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地衣芽孢杆菌复合桑叶提取物对虾夷扇贝的益生作用

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水产科学 2023年第5期42卷 813-820页

作者：米锐关晓燕王庆志蒋经伟李华琳姜苹哲徐永平李淑英周遵春辽宁省海洋水产科学研究院辽宁大连116023 大连赛姆生物工程技术有限公司博士后工作站辽宁大连116620 辽宁省噬菌体应用工程技术研究中心辽宁大连116620

为探明地衣芽孢杆菌复合桑叶提取物对虾夷扇贝的益生作用,试验共设4个投喂组:对照组中虾夷扇贝投喂基础饲料,地衣芽孢杆菌添加组中投喂添加地衣芽孢杆菌的基础饲料,桑叶添加组中投喂添加桑叶提取物的基础饲料,联合添加组中投喂同时添加... 详细信息

为探明地衣芽孢杆菌复合桑叶提取物对虾夷扇贝的益生作用,试验共设4个投喂组:对照组中虾夷扇贝投喂基础饲料,地衣芽孢杆菌添加组中投喂添加地衣芽孢杆菌的基础饲料,桑叶添加组中投喂添加桑叶提取物的基础饲料,联合添加组中投喂同时添加地衣芽孢杆菌、桑叶提取物2种物质的基础饲料。投喂试验共持续30 d,每10 d取样测定虾夷扇贝的消化酶和免疫酶活性。投喂试验结束后,通过注射哈维氏弧菌的方式对各组虾夷扇贝进行攻毒试验。投喂试验结果显示,联合添加组虾夷扇贝的消化酶及免疫酶活性最高,而对照组最低。表明联合添加组虾夷扇贝的消化能力、磷酸酶响应能力以及抗氧化能力明显高于其他处理组。攻毒试验结果显示:联合添加组虾夷扇贝的累积死亡率最低,对照组虾夷扇贝的累积死亡率最高,地衣芽孢杆菌添加组和桑叶添加组虾夷扇贝的累积死亡率差异不显著;联合添加组虾夷扇贝消化道中弧菌最少,对照组虾夷扇贝消化道中弧菌最多,联合添加组虾夷扇贝对弧菌的抑制效果更明显。试验结果表明,地衣芽孢杆菌与桑叶提取物联合施用时协同增效,对虾夷扇贝的益生作用更明显。

关键词：虾夷扇贝地衣芽孢杆菌桑叶提取物消化酶免疫酶抗病能力

基于SCoT分子标记的黄河鲤抗嗜水气单胞菌不同群体遗传多样性分析

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南方农业学报 2022年第10期53卷 2748-2755页

作者：张岚姜淑泓陈玉函常乐管俊翔林强于淼乔志刚王磊河南师范大学水产学院/河南省水产动物养殖工程技术研究中心/水产动物疾病控制河南省工程实验室河南新乡453007 中国水产科学研究院珠江水产研究所广东广州510380

【目的】基于SCoT分子标记探讨黄河鲤遗传多样性与其抗嗜水气单胞菌能力的关系,为黄河鲤的抗病育种提供理论依据。【方法】通过腹腔注射对300尾黄河鲤进行人工感染嗜水气单胞菌,按死亡顺序分为最先死亡群体(FP)、最后死亡群体(LP)和存... 详细信息

【目的】基于SCoT分子标记探讨黄河鲤遗传多样性与其抗嗜水气单胞菌能力的关系,为黄河鲤的抗病育种提供理论依据。【方法】通过腹腔注射对300尾黄河鲤进行人工感染嗜水气单胞菌,按死亡顺序分为最先死亡群体(FP)、最后死亡群体(LP)和存活群体(SP),每个群体选取30尾。从80条SCoT引物中筛选出多态性好、重复性高、条带清晰的引物,对3个黄河鲤群体进行多态性扩增,采用PopGene32和Arlequin 3.5计算3个群体的等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei’s基因多样性指数(H)及Shannon’s信息指数(I)等遗传参数,基于Nei’s遗传距离(Ds)利用MEGA 7.0中的非加权组平均法(UPGMA)构建系统发育进化树,并以Structure 2.3进行群体间的遗传结构分析。【结果】黄河鲤感染嗜水气单胞菌的死亡率为40.0%。从80条SCoT引物中筛选出18条扩增条带清晰、多态性好的引物,从3个黄河鲤群体中共扩增出103条条带,其中多态性条带97条,占94.17%。3个黄河鲤群体的Na范围为1.7961~1.8155,Ne范围为1.3828~1.4029,H范围为0.2258~0.2467,I范围为0.3453~0.3804;群体间的遗传分化指数(Gst)为0.0972,即90.28%的遗传多样性分布在群体内部。3个黄河鲤群体的遗传分化指数(Fst)为0.1299,属于轻度遗传分化;群体间的Ds分布在0.0248~0.0835,其中FP群体与SP群体的遗传距离最大。基于Ds的UPGMA聚类分析结果显示,FP群体和LP群体聚为一支,SP群体单独聚为一支;遗传结构分析结果表明,3个黄河鲤群体可分为2个亚群[抗病群体(SP)和易感群体(FP和LP)]。可见,通过黄河鲤死亡时间划分的群体与通过聚类分析及遗传结构分析得出的群体基本一致。【结论】黄河鲤抗嗜水气单胞菌的能力随着群体遗传多样性的增大而增强。因此,在黄河鲤抗病品种(系)选育过程中应保证足够的群体数量,在提高生长、营养等经济性状的同时保证一定的基因杂合度。

关键词：黄河鲤嗜水气单胞菌 ScoT分子标记遗传多样性抗病能力

喷施BABA调控枸杞活性氧代谢提高果实采后抗病能力

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北方园艺 2023年第13期 112-120页

作者：冯丽丹李捷何静李永晖张煦刘祥林甘肃农业大学食品科学与工程学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学林学院甘肃兰州730070 甘肃省枸杞无害化栽培工程研究中心甘肃兰州730070

以六年生枸杞‘宁杞7号’植株为试材,采用叶面喷施β氨基丁酸(BABA)的方法,研究了BABA对枸杞果实失重率、自然发病率、MDA含量、主要活性氧、抗氧化酶和抗氧化物质的影响,以期为增强枸杞鲜果采后抗病能力,减少果实的腐烂,延长保鲜时... 详细信息

以六年生枸杞‘宁杞7号’植株为试材,采用叶面喷施β氨基丁酸(BABA)的方法,研究了BABA对枸杞果实失重率、自然发病率、MDA含量、主要活性氧、抗氧化酶和抗氧化物质的影响,以期为增强枸杞鲜果采后抗病能力,减少果实的腐烂,延长保鲜时间提供参考依据。结果表明:采前叶面喷施1.0 mg·m^(-1)BABA诱导21 d后,可明显降低采后枸杞果实的失重率和自然腐烂率;抑制果实中超氧阴离子(O·_(2)^(-))和过氧化氢(H_(2)O_(2))的产生,显著提升超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性;提升抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环中抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)的活性,提高抗坏血酸(AsA)和脱氧抗坏血酸还原酶(DHA)等非酶促抗氧化剂的含量,降低丙二醛(MDA)含量。在枸杞第1茬坐果后开始施用1 mg·mL^(-1)BABA,每7 d施用1次,可通过激活枸杞果实抗氧化酶活性,提升非酶促抗氧化剂的含量,将果实氧化程度控制在较低水平,有效减少果实的腐烂,延长保鲜时间。

关键词： β-氨基丁酸枸杞抗病能力活性氧抗氧化

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民猪肠道微生物功能发掘与利用研究进展

饲料工业 2023年第11期44卷 1-7页

作者：石宝明钊阳孙国栋东北农业大学动物科学技术学院

民猪是我国东北地区重要的地方猪种，具有抗病性强、耐寒、抗逆性强等优良特性。民猪独特的肠道微生物群组成与民猪的优良特性紧密相关。将民猪母体粪便微生物移植给受体大白猪仔猪，能够提高其哺乳期免疫球蛋白水平和断奶后小肠黏膜中... 详细信息

民猪是我国东北地区重要的地方猪种，具有抗病性强、耐寒、抗逆性强等优良特性。民猪独特的肠道微生物群组成与民猪的优良特性紧密相关。将民猪母体粪便微生物移植给受体大白猪仔猪，能够提高其哺乳期免疫球蛋白水平和断奶后小肠黏膜中的抗菌肽水平。利用葡聚糖硫酸钠盐（DSS）和脂多糖（LPS）诱导的仔猪炎症模型证明了民猪微生物具有独特的抗炎特性。在慢性冷应激期间，民猪肠道微生物群的响应以及微生物群与肠道黏膜免疫的互作可能是民猪具有较强抗寒能力的原因之一。从民猪肠道微生物群中得到的枯草芽孢杆菌MZ-01、暹罗芽孢杆菌MZ16和贝莱斯芽孢杆菌三种菌株均具有很强的抑菌活性和应用价值。以上表明民猪肠道独特微生物菌群和代谢产物具有十分重要的发掘和利用价值。

关键词：民猪肠道微生物抗病能力抗寒能力生物饲料

枯草芽孢杆菌抗菌活性物质及其对水产动物抗病力影响的研究进展

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饲料研究 2022年第22期45卷 125-128页

作者：卢昱茜万继武王博汪惠庆刘佳李月红吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林省卫生监测检验中心吉林长春130062 吉林省水产技术推广总站吉林长春130000

枯草芽孢杆菌具有良好的抗菌能力,是目前使用最普遍的饲用益生菌之一。由枯草芽孢杆菌所产生的抗菌活性物质包括由核糖体合成的抗菌蛋白以及由非核糖体合成的脂肽类化合物。这两大类抗菌活性物质均可以提高水生动物的抗病能力。文章综... 详细信息

枯草芽孢杆菌具有良好的抗菌能力,是目前使用最普遍的饲用益生菌之一。由枯草芽孢杆菌所产生的抗菌活性物质包括由核糖体合成的抗菌蛋白以及由非核糖体合成的脂肽类化合物。这两大类抗菌活性物质均可以提高水生动物的抗病能力。文章综述枯草芽孢杆菌抗菌活性物质及其对水产动物抗病力的具体作用机制,以期为枯草芽孢杆菌在水产养殖中的进一步应用提供参考。

关键词：枯草芽孢杆菌抗菌活性物质抗病能力水产动物

乳酸乳球菌Q-9胞外多糖对鲤先天免疫应答、抗氧化活性和抗病性能的影响

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水产学报 2020年第9期44卷 1477-1487页

作者：冯军厂蔡忠良陈永艳常绪路刘慧芬赵燕静张建新河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心水产动物疾病控制河南省工程实验室

为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响,实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养,检测头肾细... 详细信息

为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响,实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养,检测头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,以及孵育液中一氧化氮(NO)和细胞因子的合成量。将300尾健康鲤[(47.66±0.43) g]随机分为5组,对照组(阴性和阳性)灌喂无菌的磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline, PBS),处理组分别灌喂不同浓度的EPS-9 (250、500和1 000μg/mL),1次/天,连续处理7 d后取血液和肝胰腺组织。随后,阳性组和处理组腹腔注射嗜水气单胞菌,阴性组用无菌PBS处理,感染24 h后取血液和肝胰腺组织。分别检测血清中NO和细胞因子的合成量,及溶菌酶(LZM)和碱性磷酸酶(AKP)的活性;肝胰腺组织中的抗氧化(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px和MDA)指标。体外结果显示,EPS-9能显著增强鲤头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,并提高NO、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的合成量。体内结果显示,与阴性对照组相比,EPS-9灌喂处理能显著上调血清中NO和促炎细胞因子的合成量,LZM和AKP活性,以及肝胰腺的抗氧化水平。嗜水气单胞菌感染后,NO、促炎细胞因子的合成量及LZM、AKP的活性均显著低于阳性对照组。但无论感染与否,EPS-9处理组血清中抗炎细胞因子的合成量均显著升高。研究表明,EPS-9在体内和体外均具备提高鲤的非特异性免疫、抗氧化活性和抗病原菌感染的能力,可作为一种安全有效的添加剂应用于水产养殖。

关键词：鲤乳酸菌胞外多糖免疫应答抗氧化活性抗病能力

基于单类T细胞转录组挖掘猪CD4/CD8互斥分化的关键枢纽基因

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基于单类T细胞转录组挖掘猪CD4/CD8互斥分化的关键枢纽基因

作者：张伟华中农业大学

学位级别：硕士

猪疾病问题一直是困扰养猪企业的关键性问题,从遗传上提高猪群的抗病能力已成为了当代育种的重要工作之一。抗病能力往往与自身免疫能力密切相关。T淋巴细胞作为免疫系统的重要组分,其在抵抗疾病方面具有关键作用。因此,从遗传上研究猪... 详细信息

猪疾病问题一直是困扰养猪企业的关键性问题,从遗传上提高猪群的抗病能力已成为了当代育种的重要工作之一。抗病能力往往与自身免疫能力密切相关。T淋巴细胞作为免疫系统的重要组分,其在抵抗疾病方面具有关键作用。因此,从遗传上研究猪T淋巴细胞的产生机理对于间接性提高猪群抗病能力具有重大意义。然而,目前关于猪T淋巴细胞的研究还很少,特别是从全基因组层面去解析猪T淋巴细胞分化发育过程的研究更是少之又少。因此,本研究通过采集仔猪胸腺和肠系膜淋巴结并制成白细胞悬浮液,以CD3、CD4和CD8为抗体标记,结合流式细胞术分选出胸腺的CD4CD8、CD4CD8、CD4、CD84类T细胞亚型,以及肠系膜淋巴结的CD4CD8、CD4、CD83类T细胞亚型,然后对这7类T细胞亚型进行转录组测序,并通过将比较转录组与权重基因共表达网络分析(weighted correlation network analysis,WGCNA)方法结合起来对其进行分析,挖掘影响猪T淋巴细胞互斥分化的关键枢纽基因(Key hub gene)及其表达变化规律。本研究所获的主要结果如下:(1)流式细胞术和转录组测序获得了7类T细胞亚型的21个样本转录组数据。(2)按T细胞互斥分化路线对21个样本进行成对差异表达分析,共获得5403个差异表达基因;结合WGCNA方法挖掘到了各类T细胞亚型对应的7个主要模块;模块基因GO富集分析结果发现大部分基因主要与免疫调控及T细胞分化过程相关;模块基因PPI(蛋白互作)网络分析结果发现大多数基因具备翻译成蛋白的功能,且蛋白之间存在明显互作关系。(3)通过对各个主要模块的内部基因进行相关性分析,初步挖掘到了各类T细胞亚型的Hub gene;对Hub gene进行网络构建,发现Hub gene之间高度紧密连接。(4)利用cytoHubba软件的7种网络拓扑分析算法筛选到了各T细胞亚型的关键Hub gene,并对关键Hub gene进行网络重构,发现关键Hub gene具有相似的调控模式,即关键Hub gene之间既存在调控,同时又调控着其他Hub gene;此外,关键Hub gene与人和小鼠T细胞互斥分化相关的的重要转录因子进行overlap,发现存在明显差异,表明猪T细胞互斥分化过程存在一套异于人和小鼠的基因调控模式。(5)关键Hub gene表达模式分析和ROC曲线分析发现CDK6、BIRC5、BBS12、ST6GAL1、PNPLA7、KCNAB3、ZFP82基因只在其对应的特定T细胞亚型中高表达,表明关键Hub gene可能决定着各类T细胞亚型的分化方向,可作为对应T细胞亚型的潜在候选标记基因。基于上述研究结果,本研究初步推断了猪T细胞互斥分化通路及其基因表达变化规律:即当某一时期的T细胞亚型开始分化时,决定新状态的关键Hub gene会开启或高表达,同时,决定原状态的关键Hub gene会关闭或低表达。本研究不仅加深了对猪T细胞互斥分化机制的分子认知,而且为猪抗病育种提供了一定的候选基因信息。

关键词：猪 T淋巴细胞抗病能力互斥分化胸腺基因组枢纽基因

幼虫密度对粘虫抵抗苏云金芽孢杆菌和球孢白僵菌侵染能力的影响

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应用昆虫学报 2020年第6期57卷 1411-1416页

作者：孔海龙袁琳董传磊郑敏圆荆王辉田振侯秋莉扬州大学园艺与植物保护学院扬州225009

【目的】明确粘虫Mythimna separata幼虫不同密度下抗病能力的变化规律。【方法】在室内条件下,采用叶片药膜法与浸虫法,对不同密度(1、2、5、10、30头/瓶(650 mL))饲养的粘虫幼虫抵抗苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)和球孢... 详细信息

【目的】明确粘虫Mythimna separata幼虫不同密度下抗病能力的变化规律。【方法】在室内条件下,采用叶片药膜法与浸虫法,对不同密度(1、2、5、10、30头/瓶(650 mL))饲养的粘虫幼虫抵抗苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)和球孢白僵菌(Beauveria bassiana)侵染的能力进行研究。【结果】不同粘虫幼虫密度对接种苏云金芽孢杆菌及球孢白僵菌后幼虫的存活率和存活时间影响显著。随着幼虫密度的增加,苏云金芽胞杆菌侵染的幼虫存活率明显升高、存活时间显著延长,幼虫存活率以10头/瓶的最高,显著高于1头/瓶和2头/瓶的;幼虫存活时间以30头/瓶的最长,明显长于1头/瓶、2头/瓶、5头/瓶的。同时,随着幼虫密度的升高,球孢白僵菌与苏云金芽孢杆菌侵染的幼虫存活率、存活时间变化趋势相同,高密度幼虫的存活率和存活时间均显著高于低密度的幼虫。【结论】幼虫密度是影响粘虫幼虫抗病性变化的重要因子,且高密度幼虫的抗病能力明显高于低密度幼虫。

关键词：粘虫苏云金芽孢杆菌球孢白僵菌幼虫密度抗病能力

中药提取物对IBDV感染SPF鸡的防治效果

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西北农业学报 2021年第1期30卷 25-31页

作者：朱买勋唐红梅闫志强陈春林翟少钦重庆市畜牧科学院重庆402460

为了确定中药提取物对IBDV感染的防治效果,将150羽SPF雏鸡随机分为对照组、模型组和中药提取物高、中、低剂量组,中药提取物高、中、低剂量组分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5 g/L的中药提取物,连续添加7 d,对照组和模型组不添加任何药... 详细信息

为了确定中药提取物对IBDV感染的防治效果,将150羽SPF雏鸡随机分为对照组、模型组和中药提取物高、中、低剂量组,中药提取物高、中、低剂量组分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5 g/L的中药提取物,连续添加7 d,对照组和模型组不添加任何药物。给药后,除对照组外,其余组雏鸡分别通过滴鼻接种IBDV,攻毒后连续观察2周。统计雏鸡的成活率,荧光定量PCR检测IBDV在组织中的载量,分析病毒在脏器中的分布。结果显示:中药提取物能提高雏鸡成活率,高、中、低剂量组雏鸡成活率分别为86.67%、93.33%和70.00%,高剂量组雏鸡脾脏和法氏囊指数显著降低,中剂量组的胸腺和法氏囊指数显著降低。高、中剂量组脾脏、胸腺、法氏囊病毒载量极显著低于模型组,脾脏、胸腺病毒载量极显著低于低剂量组,法氏囊病毒载量显著低于低剂量组。表明中药提取物能提高雏鸡的成活率,促进IBDV核酸转阴,改善脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官状况,降低病毒在脾脏、法氏囊、胸腺的载量,且中剂量组效果优于其他剂量组。

关键词： SPF雏鸡 IBDV 中药提取物抗病能力病毒载量