检索结果-南通市图书馆

作者：白金延边大学

学位级别：硕士

[目的]采用脑立体定位注射、化学遗传学、行为学、免疫荧光染色、全细胞膜片钳及神经药理学方法,探究小鼠小脑平行纤维（parallel fiber,PF）到浦肯野细胞（Purkinje cell,PC）突触传递在吗啡条件性位置偏爱（conditioned place prefere... 详细信息

[目的]采用脑立体定位注射、化学遗传学、行为学、免疫荧光染色、全细胞膜片钳及神经药理学方法,探究小鼠小脑平行纤维（parallel fiber,PF）到浦肯野细胞（Purkinje cell,PC）突触传递在吗啡条件性位置偏爱（conditioned place preference,CPP）中的作用。[材料与方法]1.实验动物选取6-8周龄成年雄性昆明小鼠,体重22±2 g,随机分为吗啡（Morphine）组和生理盐水（Saline）组。Morphine组小鼠接受连续5天的吗啡CPP训练,上午腹腔注射生理盐水（10 mg/kg）后立即放入偏爱箱一侧（该侧定义为伴生理盐水侧）30 min,下午腹腔注射盐酸吗啡（10 mg/kg）后立即放入另一侧（该侧定义为伴吗啡侧）30 min;Saline组小鼠接受同样的实验操作但上午和下午均腹腔注射生理盐水。测试阶段,分别将两组小鼠放入无隔板的CPP箱中自由探索15 min,记录其在每侧停留时间。在伴吗啡侧停留时间减去在伴盐水侧停留时间得到的时间差值即为吗啡CPP评分。2.在CPP测试后48 h内,将小鼠经异氟烷吸入麻醉后迅速断头取脑,制备300μm厚度的小脑矢状切片,将脑片迅速转移至室温条件下充分含有O2（95%）和CO2（5%）混合气体的人工脑脊液（artificial cerebrospinal fluid,ACSF）中孵育,约60 min后进行全细胞膜片钳记录。在picrotoxin（GABAA受体阻断剂）和TTX（钠离子通道阻断剂）存在且钳制电压为-70 m V条件下,记录PC的微小兴奋性突触后电流（mini excitatory postsynaptic current,m EPSC）。3.将小鼠随机分为对照组和h M4D（Gi）组,并分别在小鼠小脑Vermis区颗粒细胞层（granular cell layer,GCL）注射p AAV-Ca MKⅡa-MCS-m Cherry和p AAV-Ca MKⅡa-h M4D（Gi）-m Cherry病毒。在病毒注射后第17天,行核团置管手术。术后恢复3天进行后续实验。在吗啡CPP实验中,每次吗啡CPP训练前15min,经微量注射泵以180 nl/min的速率向小鼠小脑GCL注射叠氮平-N-氧化物（clozapine-N-oxide,CNO）0.3μl,100 s完成给药。旷场实验在病毒注射前（第0天）,病毒注射半个月后（第16天）及核团置管手术3天后（第20天）进行,以评估两组小鼠核团注射病毒前后及埋管前后运动能力的变化。4.同上,对照组和h M4D（Gi）组小鼠在吗啡CPP测试后48 h内,将小鼠经4%多聚甲醛灌流后取脑,OCT包埋后灌流取脑后用冰冻切片机制备厚度为15μm的小脑矢状切片,进行免疫荧光实验检测病毒及VGlut 1表达情况。5.注射病毒小鼠在吗啡CPP测试后48 h内,经异氟烷吸入麻醉后断头取脑行全细胞膜片钳实验。在picrotoxin存在条件下,小脑脑片表面灌流CNO,记录对照组和h M4D（Gi）组小鼠PC的自发性兴奋性突触后电流（spontaneous excitatory postsynaptic current,s EPSC）。在picrotoxin和CNO同时存在条件下,脑片表面灌流DAMGO观察对照组和h M4D（Gi）组s EPSC的变化情况。6.所有数据均用mean±SEM表示,采用单因素方差分析（One-way ANOVA）、双因素方差分析（Two-way ANOVA）,Mann-Whitney检验和两独立样本T检验分析数据是否存在统计学意义。P值小于0.05被认为存在显著性差异。[结果]1.CPP训练后,Morphine组小鼠与Saline组小鼠相比,CPP评分明显提高（P＜0.05）。2.Morphine组小鼠PCs m EPSC的幅值与Saline组相比明显增加（P＜0.05）,频率减小（P＜0.05）。3.免疫荧光结果显示化学遗传学病毒标记神经元与小脑Vermis区GCL谷氨酸能神经元重合。4.对照组和h M4D（Gi）组小鼠病毒注射0天、16天及20天在旷场实验中的运动总距离没有统计学差异（P＞0.05）,h M4D（Gi）组小鼠吗啡CPP评分较对照病毒组明显增高（P＜0.05）。5.对照组小鼠小脑切片,在picrotoxin存在条件下,灌流CNO不改变PC s EPSC的频率和幅值（P＞0.05）;h M4D（Gi）组小鼠脑片灌流CNO时则明显降低PC s EPSC的频率（P＜0.05）,但幅值不变（P＞0.05）。6.对照组和h M4D（Gi）组小鼠小脑脑片,在picrotoxin和CNO存在条件下,灌流DAMGO均使PC s EPSC的频率明显降低（P＜0.05）而幅值不变（P＞0.05）,且h M4D（Gi）组小鼠PC s EPSC频率下降程度明显大于对照组（P＜0.05）。

关键词：平行纤维浦肯野细胞突触传递条件性位置偏爱 μ-阿片受体

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阿片受体在小鼠小脑皮层平行纤维到浦肯野细胞突触传递中的作用

阿片受体在小鼠小脑皮层平行纤维到浦肯野细胞突触传递中的作用

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作者：杨贺旻延边大学

学位级别：硕士

[目的]阿片类药物通过作用于体内的受体而发挥药理学作用。在中枢神经系统中存在三种阿片受体亚型,分别是μ型阿片受体(mu opioid receptor,MOR),δ型阿片受体(delta opioid receptor,DOR)和κ型阿片受体(Kappa opioid receptor,KOR)。... 详细信息

[目的]阿片类药物通过作用于体内的受体而发挥药理学作用。在中枢神经系统中存在三种阿片受体亚型,分别是μ型阿片受体(mu opioid receptor,MOR),δ型阿片受体(delta opioid receptor,DOR)和κ型阿片受体(Kappa opioid receptor,KOR)。阿片受体在不同脑区的分布密度不同,激活受体后可参与学习记忆、情绪反应和成瘾等生理功能。近年来,小脑在非运动协调功能,如参与认知、学习记忆以及奖赏等方面越来越受到重视。浦肯野细胞(Purkinje cell,PC)是小脑皮层唯一的传出神经元,与颗粒细胞轴突末端形成的平行纤维(parallel fiber,PF)构成突触联系。PF-PC突触传递在存储小脑皮层的输入信号以及动态调节谷氨酸递质的释放中具有关键作用。研究表明,在小脑皮层的生长发育过程中有阿片受体的表达及分布,但阿片受体及其亚型在小鼠小脑PF-PC突触中的分布及其对突触传递的影响还不清楚。因此,本实验利用全细胞膜片钳技术与药理学方法,探讨激活三种不同阿片受体亚型对PF-PC突触传递的影响,阐明在小鼠小脑PF-PC突触中阿片受体亚型的分布及相关突触传递的机制。[材料与方法]1.实验动物选用体重为28-33 g成年(6-8周龄)雄性昆明小鼠。将小鼠称量后置于麻醉机中,吸入异氟烷麻醉,将其迅速断头取脑,后置于Vibratome全自动震动切片机中制备小脑皮层矢状切片,切片厚度设置为300 μm。在室温条件下将切好的脑片迅速转移至充分含氧并有O2(95%)和CO2(5%)混合气体的人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,aCSF)的孵育槽中,其pH值为7.4,渗透压在295-305 mOsm左右,孵育60-90 min后即可进行电生理学记录。2.小脑脑片全细胞膜片钳记录:将刺激电极置于小脑脑片的分子层并刺激PF,其配对刺激脉冲为0.5 Hz(0.2 ms,10-100 μA;持续时间:50 ms),电压钳模式下将记录电极钳制PC细胞,待细胞状态稳定后,记录PC的兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic currents,EPSCs)。所有数据均在 picrotoxin 存在条件下记录。3.所有的电生理数据均采用Clampfit 10.4软件进行分析。各组数据表示为Mean±SEM。使用单因素方差分析与秩核检验方法确定数据组间的差异性水平。P值小于0.05被认为有统计学意义。[结果]1.在picrotoxin存在条件下,小脑脑片表面灌流2 μM MOR激动剂DAMGO可显著减少PF-PC EPSCs的振幅值以及曲线下面积(P0.05)。[结论]1.在小鼠小脑皮层PF的轴突末梢可能存在MOR和DOR,而不存在或少量存在KOR。2.激活MOR和DOR可通过调节突触前谷氨酸释放抑制小鼠小脑PF-PC的突触传递过程。

关键词： μ型阿片受体 δ型阿片受体 κ型阿片受体平行纤维小脑浦肯野细胞突触传递

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小脑平行纤维前突触终末及Purkinje细胞树突小棘能动性研究

小脑平行纤维前突触终末及Purkinje细胞树突小棘能动性研究

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河南省细胞生物学学会第二届会员代表大会暨学术研讨会

作者：邓锦波于东明文曙光 Anna Dunaevsky 河南大学生命科学学院神经生物实验室 Dept.Neuroscience Brown University

早期研究表明小脑Purkinje细胞上的树突小棘具有高度的能动性;而且与之构成突触连结的平行纤维前突触终末也有活体观察报道。以往研究都是分别对突出前体和突触后体进行的活体观察,故缺乏对突触活体的整体了解,也难以对突触前体和突触... 详细信息

早期研究表明小脑Purkinje细胞上的树突小棘具有高度的能动性;而且与之构成突触连结的平行纤维前突触终末也有活体观察报道。以往研究都是分别对突出前体和突触后体进行的活体观察,故缺乏对突触活体的整体了解,也难以对突触前体和突触后体的能动性作比较性研究。我们运用GFP转染Purkinje细胞,DiI标记平行纤维获得成功。因此,使得对前突触终末和树突棘之间的突触连结的活体观察成为可能。研究表明树突小棘的能动性远大于前突触终末。树突棘和树突棘表面的伪足可主动搜寻附近的前突触终末,与之形成突触连结。树突棘的这种高度能动性,提示他们在突触发生过程中发挥特殊作用。

关键词：突触 Purkinje细胞平行纤维 DiI 双光子显微镜 GFP转染活体观察

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小脑平行纤维前突触终末及Purkinje细胞树突小棘能动性研究

小脑平行纤维前突触终末及Purkinje细胞树突小棘能动性研究

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：于东明文曙光 Dunaevsky 邓锦波河南大学医学院神经生物学实验室河南大学医学院神经生物学实验室 Brown University USA Providence 02912 河南大学医学院神经生物学实验室

＜正＞早期研究表明小脑Purkinje细胞上的树突小棘具有高度的能动性;而且与之构成突触连结的平行纤维前突触终末也有活体观察报道。以往研究都是分别对突触前体和突触后体进行的活体观察, 故缺乏对突触活体的整体了解,也难以对突触前体... 详细信息

＜正＞早期研究表明小脑Purkinje细胞上的树突小棘具有高度的能动性;而且与之构成突触连结的平行纤维前突触终末也有活体观察报道。以往研究都是分别对突触前体和突触后体进行的活体观察, 故缺乏对突触活体的整体了解,也难以对突触前体和突触后体的能动性作比较性研究。我们运用GFP转染Purkinje细胞,DiI标记平行纤维获得成功。因此,使得对前突触终末和树突棘之间的突

关键词：突触 Purkinje细胞平行纤维 DiI 双光子显微镜 GFP转染活体观察

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平行纤维产品的仿毛工艺研究

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济南纺织科技 1992年第2期 23-26页

作者：刘桂溪

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感觉刺激诱发小鼠小脑皮层分子层与颗粒层场电位反应的时空关系

感觉刺激诱发小鼠小脑皮层分子层与颗粒层场电位反应的时空关系

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作者：马畅延边大学

学位级别：硕士

[题目]感觉刺激诱发小鼠小脑皮层分子层与颗粒层场电位反应的时空关系。[目的]小脑是重要中枢,外部信息传入小脑皮层后,经小脑神经环路整合与运算,参与调节运动行为、身体平衡、情感认知、及运动学习功能。然而,外部信息在小脑皮层中传... 详细信息

[题目]感觉刺激诱发小鼠小脑皮层分子层与颗粒层场电位反应的时空关系。[目的]小脑是重要中枢,外部信息传入小脑皮层后,经小脑神经环路整合与运算,参与调节运动行为、身体平衡、情感认知、及运动学习功能。然而,外部信息在小脑皮层中传递的时空机制尚不清楚,因此,本研究应用在体双通道记录和药理学手段对比研究感觉刺激诱发小鼠小脑皮层分子层与颗粒层场电位反应的波形特征及相互关系,探讨感觉信息在小鼠小脑皮层分子层与颗粒层传递与整合的时空机制。[材料与方法]实验动物选取为成年ICR小鼠（6-8周龄）,体重26-35g,腹腔注射乌拉坦（1.1kg/WB）麻醉,剪掉两侧的胡须暴露出触须垫,并进行气管插管手术,使记录过程中不受呼吸条件干扰,小鼠的头部用上颌骨固定、双侧耳棒及在脑立体定位装置固定并置于显微镜下,进行外科手术,去除脑部肌肉组织,轻轻剥离硬脑膜,使脑组织暴露在镜下,并持续用含有氧气的人工脑脊液灌流。利用在体双通道电生理学记录的实验方法,同时记录小脑的分子层和颗粒细胞层的场电位反应,观察这些场电位反应的波型特征,分析场电位反应的时间关系。电生理实验数据分析采用Clampfit 10.6软件,每组数据都采用了Mean±SEM进行统计学分析,统计学数据采用了配对t检验和单因素方差分析,使用SPSS软件,n表示样本数,P＜0.05被认为有显著性差异。[结果]（1）感觉刺激诱发的场电位在分子层的潜伏期是11.0±0.47 ms,在颗粒细胞层的潜伏期是9.3±0.43 ms,二者相差1.7 ms,结果与传统理论相符,表明感觉信息通过苔藓纤维-颗粒细胞-平行纤维途径传入小脑皮层。（2）兴奋性成分N1在分子层持续的时间是4.3±0.45 ms,在颗粒细胞层持续5.3±0.45 ms;而抑制性反应的潜伏期在分子层为14.4±0.46 ms,在颗粒细胞层为14.5±0.51 ms,抑制性反应在两层出现的时间没有明显差异（P＞0.05）;抑制持续时间在分子层是3.0±0.27 ms,在颗粒细胞层是3.1±0.32 ms;二者没有显著差异（P＞0.05）,提示感觉刺激同时在颗粒细胞层和分子层诱发持续时间几乎相同的抑制性反应。（3）在分子层给予AMPA受体的阻断剂,NBQX,分子层的P1振幅为0.02±0.01 mV,显著低于给药前（ACSF:0.53±0.12 mV;P＜0.05）;而颗粒细胞层的P1振幅为0.02±0.01 mV,较给药前（ACSF:0.41±0.07 mV）显著降低,提示感觉刺激通过平行纤维途径活化AMPA受体诱发颗粒细胞层和分子层的抑制性反应。（4）给予GABAA受体阻断剂SR95531,阻断感觉刺激诱发分子层的抑制性反应,并出现兴奋性波形,其振幅为-0.31±0.05 mV;而随着灌流SR95531时间的延长,颗粒细胞层抑制性反应的振幅显著减小,均值为0.017±0.01 mV,显著低于对照（ACSF:0.41±0.09 mV）,表明感觉刺激通过平行纤维途径激活GABAA受体诱发颗粒细胞层和分子层产生抑制性反应。[结论]（1）无论记录位置如何改变,面部感觉刺激在分子层与颗粒层都能诱发同步抑制性反应。（2）面部刺激引起的感觉信息是通过平行纤维途径同时兴奋分子层中间神经元和颗粒层高尔基细胞,进而对小脑皮层产生GABA能介导的同步抑制。

关键词：双通道电生理记录小脑皮层分子层颗粒层面部触觉刺激 GABAA受体平行纤维

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丙泊酚对小鼠小脑皮层PF-PC突触传递的影响

丙泊酚对小鼠小脑皮层PF-PC突触传递的影响

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作者：玄芳玲延边大学

学位级别：硕士

[目的]在急性小脑切片上,应用全细胞膜片钳记录技术与药理学方法,在阻断GABAAR(γ-aminobutyric acid Areceptor,GABAAR)与甘氨酸受体(glycine receptor,GlyR)的前提下研究丙泊酚对于离体小鼠小脑皮层平行纤维-浦肯野细胞(Parallel fibe... 详细信息

[目的]在急性小脑切片上,应用全细胞膜片钳记录技术与药理学方法,在阻断GABAAR(γ-aminobutyric acid Areceptor,GABAAR)与甘氨酸受体(glycine receptor,GlyR)的前提下研究丙泊酚对于离体小鼠小脑皮层平行纤维-浦肯野细胞(Parallel fiber-Purkinje cell PF-PC)的突触传递的影响。[材料与方法]实验动物选用出生后4-7周的ICR小鼠,使用异氟烷吸入麻醉后,迅速断头取脑。随后使用振动切片机制备矢状切片,切片厚度为300 μM。在24-25℃条件下,将小脑切片置于冲95%O2和5%CO2混合气体的人工脑脊液(artificialcerebrospinal fluid,ACSF)中孵育60 min以上。将刺激电极置于分子层,配对刺激平行纤维,其配对刺激脉冲为0.5 Hz(0.2 ms,刺激强度10-100 μA;持续时间50 ms),通过膜片钳放大器(Axopatch-700B)及数据采集软件记录PCs兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic currents,EPSC)。所有实验都给予 picrotoxin(50 μM)与 strychnine(2 μM)阻断GABAAR与GlyR的条件下进行。电生理实验数据分析采用Clampfit 10.3软件,各组数据均用Mean±SEM表示,n代表样本数。数据统计学分析采用SPSS软件,均数的比较采用配单因素方差分析与秩核检验,P<0.05被认为有统计学意义。[结果](1)在GABAAR与GlyR在被阻断时,丙泊酚可减少PF-PC兴奋性突触后电流(EPSC)的振幅大小,并显著增加配对脉冲比率(pair-pulsed ratio,PPR)。(2)丙泊酚对PF-PC突触传递的抑制作用是可逆的,并具有浓度依赖性,其半数有效浓度为4.7 μM。(3)N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)的阻断剂 D-氨基膦基戊酸(D-2-Amino-5-phosphonovaleric acid,D-APV)(50 μM)对丙泊酚对PF-PC突触传递的抑制作用无影响。(4)应用 γ-氨基丁酸 B 型受体(γ-aminobutyric acid B receptor,GABABR)的阻断剂saclofen(10 μM)可以完全废除丙泊酚对PF-PC突触的EPSC振幅值的抑制作用与PPR值的增大作用。(5)应用GABABR激动剂baclofen诱发了类似丙泊酚作用的PF-PC突触的EPSC振幅值减小与PPR值增大的现象。在baclofen的存在下,丙泊酚对于PF-PC突触传递无抑制作用。(6)给予蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂KT5720也可阻断丙泊酚对PF-PC突触EPSC振幅值的减小效应与PPR值的增大效应。[结论](1)在阻断GABAA和GlyR的条件下,丙泊酚可浓度依赖性地抑制小鼠小脑皮层PF-PC突触传递。(2)丙泊酚对PF-PC突触传递的抑制作用是通过激活突触前GABABR及PKA信号通路来实现的。

关键词：丙泊酚小脑浦肯野细胞全细胞膜片钳记录 GABABR 平行纤维蛋白激酶A

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纱线内部纠缠纤维受力及伸长率模型的建立与分析

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东华大学学报（自然科学版） 2013年第6期39卷 744-747,753页

作者：李楠何小东罗俊程隆棣东华大学纺织面料技术教育部重点实验室上海201620 广东溢达纺织有限公司广东佛山528500

针对紧密纺纱线芯部纤维较平行导致纤维之间的抱合力没有得到充分利用的问题,提出对纱线内部纤维进行有序干扰,使之达到一种理想的纠缠结构,从而使纱线拉伸断裂性能得到优化;建立纱线力学模型,探究纱线内部纠缠纤维和平行纤维的受力,在... 详细信息

针对紧密纺纱线芯部纤维较平行导致纤维之间的抱合力没有得到充分利用的问题,提出对纱线内部纤维进行有序干扰,使之达到一种理想的纠缠结构,从而使纱线拉伸断裂性能得到优化;建立纱线力学模型,探究纱线内部纠缠纤维和平行纤维的受力,在理论上得出,在紧密纺纱线内部呈纠缠状态的纤维对纱线强力的贡献比平行状态的纤维大.

关键词：紧密纺纱线纠缠纤维平行纤维纱线结构

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