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线性探针技术诊断耐药肺结核准确性的Meta分析

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中华流行病学杂志 2018年第11期39卷 1491-1495页

作者：许璐孙一鑫詹思延北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系 100191

目的采用Meta分析方法评价线性探针技术对耐药肺结核诊断的准确性。方法通过检索中文数据库（中国知网、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献服务系统、维普期刊中文期刊服务平台）和英文数据库（PubMed、Embase、Cochrane Librar... 详细信息

目的采用Meta分析方法评价线性探针技术对耐药肺结核诊断的准确性。方法通过检索中文数据库（中国知网、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献服务系统、维普期刊中文期刊服务平台）和英文数据库（PubMed、Embase、Cochrane Library）获得2000年1月1日至2017年9月1日发表的线性探针技术对中国耐药肺结核患者诊断准确性的研究。使用诊断准确性研究质量评价标准-2（QUADAS-2）进行质量评价。通过Meta分析（双变量或单变量模型）合并各研究（金标准为传统药敏试验或耐药相关基因测序）的灵敏度和特异度，然后对亚组（GenoType MTBDRplus、GenoType MTBDRsl和反向斑点杂交技术）进行分析，并进行敏感性分析。结果最终纳入24篇文献，共包括82项研究。线性探针技术诊断耐利福平肺结核的灵敏度为0.91（0.88～0.94），特异度为0.98（0.97～0.99）；诊断耐异烟肼肺结核的灵敏度为0.80（0.77～0.83），特异度为0.98（0.96～0.99）；诊断耐多药肺结核的灵敏度为0.81（0.76～0.85），特异度为0.99（0.99～1.00）；诊断耐喹诺酮肺结核的灵敏度为0.92（0.88～0.95），特异度为0.94（0.91～0.97）；诊断耐二线注射类（包括卡那霉素、卷曲霉素、丁胺卡那霉素）肺结核的灵敏度为0.79（0.58～0.91），特异度为0.98（0.90～1.00）；诊断广泛耐多药肺结核的灵敏度为0.46（0.19～0.75），特异度为1.00（0.98～1.00）。亚组分析显示GenoType MTBDRplus和GenoType MTBDRsl诊断准确性整体上高于反向斑点杂交技术。敏感性分析显示本研究结果较为稳定。结论线性探针技术对耐药肺结核的诊断准确性较高。

关键词：耐药肺结核线性探针 Meta分析

微透析与高效液相色谱在线联用技术校正大鼠皮下阿魏酸线性探针

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分析化学 2012年第1期40卷 164-168页

作者：王丹刘春生刘艳霞安卓玲李鹏飞刘丽宏石力夫胡晋红第二炮兵总医院第三军医大学第二军医大学长海医院药学部

采用微透析与高效液相在线联用技术(MD-HPLC on-line)建立并验证大鼠皮下阿魏酸微透析线性探针体内外校正方法。以磷酸盐缓冲溶液为灌流液,微透析灌注液流速为2μL/min,10孔自动进样阀间隔为8 min,在以Hypersil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm... 详细信息

采用微透析与高效液相在线联用技术(MD-HPLC on-line)建立并验证大鼠皮下阿魏酸微透析线性探针体内外校正方法。以磷酸盐缓冲溶液为灌流液,微透析灌注液流速为2μL/min,10孔自动进样阀间隔为8 min,在以Hypersil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(含0.5%乙酸)(35∶65,V/V),流速1 mL/min,检测波长314 nm的HPLC色谱条件下进行在线检测,阿魏酸在0.1～80 mg/L范围内回归方程线性关系良好,A=159044C-2607(r=1),阿魏酸日内精密度RSD分别为0.8%,0.3%和0.5%(n=5);日间精密度RSD分别为0.2%,0.3%和0.4%(n=5),重现性与稳定性RSD分别为0.7%和1.1%(n=5)。增量法和减量法测定阿魏酸线性探针体内外回收率分别为47.23%±0.94%和20.37%±1.37%,阿魏酸适宜进行微透析实验。应用MD-HPLC on-line对中药当归阿魏酸进行测定,使取样、进样和分析监测同时进行。

关键词：高效液相色谱微透析在线联用技术阿魏酸线性探针

来源：博看期刊

线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中的应用

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中国热带医学 2019年第7期19卷 662-666页

作者：钟业腾林翀陈灼霖邱文华陈少文林明冠海南医学院第二附属医院

目的探讨线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中临床应用。方法分别采用结核菌涂片、罗氏培养法、比例法药敏及线性探针技术对海南省疑似结核病患者痰液标本进行检测,并对检测结核分枝杆菌、耐药性及耐药突变特点进行分析。结... 详细信息

目的探讨线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中临床应用。方法分别采用结核菌涂片、罗氏培养法、比例法药敏及线性探针技术对海南省疑似结核病患者痰液标本进行检测,并对检测结核分枝杆菌、耐药性及耐药突变特点进行分析。结果线性探针技术检测结核分枝杆菌阳性率(58.7%)明显高于结核菌涂片(40.2%)和罗氏培养(53.8%),线性探针法与两种传统方法比较差异有统计学意义(P线性探针法对结核分枝杆菌耐利福平、异烟肼和耐多药结核分枝杆菌检测的特异性为89.27%、94.95%和91.45%,敏感性为94.38%、75.00%和75.68%,阴性预测值为94.62%、80.34%和5.60%,阳性预测值为85.71%、93.32%和84.85%,符合率为90.05%、85.34%和85.34%,线性探针技术与比例法药敏检测结核分枝杆菌利福平耐药性效果比较差异无统计学意义,且具有较好一致性,检测异烟肼耐药性差异有统计学意义,且两种方法之间一致性一般,检测耐多药结核分枝杆菌两种方法差异无统计学意义,但两种方法之间一致性一般;利福平耐药基因突变类型主要是 rpoB H531L,占57.14%,异烟肼耐药基因突变类型主要是katG S315T1,占91.89%,耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变类型主要为rpoB S531L+KatG S315T1,占56.06%。结论线性探针技术可快速准确地从海南省疑似肺结核临床标本鉴定出结核分枝杆菌及耐多药结核分枝杆菌,并可直接快速检测临床标本耐药性从而指导临床用药。

关键词：线性探针结核分枝杆菌耐药性利福平异烟肼

线性探针法MTBDRplus用于涂阳肺结核的耐多药检测研究

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中国卫生检验杂志 2013年第2期23卷 380-383,386页

作者：李辉马晓光石洁王瑜闫国蕊杨洪毅李强赵雁林河南省疾病预防控制中心结核病参比实验室郑州450016 河南省开封市结核病防治所结核病实验室河南开封410200 中国疾病预防控制中心国家结核病参比实验室北京102206

目的:评价线性探针法MTBDRplus对耐多药肺结核病的检测效能。方法:选取河南省涂阳肺结核病人痰液和结核杆菌菌株作为检测标本,以传统药物敏感性试验为标准,获得MTBDRplus方法的检测灵敏性和特异性。结果:MTBDRplus检测145例痰标本和169... 详细信息

目的:评价线性探针法MTBDRplus对耐多药肺结核病的检测效能。方法:选取河南省涂阳肺结核病人痰液和结核杆菌菌株作为检测标本,以传统药物敏感性试验为标准,获得MTBDRplus方法的检测灵敏性和特异性。结果:MTBDRplus检测145例痰标本和169株菌株中结核杆菌耐多药(MDR)的灵敏度和特异度分别为80.00%、84.62%和100.00%、98.90%。结论:线性探针法MTBDRplus能快速检出涂阳痰标本及培养菌株中耐多药结核杆菌,有较高的灵敏度和特异性,利于耐多药结核病的快速筛查和诊断。

关键词：结核病耐多药线性探针突变位点

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线性探针技术在耐药结核病诊断中的应用

线性探针技术在耐药结核病诊断中的应用

作者：可春梅郑州大学

学位级别：硕士

背景和目的2017年世卫组织全球结核病报告显示:全球有1040万结核病患者,2016年有180万人死于结核病,结核病成为全球头号传染病杀手。结核病的治疗管理不善,抗菌药物的不正确使用,使用无效药品配方,以及过早中断治疗,都可以引起结核分枝... 详细信息

背景和目的2017年世卫组织全球结核病报告显示:全球有1040万结核病患者,2016年有180万人死于结核病,结核病成为全球头号传染病杀手。结核病的治疗管理不善,抗菌药物的不正确使用,使用无效药品配方,以及过早中断治疗,都可以引起结核分枝杆菌产生耐药性,并可进而造成传播。在全球范围内我国是耐药结核结核病疫情比较严重的国家,WHO已将我国列为耐多药结核病高负担国家之一。耐多药防治工作存在发现率低,治愈率低等问题。如何有效控制结核病尤其是耐药肺结核疫情,是当前全球结核病预防、控制工作所面临的紧迫问题,同时也是我国传染性疾病防治事业面临的重要挑战。因此,探寻、评估新的耐药结核病早期诊断技术,及时发现、治疗耐药病人,对我国“十三五”期间的结核病防治工作有重要的意义。当前我国用于筛查耐药结核病方面应用最广泛的一项基本技术是抗结核药物敏感性试验(DST),该方法最大的缺陷在于检测周期过长,临床时效性较差,不利于临床及时合理选择抗结核方案。近年来结核病分子生物学诊断领域发展较快,涌现出基因芯片、GeneXpert、熔解曲线法、HAIN线性探针检测(Line probe assay,LPA)等技术,不仅可用于结核病诊断,还可对部分抗结核药物进行耐药性检测。其中HAIN线性探针检测是由德国HAIN Lifescience公司开发的一种诊断技术,能通过对rpoB、katG、inhA基因突变进行检测从而判断结核分枝杆菌是否对利福平(RIF)和异烟肼(INH)耐药。本次试验旨在通过HAIN线性探针技术与传统分枝杆菌药物敏感性试验(DST)进行比较分析,评估该技术在耐多药结核病早期诊断中的应用价值;同时对确诊为耐多药结核病(MDR-TB)的患者耐药基因进行分析,探寻导致本地区MDR-TB发生的主要基因位点。方法随机选取2015年5月至2016年2月期间于河南省传染病医院(郑州市第六人民医院)门诊或住院治疗的387例涂片抗酸染色阳性结核病患者,其中男性271例,女性116例,平均年龄(39.3±17.5)岁。对入组患者抗酸阳性生物样本分别进行HAIN线性探针技术检测及分枝杆菌固体培养,对培养阳性菌株进行传统比例法分枝杆菌药物敏感性试验(DST)。从实验室信息管理系统(LIS)上查询两种方法从样本接受至结果审核报告所用的时间,即样本周转时间(TAT),做好试验记录。对HAIN线性探针检测结果与药物敏感性试验结果进行比较,评价HAIN线性探针技术在耐药结核病诊断领域的应用价值。统计学处理采用SPSS 19.0统计软件和Excel软件对各组研究对象的病例信息、检测结果进行数据整理分析。定量资料以均数±标准差(?x±s)表示;定性资料各组研究对象间率的差异采用卡方检验,P线性探针检测判定检测结果无效。故而排除以上7例患者,最终有380例涂阳结核病患者继续本次研究。***的平均样本TAT为(28.77±10.67)小时,而DST的平均样本TAT为(1508.87±153.97)小时。***对利福平(RIF)耐药性检测的敏感性为82.92%,特异度为96.12%;与DST符合率为94.68%,Kappa值为0.743。两种方法在检测RIF是否耐药有高度的一致性。***对异烟肼(INH)耐药性检测的敏感性为94.33%,特异度为94.12%;与DST符合率为94.14%,Kappa值为0.785。两种方法在判断INH是否耐药有高度的一致性。5.与传统DST比较,HAIN筛查MDR的敏感性为96.97%,特异度为97.96%,二者符合率为97.87%,Kappa值为0.877,两种方法在筛查MDR-TB方面具有非常高度的一致性。6.对确诊为MDR-TB的32例患者进行RIF耐药位点分析,发现本地区rpoB发生频率最高的情况是WT8和MUT3同时突变,即53033位点出现S531L突变,检出频率为56.25%;其次为WT7与MUT2同时突变,即52629位密码子发生H526Y突变,检出频率为15.68%;第三为WT3+WT4+MUT1同时突变即51319位点发生D516V突变,突变频率为9.38%。7.对确诊为MDR-TB的32例患者进行INH耐药位点分析,发现kat G基因总的突变频率为96.88%,inhA基因突变的总频率为37.50%。二者之间差异具有统计学意义(χ=22.12,P线性探针技术在耐多药

关键词： HAIN 线性探针耐多药结核病药物敏感性试验

基因芯片法与线性探针法对痰标本中结核分枝杆菌检测的应用价值

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中国感染控制杂志 2019年第4期18卷 283-288页

作者：钟业腾吕志辉林翀林明冠陈灼霖苏应仙陈少文裴华海南医学院第二附属医院检验科海南海口570311 海南省临高县疾病预防控制中心检验科海南临高571800

目的探讨基因芯片法与线性探针法检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)的应用价值。方法海南医学院第二附属医院2018年3—7月门诊和住院的106例疑似肺结核患者纳入研究,采用基因芯片法、线性探针法对患者送检的痰进行检测,并与改良罗氏培养法... 详细信息

目的探讨基因芯片法与线性探针法检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)的应用价值。方法海南医学院第二附属医院2018年3—7月门诊和住院的106例疑似肺结核患者纳入研究,采用基因芯片法、线性探针法对患者送检的痰进行检测,并与改良罗氏培养法进行比较;以比例法药敏试验为金标准,分析上述两种方法检测利福平和异烟肼耐药性的效能。结果对106份痰标本进行改良罗氏培养,阳性率为52.83%(56/106),经鉴定其中46份标本为MTB阳性。基因芯片法和线性探针法分别检出MTB46、53株,基因芯片法、线性探针法与改良罗氏培养法检测MTB结果比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。基因芯片法、线性探针法与比例法检测MTB对利福平的耐药性比较,差异均无统计学意义,且具有较好一致性(均P>0.05,均Kappa>0.75)。对利福平的耐药性检测,基因芯片法的灵敏度、特异度分别为84.62%、90.00%,线性探针法分别为84.62%、85.00%。基因芯片法、线性探针法与比例法检测MTB对异烟肼的耐药性比较,差异均无统计学意义,但一致性一般(均P>0.05、均Kappa线性探针法分别为65.38%(17/26)、85.00%(17/20)。结论基因芯片法和线性探针法均可准确、快速地从大部分疑似结核病患者的痰标本中鉴定出MTB,也适用于利福平和异烟肼耐药结果的快速检测,从而指导临床用药,值得临床推广。

关键词：基因芯片线性探针比例法结核分枝杆菌利福平异烟肼罗氏培养

线性探针技术快速检测耐药结核分枝杆菌的应用评价

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当代医学 2017年第13期23卷 108-110页

作者：辛宝林于秀坤刘金玲黑龙江省大庆市疾病预防控制中心黑龙江大庆163311

目的评价线性探针技术(Geno-Type~?MTBDRplus)检测结核分枝杆菌耐药性的可靠性和及时性。方法用线性探针技术对240株结核分枝杆菌进行利福平、异烟肼耐药性检测,以比例法药敏试验作为金标准,比较线性探针法与比例法药敏试验耐药结果的... 详细信息

目的评价线性探针技术(Geno-Type~?MTBDRplus)检测结核分枝杆菌耐药性的可靠性和及时性。方法用线性探针技术对240株结核分枝杆菌进行利福平、异烟肼耐药性检测,以比例法药敏试验作为金标准,比较线性探针法与比例法药敏试验耐药结果的符合程度,评价其准确性和应用价值,同时比较二者检测报告时间。结果与比例法相比较,线性探针技术检测异烟肼敏感性96.8%,特异性95.3%;阳性预测值97.4%,阴性预测值94.3%;检测利福平敏感性95.8%,特异性91.8%;阳性预测值94.4%,阴性预测值93.4%。比例法检出耐多药88例,检出率为36.7%,线性探针法检出耐多药87例,检出率36.3%,一致率为98.9%,检测耐多药的敏感度98.9%,特异性100%;阳性预测值100%,阴性预测值99.3%,两种方法检出率差异无统计学意义(校正x^2=0.0000,P=1.0000)。结论线性探针技术检测利福平、异烟肼耐药性与比例法具有高度一致性,有较高的敏感性和特异性,而且操作简便、结果准确,报告时间短,可以作为地市级快速检测结核分枝杆菌耐药性的方法。

关键词：线性探针快速耐药检测结核分枝杆菌微生物敏感性试验利福平异烟肼

线性探针联合HPLC研究六锐胶囊中没食子酸的眼部药代动力学

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中国中医眼科杂志 2017年第2期27卷 83-86页

作者：郭俊国王兴荣赵晴宋继科毕宏生山东中医药大学眼科研究所济南250002 山东中医药大学附属眼科医院济南250002 山东中医药大学眼科与视光医学院济南250355

目的建立线性探针联合高效液相色谱(HPLC)测量兔前房没食子酸的方法,探讨六锐胶囊中没食子酸的眼部药代动力学参数。方法 6只新西兰大白兔前房植入微透析线性探针(CMA402),灌胃给予六锐胶囊(20 ml/kg)。以乙腈和0.1%醋酸水为流动相梯度... 详细信息

目的建立线性探针联合高效液相色谱(HPLC)测量兔前房没食子酸的方法,探讨六锐胶囊中没食子酸的眼部药代动力学参数。方法 6只新西兰大白兔前房植入微透析线性探针(CMA402),灌胃给予六锐胶囊(20 ml/kg)。以乙腈和0.1%醋酸水为流动相梯度洗脱,283 nm检测没食子酸浓度,DAS 2.0分析没食子酸的药代动力学参数。结果没食子酸检测限为0.67μg/ml,定量限为1.34μg/ml,在1.34~20.13μg/ml间线性关系良好,精密度和稳定性的相对标准差(RSD)分别为0.77%和2.21%,体内回收率为50.78%。没食子酸前房药代动力学符合二室模型,生物半衰期为54 min,达到最大浓度时间为80 min。结论采用线性探针联合HPLC实时测量兔眼没食子酸前房浓度准确可靠;六锐胶囊中的没食子酸可以进入兔眼前房,其药代动力学符合二室模型特征。

关键词：六锐胶囊没食子酸线性探针高效液相色谱药代动力学

线性探针技术检测肺结核患者耐药情况临床评价

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中国药业 2019年第2期28卷 23-26页

作者：侯婧韩莙张艳孟婧安徽省胸科医院安徽合肥230022

目的评价线性探针(HAIN)技术用于临床抗结核治疗的价值。方法收集251例痰抗酸杆菌涂片阳性肺结核患者的痰标本,以罗氏培养及药敏试验为"金标准",采用HAIN技术检测异烟肼及利福平的耐药情况。结果 HAIN技术对男性涂阳患者利福平(χ~2=0.6... 详细信息

目的评价线性探针(HAIN)技术用于临床抗结核治疗的价值。方法收集251例痰抗酸杆菌涂片阳性肺结核患者的痰标本,以罗氏培养及药敏试验为"金标准",采用HAIN技术检测异烟肼及利福平的耐药情况。结果 HAIN技术对男性涂阳患者利福平(χ~2=0.634,P=0.426)和异烟肼(χ~2=0.951,P=0.329)的耐药检测,对女性涂阳患者利福平(χ~2=0.174,P=0.676)和异烟肼(χ~2=2.791,P=0.095)的耐药检测,以及全部涂阳患者利福平(χ~2=0.806,P=0.369)和异烟肼(χ~2=0.012,P=0.914)的耐药性检测效果与"金标准"比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。HAIN技术对利福平和异烟肼耐药检测的灵敏度分别为87.69%和57.73%,特异度分别为90.86%和87.24%。结论 HAIN技术能用于快速、准确地诊断利福平和异烟肼的耐药性,可作为辅助检测手段用于临床结核病尤其是耐药结核病的诊治。

关键词：线性探针利福平异烟肼耐药性检测实验诊断