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中国实验方剂学杂志 2022年第7期28卷 81-87页

作者：刘盛玲吕红田会茹姜思琴袁萍傅蔚然高书亮付剑江江西中医药大学南昌330004 首都医科大学基础医学院北京100069

目的:研究蚊母草提取物(EVP)的抗乳腺癌破骨性骨转移作用。方法:采用左心室注射肿瘤细胞法建立裸鼠骨转移模型,通过巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白-19(Ck-19)基因表达量确定肿瘤细胞的骨转移程度及EVP的抑制作... 详细信息

目的:研究蚊母草提取物(EVP)的抗乳腺癌破骨性骨转移作用。方法:采用左心室注射肿瘤细胞法建立裸鼠骨转移模型,通过巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白-19(Ck-19)基因表达量确定肿瘤细胞的骨转移程度及EVP的抑制作用;采用多核细胞计数法及组织蛋白酶K(Cathepsin K)分泌量检测法,确定小鼠破骨细胞前体骨髓巨噬细胞(BMMs)的活性,并观察EVP(40、80、160 g·L^(-1))的抑制作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察EVP对BMMs细胞内核转录因子-κB受体活化因子(RANK)、Runt相关转录因子2(Runx2)、磷酸化Runx2(p-Runx2)及其下游蛋白基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响;采用明胶酶谱法检测EVP对基质金属蛋白酶(MMPs)水解明胶活性的影响。结果:与空白组比较,裸鼠给予EVP 5.5、11、22 g·kg^(-1),其骨髓组织中人Ck-19水平明显降低(P骨转移作用;体外实验显示,与空白组比较,可溶性核转录因子-κB受体活化因子配基(sRANKL)可诱导BMMs分化为多核细胞(P破骨性骨转移,抑制骨形成相关转录因子Runx2活化,进而干扰RANK/RANKL信号转导从而抑制破骨细胞活化可能是其作用机制之一。

关键词：蚊母草破骨性骨转移乳腺癌 Runt相关转录因子2(Runx2) 核转录因子-κB受体活化因子

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左归丸抗乳腺癌破骨性骨转移机制探讨

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中国实验方剂学杂志 2016年第12期22卷 123-127页

作者：付剑江刘婷墨啸筝柯小琴朱小翠张舟妙吕红江西中医药大学药学院南昌330004 江西中医药大学中医理论分化发展研究中心南昌330004 江西中医药大学网络与教育技术中心南昌330004

目的:研究左归丸的抗乳腺癌破骨性骨转移作用,并探讨其机制。方法:采用左心室注射人乳腺癌MDA-MB^(-2)31细胞法建立裸鼠乳腺癌实验性骨转移模型,实验分为空白组、左归丸(21,42 g·kg^(^(-1)))组,采用巢式PCR特异性扩增裸鼠骨髓中人细胞... 详细信息

目的:研究左归丸的抗乳腺癌破骨性骨转移作用,并探讨其机制。方法:采用左心室注射人乳腺癌MDA-MB^(-2)31细胞法建立裸鼠乳腺癌实验性骨转移模型,实验分为空白组、左归丸(21,42 g·kg^(^(-1)))组,采用巢式PCR特异性扩增裸鼠骨髓中人细胞角蛋白(CK19),确定肿瘤细胞在骨髓组织中的转移情况。体外分离小鼠破骨细胞前体细胞小鼠骨髓巨噬细胞(BMMs),外源性加入核转录因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体(sRANKL),模拟肿瘤条件下破骨细胞活化,观察左归丸对破骨细胞活化、组织蛋白酶K(Cathepsin K)分泌以及骨片吸收的影响。采用免疫印迹法(Western blot)检测破骨细胞前体细胞NF-κB受体活化因子(RANK)表达的影响。结果:与空白组比较,左归丸(21,42 g·kg^(^(-1)))组均可显著抑制乳腺癌骨转移动物骨髓组织中人CK19表达的影响(P破骨细胞(P破骨细胞分泌Cathepsin K(P破骨性骨转移作用,RANKL/RANK系统活性可能是其作用机制之一。

关键词：左归丸破骨性骨转移乳腺癌巢式PCR 人源细胞角蛋白核转录因子-κB受体活化因子配体组织蛋白酶k

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左归丸通过调控p38 MAPK/ERK信号通路抑制乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：付剑江梅殷珑麻俊超朱小翠王伟吕红江西中医药大学恶性肿瘤中医药诊疗与康复江西省重点实验室

目的：探讨左归丸的抗乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制。方法：为了模拟乳腺癌诱导的破骨性骨转移，本实验采用含50% 乳腺癌细胞MDA-MB-231培养上清的条件培养基培养RAW264.7细胞；实验中左归丸的给药浓度分别为含体积分数5%和10%的左... 详细信息

目的：探讨左归丸的抗乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制。方法：为了模拟乳腺癌诱导的破骨性骨转移，本实验采用含50% 乳腺癌细胞MDA-MB-231培养上清的条件培养基培养RAW264.7细胞；实验中左归丸的给药浓度分别为含体积分数5%和10%的左归丸含药血清。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨细胞活化情况；酶联免疫吸附法（ELISA）检测RAW264.7细胞Cathepsin K分泌；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测骨钙素（OCN）、唾液酸蛋白（BSP）mRNA表达水平；采用免疫共沉淀法检测Runx2与核心结合因子β亚基（CBF-β）间相互作用；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Runt-related transcription factor 2（Runx2）、磷酸化（p-）Runx2、细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）、p-ERK1/2、p38 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、p-p38 MAPK以及CBF-β等蛋白表达。结果：与空白组相比，MDA-MB-231细胞上清组TRAP阳性细胞数目、Cathepsin K分泌显著增加；p-Runx2蛋白表达、与CBF-β相互作用结合能力、BSP和OCN mRNA表达、p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达显著降低（P破骨细胞内骨形成的关键性转录调节蛋白Runx2磷酸化而抑制破骨细胞活化，这一过程与p38 MAPK/ERK信号转导途径的活化密切相关。

关键词：左归丸破骨性骨转移乳腺癌 runt相关转录因子2 p38丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路

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左归丸抗乳腺癌转移及其作用机制

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中国实验方剂学杂志 2017年第23期23卷 85-90页

作者：邹乐兰刘红宁吕红徐焕军朱小翠张舟妙付剑江南昌大学医院南昌330031 江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心南昌330004 江西中医药大学网络与教育技术中心南昌330004 江西中医药大学药学院南昌330004

目的:观察左归丸的抗乳腺癌转移作用,探讨其作用机制。方法:采用股骨内注射法建立人乳腺癌细胞MDAMB-231骨转移裸鼠模型,受试裸鼠随机分为空白组(蒸馏水),左归丸低、高剂量(21,42 g·kg-1)组。连续给药8周后,采用巢式聚合酶链式反应(PCR... 详细信息

目的:观察左归丸的抗乳腺癌转移作用,探讨其作用机制。方法:采用股骨内注射法建立人乳腺癌细胞MDAMB-231骨转移裸鼠模型,受试裸鼠随机分为空白组(蒸馏水),左归丸低、高剂量(21,42 g·kg-1)组。连续给药8周后,采用巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白(ck19)基因的表达,确定肿瘤转移情况;采用Oris法,检测左归丸含药血清对乳腺癌细胞MDA-MB-231体外迁移能力的影响;采用重组基底膜侵袭法,观察左归丸含药血清的体外抗侵袭作用;采用Alexa Fluor488标记的鬼笔环肽(Phalloidin)进行荧光染色,观察左归丸含药血清对乳腺癌细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)聚合的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测左归丸含药血清对MDA-MB-231细胞甲状旁腺激素相关蛋白(PTHr P)和4型趋化因子受体(CXCR4)表达的影响。结果:与空白组比较,左归丸高、低剂量均可显著抑制小鼠骨髓组织中人ck19基因表达(P骨转移作用,其机制与抑制肿瘤细胞PTHr P,CXCR4表达,从而直接抑制其体外运动活性相关。

关键词：左归丸破骨性骨转移乳腺癌甲状旁腺激素相关蛋白

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