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巢式聚合酶链反应

中华内科杂志 1996年第5期 29-29页

巢式聚合酶链反应山西医学院王守义医师函问：在聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术中什么叫巢式？什么叫外引物、内引物？侯金林、骆抗先医师（第一军医大学南方医院，广州５１０５１５）答：巢式ＰＣＲ（Ｎｅｓｔｅｄ－ｐｒｉｍｅｒｓＰＣＲ... 详细信息

巢式聚合酶链反应山西医学院王守义医师函问：在聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术中什么叫巢式？什么叫外引物、内引物？侯金林、骆抗先医师（第一军医大学南方医院，广州５１０５１５）答：巢式ＰＣＲ（Ｎｅｓｔｅｄ－ｐｒｉｍｅｒｓＰＣＲ）是通过“外”、“内”两对引物完成...

关键词：巢式聚合酶链反应第一军医大学南方医院内引物

巢式聚合酶链反应在输入性卵形疟诊断和分型中的应用

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中国热带医学 2016年第6期16卷 574-576页

作者：孙凌聪张华勋吴冬妮裴速建曹慕民夏菁董小蓉湖北省疾病预防控制中心血吸虫病防治研究所湖北武汉430079

目的评价巢式聚合酶链反应(Nested--polymerase chain reaction,nested-PCR)在输入性卵形疟诊断和分型中的应用价值。方法采用巢式PCR方法回顾性检测湖北省2013年7月至2015年6月网报疟疾病例,比较疟疾快速诊断试剂盒(Rapid diagnostic t... 详细信息

目的评价巢式聚合酶链反应(Nested--polymerase chain reaction,nested-PCR)在输入性卵形疟诊断和分型中的应用价值。方法采用巢式PCR方法回顾性检测湖北省2013年7月至2015年6月网报疟疾病例,比较疟疾快速诊断试剂盒(Rapid diagnostic tests,RDTs)、显微镜镜检和巢式PCR这三种方法对输入性疟疾的检测效果。结果巢式PCR共检出卵形疟24例,其中经典亚种10例,变异亚种14例;RDTs阳性13例,阴性11例;显微镜检15例诊断为卵形疟,8例为间日疟,1例为三日疟。卵形疟两亚种在RDTs诊断阳性率和镜检准确率差异无统计学意义(P>0.05)。结论巢式PCR在输入性卵形疟的诊断和分型上较RDTs和镜检法有显著优势。

关键词：输入性卵形疟显微镜镜检巢式聚合酶链反应

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巢式聚合酶链反应(Nested PCR)检测武汉单极虫病方法的建立

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巢式聚合酶链反应(Nested PCR)检测武汉单极虫病方法的建立

巢式聚合酶链反应检测血清HBV-DNA对乙肝治疗的临床意义

中国水产学会鱼病专业委员会2013年学术研讨会

作者：柴下陆宏达上海海洋大学水产学院国家水生动物病源库

应用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)立了一种检测异育银鲫武汉单极虫(Thelohanellus wuhanensisum)病的方法。采用液氮、热水浴反复冻融裂解、酚/氯仿抽提及冰乙醇沉淀法纯化武汉单极虫作为模板DNA,第一次扩增采用单极虫通用引物:5’-CTG... 详细信息

应用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)立了一种检测异育银鲫武汉单极虫(Thelohanellus wuhanensisum)病的方法。采用液氮、热水浴反复冻融裂解、酚/氯仿抽提及冰乙醇沉淀法纯化武汉单极虫作为模板DNA,第一次扩增采用单极虫通用引物:5’-CTGCGGACGGCTCAGTAAATCAGT-3’和5’-CCAGGACATCTTAGGGCATCACAGA-3’;第二次扩增依据武汉单极虫18S rRNA序列高度保守区设计特异性引物:5’-ACCCACTTCTGTGGCCTTTC-3’和5’-AATCCGACCTACAACGCTGG-3’。结果表明,采用巢式PCR最低核酸DNA检测量仅10 fg,比常规PCR检测的灵敏度至少高1000倍。因此,所建立的巢式聚合酶链反应检测方法适合于武汉单极虫病的诊断和流行病学调查。

关键词：武汉单极虫巢式聚合酶链反应检测常规PCR 灵敏度

来源： cnki会议评论

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西部医学 2017年第1期29卷 117-119,122页

作者：王红建封伟张健刘殿武衡水市第二人民医院检验科河北衡水053000 河北医科大学第一附属医院感染科河北石家庄050031

目的研究使用巢式聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA对治疗乙肝的临床意义。方法筛选146例乙型肝炎病毒(HBV)感染者,先采用ELISA检测HBVM作为参照,再分别采用FQ-PCR和nPCR检测参与研究的HBV病人HBV-DNA,并判断HBV的复制和活动情况。另外选... 详细信息

目的研究使用巢式聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA对治疗乙肝的临床意义。方法筛选146例乙型肝炎病毒(HBV)感染者,先采用ELISA检测HBVM作为参照,再分别采用FQ-PCR和nPCR检测参与研究的HBV病人HBV-DNA,并判断HBV的复制和活动情况。另外选择49名健康者作为对照组。结果PCR模板1和PCR模板4中的HBV-DNA阳性率都很高,PCR模板1中ELISA检测的阳性率与套式聚合酶链反应(nPCR)和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA的阳性率差异显著(P0.05)。nPCR法和FQ-PCR法的结果对比可见,nPCR的阳性率显著高于FQ-PCR,具有明显差异(P<0.05)。nPCR的阳性率要比ELISA的阳性率高很多,具有明显差异(P<0.05)。ELISA阳性率比对照组高很多,具有明显差异(P<0.05)。结论采用nPCR检测技术诊断HBV疾病的检出率高、特异性强,对HBV疾病的诊断具有很高的实用价值,可在临床推广应用。

关键词：巢式聚合酶链反应乙型肝炎病毒 HBV-DNA ELISA

巢式聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA对治疗乙肝的临床意义

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心电图杂志（电子版） 2018年第4期7卷 62-63页

作者：向芳菲广州市第八人民医院广东广州510060

目的总分析巢式聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA对治疗乙肝的临床意义。方法选取2017年10月-2018年10月本院收治的50例HBV(乙型肝炎病毒)患者,采用ELISA(酶联免疫吸附实验)方法对HBVM进行检测,同时采用nPCR(套式聚合酶链反应)以及FQ-PCR... 详细信息

目的总分析巢式聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA对治疗乙肝的临床意义。方法选取2017年10月-2018年10月本院收治的50例HBV(乙型肝炎病毒)患者,采用ELISA(酶联免疫吸附实验)方法对HBVM进行检测,同时采用nPCR(套式聚合酶链反应)以及FQ-PCR(荧光定量聚合酶链反应)检测所有HBV患者HBV-DNA,分析HBV的复制、活动,同时选定50例本院体检中心的50例体检者。结果 nPCR检测HBV-DNA的阳性率相对较ELISA、FQ-PCR检测高(P<0.05)。结论 V病毒采用nPCR检测法进行检测,具有较强的特异性,检出率相对较高,在临床中具有较高的诊断价值。

关键词：巢式聚合酶链反应 HBV-DNA 乙肝

巢式聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA对治疗乙肝的临床意义

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中国医药导刊 2016年第3期18卷 292-293页

作者：姚伟容福建龙海市第一医院检验科龙海363100

目的:探讨巢式聚合酶链反应(n PCR)检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)-DNA对治疗乙型肝炎的临床意义。方法:146名HBV感染者用ELISA检测HBVM作为参照,再分别用FQ-PCR和n PCR检测参与研究的所有HBV患者HBV-DNA,并判断HBV的复制和活动情况。对... 详细信息

目的:探讨巢式聚合酶链反应(n PCR)检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)-DNA对治疗乙型肝炎的临床意义。方法:146名HBV感染者用ELISA检测HBVM作为参照,再分别用FQ-PCR和n PCR检测参与研究的所有HBV患者HBV-DNA,并判断HBV的复制和活动情况。对照组另外选择49名健康者作为对照。结果:模式1和模式4中的HBV基因的阳性率都很高,模式1的阳性率与n PCR和FQ-PCR检测HBV基因的阳性率差距显著(P式2阳性率与n PCR和FQ-PCR检测HBV基因的阳性率差距不显著(P>0.05)。n PCR法和FQ-PCR法的结果对比可见,n PCR的阳性率显著高于FQ-PCR(P<0.05)。n PCR的阳性率要比ELISA的阳性率高很多(P<0.05)。ELISA阳性率比对照组高很多(P<0.05)。结论:采用n PCR检测技术诊断HBV疾病的检出率高、特异性强,对HBV疾病的诊断具有很高的实用价值。

关键词：巢式聚合酶链反应乙型肝炎病毒 HBV-DNA ELISA

巢式聚合酶链反应检测感染树鼩中乙型肝炎病毒DNA

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现代预防医学 2007年第14期34卷 2627-2629页

作者：杨春李瑗陈茂伟李丽萍曹骥梁亮苏建家广西肿瘤防治研究所实验研究部广西医科大学医学科学实验中心南宁 530021

[目的]运用巢式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测人HBV在树鼩体内感染,并探讨Nested-PCR在树鼩感染模型研究中的意义。[方法]用本实验室自繁树鼩,无感染史,年龄在1d龄至4月龄的树鼩,经肌肉、腹腔或者股静脉等多种途径接种人HBV(约含1×107H... 详细信息

[目的]运用巢式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测人HBV在树鼩体内感染,并探讨Nested-PCR在树鼩感染模型研究中的意义。[方法]用本实验室自繁树鼩,无感染史,年龄在1d龄至4月龄的树鼩,经肌肉、腹腔或者股静脉等多种途径接种人HBV(约含1×107HBV DNA copies/ml)。接种后定期抽血,用Nested-PCR检测血清中的HBV DNA情况。[结果]在111只感染了人HBV的树鼩血清中,经Nested-PCR检测,共有46只树鼩检测出HBV DNA,动物感染的阳性率为41.44%(46/111)。其中1～30d龄的66只树鼩检测出HBV DNA的有33只,阳性率50%;31d龄至4月龄的45只树鼩检出HBV DNA的有13只,阳性率28.89%,两者阳性率比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。在Nested-PCR检测过程中,所有的动物血清的第1轮PCR扩增结果均为阴性,经第2轮PCR扩增则出现阳性结果。Nested-PCR扩增产物经测序证实为目的基因(HBV C区)的序列。[结论]选择幼年树鼩感染HBV,可提高树鼩的感染率;Nested-PCR比普通PCR方法更敏感、更特异,能有效的提高树鼩血清中HBV DNA的检出率,有较大的实用价值,为研究树鼩感染人HBV模型建立了一种良好的检测方法。

关键词：巢式聚合酶链反应乙型肝炎病毒树鼩

巢式聚合酶链反应技术在流感嗜血杆菌b型检测中的应用

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中国感染与化疗杂志 2006年第1期6卷 18-21页

作者：姜敏胡翼云高薇袁林沈叙庄俞桑洁杨永弘首都医科大学附属北京儿童医院儿科研究所微生物室北京100045

目的评价巢式聚合酶链反应(nested-PCR)技术在b型流感嗜血杆菌(Hib)检测中的应用价值,估计氨苄西林耐药Hi中b型的比率。方法对2000—2003年北京、上海、广州细菌监测项目中,呼吸道感染儿童鼻咽部分离培养的899株Hi,用E试验法检测氨苄西... 详细信息

目的评价巢式聚合酶链反应(nested-PCR)技术在b型流感嗜血杆菌(Hib)检测中的应用价值,估计氨苄西林耐药Hi中b型的比率。方法对2000—2003年北京、上海、广州细菌监测项目中,呼吸道感染儿童鼻咽部分离培养的899株Hi,用E试验法检测氨苄西林耐药情况后,用nested-PCR与玻片凝集法对氨苄西林耐药菌株进行b型检测。结果检出74株氨苄西林耐药Hi。nested-PCR与玻片凝集法检测Hib的结果一致,74株氨苄西林耐药Hi中有2株为Hib,约占2.7%。结论nested-PCR b型荚膜检测方法可作为玻片凝集法的一个重要补充。3地4年内呼吸道感染的儿童鼻咽部携带的氨苄西林耐药Hi中,Hib的比率处于相对较低的水平。

关键词： b型流感嗜血杆菌巢式聚合酶链反应玻片凝集法

巢式聚合酶链反应检测人疱疹病毒在人群中的感染情况

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国际检验医学杂志 2015年第19期36卷 2777-2778,2781页

作者：李明月沈曦月周帅罗笛巢嘉婧冯纯姚堃冯东举周锋李凌云南京医科大学发育遗传学系江苏南京210029 南京医科大学微生物与免疫学系江苏南京210029

目的调查人群中人疱疹病毒(HHV),包括人巨细胞病毒(HCMV)、EB病毒(EBV)、HHV-6和HHV-7的感染情况。方法收集55例南京市无偿献血者的外周血标本,提取全血DNA,巢氏PCR扩增HCMV、EBV、HHV-6和HHV-7特异性序列,1%琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 5... 详细信息

目的调查人群中人疱疹病毒(HHV),包括人巨细胞病毒(HCMV)、EB病毒(EBV)、HHV-6和HHV-7的感染情况。方法收集55例南京市无偿献血者的外周血标本,提取全血DNA,巢氏PCR扩增HCMV、EBV、HHV-6和HHV-7特异性序列,1%琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 55例献血者中EBV、HCMV、HHV-6和HHV-7的阳性感染率分别为50.9%、5.5%、49.1%和21.8%,并且存在多种病毒混合感染。结论 HHV筛查对临床相关疾病的诊治具有十分重要的意义,应引起医务工作者的重视。

关键词：人疱疹病毒感染巢式聚合酶链反应