左归丸通过调控p38 MAPK/ERK信号通路抑制乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制

作     者：付剑江 梅殷珑 麻俊超 朱小翠 王伟 吕红 

作者机构：江西中医药大学 恶性肿瘤中医药诊疗与康复江西省重点实验室 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2025年第1期

页      面：1-9页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81660680) 

主　　题：左归丸 破骨性骨转移 乳腺癌 Runt相关转录因子2 p38丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶 信号通路 

摘      要：目的：探讨左归丸的抗乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制。方法：为了模拟乳腺癌诱导的破骨性骨转移，该实验采用含50%乳腺癌细胞MDA-MB-231培养上清的条件培养基培养RAW264.7细胞；实验中左归丸的给药浓度分别为5%、10%的左归丸含药血清。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨细胞活化情况；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测RAW264.7细胞Cathepsin K分泌；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测骨钙素（OCN）、唾液酸蛋白（BSP）mRNA表达水平；采用免疫共沉淀法检测Runt-相关转录因子2(Runx2)与核心结合因子β亚基（CBF-β）间相互作用；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Runx2、磷酸化（p）-Runx2、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2、p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、p-p38 MAPK及CBF-β等蛋白表达。结果：与空白组比较，MDA-MB-231细胞上清组TRAP阳性细胞数目、CathepsinK分泌显著增加；p-Runx2蛋白表达、与CBF-β相互作用结合能力、BSP和OCNmRNA表达、p-p38MAPK和p-ERK1/2蛋白表达显著降低（P?0.01）。与MDA-MB-231细胞上清组比较，左归丸含药血清可显著减少TRAP阳性细胞数目、Cathepsin K分泌（P?0.01），显著增加p-Runx2蛋白表达、BSP和OCN mRNA表达、p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达，并促进Runx2与CBF-β相互作用（P?0.01）,Runx2表达则未见明显改变。与空白组比较，BVD-523组p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达显著降低（P?0.01）；与BVD-523组比较，低、高浓度左归丸含药血清组p-p38 MAPK表达显著升高（P?0.01），高浓度左归丸含药血清组p-ERK1/2表达也显著升高（P?0.01），低剂量组差异无统计学意义。结论：左归丸可以通过诱导破骨细胞内骨形成的关键性转录调节蛋白Runx2磷酸化而抑制破骨细胞活化，这一过程与p38 MAPK/ERK信号转导途径的活化密切相关。