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米非司酮的抗伪狂犬病毒作用及其与氢醌的协同效应

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南京农业大学学报 2023年第2期46卷 316-323页

作者：李紫彤赵晨遥朱慧欣蓝培如王先炜南京农业大学动物医学院/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

[目的]本试验探究药物米非司酮的抗伪狂犬病毒(PRV)作用及其与另一种抗伪狂犬病毒药物氢醌的协同作用,为抗PRV药物的研究和临床应用奠定基础。[方法]用Western blot和qPCR等方法检测米非司酮及其与氢醌联用在体外对伪狂犬病毒复制的影... 详细信息

[目的]本试验探究药物米非司酮的抗伪狂犬病毒(PRV)作用及其与另一种抗伪狂犬病毒药物氢醌的协同作用,为抗PRV药物的研究和临床应用奠定基础。[方法]用Western blot和qPCR等方法检测米非司酮及其与氢醌联用在体外对伪狂犬病毒复制的影响及其影响的作用阶段,再通过小鼠攻毒保护试验进一步确认其抗病毒作用及与氢醌联用的协同作用。[结果]15μmol·L^(-1)米非司酮具有抗病毒作用,且随着浓度升高而增强,此作用发生于伪狂犬病毒复制早期。体内、体外试验结果表明,米非司酮(体内5μmol·L^(-1)、体外40 mg·kg^(-1))单独或与氢醌(体内5μmol·L^(-1)、体外50 mg·kg^(-1))联用均具有抗病毒作用,与氢醌具有协同抗病毒作用,同时能减轻单独用药对肝脏的损伤。[结论]米非司酮在病毒复制早期发挥抗病毒作用,与氢醌的联用具有更好的抗病毒效果,既减轻氢醌对肝脏的损伤,又弥补米非司酮药效上的不足。

关键词：猪伪狂犬病毒米非司酮抗病毒氢醌协同效应

高效液相色谱-荧光检测法同时测定美白类化妆品中的α-熊果苷、β-熊果苷、脱氧熊果苷、氢醌和苯酚

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分析试验室 2023年第8期42卷 1056-1060页

作者：乔亚森袁莹莹董亚蕾黄传峰王海燕国家药品监督管理局化妆品研究与评价重点实验室中国食品药品检定研究院北京100050

建立了高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)同时测定美白类化妆品中α-熊果苷、 β-熊果苷、脱氧熊果苷、氢醌和苯酚等5种准用和禁用美白成分。以膏霜、乳液、面膜、啫喱和液体水基等样品为化妆品代表性基质考察了样品前处理条件。采用CA... 详细信息

建立了高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)同时测定美白类化妆品中α-熊果苷、 β-熊果苷、脱氧熊果苷、氢醌和苯酚等5种准用和禁用美白成分。以膏霜、乳液、面膜、啫喱和液体水基等样品为化妆品代表性基质考察了样品前处理条件。采用CAPCELL PAK ADME型色谱柱分离,荧光检测器检测。结果表明,α-熊果苷、 β-熊果苷在0.5~50 mg/L范围内线性关系良好,脱氧熊果苷、氢醌、苯酚的线性范围为0.1~10 mg/L。5种化合物在化妆品中低、中、高3个浓度水平的加标回收率范围为80.1%~117.3%,相对标准偏差(RSD)为0.40%~8.2%, α-熊果苷和β-熊果苷的方法检出限为2μg/g,脱氧熊果苷、氢醌和苯酚的方法检出限为0.2μg/g。

关键词：高效液相色谱-荧光检测法熊果苷脱氧熊果苷氢醌苯酚化妆品

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氢醌对L-02肝细胞自噬的影响

安徽医科大学学报 2022年第9期57卷 1425-1430页

作者：郑作兵张伟熊亮刘婷婷吴杨娜杨嘉辉胡恭华南昌大学公共卫生学院南昌330006 江西省预防医学重点实验室南昌330006 赣南医学院公共卫生与健康管理学院赣州341000

目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞自噬的影响。方法用不同浓度HQ(0、10、20、40和80μmol/L)处理L-02细胞24 h后,采用透射电镜观察自噬体形成;采用mCheery-GFP-LC3B融合蛋白示踪自噬体形成;采用Western blot实验检测自噬标志蛋白LC3、Bec... 详细信息

目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞自噬的影响。方法用不同浓度HQ(0、10、20、40和80μmol/L)处理L-02细胞24 h后,采用透射电镜观察自噬体形成;采用mCheery-GFP-LC3B融合蛋白示踪自噬体形成;采用Western blot实验检测自噬标志蛋白LC3、Beclin-1、P62的表达;采用免疫荧光实验检测自噬蛋白LC3、Beclin-1、P62的亚细胞定位及表达。结果透射电镜下,观察到HQ作用后L-02细胞自噬体和溶酶体增多。荧光显微镜下,GFP-LC3B点状黄色斑点数量随HQ剂量增加而增多,而红色片状斑点减少。Western blot结果显示,HQ提高L-02细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的比值水平,各处理组与对照组差异均有统计学意义(P0.05)。免疫荧光实验结果显示,LC3和Beclin-1在L-02细胞的胞核和胞质中均有表达,HQ对L-02细胞内LC3和Beclin-1的亚细胞定位未产生影响,而40、80μmol/L的HQ则可诱导L-02细胞内的P62由胞质向胞核转位。结论HQ诱导L-02细胞的自噬体增多,可能与其导致的自噬体清除障碍有关。

关键词：氢醌肝细胞自噬

氢醌诱导肝细胞自噬及其与DNA损伤应答的关系研究

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氢醌诱导肝细胞自噬及其与DNA损伤应答的关系研究

作者：郑作兵南昌大学

学位级别：硕士

目的:探讨氢醌对肝细胞自噬水平的影响,明确自噬在氢醌所致肝细胞DNA损伤应答（DNA Damage Response,DDR）中的作用及其机制;为深入阐明氢醌中毒的分子机制,寻找氢醌职业中毒的干预靶点提供新思路,并为建立机体对氢醌所致损伤的防御体... 详细信息

目的:探讨氢醌对肝细胞自噬水平的影响,明确自噬在氢醌所致肝细胞DNA损伤应答（DNA Damage Response,DDR）中的作用及其机制;为深入阐明氢醌中毒的分子机制,寻找氢醌职业中毒的干预靶点提供新思路,并为建立机体对氢醌所致损伤的防御体系提供科学的理论依据。方法:（1）氢醌作用下肝细胞的自噬状况分析:不同浓度HQ作用L02肝细胞24小时,采用透射电镜观察自噬体形成,m Cherry-GFP-LC3B融合蛋白示踪自噬体形成,Western blot实验检测自噬标志蛋白LC3、Beclin-1、P62的表达,免疫荧光实验检测自噬蛋白LC3、Beclin-1、P62的亚细胞定位及表达。（2）自噬对氢醌作用下肝细胞DDR的影响:自噬抑制剂或自噬诱导剂联合HQ作用肝细胞后,采用相差倒置显微镜观察细胞状态,检测细胞线粒体膜电位水平和ATP含量,采用流式细胞术检测细胞周期分布、凋亡水平,采用彗星实验检测细胞DNA损伤状况,Western blot实验检测DDR相关蛋白的表达,免疫荧光实验检测DDR相关蛋白的亚细胞定位及表达。结果:（1）氢醌作用下肝细胞的自噬状况分析:透射电镜下观察到HQ作用L02肝细胞后出现自噬样改变,自噬体和自噬溶酶体结构较对照组显著增多。m Cherry-GFP-LC3B实验结果显示,HQ组以剂量依赖性的方式增加了代表自噬体的黄色荧光斑点的数量,而代表自噬溶酶体的红色片状斑点有明显减少的趋势。Western blot结果显示,与对照组相比,HQ组提高了LC3II/LC3I的蛋白质表达水平;但对Beclin-1和P62蛋白表达无显著影响。免疫荧光结果显示,LC3蛋白在细胞核和细胞质中均有表达,主要分布于细胞核中,HQ处理后LC3在细胞核周围聚集,荧光强度均明显高于对照组;Beclin-1在细胞核和细胞质均有表达,HQ组Beclin-1的亚细胞定位及荧光强度与对照组无明显差异;在对照组和低剂量HQ组（10和20μmol/L）中,P62蛋白只在细胞质中表达,而在高剂量HQ组中,观察到P62蛋白在细胞质与细胞核中均有表达。（2）自噬对氢醌作用下肝细胞DDR的影响:单纯的自噬抑制剂或诱导剂对肝细胞形态学特征和细胞活力的影响不显著,自噬抑制或诱导下不增加HQ的细胞毒性。细胞凋亡检测结果显示,对照组、HQ组、3-MA组、3-MA+HQ组、Rapa组、Rapa+HQ组的细胞凋亡率分别为6.17%、19.70%、6.63%、12.20%、9.54%和19.2%。与对照组相比,HQ组、3-MA+HQ组、Rapa组、Rapa+HQ组的细胞凋亡率升高（P＜0.01）;3-MA+HQ组的细胞凋亡率明显低于HQ组（P＜0.05）。细胞周期检测结果显示,对照组、HQ组、3-MA组、3-MA+HQ组、Rapa组、Rapa+HQ组G1期细胞比例分别为83.3%、78.2%、76.7%、69.9%、82.1%和78.9%;S期细胞比例分别为9.9%、14.5%、15.1%、21.7%、10.6%和14.0%;G2期细胞比例分别为4.3%、4.8%、6.0%、6.8%、4.9%和5.0%。与对照组相比,HQ组、3-MA组、3-MA+HQ组和Rapa+HQ组G1期细胞比例降低（P＜0.05）;HQ组、3-MA组、3-MA+HQ组和Rapa+HQ组S期细胞比例增加（P＜0.05）;3-MA+HQ组G2期细胞比例增加（P＜0.05）。与HQ组相比,3-MA+HQ组的G1期细胞比例降低（P＜0.01）,G2期和S期细胞比例升高（P＜0.05）。细胞线粒体膜电位检测结果显示,对照组、HQ组、3-MA组、3-MA+HQ组、Rapa组、Rapa+HQ组线粒体膜电位水平分别为7.80、5.57、8.66、6.72、8.15、5.66。与对照组相比,HQ组、3-MA+HQ组和Rapa+HQ组线粒体膜电位下降（P＜0.01）;3-MA组线粒体膜电位升高（P＜0.05）。与HQ组相比,3-MA+HQ组线粒体膜电位升高（P＜0.01）。ATP检测结果显示,对照组、HQ组、3-MA组、3-MA+HQ组、Rapa组、Rapa+HQ组的细胞ATP含量依次为9.45、9.63、8.90、9.43、9.95和10.95μM/g蛋白,Rapa+HQ组的ATP含量高于对照组和HQ组（P＜0.05）。彗星实验结果显示,HQ组、3-MA+HQ组和Rapa+HQ组均能诱导肝细胞DNA损伤水平的增加,Rapa+HQ组较HQ组的DNA损伤水平降低（P＜0.01）。Western blot结果显示,与HQ组相比,3-MA+HQ组的p-DNA-PKcs、PARP1、Chk1、p-Chk2蛋白表达上调,但下调了Chk2和p-p53的表达;Rapa+HQ组的DNA-PKcs、p-DNA-PKcs、PARP1蛋白表达上调,但下调了p-p53、Chk1、p-Chk1和p-Chk2的表达。细胞免疫荧光

关键词：氢醌自噬 DNA损伤应答肝细胞

单乙酰氢醌对中波紫外线诱导小鼠尾部皮肤黑色素生成的影响及其机制研究

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临床皮肤科杂志 2023年第11期52卷 661-666页

作者：潘潇廖志锴董炳琦姚云竹雷铁池武汉大学人民医院皮肤科湖北武汉430060

目的:探讨单乙酰氢醌(4-AC)对中波紫外线(UVB)诱导小鼠尾部皮肤黑色素生成的影响及其相关机制。方法:对比观察含不同浓度氢醌(HQ)、熊果苷(Arb)和4-AC的乳膏制剂暴露于环境空气中14 d后乳膏颜色的变化。使用Dct-LacZ转基因小鼠,UVB照射... 详细信息

目的:探讨单乙酰氢醌(4-AC)对中波紫外线(UVB)诱导小鼠尾部皮肤黑色素生成的影响及其相关机制。方法:对比观察含不同浓度氢醌(HQ)、熊果苷(Arb)和4-AC的乳膏制剂暴露于环境空气中14 d后乳膏颜色的变化。使用Dct-LacZ转基因小鼠,UVB照射构建鼠尾皮肤色素沉着(以下简称色沉)模型后,将小鼠随机分为4组(每组5只):乳膏基质组(对照组)、2%HQ组、2%Arb组、2%4-AC组,每日涂药1次,共4周。采用Image J软件分析测定皮肤色沉斑的脱色效率、黑色素细胞(MC)数、多巴阳性MC数、表皮厚度以及黑色素颗粒数,以评估4-AC对鼠尾皮肤黑色素生成的影响。用含有HQ、Arb及4-AC的培养基处理体外培养的MNT-1人黑素瘤细胞48 h,测定酪氨酸酶(TYR)活性及黑色素含量的变化,并检测TYR基因与蛋白表达水平。结果:暴露于空气中14 d后,随着浓度升高,含HQ的乳膏制剂颜色逐渐变深至棕红色,而Arb组与4-AC组无明显变化。涂药4周后,与对照组相比,3种化合物处理组鼠尾色沉斑颜色均变淡,表皮多巴阳性MC数与黑色素颗粒数下降,但表皮MC数与对照组差异无统计学意义;与对照组相比,HQ组表皮增厚,Arb组及4-AC组表皮厚度与对照组比较差异无统计学意义。细胞实验结果表明4-AC可抑制TYR活性从而减少MNT-1细胞的黑色素生成,但对其TYR mRNA与蛋白的表达无影响。结论:4-AC具有较好的抗氧化变色能力和抗黑色素生成活性,能否成为HQ的替代化合物用于治疗黄褐斑等色素增加性皮肤病,有待临床进一步验证。

关键词：单乙酰氢醌氢醌黑色素皮肤脱色剂

米非司酮抗伪狂犬病毒的作用及其与氢醌的协同效应研究

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南京农业大学学报 2022年

作者：李紫彤赵晨遥朱慧欣蓝培如王先炜南京农业大学动物医学院/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

[目的]本文研究药物米非司酮抗PRV作用，以及与另一种抗PRV药物(氢醌)的协同作用，为抗PRV药物的研究和临床应用奠定基础。[方法]本研究用Western blot和qPCR等方法检测米非司酮以及与氢醌联合使用在体外对PRV复制的影响和产生影响的时... 详细信息

[目的]本文研究药物米非司酮抗PRV作用，以及与另一种抗PRV药物(氢醌)的协同作用，为抗PRV药物的研究和临床应用奠定基础。[方法]本研究用Western blot和qPCR等方法检测米非司酮以及与氢醌联合使用在体外对PRV复制的影响和产生影响的时间，并通过小鼠攻毒保护实验进一步确认了其抗病毒作用及与氢醌联合用药的协同作用。[结果]15 μmol L的米非司酮具有抗病毒作用，且随着药物浓度升高而增强，作用于PRV复制早期。体内外实验结果表明，米非司酮(体内5 μmol L，体外40 mg kg)单独或与氢醌(体内5 μmol L，体外50 mg kg)联合使用均具有抗病毒作用，且与氢醌具有协同抗病毒作用。[结论]米非司酮在病毒复制早期发挥抗病毒作用，且与氢醌的联合用药具有更好的抗病毒效果，既减轻氢醌对肝脏的损伤，又弥补米非司酮药效上的不足。

关键词：猪伪狂犬病毒米非司酮抗病毒氢醌协同效应

PARP-1通过p16参与氢醌诱导TK6恶性转化细胞周期信号的调控

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中国职业医学 2022年第2期49卷 126-132页

作者：邱伟峰陈林崔哲明杨慧罗皓李华文广东医科大学公共卫生学院东莞市环境医学重点实验室广东东莞523808

目的探讨聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP-1)和p16/视网膜母细胞瘤(Rb)信号通路在氢醌(HQ)诱导的TK6细胞中的表达及其相关调控机制。方法按照2×2析因设计模型,将TK6细胞按HQ染毒水平分为磷酸缓冲盐溶液(PBS)-TK6组和HQ-TK6组,再按照多... 详细信息

目的探讨聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP-1)和p16/视网膜母细胞瘤(Rb)信号通路在氢醌(HQ)诱导的TK6细胞中的表达及其相关调控机制。方法按照2×2析因设计模型,将TK6细胞按HQ染毒水平分为磷酸缓冲盐溶液(PBS)-TK6组和HQ-TK6组,再按照多柔比星(DOX)干预水平分为无DOX干预组和DOX干预组,共4组。PBS-TK6组细胞以PBS处理,HQ-TK6组细胞予终浓度为20.0μmol/L的HQ染毒处理;无DOX干预组细胞加入体积分数为0.05%的二甲基亚砜,DOX干预组细胞加入终浓度为0.5μmol/L的DOX。采用流式细胞术检测细胞周期分布情况,蛋白免疫印迹法检测p16/Rb信号通路p16、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、多功能蛋白E2转录因子1(E2F1)、Rb、p-Rb蛋白表达水平,免疫荧光和免疫共沉淀法检测p16核糖化水平。结果主效应分析结果显示,与PBS-TK6组比较,HQ-TK6组细胞G0/G1期细胞周期分布百分比和p16蛋白相对表达水平均下调(P值均<0.05),S期细胞周期分布百分比和cyclinD1、p-Rb蛋白相对表达水平均上升(P值均<0.05);与无DOX干预组比较,DOX干预组细胞在G0/G1期、G2/M期的细胞周期分布百分比和p16蛋白相对表达水平均上升(P值均<0.05),在S期细胞百分比和cyclinD1、p-Rb蛋白相对表达水平均下调(P值均<0.05)。交互效应分析结果显示,与PBS-TK6细胞无DOX干预组比较,PBS-TK6细胞DOX干预组中Rb和E2F1蛋白相对表达水平均下调(P值均<0.05),HQ-TK6细胞无DOX干预亚组的Rb蛋白相对表达水平均下调(P<0.05),E2F1蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与PBS-TK6细胞DOX干预组比较,HQ-TK6细胞DOX干预组的Rb蛋白相对表达水平下调(P<0.05),E2F1蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与HQ-TK6细胞无DOX干预组比较,HQ-TK6细胞DOX干预组的Rb蛋白相对表达水平上调(P<0.05),E2F1蛋白相对表达水平下调(P<0.05)。结论PARP-1可能通过调控p16/Rb信号通路参与TK6细胞的周期调控。

关键词：氢醌细胞周期聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1 p16 恶性转化

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介孔碳微球的氢醌改性及电容性能研究

无机材料学报 2018年第1期33卷 48-52页

作者：高秀丽王丹丹李硕邢伟阎子峰中国石油大学(华东)理学院青岛266580 中国石油大学(华东)化学工程学院国家重质油重点实验室青岛266580

由于纯碳材料单一的双电层储能机理,其比电容较低,而赝电容材料可利用法拉第反应进行能量存储,可以获得较高的比电容。作者利用软模板法制备出具有三维有序结构的介孔碳微球,然后采用水热法制备氢醌改性的介孔碳微球。循环伏安和恒流充... 详细信息

由于纯碳材料单一的双电层储能机理,其比电容较低,而赝电容材料可利用法拉第反应进行能量存储,可以获得较高的比电容。作者利用软模板法制备出具有三维有序结构的介孔碳微球,然后采用水热法制备氢醌改性的介孔碳微球。循环伏安和恒流充放电测试表明,氢醌改性使得介孔碳微球不仅具有双电层电容,而且具有赝电容。负载10wt%氢醌的介孔碳微球具有最大的比电容值,当电流密度为0.5 A/g时,其比电容值高达285 F/g;当电流密度增大到10 A/g时,其比电容值仍高达212 F/g,表现出优异的倍率特性。这主要归因于氢醌以π-π堆叠方式负载在碳质介孔表面,不仅提供了额外的赝电容,而且提高了碳材料在水系电解液中的倍率特性。

关键词：介孔碳氢醌赝电容超级电容器

二维柱切换高效液相色谱法测定美白类化妆品中氢醌和苯酚

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药物分析杂志 2022年第6期42卷 1065-1071页

作者：王珵王嘉庆张立雯广州市药品检验所广州510160

目的:建立二维柱切换高效液相色谱法测定化妆品中氢醌、苯酚的分析方法。方法:二维色谱柱均为C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),捕获柱为2条串联的C_(16)色谱柱(20 mm×4.0 mm,5μm),10 mmol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH3.5)... 详细信息

目的:建立二维柱切换高效液相色谱法测定化妆品中氢醌、苯酚的分析方法。方法:二维色谱柱均为C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),捕获柱为2条串联的C_(16)色谱柱(20 mm×4.0 mm,5μm),10 mmol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH3.5)-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长280 nm,进样量2μL。结果:氢醌和苯酚线性范围分别为5.570~111.5μg·mL^(-1)(r=0.9997)和5.410~108.1μg·mL^(-1)(r=0.9996),方法提取回收率分别为91.9%~92.6%和94.4%~94.7%,精密度试验的RSD分别为3.9%~4.1%和0.9%~2.1%,检测下限分别为0.70μg·g^(-1)和0.69μg·g^(-1)。市场随机抽取40批美白类化妆品样品(包含乳剂、霜剂、水剂等)均单次进样即可快速完成样品分析,无基质干扰。结论:本法测定美白类化妆品中氢醌、苯酚含量的专属性好,方法快速、准确,可用于复杂基质的美白类化妆品中氢醌、苯酚的测定。

关键词：氢醌苯酚二维高效液相色谱美白类化妆品分析方法