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利用骨髄重构模型以及李斯特菌感染模型研究Tespa1在T细胞中的功能

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利用骨髄重构模型以及李斯特菌感染模型研究Tespa1在T细胞中的功能

作者：蔡志斌厦门大学

学位级别：硕士

T细胞是机体后天免疫系统的重要成员,在抗感染免疫、抗肿瘤免疫和自身免疫病中均发挥重要作用。T细胞在胸腺中完成发育后进入外周免疫器官发挥作用,这背后涉及到一系列复杂的调控机制。厘清T细胞在发育过程中和在外周免疫器官发挥免疫... 详细信息

T细胞是机体后天免疫系统的重要成员,在抗感染免疫、抗肿瘤免疫和自身免疫病中均发挥重要作用。T细胞在胸腺中完成发育后进入外周免疫器官发挥作用,这背后涉及到一系列复杂的调控机制。厘清T细胞在发育过程中和在外周免疫器官发挥免疫反应中的分子机制,有助于我们为临床抗感染和肿瘤免疫治疗中提供新的免疫干预靶点。近年来陆续发现一些新的分子在胸腺T细胞发育中发挥重要作用,其中Tespal是最近新报道的一个对T细胞发育具有重要作用的基因。Tespal分子的缺失会导致T细胞在发育过程中无法进行阳性选择,从而影响T细胞的发育,但是Tespal分子中影响T细胞发育的关键结构域仍不清楚。我们利用骨髓重构模型验证了 Tespal缺失会导致T细胞发育出现缺陷。在骨髓造血干细胞中回补Tespal分子能够恢复胸腺T细胞发育和外周T细胞比例,我们同时对Tespal中的两个氨基酸位点(Phe187以及Phe188)进行突变,研究发现,Tespal分子突变后尽管在T细胞比例上未见明显差异,但是在胸腺和外周T细胞数量上明显降低,提示Tespal的Phe187以及Phel88位点可能会影响T细胞的发育。为了进一步研究Tespal分子在外周T细胞中的功能,我们使用李斯特菌感染Tespal缺失的小鼠。李斯特菌是一种腐生性的革兰氏阳性菌,主要以食物为传染媒介,是最致命的食源性病原体之一。由于该菌是一种细胞内寄生菌,宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能,所以李斯特菌可以用来作为研究抗原特异性记忆性CD8+T细胞反应的模式病原体。为了研究Tespal在宿主抵抗病原体感染过程中的作用,本文利用李斯特菌分别感染野生型小鼠和Tespal缺失的小鼠,分析了初次免疫应答过程中CD8+T细胞的活化,CD8+T细胞细胞因子的产生,以及抗原特异性CD8+T细胞的分化。结果显示,在小鼠感染李斯特菌之后,Tespal缺失会使淋巴结CD8+T细胞的活化明显增强,但未影响细胞因子的分泌和抗原特异性CD8+T细胞的形成,通过对小鼠细菌清除能力的检测发现,Tespal分子的缺失并未影响小鼠的细菌清除能力。所以Tespal缺失对李斯特菌感染的初次免疫应答的影响较小。综上所述,Tespal缺失会导致T细胞的发育出现缺陷。进一步的研究表明,其影响胸腺T细胞发育的主要功能位点可能是Phe187以及Phe188位点。在李斯特菌感染模型中,Tespal缺失能够增强CD8+T细胞的活化,但并未明显影响细胞因子分泌,抗原特异性CD8+T细胞的形成,和小鼠的病菌清除能力。

关键词： T细胞发育 Tespal 骨髓重构李斯特菌感染

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利用李斯特菌感染模型探究盲肠的生理意义

利用李斯特菌感染模型探究盲肠的生理意义

作者：师琦琳厦门大学

学位级别：硕士

盲肠是肠道中的一部分,对其生理病理功能研究甚少。之前的研究表明,小鼠尾静脉注射高剂量的TNF-α（坏死样凋亡关键分子）后,RIP3或MLKL基因敲除后可以明显的抑制小鼠的死亡。而野生小鼠的盲肠,最先被观察到了明显的器官坏死受损情况,... 详细信息

盲肠是肠道中的一部分,对其生理病理功能研究甚少。之前的研究表明,小鼠尾静脉注射高剂量的TNF-α（坏死样凋亡关键分子）后,RIP3或MLKL基因敲除后可以明显的抑制小鼠的死亡。而野生小鼠的盲肠,最先被观察到了明显的器官坏死受损情况,但其余肠组织观察不到明显的坏死现象。同时在人的阑尾炎样本中,磷酸化MLKL表达量都有显著升高。这些都表明盲肠是一个对于坏死样凋亡高度敏感的组织,但这种特性的具体生理意义尚未明了。坏死样凋亡通常被认为是与机体细胞抵御病原体密切相关,因此本实验将利用李斯特菌感染模型探究盲肠这种对坏死样凋亡高度敏感的特性是否在免疫反应中发挥保护作用。通过对李斯特菌感染野生型小鼠和盲肠切除小鼠后的T细胞分化和免疫效应分析,我们观察到盲肠在免疫反应中发挥一定的作用:在CD8+T细胞的活化过程中,不论是初次感染还是二次感染,盲肠切除小鼠与正常小鼠相比,两者并无显著差异。而在记忆CD8+T细胞的形成过程中,盲肠切除同样没有影响。但是在抗原特异性CD8+T细胞的分化中,盲肠切除小鼠的分化程度明显低于正常小鼠。同时,盲肠切除后的小鼠,其产生细胞因子的细胞比例有所下降。因此,盲肠不会影响记忆性T细胞的分化,但是会影响效应T细胞的分化和即时效应的应答。但随后的MLKL基因敲除小鼠的检测中,对于李斯特菌的免疫应答却没有发现任何的差异:MLKL敲除小鼠与野生型小鼠,无论是在CD8+T细胞的分化,还是在细胞因子产生方面,都没有很明显的差异。这些结果表明,盲肠确实对T细胞的免疫效应有一定的影响,但是并不依赖于细胞坏死样凋亡信号通路。而盲肠对坏死样凋亡高度敏感,以及它在免疫系统中的作用还需要进一步的实验来探究。

关键词：盲肠坏死样凋亡李斯特菌感染 T细胞分化

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李斯特菌感染对小鼠APC活性的影响

中国免疫学杂志 2001年第9期17卷 469-472页

作者：刘凤芝吕昌龙曹雅明孙黎光中国医科大学免疫学教研室沈阳110001 中国医科大学生物化学教研室沈阳110001

目的 :通过对转基因鼠脾T细胞的分化研究 ,探讨感染初期APC的活性。方法 :细胞因子ELISA测定转基因鼠脾T细胞产生的IFN γ及IL 4,FACS鉴定T细胞为TCR TG的T细胞 (Vβ8 2品系 )。结果 :感染鼠的APC诱导TG鼠的T细胞向Th1方向分化 ,未感... 详细信息

目的 :通过对转基因鼠脾T细胞的分化研究 ,探讨感染初期APC的活性。方法 :细胞因子ELISA测定转基因鼠脾T细胞产生的IFN γ及IL 4,FACS鉴定T细胞为TCR TG的T细胞 (Vβ8 2品系 )。结果 :感染鼠的APC诱导TG鼠的T细胞向Th1方向分化 ,未感染鼠的APC诱导TG鼠的T细胞向Th2方向分化 ,IL 12和IL 4可影响APC对T细胞分化的诱导。结论 :感染和外来细胞因子影响APC的提呈诱导活性。

关键词：转基因鼠细胞因子 APC T细胞李斯特菌感染

产单核细胞李斯特菌感染小鼠脾脏树突状细胞亚群和表型的变化

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蚌埠医学院学报 2013年第6期38卷 645-647,651页

作者：韦莉金齐力管俊昌孔晓明蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院检验科安徽蚌埠233040

目的:利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型,研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法:LM尾静脉感染BALB/c小鼠,感染后第3、5、7天取小鼠脾脏,平板稀释法进行脾脏细菌载量分析;流式细胞术检测脾脏DC亚群... 详细信息

目的:利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型,研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法:LM尾静脉感染BALB/c小鼠,感染后第3、5、7天取小鼠脾脏,平板稀释法进行脾脏细菌载量分析;流式细胞术检测脾脏DC亚群及DC相关表面分子CD80、CD86的表达情况。结果:感染小鼠脾脏细菌载量感染后第3天有高水平的菌落形成单位计数,随着时间的推移细菌的数量迅速降低,直到第7天基本被清除;CD11c+DC的数量在感染第5天高于对照组(P感染后第5天和第7天均高于对照组(P感染后第3、5和7天及CD4-CD8α-DC的数量在感染后的第3和第5天亦均高于对照组(P感染后,DC表面CD80和CD86的表达增加,均于感染后第3天和第5天显著高于对照组(P感染早期,小鼠脾脏DC亚群出现的增殖和成熟表型特征性分子表达上调,决定了其在细胞免疫应答活化中的作用地位。

关键词：李斯特菌感染产单核细胞树突状细胞免疫应答小鼠

ICP合并李斯特菌宫内感染致新生儿死亡1例

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巴楚医学 2020年第4期3卷 94-96页

作者：文丹丹罗飞芦伟儿科湖北宜昌443003 妇产科湖北宜昌443003

李斯特菌病是一种重要的食源性人兽共患疾病,与摄入单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)污染的食物有关。2017年3月本院发生1例妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)合并LM宫内感染引起新... 详细信息

李斯特菌病是一种重要的食源性人兽共患疾病,与摄入单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)污染的食物有关。2017年3月本院发生1例妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)合并LM宫内感染引起新生儿死亡的病例,现报道如下。

关键词：妊娠期肝内胆汁淤积症李斯特菌感染脓毒症胎儿疾病新生儿

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围产期李斯特菌感染4例临床病理分析和预示

世界感染杂志 2001年第5期1卷 431-432,F004页

作者：王进进沈月华王啸中福会国际和平妇幼保健院上海200030

目的：加强对围产期李斯特菌感染临床病理变化的认识。方法：报告4例围产期李斯特菌感染的临床症状及组织病理学特征。结果：产妇平均年龄29a，产前有发热现象，新生儿或胎儿出现肺炎，脑膜脑炎，胎盘发生羊膜绒毛膜炎，脐带炎，绒毛炎... 详细信息

目的：加强对围产期李斯特菌感染临床病理变化的认识。方法：报告4例围产期李斯特菌感染的临床症状及组织病理学特征。结果：产妇平均年龄29a，产前有发热现象，新生儿或胎儿出现肺炎，脑膜脑炎，胎盘发生羊膜绒毛膜炎，脐带炎，绒毛炎。结论：围产期李斯特菌感染极易导致围产儿死亡，因此早期诊断与治疗利于优生优育。

关键词：围产期李斯特菌感染病理学特征人兽共患性疾病临床特点

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新生儿李斯特菌感染15例临床探讨

中外医疗 2018年第3期37卷 84-85,88页

作者：潘冬妮解道敏云南省昭通市第一人民医院新生儿科云南昭通657000

目的探讨新生儿李斯特菌感染情况,为新生儿李斯特菌临床诊治提供借鉴参考。方法 2014年2月—2016年3月方便收集15例LM感染确诊患儿的临床资料,观察15例患儿发病月份分布情况,对早发型与晚发型患儿的围生期相关指标进行对比,开展血培养... 详细信息

目的探讨新生儿李斯特菌感染情况,为新生儿李斯特菌临床诊治提供借鉴参考。方法 2014年2月—2016年3月方便收集15例LM感染确诊患儿的临床资料,观察15例患儿发病月份分布情况,对早发型与晚发型患儿的围生期相关指标进行对比,开展血培养及药敏试验,总结LM对常用抗菌药物的耐药情况。结果 1月和11月无患儿发病,4~10月是LM感染的高发期,占全年发病的80.0%;早发型(n=13)和晚发型(n=2)患儿在发病时间及感染途径上差异有统计学意义(P感染,晚发型发病时间≥5 d,为生后感染;血培养及药敏试验结果显示对左氧氟沙星为100.0%耐药,对万古霉素、利福平、亚胺培南、美罗培南均为100.0%敏感。结论儿科医师应当加强围生期感染控制,完善血培养及药敏试验,合理选择抗菌药物治疗,提高新生儿LM感染防治水平。

关键词：新生儿李斯特菌感染临床特点

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围产期李斯特菌感染五例

中华围产医学杂志 2004年第1期7卷 63-64页

作者：施婴婴沈月华中国福利会国际和平妇幼保健院新生儿科上海200030

李斯特菌为革兰阳性杆菌,早在1926年国外已有人报道第1例人类单核细胞性李斯特菌(Listeria monocytogene,LM)感染,至1983年Schlech等报道,加拿大1981年发生的一次LM爆发流行的实验调查中,确是一种极有危害的食物中毒菌的认识,得到了进... 详细信息

李斯特菌为革兰阳性杆菌,早在1926年国外已有人报道第1例人类单核细胞性李斯特菌(Listeria monocytogene,LM)感染,至1983年Schlech等报道,加拿大1981年发生的一次LM爆发流行的实验调查中,确是一种极有危害的食物中毒菌的认识,得到了进一步的公认.而我院近几年来发生了5例围产儿LM感染,4例死亡,1例存活,现报道如下。

关键词：围产期李斯特菌感染围产儿食物中毒菌

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双胎妊娠合并李斯特菌感染1例并文献复习

医学信息 2010年第12期23卷 4818-4819页

作者：张洁文蔺莉首都医科大学附属北京友谊医院妇产科

李斯特菌是一类兼性细胞内生长的革兰阳性细菌。近年来,李斯特菌病已日益成为全球性疾病,引起了国际上的高度重视。普通人群的发病率报道不一,在0.1~1.1/10万[1],孕妇的发病率为12/10万,明显高于普通人群[2]。我院2000年1月~2010年7月... 详细信息

李斯特菌是一类兼性细胞内生长的革兰阳性细菌。近年来,李斯特菌病已日益成为全球性疾病,引起了国际上的高度重视。普通人群的发病率报道不一,在0.1~1.1/10万[1],孕妇的发病率为12/10万,明显高于普通人群[2]。我院2000年1月~2010年7月分娩总量为18511,仅发现1例妊娠合并李斯特菌感染。本文就我院收治的这例双胎妊娠合并李斯特菌感染结合文献复习讨论如下。

关键词：李斯特菌感染双胎妊娠单核细胞增生性李斯特菌文献复习