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超高效液相色谱串联质谱法检测人肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液中奈诺沙星浓度及临床应用

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中国感染与化疗杂志 2020年第2期20卷 146-152页

作者：赵锦锦徐晓勇朱勇俊陈志明范亚新胡佳丽毋海兰王雨李熠郭蓓宁张菁复旦大学附属华山医院抗生素研究所国家卫健委抗生素临床药理重点实验室国家老年疾病临床医学研究中心(华山)上海200040 复旦大学附属华山医院胸外科上海200040

目的建立一种快速、准确地检测人体肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液中奈诺沙星浓度的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,并将该方法应用于临床样品检测。方法色谱柱为ACE UltraCore 2.5 super C18(4.6 mm×50 mm,2.5μm),流动相... 详细信息

目的建立一种快速、准确地检测人体肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液中奈诺沙星浓度的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,并将该方法应用于临床样品检测。方法色谱柱为ACE UltraCore 2.5 super C18(4.6 mm×50 mm,2.5μm),流动相为0.3%甲酸水溶液-甲醇,采用电喷雾离子源、正离子多反应监测进行分析扫描。内标为苹果酸奈诺沙星-D3。样品经乙腈沉淀蛋白后离心,取上清液稀释后进样。方法学验证中用0.9%NaCl溶液作为替代基质代替支气管黏膜和支气管分泌液。利用经方法学验证过的检测方法进行组织穿透性研究样品的检测,通过肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液与血浆浓度的比值评价奈诺沙星的组织体液穿透性。结果该方法测定奈诺沙星在组织体液中的线性范围均为0.0200~10.0 mg/L,检测下限均为0.0200 mg/L。肺组织样品及替代基质样品的各质控浓度测定结果的批内和批间精密度均≤6.0%,准确度偏差均≤11.5%。肺组织内标归一化基质效应因子为96.5%~99.3%,变异系数均≤1.5%。0.9%NaCl溶液替代支气管黏膜及支气管分泌液的精密度和准确度偏差分别≤2.8%和≤10.3%。肺组织和替代基质中奈诺沙星的总体回收率分别为95.0%和102.8%,变异系数分别为1.0%和1.5%。肺组织穿透性研究结果显示5例需行肺叶切除术患者口服奈诺沙星500 mg,每日1次,连续服药(4±1)d后,体内药物分布达到稳态,肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液中浓度与血浆浓度比值分别为3.72~6.56、4.03~9.51、1.18~1.88。结论该研究建立了一种准确、方便检测人肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液中奈诺沙星浓度的UPLC-MS/MS法,其方法学验证结果均符合生物样品分析的要求。组织穿透性结果显示奈诺沙星在肺组织、支气管黏膜和支气管分泌液中穿透性良好。

关键词：奈诺沙星超高效液相色谱串联质谱肺组织支气管黏膜支气管分泌液穿透性

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支气管黏膜角化症一例并文献复习

中国医师杂志 2021年第6期23卷 908-910页

作者：朱爱芳张先明贵州医科大学贵阳550004 贵州医科大学附属医院呼吸与危重症医学科贵阳550004

目的通过支气管黏膜角化症病例报道及相关文献复习探讨该病的临床特点及治疗,提高临床医师对该病的诊疗水平。方法该患者为70岁男性,于2019年4月17日收治入院,主要临床表现为胸痛,气促;增强胸部CT示双肺小结节灶,双肺多发纤维化灶及钙化... 详细信息

目的通过支气管黏膜角化症病例报道及相关文献复习探讨该病的临床特点及治疗,提高临床医师对该病的诊疗水平。方法该患者为70岁男性,于2019年4月17日收治入院,主要临床表现为胸痛,气促;增强胸部CT示双肺小结节灶,双肺多发纤维化灶及钙化灶;纤维支气管镜下可见气管全程广泛黏膜糜烂,左右支气管近端可见黄白色颗粒样隆起,并干酪样坏死物附着;支气管镜下病理示:支气管黏膜可见较多渗出物及骨化,并可见角化过度伴鳞状上皮化生;符合支气管黏膜角化症的诊断。结果根据药敏试验结果给予头孢他啶抗感染,布地奈德联合异丙托溴铵雾化吸入止咳化痰及沙丁胺醇舒张支气管等对症支持治疗,患者症状明显好转出院。随访10个月,患者偶有气促,不影响日常生活和工作。结论支气管黏膜角化症为少见病,且临床表现缺乏特异性,目前诊断主要依靠纤维支气管镜及病理诊断,予以抗感染、舒张支气管等治疗,取得较好疗效。

关键词：角化病支气管黏膜支气管镜检查

支气管肺泡灌洗术联合谷氨酰胺治疗对难治性肺炎支原体肺炎患儿支气管黏膜和胃肠功能的影响

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感染．炎症．修复 2022年第3期23卷 154-157页

作者：邓德凤徐军茹开封市儿童医院儿内科河南开封475000

目的:探讨支气管肺泡灌洗术(BAL)与谷氨酰胺联合治疗儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)对支气管黏膜修复和胃肠功能障碍恢复的影响。方法:97例RMPP患儿随机分为2组。对照组48例给予常规治疗及用纤维支气管镜行BAL治疗;在此基础上,观察组4... 详细信息

目的:探讨支气管肺泡灌洗术(BAL)与谷氨酰胺联合治疗儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)对支气管黏膜修复和胃肠功能障碍恢复的影响。方法:97例RMPP患儿随机分为2组。对照组48例给予常规治疗及用纤维支气管镜行BAL治疗;在此基础上,观察组49例加用谷氨酰胺颗粒口服。比较两组患儿治疗前及治疗7d支气管黏膜损伤修复率、肠黏膜屏障功能指标血浆D-乳酸和二胺氧化酶(DAO)水平以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和血清C反应蛋白(CRP)等炎症指标水平的变化,以及治疗15 d内胃肠功能障碍发生率,并观察不良反应。结果:治疗后观察组支气管黏膜损伤修复率显著高于对照组(77.55%比54.17%),胃肠功能障碍发生率(4.08%比22.92%)、D-乳酸[(5.37±0.19)mg/L比(7.56±0.23)mg/L]、DAO[(3.19±0.31)g/L比(5.11±0.28)g/L]、CRP[(10.18±2.35)ng/L比(17.49±4.33)ng/L]、TNF-α[(79.62±14.30)ng/L比(108.69±20.44)ng/L]、IL-6[(102.35±14.71)ng/L比(152.66±19.73)ng/L]水平显著低于对照组(P0.05)。结论:BAL联合谷氨酰胺治疗儿童RMPP,患儿肠黏膜屏障功能较未用谷氨酰胺治疗的患儿得到更有效的改善,炎症因子水平下降更明显,支气管黏膜损伤修复率提高,且安全性较高。

关键词：肺炎支原体肺炎难治性纤维支气管镜支气管肺泡灌洗谷氨酰胺支气管黏膜胃肠功能炎症反应

慢性阻塞性肺疾病患者支气管黏膜活检标本中HO-1和iNOS的表达

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中国老年学杂志 2011年第14期31卷 2616-2618页

作者：李巧荣吴大玮杨蕾韩进山东大学齐鲁医院加强医疗科山东济南250012 山东省胸科医院呼吸科烟台市烟台山医院呼吸科

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管黏膜血红素氧化酶-1(HO-1)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及其与肺功能的关系。方法 28例因肺癌行支气管镜检查的患者,根据是否吸烟及肺功能检查分为三组:(1)吸烟伴COPD组9例;(2)吸烟肺功... 详细信息

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管黏膜血红素氧化酶-1(HO-1)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及其与肺功能的关系。方法 28例因肺癌行支气管镜检查的患者,根据是否吸烟及肺功能检查分为三组:(1)吸烟伴COPD组9例;(2)吸烟肺功能正常组9例;(3)不吸烟肺功能正常组10例,经电子支气管镜钳取支气管黏膜,用免疫组化法检测支气管黏膜中HO-1和iNOS的表达,并与肺功能结果进行相关性分析。结果吸烟伴COPD组支气管黏膜中HO-1和iNOS的表达(0.156±0.036,0.188±0.030)较不吸烟肺功能正常组(0.094±0.043,0.159±0.034)明显增强,差异有统计学意义(P0.05)。气管黏膜中HO-1和iNOS的表达无相关性(r=0.046,P>0.05)。气管黏膜中HO-1的表达与FEV1呈负相关(r=-0.558,P气管黏膜中HO-1和iNOS的表达增强,并且与FEV1呈负相关。

关键词：慢性阻塞性肺疾病支气管黏膜血红素氧化酶-1 诱生型一氧化氮合酶免疫组织化学

儿童反复呼吸道感染的支气管黏膜免疫和气道高反应性变化

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临床儿科杂志 2011年第1期29卷 22-25页

作者：吴小川周杜鹃中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室湖南长沙410011

反复呼吸道感染(recurrent respiration tract infection,RRTI)是儿童常见的呼吸道疾病,常见的原因有免疫功能低下、先天畸形、营养物质缺乏、慢性疾病以及感染疾病治疗不彻底等。RRTI与呼吸道黏膜免疫改变、气道高反应性及过敏有关。

关键词：反复呼吸道感染支气管黏膜免疫气道高反应性

Galectin-7在哮喘儿童支气管黏膜中的表达及对支气管上皮细胞凋亡的影响

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现代生物医学进展 2017年第22期17卷 4239-4242,4288页

作者：薛峥峰赵力芳马甜李元霞庞随军谢坤霞延安大学附属医院儿科一病区陕西延安716000 延安大学附属医院眼科陕西延安716000 延安大学附属医院儿科二病区陕西延安716000

目的:探讨半乳糖凝集素-7(Galectin-7)在哮喘儿童支气管黏膜中的表达及对支气管上皮细胞凋亡的影响。方法:收集哮喘儿童支气管黏膜及支气管扩张非哮喘儿童支气管黏膜,Western blot检测其Galectin-7的表达。体外培养人支气管上皮细胞,分... 详细信息

目的:探讨半乳糖凝集素-7(Galectin-7)在哮喘儿童支气管黏膜中的表达及对支气管上皮细胞凋亡的影响。方法:收集哮喘儿童支气管黏膜及支气管扩张非哮喘儿童支气管黏膜,Western blot检测其Galectin-7的表达。体外培养人支气管上皮细胞,分为正常组、对照组、感染组和实验组,正常组用正常的人支气管上皮细胞,对照组细胞用转染siRNA control后的人支气管上皮细胞,感染组细胞用RSV感染后的人支气管上皮细胞,实验组细胞为RSV感染后并转染siRNA Galectin-7的人支气管上皮细胞。培养24 h后,检测各组细胞中Galectin-7蛋白表达,并采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、STAT3、p-STAT3蛋白的表达。结果:哮喘儿童支气管黏膜中Galectin-7的表达明显高于非哮喘儿童支气管黏膜组织(P0.05),感染组Galectin-7、Bax表达和细胞凋亡率均明显高于正常组,而Bcl-2、p-STAT3的表达均明显低于正常组(P支气管黏膜中表达上调,可能通过活化STAT3,促进支气管上皮细胞凋亡。

关键词：哮喘支气管黏膜凋亡 Galectin-7

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支气管黏膜受累结节病临床特征分析

中华实用诊断与治疗杂志 2010年第5期24卷 467-468页

作者：丁新民冯华松周筠宁浩勇彭朝胜孟激光聂舟山段蕴铀中国人民解放军海军总医院呼吸内科北京市100037

目的:了解结节病支气管黏膜受累的临床特点。方法:回顾性分析26例经支气管镜下支气管黏膜活检阳性患者的临床资料。结果:因呼吸系统症状就诊者22例(84.6%),因肺外症状就诊者3例(11.5%),存在胸腔外器官受累9例。有咳嗽症状者24例(92.3%)... 详细信息

目的:了解结节病支气管黏膜受累的临床特点。方法:回顾性分析26例经支气管镜下支气管黏膜活检阳性患者的临床资料。结果:因呼吸系统症状就诊者22例(84.6%),因肺外症状就诊者3例(11.5%),存在胸腔外器官受累9例。有咳嗽症状者24例(92.3%),临床分期21例为Ⅱ期(80.8%)。接受药物治疗22例(84.6%)。结论:支气管黏膜受累结节病临床分期以Ⅱ期多见,多数因出现临床症状需接受药物治疗。

关键词：结节病支气管黏膜临床表现

糖皮质激素抵抗性哮喘患者支气管黏膜中Raf-1、Mek1/2、Erk1/2的表达及临床意义

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海南医学 2019年第19期30卷 2479-2482页

作者：张军营陈洋商洛市中心医院呼吸内科

目的分析糖皮质激素抵抗性哮喘患者支气管黏膜中Raf-1、Mek1/2、Erk1/2的表达水平,探讨其对糖皮质激素抵抗性哮喘的预测和诊治的意义。方法选取2015年1月至2018年1月在商洛市中心医院呼吸内科治疗的糖皮质激素抵抗性哮喘50例作为研究组... 详细信息

目的分析糖皮质激素抵抗性哮喘患者支气管黏膜中Raf-1、Mek1/2、Erk1/2的表达水平,探讨其对糖皮质激素抵抗性哮喘的预测和诊治的意义。方法选取2015年1月至2018年1月在商洛市中心医院呼吸内科治疗的糖皮质激素抵抗性哮喘50例作为研究组,另选取同期健康体检人员50例为对照组,利用肺功能测试仪检测两组受试者第1秒最大肺活量(FEV1)、最大呼吸气流速(PEF)、最大通气量(MVV),采用蛋白免疫印迹法(WB)检测Raf-1、Mek1/2及Erk1/2在两组支气管黏膜中的表达情况,利用ROC曲线分析Raf-1、Mek1/2和Erk1/2对糖皮质激素抵抗性哮喘的诊断价值,并采用非条件Logistic多元回归分析法分析影响糖皮质激素抵抗性哮喘发生的危险因素。结果研究组患者FEV1、PEF和MVV分别为(1.23±0.18)L、(3.15±0.42)L/s、(46.05±9.29)L/min,均明显低于对照组的(1.52±0.41)L、(5.72±1.69)L/s、(59.27±14.16)L/min,差异均有统计学意义(P支气管黏膜中的Raf-1、Mek1/2和Erk1/2表达量分别为0.87±0.07、0.65±0.16和0.69±0.12,均明显高于对照组的0.45±0.08、0.37±0.05、0.34±0.04,差异均有统计学意义(P支气管黏膜中Raf-1、Mek1/2、Erk1/2呈异常高表达,Raf-1可以作为糖皮质激素抵抗性哮喘的判断指标,为临床上预测及诊治提供一定的参考依据。

关键词：糖皮质激素抵抗性哮喘支气管黏膜 Raf-1 Mek1/2 Erk1/2

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咳嗽、咳痰,支气管黏膜颗粒状突起

临床肺科杂志 2017年第8期22卷 1515-1518,1530页

作者：孙俊生卓宋明古志球深圳市龙岗中心医院呼吸内科广东深圳518116

临床病例患者,男,31岁,以＂咳嗽、咳痰、气喘8月,再发并加重15天.＂主诉入院.患者于8月前无明显诱因出现咳嗽、咳黄脓痰,咳嗽剧烈时伴有气喘,未闻及＂喘鸣音＂,伴流涕,有时为黄脓涕,无头痛、呕吐、发热等,间断予抗炎止咳等治疗,症状时... 详细信息

临床病例患者,男,31岁,以＂咳嗽、咳痰、气喘8月,再发并加重15天.＂主诉入院.患者于8月前无明显诱因出现咳嗽、咳黄脓痰,咳嗽剧烈时伴有气喘,未闻及＂喘鸣音＂,伴流涕,有时为黄脓涕,无头痛、呕吐、发热等,间断予抗炎止咳等治疗,症状时轻时重.15天前患者咳嗽、咳痰加重,伴双侧以耳垂为中心的肿胀及疼痛,当地医院痰培养示＂肺炎克雷伯杆菌＂,按＂支气管哮喘并感染、双侧复发性化脓性腮腺炎＂,先后予哌拉西林他唑巴坦、左氧氟沙星、头孢哌酮舒巴坦、阿奇霉素等无显效,今来我院求治.近期体重无明显减轻. 既往史无特殊,成年结婚,育有一子,家族中无遗传病史.

关键词：支气管黏膜咳嗽咳痰颗粒状哌拉西林他唑巴坦肺炎克雷伯杆菌头孢哌酮舒巴坦化脓性腮腺炎