒物大鼠肺炎症因子细胞角蛋白18 亚慢性染毒

血清骨桥蛋白、癌胚抗原及CK18的表达对胃癌的诊断价值

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郑州大学学报（医学版） 2018年第2期53卷 221-224页

作者：邢鑫张自森郭彦伟王利娟张红巧郑晓珂张剑王亚楠郑州大学第五附属医院肿瘤内科郑州450052

目的:测定胃癌患者血清中骨桥蛋白(OPN)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白18(CK18)的表达情况,探讨其在胃癌诊断中的意义。方法:选择80例胃癌患者作为胃癌组,80名健康体检者作为对照组,观察胃癌组和对照组血清OPN、CEA和CK18含量,血清OPN和CE... 详细信息

目的:测定胃癌患者血清中骨桥蛋白(OPN)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白18(CK18)的表达情况,探讨其在胃癌诊断中的意义。方法:选择80例胃癌患者作为胃癌组,80名健康体检者作为对照组,观察胃癌组和对照组血清OPN、CEA和CK18含量,血清OPN和CEA、CK18诊断胃癌的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积,血清OPN、CEA和CK18含量和胃癌病理特征的关系。结果:胃癌组患者血清OPN、CEA和CK18含量均高于对照组(P18,两两联合指标诊断胃癌的ROC曲线下面积大于单独指标,三者联合诊断胃癌的ROC曲线下面积最大。随着联合指标的增多,诊断胃癌的灵敏度升高。结论:胃癌患者血清OPN、CEA和CK18水平升高,多指标联合检测诊断胃癌的灵敏度比较高。

关键词：胃癌骨桥蛋白癌胚抗原细胞角蛋白18

血清CK18 M30和M65水平与慢性HBV感染肝脏疾病关系的研究

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血清CK18 M30和M65水平与慢性HBV感染肝脏疾病关系的研究

作者：李昌飞青岛大学

学位级别：硕士

目的:比较血清中两种形式的细胞角蛋白18（CK18）M30和M65在慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者的不同疾病阶段的水平差异,评价两者在慢性HBV感染相关肝脏疾病的诊断作用及与疾病进展的参考价值。方法:收集2015年12月-2016年6月在青岛市... 详细信息

目的:比较血清中两种形式的细胞角蛋白18（CK18）M30和M65在慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者的不同疾病阶段的水平差异,评价两者在慢性HBV感染相关肝脏疾病的诊断作用及与疾病进展的参考价值。方法:收集2015年12月-2016年6月在青岛市市立医院住院及查体的166例研究对象,其中包括:乙肝携带者33例（慢性HBV携带者9例和非活动性HBsAg携带者24例）,慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者50例（HBeAg阳性CHB患者38例和HBeAg阴性CHB患者12例）,乙型肝炎肝硬化患者50例。对照组为同一时间段内在青岛市市立医院体检中心收集的33例健康者。收集各组患者的一般资料,用酶联免疫吸附法测定研究对象的CK18（M30,M65）水平,比较各组之间的差异;并探讨CK18（M30,M65）与临床相关指标的相关性。采用SPSS17.0统计软件,P18（M30,M65）水平在各组中的差异,进而判断CK18（M30,M65）水平在疾病诊断中的价值;（2）探讨CK18（M30,M65）水平在乙肝携带者中的水平,进而评估其反应肝脏损伤的灵敏度;（3）通过探讨CK18（M30,M65）水平是否参与乙肝携带者向慢性乙型病毒性肝炎,进一步明确其在疾病进展中的作用;（4）分别将M30、M65与临床常用指标进行Spearman相关分析,并进一步采用多元线性逐步回归分析M30、M65的独立相关因素。结果:（1）与对照组相比,CHB组CK18 M30水平显著升高（P=0.002）,阳性率升高（χ=6.640,P0.05）,阳性率无明显差异（χ=0.776,P>0.05;χ=1.551,P>0.05）;CHB组和乙肝携带者组CK18 M65水平显著升高（P均18 M65水平无明显变化（P>0.05）,阳性率无明显差异（χ=1.551,P>0.05）。（2）携带者ALT、AST、r-GGT、ALP水平与对照组相比无显著差异（P均>0.05）。携带者CK18 M65水平及阳性率比对照组高,推测CK18 M65在预测早期肝脏损伤方面更敏感。（3）与携带者相比,CHB组血清CK18 M30水平显著性升高（P18 M65水平没有显著变化（P=0.102）,阳性率升高（χ=4.698,P=0.03）。（4）M30与ALT、AST、GGT、lgHBV-DNA呈正相关（r分别为0.388、0.364、0.198、0.226,P18 M65与ALT、AST、GGT、lgHBV-DNA、LN、PIIIP呈正相关（r分别为0.254、0.301、0.164、0.233、0.295、0.273,P18 M30和M65的表达水平存在差异,并且二者分别与临床常用肝脏损伤检测指标有不同程度的相关性,提示M30和M65可作为判定肝脏损害无创诊断指标。（2）CK18 M65在预测早期肝脏炎症发生的方面比ALT、CK18 M30更敏感。（3）CK18 M30和M65在预测乙肝携带者向CHB进展的方面起一定作用。

关键词：细胞角蛋白18 乙型肝炎病毒肝脏炎症肝硬化

LncRNA MALAT1在NASH高危人群中的表达及意义

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LncRNA MALAT1在NASH高危人群中的表达及意义

作者：余雪婷昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]通过检测长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录子 1(Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)的表达水平,分析lncRNA MALAT1在非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis,NASH)高危人群中的表达变化及意义,寻找可用于评估NASH高危人群的分子学标志物,为NASH高危人群的早期识别提供可能的诊断标记物。[方法]随机抽取无血缘关系的非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholicfatty liver disease,NAFLD)患者95例和无NAFLD者46例,进行人体测量学和代谢指标的检测。提取外周血中单核细胞的总RNA,采用实时荧光定量PCR方法检测各组外周血中lncRNA MALAT1基因的表达水平。通过ELISA方法测定NAFLD组患者外周血清中CK-18的含量,根据2018版非酒精性脂肪性肝病防治指南推荐将NAFLD组分为单纯NAFLD组(n=55例)和NASH高危组(n=40例)。比较无NAFLD组、单纯NAFLD组和NASH高危组lncRNA MALAT1表达水平差异。[结果]1.与无NAFLD组相比,NAFLD组患者体重、BMI、腰围、腰臀比、UA、TG明显升高,HDL-c明显下降,单纯NAFLD组与NASH高危组间上述指标无明显统计学差异。2.无NAFLD组、单纯NAFLD组和NASH高危组的lncRNAMALAT1的相对表达量有统计学差异(P0.05)。[结论]1.与无NAFLD组相比,NAFLD患者常伴有超重、腹型肥胖;常共存尿酸及血脂的代谢异常。***1的相对表达水平在NASH高危人群中明显升高。推测lncRNAMALAT1可能作为评估NAFLD患者发生NASH风险增高的指标之一。

关键词：非酒精性脂肪性肝病非酒精性脂肪型肝炎高危人群长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录子1 细胞角蛋白18